INSAMANTRILE ARTIFICIALE nsmnarea artificial este o metod biotehnic, generalizat la toate speciile de animale .

Aceasta reprezint un complex de aciuni prin care, cu ajutorul unor instrumente, sperma este introdus n organele genitale femele, fr a avea loc actul de mperechere ntre mascul i femel. Aplicarea nsmnrilor artificiale prezint importan de ordin zootehnic, sanitarveterinar i economic. Astfel, din punct de vedere zootehnic, prin aceast metod se folosete n mod intens reproductori de valoare, prin care se accelereaz procesul de ameliorare. Cu sperma unui reproductor valoros se pot nsmna mult mai multe animale dect prin monta natural. De exemplu ntr-un an din 150 160 de ejaculate colectate de la un taur, se pot nsmna aproximativ 800- 1000 de vaci, n timp ce prin monta poate insemina natural doar 90-120. Dintr-un ejaculat de berbec sau de ap se pot nsmna 5-6 oi n timp ce un reproductor poate s monteze natural 1-2 femele . Cu sperma unui armsar se nsmneaz ntr-un sezon 150-200 iepe, fa de numai 50-70 prin monta natural iar cu sperma unui vier se pot nsmna 100-120 de scroafe, n timp ce prin monta natural doar 20-30. n acest fel, datorit numrului mare de femele ce pot fi nsmnate artificial se grbete mult ameliorarea animalelor, valorificndu-se foarte mult reproductorii de mare valoare zootehnic. Un numr mare de femele nsmnate nseamn un numr la fel de mare de produi obinui, ceea ce are o deosebit importan n lucrrile de selecie. Numrul mare de produi pe care se aplic selecia reprezent unul din factorii de baz, care asigur succesul acestei importante aciuni zootehnice. Pe de alt parte, exist posibilitatea transportului de sperm, prin care se realizeaz importante economii materiale i bneti, se realizeaz cu succes potrivirea perechilor, un alt factor important al ameliorrii, chiar dac reproductorii respectivi se afl la mare distan unul de altul . Din punct de vedere economic, se realizeaz o reducere a cheltuielilor de ntreinere a masculilor, datorit ntreinerii unui numr mic de reproductori, care sunt cei mai valoroi, acetia putnd fi inui n cele mai bune condiii de ntreinere i hrnire. Din punct de vedere sanitar-veterinar, masculii nu intr n contact cu femelele, nlturnd posibilitatea rspndirii bolilor, care se iau prin contact n timpul montei (bruceloz, epididimit infecioas, trichomonoz, chlamidioz etc.) TEHNICA NSMNRILOR ARTIFICIALE nsmnarea artificial cuprinde patru manopere principale: - colectarea spermei; - controlul spermei; - diluarea i conservarea spermei; - introducerea spermei n organele genitale femele; Colectarea spermei reprezint prima manoper a biotehnicii de nsmnarea artificial. De felul cum se face recoltarea depinde n bun msur succesul nsmnrilor artificiale. Colectarea spermei trebuie fcut n condiii perfecte de curenie, pentru a nltura posibilitatea contaminrii acesteia. De asemenea instrumentele care se folosesc trebuie s fie confecionate din materiale care s nu duneze spermatozoizilor (colectarea i procesrile ulterioare se efectueaz n recipieni de sticl i se conserv fie n acetia sau n paiete din plastic). Colectarea spermei se realizeaz cu vagina artificial sau cu electroejaculatorul. Prima metod const n reproducerea artificial a tuturor factorilor, care se gsesc n vagina natural i care favorizeaz ejacularea (eliminarea spermei). n prezent aceast metod se folosete la toate animalele de ferm. Vagina artificial este format dintr-un tub confecionat din cauciuc tare, ebonit sau metal, care n interior este cptuit cu o cama din material de plastic subire , rezistent , avnd capetele rsfrnte n afar, pe peretele tubului i fixate cu inele de cauciuc (Fig. 1). n spaiul dintre tub i cama se introduce ap cald la 45-50oC ,

