CAPITOLUL 14

IMUNOPROFILAXIA

VACCINURI: DEFINIIE

Vaccinurile sunt produse biologice, obinute din microorganisme sau toxinele acestora i care aplicate unui organism i confer imunitate activ fa de microorganismul din care a fost preparat.

VACCINURI: CLASIFICARE

1. n funcie de natura antigenului din care se

prepar :
vaccinuri vii atenuate vaccinuri inactivate (omorte) vaccinuri preparate cu fraciuni imunogene purificate (vaccinuri subunitare).

2. Dup coninutul lor n antigeni:

monovalente - preparate cu o singur specie bacterian sau viral bi, tri sau polivalente - conin corpi bacterieni sau toxine provenind de la dou, trei sau mai multe microorganisme.

3. Dup provenien i folosirea lor:

autovaccinuri - se prepar cu o tulpin bacterian izolat de la un individ i folosit n imunizarea acestuia stock-vaccinuri - preparate din mai multe tulpini izolate din focar i destinate a fi folosite n imunizri n focar vaccinuri unice cu tulpini standardizate, pentru imunizarea tuturor animalelor dintr-o specie animal.

Prin vaccinuri se obine o imunitate antiinfecioas specific - imunitate activ sau inductibil. Imunitatea activ se obine prin trecere prin boal sau prin vaccinare i are urmtoarele caracteristici:
are un caracter strict individual, apare la indivizi maturi i este dependent de intrarea unui antigen n organism

imunitatea inductibil implic o restructurare a organismului prin apariia de imunoglobuline sau/i limfocite active
aciunea efectorului imun este specific i difereniat n funcie de natura antigenului

imunitatea inductibil prin vaccinare nu este transmisibil ereditar, se instaleaz n 6-21 zile i dureaz un timp variabil n funcie de antigen.

VACCINURI VII I NEATENUATE

Ofer o imunitate solid, dar au dezavantajul c pot da mbolnviri mortale prin aplicare greit i creaz purttori de germeni. Utilizarea vaccinurilor vii neatenuate este limitat i se practic numai n condiii epizootologice speciale n intervenii de necesitate, ca serovaccinri i seroimunizri. Folosirea se bazeaz n principiu pe receptivitatea diferit a esuturilor fa de un anumit antigen (virusul variolic produce pe cale subcutanat boala; administrat sub form de vaccin viu pe cale intradermic produce ns o imunitate solid). n ultimul timp se folosesc aa numitele vaccinuri vii paraspecifice sau heterotipice, care se bazeaz pe folosirea n imunizare a unor germeni vii nemodificai, pentru a conferi protecie fa de ali germeni nrudii antigenic cu cei vaccinali. n imunoprofilaxia difterovariolei la galinacee se folosete virusul

variolic columbar n prevenirea bolii lui Marek se utilizeaz un herpes virus viu izolat de la curc. Inoculat la pui de o zi, acesta din urm, induce o rezisten satisfctoare pentru a-i proteja de infecia spontan cu virus Marek.

VACCINURI VII I ATENUATE

Vaccinurile vii atenuate constau din suspensii de bacterii sau virusuri vii, dar cu virulen atenuat n aa fel nct s nu mai poat determina boala la animale, dar s rmn capabile s iniieze o infecie inaparent, imunogen.
conin corpi microbieni viabili dar slab viruleni i administrate la animale ntr-o singur injecie, determin o imunitate solid, comparabil acelei consecutive trecerii prin boal, fr a fi provocat ns, dect cel mult semne minime de boal. Indiferent de locul inoculrii, agentul infecios din vaccinul viu atenuat nu rmne localizat, ci se rspndete n organism, ptrunznd i multiplicndu-se n aceleai esuturi n care se localizeaz i n cazul infeciei naturale.
Singura deosebire fa de agentul patogen virulent este aceea c, infectnd un numr mai mic de celule sensibile i multiplicndu-se lent, agentul infecios din vaccin nu declaneaz o boal clinic, ci numai o infecie de form atenuat, care este ns nsoit de modificrile umorale i de reactivitate, necesare pentru stri de imunitate.

