UNELE UTILIZRI ALE PGF2ALFA I GnRH N DIRIJAREA

FUNCIEI DE REPRODUCIE LA VACILE DE LAPTE

Considerente generale

n cazul vacilor de lapte, inseminarea i instalarea gestaiei se petrec pe
parcursul lactaiei. Astfel, desfurarea lactaiei i reinstalarea gestaiei trebuie
s se suprapun. Modificrile zestrei genetice, creterea produciei de lapte
precum i managementul vacilor de lapte au condus la declinul parametrilor
reproductivi. Multiplele investigaii efectuate au evideniat relaiile invers
proporionale dintre nutriie i lactaie, pe de o parte, i reproducie, pe de alt
parte, avndu-se n principal n vedere argumentul prioritii repartizrii
substanelor nutritive. n puerperium, vacile de lapte i dirijeaz cu prioritate
energia metabolizabil ctre producia de lapte i abia ulterior ctre restabilirea
condiiei corporale. Procesul reproductiv beneficiaz de substanele nutiritive
necesare doar dup ce producia de lapte i condiia corporal au fost asigurate.
Avnd n vedere necesitatea meninerii unui ciclu productiv / reproductiv de
aproximativ 365 de zile, devine esenial modul n care nutriia influeneaz
reproducia.
Aspectul esenial n puerperium este reprezentat de ieirea hipotalamusului
i a hipofizei de sub influena statusului hormonal al gestaiei recent ncheiate, n
vederea relurii producerii de hormon de stimulare folicular (FSH) i a
hormonului luteinizant (LH).
Cel de-al doilea aspect important al puerperiumului este reprezentat de
involuia uterin, proces care ar trebui s se ncheie n primele 30-40 de zile
postpartum. Desvrirea involuiei uterine coincide cu reluarea ciclicitii
sexuale i redobndirea fertilitii.
Considerm util trecerea n revist a ctorva aspecte referitoare la
fiziologia puerperiumului (din punct de vedere hormonal i al involuiei uterine),
bilanul energetic negativ, precum i s evideniem beneficiile unor protocoale
terapeutice prin intermediul crora se poate influena puerperiumul n vederea
obinerii unor parametri reproductivi optimi.

Butler (1988) a prezentat date care indic o descretere a ratei concepiei la
prima inseminare de la aprox. 65% n 1951 la 40% n 1996. n cazul vacilor
inseminate la estrul observat, cercettorii din anii 50 raportau rate ale concepiei
de aproximativ 55% (Casida, 1961). Ratele concepiei prezentate n ultima
perioad sunt de aproximativ 45% n cazul insmeinrilor realizate la estrul
spontan (Dransfield i col., 1998) i de aproximativ 35% n cazul IA programate
(Schmitt i col., 1996; Pursley i col., 1997a, 1997b, 1998).
Silvia (1998), colectnd datele de la ferme de vaci din Kentucky, a observat
o cretere a nr. de inseminri per concepie de la 1,62 n anul 1972, la 2,91 n
anul 1996.

Producia de lapte n Statele Unite a crescut cu aproximativ 20% n decada
1990-2000, concomitent cu o scdere a indicilor de reproducie. Exist o relaie
antagonic ntre producia de lapte i reproducie la vacile de lapte.
Producia crescut de lapte nu trebuie confundat cu NEB (bilan energetic
negativ). n mod normal vacile parcurg un proces de repartizare a nutrienilor i
mobilizare a esutului adipos la debutul lactaiei. NEB, pierderea n greutate i un
BCS (body condition score) sczut apar la debutul lactaiei, cnd necesarul de
nutrieni pentru funciile de baz i lactaie depesc capacitatea femelei de a-i
asigura energia prin hran. Vacile cu cele mai mari producii de lapte nu sunt n
mod necesar i cele cu cel mai mare NEB sau sczut BCS.

Studiile de teren au artat c aproape 30% din totalul vacilor de lapte din
SUA se gsesc n ferme cu efectiv mai mare de 500 de femele. Stahl i col.
(1999) au studiat 50 de cirezi din Minnesota n care producia de lapte a crescut
cu 90%. Fermele au crescut producia prin mrirea efectivului. n acelai timp, au
ctigat teren stabulaia liber, instalaiile mecanice de muls, precum i fora de
munc angajat temporar sau definitiv. 52% din cretere a fost realizat pe baza
achiziionrii junincilor care ulterior au ftat, avnd prima lactaie n ferm.
Studiul lui Stahl i col. (1999) a demonstrat c vacile aflate la prima lactaie
sunt adesea utilizate pentru creterea efectivului. Vacile aflate la prima lactaie
au un bilanul energetic mai sczut deoarece mnnc mai puin i au necesiti
energetice pentru cretere corporal, n plus fa de cele necesare lactaiei.
Bilanul energetic mai sczut la vacile aflate la prima lactaie a fost asociat cu
intervalele prelungite pn la prima ovulaie (Lucy i col., 1992), aceasta
explicnd de ce unele studii au identificat prima lactaie drept un factor de risc
pentru instalarea gestaiei la prima IA (Leoffler i col., 1999b).
n aproximativ 10% din efectivele de vaci de lapte din SUA se utilizeaz IA
programat. Programele de IA programat sunt rspndite deoarece n efective
cu o rat slab a depistrii manifestrilor estrale se pot obine intervale
superioare calitativ pn la prima inseminare i gestaie comparativ cu vacile
inseminate doar la estrul spontan (Pursley i col., 1997a, 1997b i 1998, Schmitt
i col., 1996). Protocoalele de IA programat ofer rate acceptabile de gestaie,
fr a mai fi necesar depistarea estrului. Vacile inseminate n urma
protocoalelor de IA programat au nregistrat o rat a concepiei mai sczut fa
de vacile inseminate la estrul spontan. De aceea, parametrii reproductivi
tradiionali precum indexul de inseminare i rata concepiei sunt negativ afectate
n cazul implementrii sistemului de IA programat.
Sntatea efectivului exercit un puternic impact asupra reproduciei.
Exploatarea vacilor n adposturi i organizarea unor efective mari amplific
riscurile infeciilor mamare i uterine. Infeciile mamare i uterine reprezint
factori de risc pentru infertilitatea vacilor. Dac vacile exploatate n adposturi
sufer de mai multe afeciuni, fertilitatea lor va scdea.
Administrarea bST-ului recombinat la vacile de lapte reprezint deja o
practic rspndit i acceptat n vederea creterii produciei de lapte
(Baumann, 1999). Administrarea bST se soldeaz de asemenea i cu o uoar
descretere a performanelor reproductive. ntr-un studiu amplu, implicnd 28 de
efective, Collier i col. (1997) au demonstrat c administrarea bST la vaci
primipare a generat o cretere a perioadei de anestru cu 16 zile, neafectnd ns
rata general a gestaiei. n acelai studiu a fost relevat faptul c la vacile
multipare perioada de anestru nu a fost influenat, rata gestaiei scznd ns
cu 7 procente. Din studiul ntreprins pe 340 de efective de ctre Baumann (1999)
s-a desprins ideea c bST nu afecteaz stabilitatea parametrilor productivi ai
vacilor de lapte, introducerea bST n uz n SUA neexplicnd declinul parametrilor
reproductivi.