printr-un robinet fixat n peretele acestuia. n acest mod se creeaz o temperatur i o presiune asemntoare cu cele din vagina natural. La unul din capetele tubului, se fixeaz un pahar de sticl n care se colecteaz sperma. nainte de folosire, vagina trebuie splat i sterilizat (se spal cu o soluie de bicarbonat de sodiu 3% sau cu ser fiziologic). La captul liber al tubului se unge cu vaselin neutr, pentru a uura intrarea penisului. Vagina artificial astfel pregtit este inut n mn de operator lng crupa femelei manechin, n aa fel nct, n momentul cnd masculul sare pe femel s i se poat introduce penisul n vagin. Aici, gsind condiii de temperatur, presiune i alunecare asemntoare celor din vagina natural, masculul, dup cteva micri specifice actului copulator, va ejacula, sperma fiind proiectat n tubul paharului colector. CONTROLUL SPERMEI nainte de prelucrare, conservare i introducere n organele genitale femele, sperma trebuie s fie controlat sub aspect calitativ. n multe cazuri procentul sczut de ftri se datoreaz spermei de proast calitate, cu spermatozoizi mori, anormali sau puini viabili. Controlul spermei se face macroscopic i microscopic cu ajutorul microscopului optic. Controlul macroscopic se face imediat dup recoltare, stabilind: volumul spermei, culoarea, mirosul i desimea spermei.(Tabel 3) Tabel 3 APRECIEREA MACROSCOPIC A CALITII SPERMEI DUP CONSISTEN (sperm de berbec i ap) Consisten Spermatozoizi/ml Maxim Minim Crem groas 5,0 4,5-5,5 Cremos 4,0 3,5-4,5 Crem subire 3,0 2,5-3,5 Lptos 2,0 1,0-2,5 Tulbure 0,7 0,3-1,0 Apos Nesemnificativ Nesemnificativ Dup SALAMON S. (1976) Volumul spermei se msoar cu paharul colector, sau cu un cilindru gradat. Volumul spermei este diferit n funcie de specie. Astfel, la berbec, cantitatea de sperm eliminat este n medie de 1 cm3, la taur de 3-4 cm3, la armsar de 45-50 cm3, iar la vier de 150-200 cm3. Masculii bine ntreinui, hrnii i folosii raional pot da cantiti i mai mari de sperm. Culoarea spermei este n general, alb lptoas asemntoare laptelui smntnit. Alte culori sunt anormale. Astfel, culoarea roz se datoreaz amestecului spermei cu snge, iar culoarea verzuie este cauzat de prezena urinei n sperm. Mirosul spermei este caracteristic, de os fiert. Nu se va admite sperma, care are miros de urin sau de puroi. Desimea spermei difer de la specie la specie. Sperma este cu att mai deas cu ct numrul spermatozoizilor este mai mare. n cazul cnd sperma este deas, culoarea ei este alb cremoas, iar n pahar se observ nite valuri, n continu micare. (Fig.2) Examenul microscopic determin motilitatea spermatozoizilor, numrul acestora, prezena spermatozoizilor anormali, nematurai, existena corpilor strini etc.(Fig.3) Pentru examenul microscopic se pune pe o lam o pictur de sperm, luat din paharul colector cu ajutorul unei baghete de sticl, peste care se pune o lamel. Privind la microscop se poate observa concentraia spermei. Sperma este deas, cnd tot cimpul microscopic este plin de spermatozoizi, iar spaiile dintre acetia sunt mai mici dect lungimea lor. O astfel de sperm conine aproximativ 2-3 miliarde spermatozoizi la 1 cm3.