Atenuarea virulenei agenilor patogeni trebuie s fie stabil i ireversibil, pentru ca vaccinurile s nu duneze animalelor i s nu creeze focare noi de infecie n colectivitate.

Atenuarea bacteriilor poate fi uneori corelat cu unele modificri ale caracterelor morfologice i culturale ale germenilor (apariia de variante S sau R).
Antrax tulpina 1190 R - apatogen, acapsulogen, sporogen i

edematogen

Rujet tulpina VR2 - tulpin de tip N, atenuat n mod natural, total apatogen pentru porc, dar la om poate produce uneori erizipeloid)
Tuberculoza BCG - bacil Calmette- Guerin, obinut prin pasaje

succesive pe mediu cu bil-cartof biliat- a tulpinii de origine bovin lait Nocard, timp de 11 ani, prin efectuarea a 198 pasaje)

Listerioza - tulpinile R1 i R2 Bruceloza - tulpina B19 Salmoneloza aviar - tulpina 9R Holera aviar - tulpina CU (Clemons University)

Atenuarea virusurilor se poate realiza prin mai multe modaliti:

prin pasaje n serie pe culturi de celule prin adaptare la anumite esuturi i schimbarea tropismului caracteristic n generarea infeciei prin adaptarea pe specii de animale, care n condiii naturale nu sunt receptive.

Vaccinurile obinute din tulpini atenuate prin embriopasaje sau prin adaptare la specii nereceptive natural, au fost denumite avianizate, lapinizate, caprinizate.

Pesta porcin - tulpina C (chinez) - total apatogen, tulpinile Hudson i Koprowschy cu patogenitate rezidual accentuat, fiind folosite numai de necesitate n focarele de boal; Pesudopesta aviar - tulpina La Sota (lentogen), tulpinile H i Roakin (mezogene)
Turbare tulpina Flury n dou variante (Flury LEP- low eggs passage i Flury HEP -high eggs passage), tulpina Kelev avianizat Boala lui Aujeszky - tulpina avianizat Buk (Bucureti) Jigodie - tulpina avianizat Onderspoort Haig

Laringotraheita infecioas aviar - tulpina avianizat LS79/2

Encefalomielita infecioas aviar - tulpina avianizat

Vaccinurile vii atenuate au:

Avantaje: Confer animalelor inoculate o imunitate solid Pot fi produse de biofabrici n cantiti apreciabile i la un pre convenabil Dezvantaje: Pot genera reacii post-vaccinale nedorite, mai ales la animalele tarate sau/i carenate alimentar Tulpinile vaccinale necesit o supraveghere i verificare periodic privind meninerea capacitii lor imunologice i pstrarea gradului de mitigare (atenuare).

VACCINURI INACTIVATE I ANATOXINE

Suspensii microbiene omorte prin:

utilizarea unor factori fizici (cldur, ultrasunete, raze ultraviolete) sub aciunea formolului (0,5%) sau a altor substane chimice (fenol, chinozol, cloroform, etc.).
Vaccin contra crbunelui enfizematos Vaccin contra enetrotoxiemiilor Vaccin anticolibacilar Vaccin antisalmonelic Vaccin pestos porcin inactivat cu cristal violet, etc.

Avantaje:
Au o inocuitate bun Pot fi aplicate la animalele debile, tarate, la care vaccinurile vii atenuate sunt contraindicate, sau n cazul unor boli la care nu s-au obinut vaccinuri cu tulpini vii atenuate.

Dezavantaje:
Duc la apariia mai tardiv a rspunsului imun Imunitatea este mai puin solid i de durat scurt Imunitatea trebuie consolidat cu o revaccinare (vaccinare de rapel) la 1-2 sptmni de la prima vaccinare.