Declinul reproductiv la vacilor de lapte ar putea fi cauzat i de modificrile
mediului nconjurtor global. Decada anilor 90 a fost cea mai clduroas de la
nceputurile nregistrrii datelor meteo. Reproducia vacilor de lapte este extrem
de sensibil la stresul cauzat de cldur, datorit ratei metabolice crescute
(intensificate) asociate lactaiei (Wolfenson i col., 2000). Este evident efectul
adiional al stresului de cldur i produciilor mari de lapte asupra descreterii
ratei de concepie la prima inseminare la vacile de lapte.
n declinul performanelor reproductive pot fi implicate i substanele
chimice endocrin-disruptoare (hormono-mimetice).


CAPITOLUL 1. ASPECTE PRIVIND
FIZIOLOGIA REPRODUCIEI LA VACILE DE LAPTE

Exist puine studii care s fi urmrit modificrile survenite n fiziologia
reproducerii la vacile de lapte n ultimii 50 de ani. Datele disponibile provin din
studii efectuate naintea declinul important survenit n reproducia vacilor de
lapte. Liniile de selecie i control au fost stabilite n 1964, fiind selecionate
continuu din acel moment. Linia de control a fost meninut prin utilizarea
spermei provenite de la 20 de tauri aflai n zona de medie ca amelioratori pentru
lapte n 1964. Cnd a fost epuizat stocul iniial de sperm, s-a apelat la urmai,
care au fost selecionai n vederea crerii unor noi stocuri de sperm. Vacile
selectate n fiecare an au fost montate cu primii patru dintre cei mai valoroi tauri
amelioratori pentru lapte.

1. Intervalul pn la prima ovulaie

n general, se admite c prima ovulaie la vacile de lapte apare ntre 14-21
de zile dup parturiie, 5% din efectiv fiind n anestru la debutul sezonului de
mont, n efectivele n care managementul reproduciei prevede activitate
sezonier. Aceste valori provin din studii efectuate nainte de 1970. La vacile de
lapte contemporane, intervalul pn la prima ovulaie probabil c este cu 10 zile
mai lung, procentul femelelor aflate n anestru la debutul sezonului de mont fiind
sensibil crescut (Stevenson, 2000). Studiul efectuat de Lucy i col. (1998), pentru
a compara intervalul scurs pn la prima ovulaie pp. la vacile din Minnesota, a
evideniat valoarea de 43 5 zile, comparativ cu 293 zile, la vacile din 1964!
Procentele corespunztoare pentru vacile anestrice au fost de 38 respectiv 0.
Chiar dac studiile recente relev creterea intervalului pn la prima ovulaie
pp, distribuia datelor este neuniform. Astfel, n studiul lui deVries i Veerkamp
(2000) se arat c intervalul mediu pn la prima ovulaie a fost de 29,7 zile ns
valoarea medie a fost de 18 zile, interval similar cu cele raportate n anii 60. De
aceea, creterea intervalului mediu pn la prima ovulaie la vacile
contemporane ar putea fi determinat de o subpopulaie de vaci cu intervale
extrem de lungi.
Motivul creterii intervalului pn la prima ovulaie ar putea fi parial explicat
prin bilanul energetic negativ mai amplu n cazul vacilor contemporane. Vacile
lactante se afl n NEB (bilan energetic negativ) pe parcursul puerperiumului
timpuriu deoarece nu pot extrage suficient energie din hran. NEB reduce
pulsatilitatea LH, prin aceasta amnnd reluarea activitii ovariene (Beam i
Butler, 1999, Butler-2000). Unii cercettori au artat c NEB determin o
cretere a intervalului pn la prima ovulaie, precum i pn la primul estru.

2.Reluarea activitii ciclice post partum

Este condiionat de mai muli factori, urmnd s fie analizate aspectele
mai relevante privind involuia uterin, controlul hormonal al activitii de
reproducie n perioada puerperal precum i elemente importante legate de
exprimarea estrului.

a. Involuia uterin i reluarea activitii ovariene

1. Involuia uterin
Imediat dup parturiie, uterul are aspectul unui sac de aproximativ 1m
lungime care cntrete 9-10 kg. Involuia uterin complet presupune
reducerea dimensiunilor uterului i refacerea endometrului, fenomene care
presupun parcurgerea consecutiv a trei procese: 1. contraciile uterine,
genernd o reducere semnificativ a dimensiunilor; 2. pierderile de esut i 3.
refacerea esuturilor.
Involuia uterin este considerat complet atunci cnd ambele coarne
uterine au revenit la dimesiunile anterioare gestaiei i i-au reluat locul pe
planeul cavitii pelvine, redobndind tonusul i consistena normale. Involuia
uterin poate fi parcurs n 25-50 de zile, variaie datorat modului de examinare
precum i criteriilor utilizate pentru caracterizarea acestui proces. n plus, exist
numeroi factori care pot afecta involuia uterin, contribuind la acest interval
larg; cei mai importani sunt reprezentai de distocii i infeciile bacteriene,
determinnd o ntrziere seminificativ a involuiei. ntrzierea involuiei uterine
poate reprezenta o cauz important a infertilitii la femelele montate timpuriu
dup parturiie.
Chiar dac nu este pe deplin elucidat corelaia existent ntre involuia
uterin i activitatea ovarian, s-a demonstrat reciprocitatea acestei corelaii, cu
profunde implicaii n fertilitatea ulterioar.
Pe de o parte, reluarea timpurie a ciclicitii ovariene poate grbi involuia
uterin. Creterea nsemnat a tonusului uterin i scderea marcant a
dimensiunilor uterului ntre zilele 10 i 14 postpartum care apare la vacile
normale- n general coincid cu debutul primului estru i producerea de estrogeni.
Este recunoscut efectul benefic al estrogenilor asupra mecanismelor uterine de
aprare precum i asupra fibrelor musculare netede uterine.
Pe de alt parte, influena involuiei uterine asupra relurii activitii ovariene
se bazeaz pe eliberarea masiv postpartum a PGF2 de ctre endometru.
Dei s-a demonstrat c reluarea ciclicitii ovariene pp. nu se produce dect
dup ce nivelurile PGF2 ating pragul de baz, la vacile cu puerperium normal s-
a evideniat o corelaie negativ existent ntre durata eliberrii masive a PGF2
i timpul necesar completrii involuiei uterine, timpul necesar apariiei primei
ovulaii urmate de o faz luteal cu lungime normal. Prin urmare, la vacile cu
puerperium normal i durat mai lung a eliberrii postpartum a PGF2, involuia
uterin este mai rapid, iar prima ovulaie urmat de faz luteal normal apare
semnificativ mai devreme.
La vacile cu puerperium patologic, care au o involuie uterin prelungit,
reluarea activitii ovariene postpartum va fi semnificativ ntrziat. n acest
context, nivelurile postpartum crescute ale PGF pot reprezenta un semnal uterin
care previne reluare prea timpurie a ciclicitii ovariene, astfel nct organismul
femelei s poat avea rgazul necesar anihilrii pariale sau totale a infeciei
uterine.