n cazul spermei cu desime mijlocie, spaiile existente ntre spermatozoizi sunt egale cu lungimea unui spermatozoid. Aceast sperm cuprinde aproximativ 1,5-2 miliarde spermatozoizi la 1 cm3. Cnd sperma este rar, spaiile dintre spermatozoizi sunt mai mari dect lungimea unui spermatozoid. n acest caz numrul spermatozoizilor este sub 0,2 miliarde la 1 cm3. Sperma foarte rar, prezint n cmpul microscopic doar 5-10 spermatozoizi sau deloc. O sperm de bun calitate trebuie s aib ct mai muli spermatozoizi cu micri de naintare ct mai rapide i ct mai puini spermatozoizi anormali. La toate speciile procentul de anomalii maxim admis este de 15%. Motilitatea spermatozoizilor se stabilete la microscopul optic (metod subiectiv) sau prin coloraie vital cu eozin-nigrozin (metod obiectiv). Acest indicator este foarte important i reprezint numrul de spermatozoizi vii, care prezint micri de naintare n momentul determinrii. Motilitatea se reprezint procentual (100% maxim) sau prin folosirea sistemului zecimal, 1 reprezint motilitatea de 100%, iar 0,1 reprezint o motilitate de 10 %. n practic la toate speciile se utilizeaz reprezentarea procentual a motilitii. Motilitatea i viabilitatea spermatozoizilor (indicator care reprezint motilitatea spermatozoizilor dup 1-2 zile) sunt influenate de mai muli factori, de care trebuie s se in seama atunci cnd se practic nsmnrile artificiale. Aceti factori sunt urmtorii: - temperatura prea ridicat poate opri activitatea spermatozoizilor n foarte scurt timp; - lumina solar omoar spermatozoizii n 20-40 min, din care cauz sperma trebuie ferit de lumina direct a soarelui; - substanele chimice i medicamentele, de asemenea au o aciune duntoare asupra spermatozoizilor; - mediile de diluie care nu sunt izoterme, izoosmotice omoar spermatozoizii; - contactul spermei cu apa, cu spunul sau cu fumul de igar omoar spermatozoizii. Inocularea spermei este ultima faz a tehnologiei de nsmnre artificial ce const n inocularea spermei n tractul genital femel. ntroducerea spermei se realizeaz cu ajutorul vaginoscopului sau speculum vaginal i pipeta de inseminare (Fig. 4). n efectuarea acestei operaii, trebuie s se urmreasc momentul optim de nsmnare . Speculum vaginal este un instrument cu ajutorul cruia se pot deprta pereii vaginului, avnd posibilitatea ca nsmnarea s se fac n cervix. Mrimea acestui instrument este n funcie de specia la care se folosete. Lampa frontal se folosete pentru a lumina interiorul vaginului. Se compune dintr-un mic reflector fixat pe un suport care se aplic pe frunte. Sursa luminoas const dintr-o baterie care se poate ine n buzunar. Vaginoscopul este un speculum cu lumin proprie, instrument mult mai performant cu care se pune n eviden cervixul . Seringa semiautomat - este instrumentul cu care se dozeaz i se introduce sperma n organele genitale femele. Seringa este alctuit dintr-un tub metalic n interiorul cruia alunec un piston i care se termin printr-o canul de sticl n care se absoarbe sperma. Vrful canulei trebuie s fie bine lefuit pentru