Anatoxinele sau toxoizii sunt produse imunizante obinute prin tratarea exotoxinelor cu formol 0,5% i cldur (37C).
toxinele i pierd complet toxicitatea i pstreaz proprietatea imunologic reprezentat de capacitatea de-a stimula formarea de anticorpi protectori

Preparate de acest fel sunt de exemplu:

anatoxina tetanic anatoxina stafilococic anatoxina botulinic, etc.

Vaccinuri subunitare (purificate) - vaccinuri inactivate n care principii activi sunt constituii numai din fraciunile imunologic active ale virusurilor, bacteriilor sau metaboliilor lor.
Prin purificarea fracionat, se introduc exclusiv fraciunile protectoare dintrun antigen:
glicoproteinele peplosului viral proteinele capsidei virale aparatului piliar polizaharidele capsulare i "Vi exotoxinele, etc

Ca la orice vaccin inactivat, fraciunile separate, pot fi asociate cu o substan adjuvant n vederea potenrii capacitii imunogene. Vaccinurile subunitare prezint avantajul unei perfecte inocuiti prin eliminarea reaciilor adverse cum ar fi reaciile locale sau generale, hipersensibilizarea, etc.
Imunitatea indus este comparabil cu a vaccinurilor clasice inactivate, dar are un grad de specificitate mult mai nalt.

O substan adjuvant care are o larg ntrebuinare n prepararea vaccinurilor de uz veterinar este hidroxidul de aluminiu - Al(OH)3 substan coloidal, de culoare alblptoas, care are proprieti adsorbante fa de virusuri filtrabile, toxinele bacteriene i proteinele serice. Capacitatea imunizant a hidroxidului de aluminiu este remarcabil putnd s mreasc capacitatea imunizant a toxinei tetanice, de exemplu, pn la 100 ori fa de toxina neadsorbit.
Substanele adjuvante acioneaz prin inflamaia local i prin eluia treptat a particulei antigenice adsorbite. Unele substane adjuvante prezint i inconveniente n sensul c produc reacii locale mari sau pot mri capacitatea alergizant a organismului.

Vaccinurile se prepar n institute specializate numite biofabrici.

Principiile de preparare ale unui vaccin :
selecionarea tulpinii (a antigenului) vaccinale i testarea imunogenitii ei;
cultivarea tulpinii pe medii optimale pentru obinerea unei mase antigenice bogate; inactictivarea i eventual adiionarea pe o substan adjuvant, n cazul vaccinurilor inactivate; controlul sterilitii vaccinului;

controlul inocuitii pe animale de laborator i pe speciile pentru care este destinat;

Un vaccin pentru a putea fi utilizat n practic trebuie n mod obligatoriu s ndeplinesc o serie de condiii:
s nu fie nociv, adic s nu produc mbolnviri animalelor inoculate n conformitate cu principiul hipocratic "primum non nocere"; s fie activ antigenic, n sensul c odat administrat s provoace apariia masiv de anticorpi protectori; s poat fi preparat n condiii i cantiti industriale fiind n acelai timp i convenabil din punct de vedere economic; s aib o valabilitate de lung durat. Beneficiarul are obligaia de a pstra produsul biologic n condiii adecvate de temperatur (+2C - +4C) i la ntuneric s respecte instruciunile de aplicare.

VACCINURI OBINUTE PRIN TEHNOLOGII MODERNE

1. Vaccinurile obinute prin recombinare genetic:

Se bazeaz pe separarea i inseria genelor responsabile de sinteza fraciunilor imunologic active.

Cu ajutorul enzimelor de restricie - nucleaze i ligaze se separ o gen care codific un anumit epitop care apoi se inser ntr-un sistem vector. Sistemul vector poate fi de regul o plasmid sau alt vector adecvat, care introduce i integreaz gena n genomul unor celule de mamifere, urmat de cultivarea celulelor hibride pe medii adecvate;
Substana dorit care va fi n continuare izolat i purificat prin diferite metode.