2. Reluarea activitii ovariene n puerperiumul timpuriu

Pe parcursul perioadei anovulatorii puerperale se observ o activitate
ovarian distinct referitoare la creterea folicular, prezent la majoritatea
vacilor: ovarele sunt caracterizate de prezena unor foliculi de dimensiuni mici i
mijlocii, care vor determina formarea primului folicul dominant la aproximativ 11
zile dup parturiie.
Aceast cretere i dezvoltare este semnificativ mai pronunat pe ovarul
contralateral cornului uterin gestant, sugernd o aciune inhibitoare a gestaiei
i/sau CL de gestaie asupra dezvoltrii foliculare ulterioare. Pe baza ecografiei
i dozrilor P4, s-a stabilit c prima ovulaie pp. la vacile de lapte cu puerperium
normal i neafectate de chiti ovarieni, apare ntre zilele 15 i 21 post partum.
Lungimea perioadei anovulatorii este corelat cu apariia primului folicul
dominant precum i cu numrul foliculilor dominani prezeni naintea acestei
ovulaii. Rezult c un interval prelungit scurs ntre parturiie i prima ovulaie se
datoreaz mai degrab neproducerii ovulaiei dect lipsei dezvoltrii foliculului
dominant.

b. Controlul endocrin al reproduciei la vaci n puerperium

Reluarea activitii reproductive n puerperiumul timpuriu este bazat pe o
interrelaie extrem de coordonat ntre hipotalamus, hipofiz, ovare i uter.
Hormonul luteinizant (LH) reprezint factorul limitativ al relurii timpurii a
activitii ovariene postpartum. Pe parcursul gestaiei i n preajma parturiiei,
nivelurile plasmatice crescute ale steroizilor inhib axul hipotalamo-hipofizar,
determinnd concentraii hipofizare evident sczute ale LH la momentul
parturiiei.
Imediat dup ftare, nivelurile plasmatice bazale ale FSH i LH sunt
sczute, eliberarea lor pulsatil fiind absent. Eliberarea FSH este sczut doar
pe parcursul primelor ctorva zile n perioada peripartal. La majoritatea vacilor,
nivelurile plasmatice ale FSH sunt crescute la 5 zile pp., FSH nefiind considerat
factor decisiv pentru reluarea ciclicitii ovariene dup ftare.
Creterea nivelurilor FSH va determina creterea folicular precum i pe
cea a secreiei ovariene de estradiol, conducnd la apariia primului folicul
dominant la aproximativ 11 zile postpartum.
Nivelul crescut al estradiolului va exercita un efect stimulator (feedback
pozitiv) asupra secreiei de LH, fcnd hipopfiza mult mai receptiv la stimularea
generat de la nivel hipotalamic. Aceste aspecte au fost confirmate prin
administrarea de GnRH exogen n puerperiumul timpuriu, prilej cu care s-a
demonstrat c receptivitatea hipofizar pp. la aciunea GnRH nu se reface mai
devreme de ziua a 10-a postpartum.
Dei a fost inhibat pn n apropierea parturiiei, nivelurile LH revin la
normal semnificativ mai trziu dect cele ale FSH, sugernd mecanisme de
control diferite pentru cele dou gonadotropine. Concentraiile LH sunt sczute n
primele zile pp., dei se nregistreaz o eliberare pulsatil neregulat, de joas
amplitudine. Datorit stimulrii exercitate de concentraiile crescnde de
estradiol, nivelurile periferice ale LH cresc n cea de-a doua i cea de-a treia
sptmn postpartum, fapt demonstrat prin creterea frecvenei eliberrii
pulsatile de LH. Atunci cnd frecvenele pulsiunilor ambelor gonadotropine (LH i
FSH) cresc la valori de cel puin una pe or, devine posibil declanarea primului
estru.
Pe msur ce relaia endocrin dintre ovare i uter (secreia de PGF) se
normalizeaz ctre momentul definitivrii involuiei uterine, ciclurile fertile pot s
apar la 20-25 de zile postpartum.