a nu rni mucoasa. Dimensiunile seringii sunt diferite n funcie de specie. Pistoletul de inseminare tip CASSOU este utilizat pentru depunerea spermei congelate direct din paiet. n ultimii ani se utilizeaz depunerea spermei direct n uter , metod care se numete inseminare intrauterin . Realizarea acestui tip de nsmnare este posibil cu ajutorul unor instrumente speciale i anume: laparoscop i pistolet special pentru inseminare intrauterin numit sering Aspic. (Fig.5). La animalele mici (oi i capre), pentru a uura operaia de inoculare este necesar i un stand pentru nsmnare n care femelele sunt contenionate. Inocularea spermei trebuie realizat n condiii optime de curenie i igien. Astfel, nainte de ntrebuinare, toate

instrumentele trebuie s fie splate i dezinfectate. Cantitatea de sperm care se inoculeaz depinde de specie, volumul i desimea spermei, astfel: Tabel 4

DOZA DE SPERM BRUT DEPUS INTRACERVICAL LA DIFERITE SPECII

Specia Cantitatea de sperm Oaie, capt 0,1-0,2 cm3 vac 0,5 cm3 iap 10-15 cm3 scroaf 50 cm3 Conservarea spermei. Odat cu aplicarea nsmnrilor artificiale, a aprut i necesitatea conservrii spermei un timp ct mai ndelungat n afara organismului. Sperma supus conservrii prin refrigerare sau congelare este obinut de la masculi de mare valoare genetic, putnd fi transportat n locurile unde este nevoie de reproductori valoroi. n vederea conservrii spermei se efectueaz diluarea i rcirea spermei. Pentru a obine o conservare ct mai bun, aceste dou operaii trebuie fcute n prima jumtate de or dup recoltare. Prin diluarea spermei se urmrete pe de o parte mrirea volumului ejaculatului (pentru a se putea nsmna un numr ct mai mare de animale), iar pe de alt parte asigurarea pentru spermatozoizi a unui mediu nutritiv, care s asigure o pstrare ct mai ndelungat a spermei. Mediile de diluie trebuie s asigure condiii prielnice pentru meninerea viabilitii spermatozoizilor. n general, diluanii sunt salini sau pe baz de lapte, n componena lor se introduce glbenu de ou. REETE DE DILUANI: Diluant cu baz de fosfai pentru berbeci: Ap distilat 100 g Glucoz anhidr 5,04 g Fosfat dublu de sodiu 0,678 g Fosfat de potasiu 0,015 g Lactat de calciu 0,0191 g Diluant cu baz de sulfai pentru taur i armsar: Taur Armsar Ap distilat 100 g 100 g Glucoz anhidr 1,2 g 5,76 g Sulfat de sodiu 1,36 g 0,34 g Pepton fr sare 0,5 g 0,2 g Pentru sperma de taur i berbec se folosete foarte mult diluantul cu glbenu de ou i citrat de sodiu. Taur Berbec Ap distilat 50 ml 50 ml Citrat de sodiu 0,7 g 1,4 g Glucoz anhidr 1,5 g 0,4 g Glbenu de ou 10 ml 10 ml Pentru o bun conservare dup efectuarea dilurii spermei, amestecul este supus un timp la o scdere treptat a temperaturii pn la +4oC. n prezent diluanii pentru sperm sunt produi de mai multe centre sau uniti tip SEMTEST. n prezent nsmnarea artificial cu sperm congelat se realizeaz n proporie de 80-90% la taurine i de 10-20% la rumegtoarele mici, existnd tendina de generalizare a nsmnrilor artificiale la toate speciile de animale domestice, inclusiv la psri.