Antigenele obinute prin tehnici de inginerie genetic au o serie de avantaje decurgnd din puritatea i stabilitatea lor, absena efectelor secundare i a riscului de infeciozitate.

2. Vaccinurile sintetice:
Folosesc ca determinant antigenic, un lan polipeptidic scurt, care este adesea slab imunogen i care este cuplat la o protein de transport ("carrier") i adsorbit pe un adjuvant mineral sau uleios adecvat.

Se utilizeaz cu succes n inducerea de anticorpi neutralizani contra diverselor tipuri i subtipuri de virus aftos.
se utilizeaz peptidele a ctorva acizi aminai care corespund determinanilor antigenici majori a unei proteine a capsidei virale (proteina VP1) care se cupleaz cu o molecul de transport i o substan adjuvant.

se obine un vaccin, care inoculat la animale (bovine, oi, porci) induce apariia unor anticorpi neutralizani.

3. Vaccinuri antiidiotipice:
Se bazeaz pe principiul dualismului Ig

Cele dou faete care confer caracterul dual al imunoglobulinelor sunt determinate de abilitatea acestora de ndeplini n organism att funcia de anticorpi ct i funcia d antigeni.

Un anticorp Ig1 aprut n urma contactului cu un antigen poate s stimuleze sistemul imunitar i s determine la rndu su sinteza unui nou anticorp (Ig2). Anti-anticorpii (Ig2) pstreaz amintirea antigenului primar, cu care va reaciona specific n toate situaiile.
Se ajunge n felul acesta la posibilitatea de a induce prin intermediul anticorpilor Ig1 de anti-anticorpi Ig2 capabili de se lega de epitopul, prin intermediul cruia sunt n mod indirect formai.

Principiul tehnicii de obinere a anticorpilor antiidiotip:

Epitop Anticorpi Ig1 (idiotipuri) purttori de structuri antigenice n regiuni hipervariabile (idiotopi).

Anticorpi Ig2 (antiidiotipuri) n care ei reprezint imaginea intern a epitopului.

Anticorpi Ig3 corespund anticorpilor iniiali Ig1 i prezint specificitate a de legare pentru epitop

Prepararea vaccinurilor antiidiotipice a fost facilitat prin folosirea anticorpilor monoclonali, a cror capacitate imunogen este limitat i deci trebuie potenat prin substane adjuvante.

Avantaje:
Specificitate mare Foarte utile pentru a obine rspunsuri imune fa de antigeni slab imunogeni (antigeni polizaharidici, antigeni lipopolizaharidici).

Dezavantaje:
reacii adverse mai ales atunci cnd se folosesc anticorpii monoclonali provenii de la alt specie.

4. Vaccinuri antiparazitare: n profilaxia bolilor parazitare se ncearc prepararea unor vaccinuri utiliznd ca antigeni parazii, atenuai, omogenizat din parazitul integral, parazii omori sau antigeni parazitari solubili. n protecia contra protozoarelor sanguine s-au preparat vaccinuri folosind ca antigeni parazii atenuai sau omori prin ngheri i dezgheri succesive, tratate cu formol sau beta-propiolacton sau iradiere cu raze X. n profilaxia helmintozelor s-a reuit prepararea unui vaccin contra dictiocaulozei, folosind antigeni larvari din Dictiocaulus viviparus i D. filaria.

n ectoparazitoze, n imunoprofilaxia infestaiilor cu Ixodidae se utilizeaz experimental folosirea de antigeni obinui din extracte parazitare totale.
Profilaxia specific prin vaccinri n bolile parazitare este nc n faza experimental urmrindu-se n mod special purificarea numeroilor antigeni parazitari n vederea selectrii epitopilor specifici. n cazul vaccinurilor preparate, imunitatea este adesea incomplet i nu s-a reuit dect fa de un numr limitat de infestaii, profilaxia n

5. Vaccinuri antihormonale Utilizarea n scopul reglrii imunologice a funciilor hormonale. Ameliorarea n cretere, a prolificitii sau din contr castrarea imunologic sunt ntre principalele inte, a vaccinurilor antihormonale. ntre primele aplicri a fost mrirea foliculogenezei la ovine prin imunizarea cu hormoni steroizi (androsteron, testosteron, oestrodiol) conjugai la molecula "carrier" i adiionai la adjuvani uzuali.
n faza experimental se utilizeaz i castrarea imunologic hormonal la femele i masculi.