3. Exprimarea estrului

Depistarea estrului reprezint o component esenial a programelor de
inseminare din perioada puerperal, depinznd de evidenierea i nelegerea
semnelor clinice specifice estrului n vederea stabilirii momentului optin pentru
inseminare. Declinul actual al eficienei reproduciei la vacile de lapte ar putea fi
asociat cu slaba exprimare a estrului. Dransfield i col. (1998) au efectuat o
analiz exhaustiv a datelor generate de ctre detectorii electronici de mont
(Heat-Watch System, DDx Inc., Denver, CO). Valorile medii nregistrate pentru o
vac de lapte au fost de 8,5 salturi per estru, estrul avnd o durat de 7 ore.
Aproape un sfert dintre vaci au exprimat clduri clasificate ca avnd intensitate
sczut (mai puin de 1,5 salturi pe or) i durat prescurtat (mai mic de 7
ore). De aceea, depistarea estrului este dificil la vacile de lapte atunci cnd
perioadele de observaie sunt n numr de dou pe zi, avnd o durat mai scurt
de 30 de minute. Astfel, pentru o depistare corespunztoare a estrului sunt
necesare mai multe perioade de observaie, avnd o durat crescut.
Pe lng dificultatea depistrii estrului, n ziua de azi mai exist i problema
identificrii greite a estrului (a neidentificrii corecte a estrului). ntr-un studiu
efectuat pe 242 de vaci Holstein aparinnd aceluiai efectiv, Sturman i col.
(2000) au observat c 19% dintre inseminri au fost efectuate la vaci aflate n
faza luteal sau n stadii timpurii ale gestaiei. Inseminarea vacilor gestante a
generat o mortalitate embrionar de 17%.
Exist puine studii care s fi evaluat sistematic cauzele slabei exprimri a
estrului la vacile de lapte. Exprimarea estrului este greu de studiat deoarece
estrul reprezint un comportament care i are originea n aciunea estradiolului
asupra hipotalamusului (Allrich, 1994). Intensitatea (numrul salturilor) i durata
estrului depind de caracteristicile comportamentale ale individelor precum i de
interaciunile sociale dintre femele. Din aceste motive, intensitatea i durata
estrului trebuie examinate n cadrul unor studii de amploare, pentru a genera
concluzii valabile. Britt i col. (1986) au studiat vaci ovariectomizate tratate cu
estradiol i au evideniat faptul c nivelul produciei de lapte nu influeneaz
intensitatea exprimrii estrului. Acest studiu a evideniat importana materialului
pe care femelele efectueaz sprijinul, deoarece durata estrului a fost mai lung
precum i salturile mai intense pe pmnt, comparativ cu pardosea de beton.
Vailes i Britt (1990) au confirmat observaiile originale ale lui Brit i col. din
1986, artnd c activitatea de mont a fost de 15 ori mai intens n cazul
pardoselii de pmnt, comparativ cu cea de beton. Cea mai probabil cauz
responsabil de scderea intensitii exprimrii estrului este reprezentat de
utilizarea tot mai intens a sistemului de exploatare a vacilor n adposturi cu
pardoseala de beton.
Utiliznd sistemul HeatWatch, Lopez i col. (2004) prezint date care indic
rolul esenial al produciei de lapte n exprimarea estrului. Astfel, la vaci
manifestarea clinic a estrului dureaz n medie 7,3 ore, interval n care femela
se las srit de 7,2 ori iar la viele, estrul dureaz 11,3 ore, incluznd n medie
16,8 srituri. Vacile care produc 40,5 litri lapte/zi prezint o durat scurt de
exprimare a estrului (6,2 0,5 ore), pe cnd cele cu producie mai sczut, de
28,7 litri de lapte /zi manifest estru timp de 10,9 0,7 ore. n acelai context,
utilizarea zilnic a patru perioade de depistare vizual a estrului, asigur
identificarea a 90% dintre femelele n clduri n cazul celor cu producie medie
de 32,6 litri pe zi, i doar a 50% dintre femelele n estru, n cazul celor care
produc 46,6 litri de lapte pe zi. n aceste condiii, devine evident rolul esenial al
nsmnrii artificiale programate, fr depistarea estrului. Nu ne putem baza
exclusiv pe depistarea vizual a estrului, n special n cazul vacilor cu producii
mari de lapte, atunci cnd urmrim obinerea unor parametri reproductivi optimi.

4. Rolul bilanului energetic negativ n reluarea funciei ovariene i apariia
primului estru postpartum

In ultimele decenii este evident creterea continu a produciei de lapte la
vaci, simultan cu scderea dramatic a performanelor reproductive. Scderea
performanelor reproductive poate fi explicat prin creterea incidenei
complicaiilor bacteriene n procesul involuiei uterine, precum i prin frecvena
crescuta a disfunciilor ovariene n puerperium. Aceast lucrare trece n revist
fiziologia i patologia celei din urm, fenomen deosebit de complex. Baza
nutriional a acestui proces, anume creterea brusc a necesarului nutritiv pe
msura creterii produciei de lapte care genereaz NEB, acoper primele 10-12
sptmni. n contextul vacilor cu zestre genetic valoroas, NEB puerperal
reprezint diferena dintre ingesta energiei utilizabile i consumul energetic
efectuat n vederea meninerii masei corporale i producerii laptelui. n principiu,
este un fenomen fiziologic, care poate genera tulburri mai mult sau mai puin
grave ale metabolismului i reproduciei, genernd pagube economice
nsemnate. n primele 3-4 sptmni postpartum, NEB este puternic corelat att
cu nivelul produciei de lapte ct i cu intervalul pn la prima ovulaie. Deoarece
numrul ciclurilor sexuale ovulatorii care preced IA (nsmnarea artificial)
influeneaz rata concepiei, lungimea intervalului postpartum pn la prima
ovulaie ofer un parametru important pentru estimarea efectului NEB asupra
performanelor reproductive.

a. Fiziopatologia NEB n puerperiumul vacilor de lapte

Pe durata NEB, vacile cu producii mari de lapte trebuie s-i mobilizeze
rezervele corporale, n primul rnd depozitele subcutane de lipide (mobilizarea
forat FLM = forced lipid mobilization). n general, animalele suprahrnite
naintea parturiiei (BCS body condition score - 3,75) se afl n poziia cea
mai periculoas (sindromul vacii grase). Scderea rapid a greutii corporale
(BW) i a BCS reprezint cele mai evidente simptome clinice ale FLM. Ca o
consecin imediat, se observ o cretere accentuat a nivelurilor circulante ale
NEFA (acizi grai neesterificai), urmat - cel mai adesea, dar nu n toate cazurile
de creterea produciei de OH-butyrat (BHB) i a altor corpi cetonici
(hipercetonemie). Simultan, are loc acumularea hepatic a lipidelor, n special a
TAG (triacilglicerol), rezultnd sindromul ficatului gras.
Formele moderate sau grave ale ficatului gras (coninutul n grsimi 20%)
se nsoesc de tulburri bine definite ale funciilor hepatocelulare
(gluconeogenez, metabolismul colesterolului, acizilor biliari i bilirubinei,
inactivarea hormonilor steoridieni i insulinei, sinteza anumitor apolipoproteine i
25-hidroxilarea calciferolului). Metabolizarea bromosulfoftaleinei ncetinete iar
concentraiile plasmatice ale bilirubinei totale i acizilor biliari sunt corelate
pozitiv cu gradul infiltraiei grase a hepatocitelor. n acelai timp, n sngele
periferic se detecteaz hipoalbuminemia, niveluri foarte sczute ale VLDL i
LDL, precum i concentraii sub limitele normale ale tuturor substanelor
transportate de lipoproteine (colesterolul total, TAG, caroten i tocoferol). Dei
efectul infiltraiei grase nu este evideniat prin deteriorarea membranei, n mod
obinuit sunt observabile creteri moderate ale aspartat aminotransferazei,
fosfatazei alcaline i lactat dehidrogenazei. n cazurile grave ale lipidozei
hepatice, capacitatea hepatocelular de detoxifiere a azotului ruminal i a
endotoxinelor absorbite din tractul gastrointestinal sau eliberate din oricare
afeciune mediat de endotoxine precum endometrita putrid acut (APE)
sau anumite forme de mastite, este diminuat. A fost semnalat i dereglarea
funciei imunitare, predispunnd indivizii afectai la complicaii generate de
complicaii survenite n procesul involuiei uterine, sau mastite. Modificrile
biochimice induse de FLM predispun femela la retenia nvelitorilor fetale, pareza
de parturiie i displazia abomazumului, precum i la diferite forme de cetoz.
Aceasta din urm reprezint o consecin direct a NEB i FLM.
Ficatul intensific preluarea NEFA din snge. Aceti acizi grai sunt fie
esterificai n TAG, fie convertii n acetil-CoA. Introducerea acetil-CoA n ciclul lui
Krebs depinde de disponibilitatea oxaloacetatului, care este preponderent
eliberat din precursorii gluconeogenetici precum propionatul, piruvatul, glicerolul
i anumii aminoacizi. Dac stocul acestor precursori este inadecvat, aa cum se
ntmpl adesea pe parcursul NEB, disponibilitatea oxaloacetatului de a
introduce acetil-CoA n ciclul Krebs scade. Ca urmare, acetil-CoA n exces este
utilizat pentru cetogenez iar femela poate parcurge forme subclinice sau
clinice de cetoz. Aprovizionarea insuficient cu precursori gluconeogenici pare
a fi elementul cheie n acest proces.