PROBLEME ORGANIZATORICE ALE ACIUNII DE NSMNRI ARTIFICIALE Pentru ca aciunea de IA s aib rezultate bune, sunt necesare existena unor uniti specializate pentru producerea i difuzarea de sperm congelat. De asemenea, la animalele la care se execut nsmnri cu sperm diluat sau refrigerat, se impun n mod obligatoriu pregtirea femelelor i masculilor nainte de campania de nsmnri artificiale. FECUNDAIA I GESTAIA Prin fecundaie se nelege unirea ovulei cu spermatozoizii. Prin aceast unire se formeaz oul sau zigotul din care se va dezvolta un organism nou. De obicei, aceast unire se face n treimea superioar a oviductului i are loc dup 6-8 ore de la mont sau nsmnarea artificial. Fecundaia este condiionat de mai muli factori de mai muli factori: Intervalul de timp ntre introducerea spermei i ovulaie . Se tie c durata viabilitii spermatozoizilor n organele genitale femele este de 1-2 zile. Dac intervalul de timp ntre introducerea spermei i ovulaie este mai mare de 24 de ore, posibilitatea fecundrii este mult redus. De asemenea dac se ntrzie nsmnarea dup ovulaie, fecundarea nu mai poate avea loc, ovula avnd o viabilitate redus (8-10 ore). Numrul spermatozoizilor viabili, care ntlnesc ovula. Pentru a putea ptrunde n ovul este necesar ca spermatozoizii s distrug zona pellucida. Aceast zon este distrus de un set de enzime care se afl n acrozomul spermatozoidului. De aceea cu ct numrul spermatozoizilor va fi mai mare cu att cantitatea de enzime va fi mai mare i deci nveliul ovulei va fi distrus mai uor. Aciunea duntoare a secreiilor vaginale, care constituie un mediu neprielnic pentru viabilitatea spermatozoizilor. Acest lucru se nltur prin nsmnrile artificiale, n care caz sperma este depus n gtul uterin. Ovula fecundat coboar prin oviduct, se dezvolt pn n stadiul de blastocist preimplantaional dup care se fixeaz n mucoasa uterin, unde se va transforma mai nti n embrion implantat i apoi n fetus. Aceast perioad n care noul organism se dezvolt n uter, adic de la fixarea blastocistului pe peretele uterin i pn la ftare, poart denumirea de gestaie. Dup numrul fetuilor care se dezvolt n uter, gestaia este simpl sau multipl. Animalele care fat n mod normal un singur produs se numesc unipare, iar cele care fat mai muli produi- multipare. Animalele care fat pentru prima dat se mai numesc i primipare. Durata gestaiei este diferit la animalele domestice i anume: Tabel 5 DURATA GESTAIEI LA DIFERITE ANIMALE DOMESTICE 1 Iap n medie 340 zile ( 11 luni) 2 Vac n medie 285 zile (9 luni) 3 Oaie n medie 150 zile ( 5 luni) 4 Scroaf n medie 115 zile (3 -4 luni) 5 Bivoli n medie 315 (10 luni) 6 Mgri n medie 360 zile ( 12 luni) 7 Capr n medie 150 zile ( 5 luni) n cadrul fiecrei specii, durata gestaiei este influnat de urmtorii factori: - rasa- n general la rasele precoce, durata gestaiei este ceva mai mic dect la rasele tardive, fac excepie numai porcinele la care situaia este invers; - vrsta mamei-obinuit durata gestaiei este mai mare la fmelele primipare i la cele btrne; - sexul produsului-gestaia n cazul fetusului mascul este ceva mai lung dect n cazul fetusului femel;

alimentaia i starea de ntreinere a mamei-influeneaz durata gestaiei n sensul scurtrii ei n cazul unei hrniri raionale i unei ngrijiri corespunztoare. Cnd n relaiile fiziologice dintre mam i ft intervin tulburri, gestaia se poate ntrerupe. Aceast ntrerupere n orice perioad s-ar produce, poart denumirea de avort. Cauzele avortului pot fi: tehnologice (hrnirea i ntreinerea necorespunztoare a femelelor gestante), mecanice (diferite lovituri sau supraaglomerri) i infecioase (boli infecioase -bruceloz, tricomonoz salmoneloz, leptospiroz, chlamidioz etc.) STERILITATEA I INFERTILITATEA Prin sterilitate sau infertilitate se nelege neputina indivizilor de a da natere la urmai definitiv sau temporar, ca urmare a unor boli sau tulburri funcionale ale organelor genitale, sau datorit unor condiii anormale dentreinere. Sterilitatea i infertilitatea aduce mari pagube mari sectorului zootehnic, deoarece se mpiedic sporirea efectivului de animale i conduce la scderea produciilor acestora. Cauzele