MODUL DE APLICARE AL VACCINURILOR

Vaccinurile se administreaz la animale sntoase n scop profilactic, dozele de aplicare fiind n funcie de vaccin i de specia animal care se vaccineaz.
Cile de administrare sunt:

Parenterale - prin inoculare Enterale - administrarea pe ci naturale.

Vaccinrile parenterale devin greoaie sau chiar imposibile de aplicat n unitile industriale, n special la psri, numrul mare de animale fcnd intervenia individual inoperant.

Vaccinrile pe ci naturale:
ofer avantajul administrrii colective n vaccinri de mas sunt deosebit de eficiente n cazul vaccinurilor vii atenuate, ntruct n numeroase afeciuni infecioase procesele patologice se desfoar la nivelul mucoaselor imunizarea local blocheaz intrarea i fixarea germenilor la nivelul mucoaselor Procesul de imunizare se caracterizeaz prin formarea de Atc. protectori de tipul IgA i parial IgM Apariia de Atc. secretori este precedat de apariia de celule imunizante n mucoas, corionul fiind un strat al mucoaselor deosebit de activ pe plan imunologic Atg. corpusculari administrai pe ci naturale sunt rapid absorbi n circulaia sanguin declannd imunitatea umoral. Administrrile pe ci naturale, per os, conjunctival, prin aerosoli, necesit o supradozare a antigenului n scopul de-a oferi ansa ca toate animalele supuse operaiei de imunizare sa-i primeasc doza necesar imunizrii.

Cile de vaccinare parenterale:

vaccinarea prin scarificare

vaccinarea subcutanat vaccinarea intramuscular vaccinarea intraperitoneal

1. Vaccinarea prin scarificare:

Se aplic n profilaxia variolelor aviare

Const din scarificarea pielii pe faa anteroextern a gambei, peste care se badijoneaz vaccinul
Se poate utiliza i aplicarea vaccinului transcutanat prin presiune prin pielea normal, cu un aparat special numit Hiposprey-jet-injector;

2. Vaccinarea subcutanat:
Este cea mai rspndit dintre cile de aplicare a vaccinurilor Se execut cu ace scurte pentru a evita introducerea vaccinului sub fascii

Ca loc de elecie se recomand: a) laturile gtului la animalele mari b) faa intern a coapsei c) zona posterioar a conchiei auriculare la porcine d) prile laterale ale toracelui la carnivore e) partea superioar a gtului la psri.

3. Vaccinarea intramuscular:
Se practic rar, utilizndu-se ace lungi Locuri de elecie:
muchii fesieri muchii pectorali la psri.

Se recomand n cazul vaccinurilor vii Cele adiionate pe hidroxidul de aluminiu depreciaz calitatea crnii

4. Vaccinarea intraperitoneal:
Se practic cu ace cu bizoul scurt, respectnd reguli stricte de asepsie Se recomand doar la purcei, n vaccinrile contra enteritelor.

Cile de vaccinare enterale:

vaccinarea conjunctival

vaccinarea prin aerosoli vaccinarea oral serovaccinarea

1. Vaccinarea conjunctival:
Se aplic la psri Const n instilarea vaccinului n sacul conjunctival

2. Vaccinarea prin aerosoli:

Sub forma unor suspensii antigenice fine de dimensiuni cuprinse ntre 20-60 nm Se utilizeaz n aplicarea vaccinurilor virale, ndeosebi n imunizarea psrilor, vaccinul fiind pulverizat prin duze calibrate pentru obinerea de particule fine, la presiunea de 8 atmosfere.