b. Endocrinologia bilanului energetic negativ

Bilanul energetic negativ puerperal poate induce modificri endocrine
marcante, recunoscute ca factori importani n reglarea FLM. Pe lng implicarea
catecolaminelor, glucagonul crescut i concentraiile sczute ale insulinei
caracterizeaz modificrile timpurii, n timp ce nivelurile GH (growth hormone)
rmn nemodificate sau cresc uor. n acelai timp, scade eliberarea IFG1
hepatic GH induse, precum i a insulinei glucagon induse, iar anumite esuturi i
pierd sensibilitatea la insulin. Toate aceste evenimente endocrine pot orienta
metabolismul de pe latura anabolic spre cea catabolic. Aceast turnur
metabolic poate fi amplificat de consecinele endocrine ale unei expuneri la
endotoxine. esuturile periferice ncearc s i acordeze metabolismul energetic
la aceast stare catabolic NEB indus prin intensificarea capacitii de
inactivare (rT3) a cii hormonilor tiroidieini T3 i T4. De aceea, dei rspunsul
tirodei T4 indus la aciunea TRH (tirotropin releasing hormone) este doar uor
modificat, se observ n sngele periferic niveluri sczute ale T3 i T4 precum i
concentraii crescute ale rT3.
Cu ceva timp n urm s-a presupus i implicarea funciei adrenocorticale i
producerii de cortizol, ns nu au fost furnizate dovezi care s confirme ipoteza.
De curnd, cercetrile asupra reglrii ingestei i metabolismului energetic s-au
concentrat pe rolul leptinei. Acest hormon de natur proteic este n principal
secretat de esutul adipos, i acioneaz prin intermediul nucleilor hipotalamici,
mediind rspunsul neuroendocrin fa de variaiile de energie. Poate oferi
organelor periferice informaii legate de statusul nutriional. Acest hormon
reprezint unul dintre agenii primari care comunic informaii despre rezervele
energetice periferice ctre regiunile cerebrale care determin comportamentul
alimentar, metabolismul i funcia endocrin, n vederea meninerii homeostaziei
energetice. La oarece, obolan, om, rumegtoare i porc, concentraia sa
circulant variaz direct cu greutatea corporal iar procentul grsimii corporale i
leptinei (LEPT) contribuie la reglarea coninului de grsime corporal. Expunerea
la insulin, glucocorticoizi i endotoxine poate crete exprimarea genei sale
i/sau nivelurile sale plasmatice, n timp ce LEPT poate inhiba direct sinteza
cortizolului prin celulele adrenale. Aadar, LEPT i cortizolul interacioneaz n
interiorul unei bucle de feedback negativ. Incubarea timp de 24 de ore cu T3 (dar
nu cu T4) a intensificat semnificativ exprimarea LEPT RNAm i nivelurile LEPT
secretate n culturile de adipocite. Eliberarea LEPT din adipocite este ncetinit
de stimularea adrenergic, presupunndu-se de asemenea interaciunea sa cu
secreia GH i IGF1. Au fost puse la punct metode de determinare a nivelurilor
sanguine ale LEPT la diferite specii. La rumegtoare, LEPT poate avea rolul su
n cadrul NEB.