sterilitii pt fi de dou feluri: congenitale- atunci cnd tulburrile survin n perioada intrauterin i dobndite- atunci cnd tulburrile apar n perioada post-uterin. Cauzele sterilitii care in de perioada intrauterin pot apare fie naintea procesului de difereniere a sexului fie dup diferenierea sexelor. Cauzele acestor anomalii trebuie cutate ntr-o practicare neraional a potrivirilor perechilor sau n alimentaia defectuoas a femelelor gestante. Mai important de cunoscut sunt ns cazurile de sterilitate dobndit (infertilitate). Acestea pot fi cauzate de o alimentaie nerational, de o proast ngrijire sau de existena unor boli n sfera genital sau boli generale. Sterilitatea dobndit poate fi de dou feluri: definitiv n care caz animalele respective trebuie scoase din loturile de prsil i temporar cnd tulburrile respective pot fi nlturate. Sterilitatea de natur alimentar se datoreaz n cele mai multe cazuri unei alimentaii insuficiente. De regul sterilitatea se manifest atunci cnd n raia alimentar nu sunt asigurate proteinele, vitaminele (A,E,F,B,H,C) sau srurile minerale. Sterilitatea de natur igienic i de disconfort este cauzat de o luminozitate necorespunztoare a adposturilor, stabulaia ndelungat, folosirea neraional la munc, supraaglomerri, etc. n privina combaterii sterilitii, dac la sterilitatea congenital nu se mai poate interveni, sterilitatea dobndit (infertilitatea) poate fi evitat prin tratamente sau prin msuri de prevenire. Astfel, sterilitatea dobndit poate fi evitat dac animalele sunt bine pregtite i ngrijite n mod corespunztor, dac tineretul femel i mascul obinut este crescut n condiii optime de hran i ngrijire. Pe lng acestea va contribui la evitarea apariiei cazurilor de sterilitate, i la evidenierea lor din timp, un control periodic al funciilor de reproduci, un disgnostic timpuriu al gestaiei i n general, o atent supraveghere a reproductorilor. n cazul unei steriliti patologice se va aplica tratamentul medicamentos sau hormonal corespunztor. Dac sterilitatea a aprut, se va ncerca stimularea funciei sexuale prin folosirea unor substane hormonale naturale sau sintetiece. O contribuie serioas la combaterea sterilitii o aduce practicarea pe scar din ce n ce mai larg a nsmnrilor artificiale. Aplicarea nsmnrilor artificiale prin controlul spermei duce la evitarea cazurilor de sterilitate legate de calitatea necorespunztoare a spermei. De asemenea se pot evita cazurile n care spermatozoizii nu supravieuiesc n vagin fiind necesar depunerea acestora direct n cervix. Edemul de gestatie

Edemul de gestatie se intalneste frecvent la vaca si la iapa si mai rar la alte specii de animale. Cauzele care predispun femelele la edem in timpul gestatiei sunt: stabulatia prelungita combinata cu o alimentatie abundenta, bogata in albuminoide si suculente, varsta si sezonul. Edemul de gestatie se intalneste frecvent la iepele cu temperament limfatic. Edemul este determinat pe de o parte de staza in circulatia de intoarcere, in urma compresiunii retelelor venoase pelviene de catre greutatea uterului gestant iar pe de alta parte de congestia puternica a glandei mamare ce are loc in acest stadiu de

gestatie. Simptomatologia este specifica cu edeme in partile declive dar fara modificari asupra starii generale a animalului. La fata interioara a abdomenului, inaintea mamelei, apare la inceput o formatiune slab circumscrisa care se mareste repede si cuprinde toata fata ventrala a abdomenului de la salba mamela si posterior pana in regiunea perineala. Acest edem este rece, pastos si nedureros. Cand edemul ia un aspect invadant exagerat determina tulburari in deplasare mai ales la iapa. Tratamentul se instituie numai cand edemul are un caracter invadant si nu are tendinta de resorbtie, plimbarile zilnice, exploatare corespunzatoare, eforturi moderate sunt suficiente pentru reducerea in volum a edemului si resorbtia lui. In mod fiziologic in ultima etapa a gestatiei la toate femelele animalelor domestice se constata o stare de infiltratie edematoasa a glandei mamare care se mentine pana la fatare si dispare in prima saptamana post partum.