3. Vaccinarea oral (per os):

Administrarea vaccinului n furaj, n ap de but
Cantitatea de vaccin trebuie s fie mai mare, de circa 100 de ori, dect n administrarea parenteral ntruct aciditatea gastric i n general mediul gastrointestinal cenzureaz 99% din antigenul administrat n prezent se utilizeaz vaccinuri enterale incapsulate n microsfere de copolimeri ai acidului lactic sau acidului glicolic

Antigenele din matricea polimeric, pot fi corpusculare sau sub form lichid

4. Serovaccinarea:
Administrarea simultan, dar n puncte separate, a agentului vaccinal nemodificat (virulent) i a unei cantiti de ser imun

Serul se administreaz pentru a a sigura protecie imediat animalelor vaccinate, att fa de intervenia unei tulpini slbatice a unui posibil agent etiologic specific, dar i mpotriva agenului vaccinal, cuia i atenueaz din patogenitatea potenial.
Treptat efectul anticorpilor administrai prin serul specific scade, iar organismul ncepe s-i sintetizeze anticorpii specifici proprii, sub aciunea inductoare a vaccinului.

Serovaccinarea a fost folosit nc de la sfritul secolului trecut n imunizarea antirujetic (metoda Loretz) i anticrbunoas (metoda Sobrenheim) i din 1906 s-a introdus n imunoprofilaxia pestei porcine, sub denumirea de serovirulizare, constituind timp de aproape cinci decenii metoda de baz n lupta mpotriva acesti grave boli.
Aceast metoda de vaccinare prezint dificulti n privina unei echilibrri judicioase ntre germeni i ser (raportul antigen/anticorp), existnd posibilitatea ca virulena s fie neutralizat de ser (anticorpi) i n consecin s nu se mai instaleze o imunitate activ satisfctoare ca intensitate i durat.

Pe de alt parte, organismele vaccinate ca agentul patogen folosit ca vaccin viu, pot deveni purttoare i eliminare de germeni (mai ales n cazul vaccinurilor antivirale) pentru perioade lungi de timp, ducnd la crearea artificial a unor focare staionare de boal.

Profilaxia specific, prin utilizarea vaccinurilor reprezint pentru prezent modalitatea cea mai eficient n prevenirea bolilor infecioase.
Pentru viitor se prospecteaz prepararea de vaccinuri lipsite de antigeni de lest, care s conin numai fraciunea imunizant (subunitvaccinuri) i utilizarea pe scar larg a paravaccinurilor (MAYR, 1980).

Imunitatea pasiv:
Se obine prin transfer de anticorpi gata formai de un organism donator i prezint urmtoarele caractere generale:
se instaleaz fr participarea organismului, prin simplu transfer de anticorpi preparai de alt organism; se instaleaz imediat;

este o imunitate de scurt durat, 14-21 zile.

SERURILE IMUNE

Serurile imune sau terapeutice sunt produse biologice obinute din serul sanguin al unui animal imunizat activ prin vaccinare sau al unui convalescent imunizat activ prin trecere prin boal.
Serul conine anticorpi protectori specifici, capabili s neutralizeze aciunea antigenului respectiv
Primele ncercri de folosire a serurilor n terapia antiinfecioas dateaz de la sfritul sec. XIX-lea, cnd s-a demonstrat c inocularea unei culturi bacteriene la un animal determin apariia n serul sanguin a unor substane care pot proteja nu numai organismul care le-a produs ci i alte organisme la care acest ser este inoculat.