c. Funcia ovarian i bilanul energetic negativ n puerperiumul vacilor de
lapte

La majoritatea vacilor de lapte care nu alpteaz, concentraiile
plasmatice ale FSH cresc la valorile maxime n zilele 4-5 postpartum. Primul val
de FSH este urmat de imediat de iniierea primului val folicular postpartum, care
va produce primul folicul dominant (FD) cu diametrul mai mare de 9 mm. Ulterior,
se observ derularea regulat a valurilor de FSH i a valurilor foliculare
(recrutarea, selecia i formarea FD), n ciuda NEB mediu de minus 7,5 Mcal/zi n
primele 3 sptmni postpartum. Se pare c iniierea valurilor foliculare n
puerperiumul timpuriu nu este stnjenit de NEB i se produce ca urmare a
restabilirii valurilor de FSH sincronizate doar de sfritul gestaiei i parturiie. Pe
parcursul NEB din primele sptmni de lactaie, LH (dar nu i FSH!) este
deficient. De aceea, debutul valurilor foliculare dependent de FSH pare s nu fie
afectat de NEB.
Efectul NEB asupra momentului primei ovulaii postpartum a fost
evideniat n deceniul opt. Mecanismele fiziologice de semnalizare care
informeaz axul hipotalamo-hipofizo-ovarian (HPO) asupra statusului bilanului
energetic au fost incomplet elucidate.
Pierderea caracterului pulsatil al secreiei de LH se datoreaz aportului
energetic nesatisfctor att la vacile de carne care alpteaz, ct i la cele de
lapte care nu alpteaz. Restabilirea secreiei pulsatile de LH care determin
dezvoltarea folicular reprezint un element cheie n reluarea ciclicitii ovariene
la vacile n puerperium care trec prin NEB.
Se pare c refacerea coninutului hipofizar de LH i responsivitatea la
GnRH sunt complete n ziua a 10-a pp la vacile de lapte, iar dovezile sugereaz
un locus hipotalamic predominant, responsabil de efectul iniial de scdere a
ingestei energetice. n primele sptmni pp de lactaie, activitatea redus a
generatorului de pulsiuni de GnRH se traduce printr-un sprijin redus al LH pentru
steroidogeneza folicular necesar inducerii unui val de LH asemntor celui
preovulator precum i ovulaiei consecutive. O frecven pulsatil relativ redus a
LH (2 pulsiuni la 6 ore) este n aparen adecvat susinerii dezvoltrii
morfologice a FD pn n sptmna a 2-a postpartum. Aceast observaie este
n consens cu creterea i diferenierea FD competent pe durata mijlocului fazei
luteale a ciclului sexual al bovinelor, cnd frecvena pulsiunilor de LH este
sczut.
Orice mecanism care leag axul HPO de metabolism trebuie s implice n
ultim instan o component hormonal. Studiul lui Beam i Butler (1999) au
confirmat importana fiziologic a raportului insulin/GH i a zilei nadirului BE,
artnd c aceste diferene hormonale n perioada pp intermediar pot influena
desfurarea primului val folicular. Insulina stimuleaz celulele foliculare de vac
in vitro (Spicer i col., 1993) iar micile creteri ale acesteia nregistrate pp pot
avea efecte importante asupra stadiilor timpurii ale dezvoltrii foliculare.
Concentraiile circulante ale IGF1 i ale uneia dintre proteinele sale de cuplare
(IGFBP-2) n perioada peri-partal au reprezentat buni indicatori ai capacitii
vacilor supuse restricionrii energetice, de a relua ciclicitatea consecutiv
parturiiei. Mai mult, un raport insulin/GH crescut nregistrat pp, poate duce la
producii hepatice crescute ale IGF1. Att insulina, ct i IGF1 stimuleaz in vitro
steroidogeneza i dezvoltarea culturilor de celule tecale i granuloase. n
condiiile generate in vitro, n celulele tecale bovine, IGF1 a sporit numrul
locusurilor de cuplare pentru LH, amplificnd producerea de P4 i TEST, LH-
induse. Aceste aspecte confirm observaiile in vivo, efectuate de Beam i Butler
(1999), care au demonstrat o relaie aparent existent ntre activitatea
steroidogen a FD al primului val i nivelurile circulante ale IGF1.
Prin afectarea secreiei GnRH i gonadotropinelor, leptinei i s-a oferit un
rol n influenarea funciei de reproducere la rumegtoare, primate i
rumegtoare. Acest hormon ar putea fi unul dintre indicatorii durabili ai statusului
nutriional care permite declanarea proceselor reproductive. Rezultatele
obinute la roztoare, primate ne-umanoide i ovine sugereaz c suprimarea
GnRH/LH pe parcursul privrii de hran este mediat prin aciunea central a
leptinei la nivel hipofizar sau hipotalamic. Unele observaii sugereaz c LEPT
reprezint un mesager biochimic important ntre depozitele adipoase i axul
reproductiv. Receptorii LEPT au fost identificai i n gonade. In vitro, LEPT
exercit efecte inhibitoare slabe asupra steroidogenezei gonadotropin- sau IGF1-
induse la nivelul celulelor tecale i granuloase. n concluzie, nu doar hipo-, ci i
hiperleptinemia poate influena neggativ reproducia la mamiferele domestice,
inclusiv vaci.
La vacile de lapte aflate n perioada peri-partal, modificrile
concentraiilor plasmatice ale LEPT au fost determinate ntre zilele 35
antepartum i 56 postpartum. Concentraia LEPT a fost cea mai crescut n
gestaia avansat, scznd cu pn la 50% dup parturiie. Nivelul plasmatic al
LEPT a rmas sczut pe parcursul lactaiei timpurii, n pofida ameliorrii treptate
a BE. Modificrile corespunztoare au fost evideniate n abundena ARNm
LEPT n esutul gras alb subcutanat. Scderea pp a LEPT s-a datorat NEB,
deoarece LEPT plasmatic a rmas crescut la vacile nemulse dup parturiie.
Concentraia plasmatic a LEPT a fost corelat pozitiv cu concentraiile
plasmatice ale insulinei i glucozei, fiind corelat negativ cu GH i NEFA. Exist
puine date referitoare la interrelaia dintre nivelurile circulante ale LEPT i
reluarea pp a ciclicitii ovariene la vacile de lapte. Intervalul de la parturiie la
prima ovulaie a fost corelat semnificativ cu intervalul de la parturiie la nadirul
LEPT, dar nu a fost corelat cu valorile prepartum, pre- sau postovulatorii ale
LEPT . Huszenicza i col. (2004) au artat c la vacile de lapte aflate n
puerperium, nivelul plasmatic al LEPT poate interfera reluarea ciclicitii ovariene
n primele sptmni ale lactaiei, dar influena sa poate fi facultativ (o
concentraia minim deasupra pragului limit pare a fi pre-condiia necesar
relurii ciclicitii). S-ar putea sugera c niveluri ale insulinei, IGF-1, LEPT i
poate T3 mai degrab sczute dect normale, raportul anormal insulin/GH
i/sau combinaii ale lor pot reprezenta factorii care informeaz axul HPO asupra
statusului nutriional i coninutului corporal n grsime.

Efectele negative ale NEB n lactaia timpurie par s se manifeste i prin
fertilitatea sczut n perioada puerperal. n efectivele de vaci de lapte,
estimarea direct a BE nu este posibil, ns variaiile nregistrate de BCS ofer
o valoare indirect. Cu ct BCS se deterioreaz mai tare, cu att mai mult scade
rata concepiei (Butler, 2000). Vacile care pierd una sau mai multe uniti BCS
(pe o scal de 5 uniti) la debutul lactaiei, sunt supuse unui risc mai mare de
scdere a ratei fertilitii, care ajunge la valori cuprinse ntre 17 i 38%. Studiile
recente au artat c femelele care pierd semnficativ din BCS ( 1,25 uniti) au
doar 50% anse de a rmne gestante la prima IA, comparativ cu vacile care nu
sufer pierderi aa importante, iar rata concepiei crete cu 10% pentru fiecare
unitate BCS rectigat. Un studiu recent, efectuat pe un mare numr de
animale a evideniat faptul c vacile care au un BCS de 3 la momentul primei IA,
au anse maxime de a deveni gestante (Loeffler i col., 1999b).

d. Complicaiile bacteriene ale involuiei uterine

Chiar dac apreciem utilitatea relurii timpurii a ciclicitii sexuale n raport cu
fertilitatea, trebuie avut n vedere i relaia acesteia cu starea de sntate a
uterului. Vacile multipare care au ovulat naintea zilei 21 pp au nregistrat
performane reproductive mai slabe comparativ cu cele care au ovulat mai trziu,
fiind evident i o inciden mai crescut a CL persistent (CLP). CLP au rezultat
probabil n urma infeciilor uterine, a cror inciden a crescut n ultimii ani
(Loeffler i col., 1999b). De asemenea, au fost observate tot mai multe faze
luteale prescurtate (Huszenicza i col., 2004). Dovezile care leag infeciile
uterine i endometritele de fertilitatea sczut trebuie incluse n ansamblul celor
care motiveaz fertilitatea sczut la vacile cu producii mari de lapte.


e. Efectul nivelului progesteronului la vacile ciclice

Corpul luteal i progesteronul. Progesteronul este necesar pentru
meninerea gestaiei la vac. La vacile gestante se nregistreaz concentraii mai
ridicate ale P4 sanguin pe parcursul primelor 7-10 zile consecutiv inseminrii
(Mann i col., 1999), comparativ cu valorile nregistrate la femelele negestante.
Hrnirea deficitar i pierderile n greutate ale vacilor genereaz o scdere a
concentraiilor progesteronului sanguin. O explicaie ar fi reprezentat de faptul
c producia mare de lapte afecteaz negativ concentraiile P4 seric,
determinnd infertilitate la vacile de lapte. Msurnd nivelurile P4 sanguin n
cadrul studiului din Minnesota, Lucy i col., (1998) au gsit niveluri mai sczute
ale progesteronului la vacile selecionate, comparativ cu lotul martor. Pe baza
rezultatelor acestui studiu a fost stabilit o legtur ntre selecia genetic pentru
producia de lapte i concentraiile sczute ale progesteronului sanguin. Alte
studii au demonstrat c n cazul vacilor contemporane se nregistreaz
concentraii mai sczute ale P4 deoarece aceste femele consum un volum mai
mare de furaj i metabolizeaz progesteronul cu o intensitate crescut.
Progesteronul este necesar meninerii gestaiei, existnd o corelaie ntre
nivelul sczut al P4 i infertilitate. nc nu a fost evideniat o corelaie direct
ntre P4 sczut i mortalitatea embrionar.
n plus fa de nivelul sczut al progesteronului, unele grupe de cercettori
au afirmat recent c la vacile de lapte contemporane ar exista o porporie
crescut a fazelor luteale anormale. Opsomer i col. (1998) au examinat funcia
luteal n perioada puerperal la vaci Friz cu producii medii de lapte,
comparativ cu vaci Holstein cu producii mari de lapte. Au observat c incidena
anestrului (interval crescut pn la prima ovulaie) este de trei ori mai mare la
vacile cu producii mari de lapte (21%) comparativ cu cele cu producii medii
(7%). n plus, vacile Holstein au fost mai predispuse la a avea o faz luteal
prelungit (nivel crescut al P4 timp de mai mult de 20 de zile) comparativ cu cele
Friz (20% fa de 3%). Opsomer i col. (2000) au efectuat un studiu
epidemiologic, n urma cruia au desprins concluzia c bilanul energetic negativ,
tulburrile peripartale i afeciunile puerperale reprezint factori de risc pentru
ciclicitatea ntrziat i faz luteal prelungit. Drept urmare, anomaliile fazei
luteale au fost corelate cu starea de sntate peripartal i nutriia vacilor de
lapte.
Modificarea lungimii fazei luteale la vacile contemporane ar complica
managementul reproducerii. Fazele luteale prelungite amn inseminarea la
vacile care nu sunt incluse n programe de control al estrului, fcnd mult mai
dificil anticiparea momentului la care vacile cu activitate ciclic se vor ntoarce
n estru. Au fost semnalate faze luteale prelungite la acele vaci i viele care au
fost supuse stresului termic. n studiile respective, stresul termic a generat o
scdere a concentraiilor plasmatice ale estradiolului, amnnd astfel cu pn la
9 zile luteoliza la vacile de lapte. Estradiolul folicular reprezint un component
esenial al cascadei luteolitice. Este de presupus c faza luteal prelungit la
femelele supuse stresului termic este cauzat de o secreie inadecvat de
estradiol provenind de la un folicul probabil afectat de stresul termic. Fazele
luteale prelungite, nregistrate la vacile contemporane, pot reflecta starea precar
de sntate a foliculilor, secreia redus de estradiol, intensificarea
metabolismului estradiolului, precum i eecul cascadei luteolitice datorit unui
mecanism dependent de estradiolul folicular.

Pe parcursul primelor dou-trei cicluri postpartum, nivelul maxim al P4
crete de la un ciclu la urmtorul, iar n primele sptmni de lactaie, aceast
cretere a P4 este temperat sau chiar mpiedicat de NEB. Vacile care
traverseaz un NEB foarte accentuat n primele 9 zile pp., vor avea i un nivel
foarte sczut al P4 pe parcursul celui de-al treilea ciclu pp., perioad
corespunztoare momentului optim pentru inseminare. Valorile plasmatice ale P4
la vacile selecionate pentru producia de lapte au fost cu 25-50% mai sczute pe
parcursul celei de-a doua i celei de-a treia faze luteale, comparativ cu vacile
martor (Lucy , 2001).

Capacitatea de a produce i menine concentarii optime ale P4 este
important pentru fertilitate datorit efectului reglator pe care acest hormon l
exercit asupra funciei endometrului; n zilele 4-7 post IA, P4 a fost crescut la
vacile care au rmas gestante, comparativ cu cele care nu au rmas (Sartori i
col., 2000). Timpuriu (pn la ziua a 5-a dup fecundaie), stimularea exercitat
de P4 modific secreiile endometriale i favorizeaz dezvoltarea produsului de
concepie. n mod contrar, o rat sczut a creterii postovulatorii a P4 pe
parcursul primelor 4-5 zile a fost asociat fertilitii reduse i ncetinirii dezvoltrii
embrionare pn spre ziua a 16-a. n acest moment critic pentru recunoaterea
de ctre organismul matern a prezenei gestaiei, un embrion subdezvoltat nu ar
fi capabil s produc suficient interferon tau pentru a inhiba mecanismul luteolitic
eliberarea PGF2alfa stimulat de prezena receptorilor pentru OT, mecanism
care se autontreine datorit nivelului sczut al P4. Este posibil ca nivelul relativ
sczut al P4 n zilele 4-5 s permit recunoaterea prezenei gestaiei i
extinderea perioadei luteale, dar gestaie nu va progresa deoarece embrionul a
fost compromis pe parcursul dezvoltrii sale.
Mecanismul fiziologic prin care NEB n pp timpuriu va determina o
producere necorespunztoare a P4 dou luni mai trziu, nu a fost elucidat. Britt
i col. (1986) a presupus c foliculii ovarieni sunt afectai de expunerea la NEB la
nceputul dezvoltrii lor iar ovularea foliculilor afectai va genera o secreie mai
sczut de P4. Aceast ipotez poate explica mecanismul i nivelul secreiei de
P4 la vacile lactante ns trebuie avut n vedere i clearance-ul P4 n raport cu
raia furajer ingerat. La ovine, raiile bogate n energie intensific
metabolizarea hepatic a P4. Nivelul de baz al afluxului sanguin hepatic este
dublu la vacile lactante comparativ cu cele nelactante, valoarea sa crescnd cu
20-30% postprandial. Fluxul sanguin crescut a generat un metabolism intensificat
al steroizilor precum i concentraii ale E2 i P4 cu 25% mai sczute pe parcursul
ciclului sexual, aspecte asociate cu o inciden crescut a degenerrii
embrionilor n ziua a 5-a. n lactaia timpurie, ingesta total a crescut de dou ori
fa de momentul inseminrii. n aceast circumstan, intensificarea
metabolizrii P4 datorit aportului sporit de hran (energie i protein) se
asociaz cu efectele NEB care genereaz P4 sczut i reduc fertilitatea. Mediul
uterin depinde de P4, dar influena acestuia poate fi diminuat de NEB i
intensificarea metabolizrii sale la vacile cu producii mari de lapte.