Clasificarea serurilor se face dup mai multe criterii i anume:

1. Dup cantitatea de anticorpi:

a. seruri hiperimune - conin o cantitate foarte mare de anticorpi i se obin prin administrarea antigenului nemodificat sau a toxinei ca atare;

b. seruri de convalescent - obinute de la animale care au trecut prin boal n mod natural i conin o cantitate redus de Atc. c.concentrate gamaglobulinice - reprezint fraciunea globulinic din seruri, sunt foarte bogate n Atc. i ca atare se inoculeaz n cantitti mici, avnd o valoare de 4-5 ori mai mare dect serul integral.

2. Dup specia pe care s-a preparat:

a. Omologe - se prepar pe o specie animal i se administreaz la aceeai specie; b. heterologe - se prepar pe o specie i se aplic la alt specie animal dect specia pe care s-a preparat.

3. Dup natura antigenului cu care s-a preparat:

a. seruri antimicrobiene - antigenul folosit a fost o bacterie sau un virus; b. seruri antitoxice - imunizarea s-a fcut cu toxine; c. seruri mixte - conin att Atc. microbieni ct i antitoxici;

MODUL DE PREPARARE A UNUI SER

n prepararea unui ser sunt necesare urmtoarele etape: alegerea atg. bacterian stabilirea speciei animale pe care se face imunizarea hiperimunizarea propriu-zis sngerarea recoltarea serului sau a plasmei titrarea serului controlul puritii

1. Alegerea atg. bacterian, viral sau toxina

care trebuie s ndeplineasc condiia puritii i antigenitii; face imunizarea.

2. Stabilirea speciei animale pe care se

Se utilizeaz n mod special calul, bovinele i suinele Utilizarea animalelor mici este n general neeconomic Bovinele i porcinele se utilizeaz pentru seruri strict omologe Donatorul preferat rmne calul:
reacioneaz imunologic cu majoritatea Atg are o cantitate mare de snge serul su este relativ bine suportat de alte specii

Animalele alese pentru imunizare trebuie s fie sntoase i indemne de boli infectocontagioase oculte.

3. Hiperimunizarea propriu-zis:

Inocularea i.v. a atg Primele 2-3 inoculri se fac cu vaccin, urmtoarele cu Atg. viu n doze progresive, dup un protocol de lucru bine stabilit, n funcie de fiecare ser n parte.

4. Sngerarea:

Parial - scoaterea a cca. 1/3 din volumul total de snge la cabaline i bovine "la alb" - scoaterea ntregii cantiti de snge prin puncia cordului (la porcine).

5. Recoltarea serului sau a plasmei:

Prin defibrinare cu perle de sticl n recipiente sterile Prin exprimarea serului dup coagulare pe baghete de sticl.

6. Titrarea serului:
Se face pentru a se determina cantitatea de Atc Se evalueaz fa de seruri "etalon standard" Se exprim n uniti internaionale sau uniti de protecie.

7. Controlul puritii:
se evalueaz fa de eventualele infecii bacteriene sau micotice, aprute n timpul recoltrii serului. Dac serul este pur se introduce fenol 5% ca substan prezervant i se nfioleaz.

Condiiile pe care trebuie s le ndeplineasc un ser bun:

s fie activ - s conin o cantitate apreciabil de Atc.; s fie steril s nu fie nociv pentru specia animal la care se administreaz.

Serurile trebuie pstrate n condiii corespunztoare de temperatur i ntuneric.

S-a dovedit c:
temperatura de 37C scade titrul unui ser aproximativ 20% radiaiile solare reduc capacitatea protectoare cu 50% ngheul i dezgheul duc la inactivarea total a serurilor imune.

MODUL DE APLICARE A SERURILOR

Serurile imune se aplic n dou scopuri:

a) n scop profilactic n focarul de boal la animalele sntoase; b) n scop curativ la animale bolnave (n special serurile antitoxice).

Cile de inoculare:
Intravenos (cu riscuri de oc anafilactic pentru serurile heterologice) Intraperitoneal Subcutan Intramuscular Subdural

Nu se administreaz "per os" ntruct anticorpii sunt cenzurai de fermenii tubului digestiv Pot fi administrate pe aceast cale numai la animale nou-nscute.