f. Calitatea ovocitelor

Creterea folicular i estradiolul. Dup cum a fost menionat anterior, n
perioada puerperal timpurie vacile parcurg un proces natural de repartizare a
substanelor nutritive, bilan energetic negativ i scdere n greutate. NEB i
scderea n greutate exercit un efect inhibitor asupra creterii i dezvoltrii
foliculare. Doi dintre potenialii mediatori ai efectelor bilanului energetic negativ
asupra foliculului sunt LH i IGF-1. Pulsiunile de LH sunt sczute la vacile aflate
n NEB, de asemenea i concentraiile plasmatice ale IGF-1. LH i IGF-1
acioneaz sinergic pentru a stimula dezvoltarea folicular (Lucy, 2000). Se
presupune c efectul combinat al reducerii concentraiilor ambilor hormoni
compromite creterea folicular la vaci pe parcursul puerperiumului timpuriu.
Beam i Butler (1999) au studiat efectele NEB asupra creterii foliculare la
vaci n puerperiumul timpuriu i a observat c foliculul dominant al vacilor aflate
n NEB are nevoie de mai mult timp i de dimensiuni mai mari pentru a atinge
concentraii ale estardiolului capabile s declaneze ovulaia. De aceea, foliculii
vacilor aflate n NEB pot fi mai puin estrogenici, atingng capaciti estrogenice
crescute doar la dimensiuni mai mari.
Ovocitele care provin din foliculi persisteni mari sunt mai puin fertile dect
ovocitele produse n foliculi de dimensiuni mai mici, aflai n dezvoltare. Plusurile
de timp i dimensiune necesare ovulaiei la vacile lactante pot crea un folicul
avnd caracteristicile unui folicul persistent. Foliculii persisteni sunt expui unor
concentraii crescute de LH, declanndu-se activarea prematur a ovocitelor.
Vacile de lapte sunt clasificate drept femele monoovulare i monotocice.
Vacile de lapte contemporane au o rat a ovulaiei de aproximativ 1,25 i o rat a
gemelaritii de 5%. Gemelaritatea este indezirabil datorit faptului c att
producia de lapte, ct i fertilitatea sunt sczute dup parturiie. Studiul
epidemiologic al lui Kinsel i col. (1998) a artat o cretere a gemelaritii la
vacile de lapte de la 1,4% n 1983, la 2,4% n 1992. Mai mult, producia crescut
de lapte reprezenta un factor de risc pentru instalarea gemelaritii. Dei o mai
bun supravieuire a embrionilor ar putea reprezenta o explicaie, se pare c
procentul crescut al ftrilor gemelare are la origine incidena crescut a
ovulaiilor multiple nregistrate la vacile cu producii mari de lapte. Sartori i col.
(2000) au evideniat faptul c 25% dintre vacile lactante parcurg ovulaii multiple
pe parcursul unui singur ciclu sexual. Datele sunt n concordan cu studiul lui
Kirby i col. (1997) care gsesc multiple ovulaii la aproximativ 20% din vacile
lactante. Sartori i col. (2000) de asemenea au semnalat o inciden de numai
2% a ovulaiilor multiple la viele, aspect aflat n acord conceptual cu faptul c
gemelaritatea este rar ntlnit la primipare (Kinsel i col., 1998).
Recenta cretere a gemelaritii (probabil generat de ratele crescute ale
ovulaiei) poate reprezenta o manifestare a funciei foliculare deficitare i a
deficitului de semnalizare a estradiolului la vacile contemporane. Vacile parcurg
valuri ale dezvoltrii foliculare care sunt sincronizate prin creterile nivelurilor
plasmatice ale FSH. Estradiolul i inhibinele sunt necesari n controlul creterii
foliculare, prin intermediul efectului inhibitor pe care l exercit asupra FSH pe
parcursul valului folicular. Scderea concentraiilor E2 sanguin la vacile lactante,
reduce n mod teoretic feed-back-ul negativ exercitat asupra FSH pe parcursul
unui val folicular. Prin urmare, creterea folicular poate fi mai intens la vacile
lactante datorit creterii FSH.
NEB din puerperiumul timpuriu poate exercita un impact negativ asupra
ovocitelor de-a lungul celor 80-100 de zile necesare dezvoltrii foliculare,
exercitnd un alt efect negativ asupra fertilitii. Cteva studii prezint rezultatele
obinute n urma aspirrii transvaginale a ovocitelor din foliculii ovarieni n primele
30-120 de zile de lactaie. Vacile hrnite cu raii mai bogate energetic au generat
mai multe ovocite i de calitate mai bune fa de vacile hrnite cu raii mai srace
n energie. Vacile care au trecut pp printr-un NEB mai grav datorit supra-
ngrrii naintea parturiiei i la parturiie, au generat ovocite cu o capacitate
mai redus de dezvoltare n cadrul procedurilor de IVM i IVF, comparativ cu
martorul (Snijders i col., 2001). Vacile cu potenial genetic ridicat pentru
producia de lapte au generat ovocite cu un potenial sczut de dezvoltare,
comparativ cu vacile cu potenial genetic mediu. Diferenele dintre produciile de
lapte nu au afectat dezvoltarea embrionar, dar rata formrii blastocitilor a fost
mai sczut la vacile cu un BCS sczut (1,5 la 2,5). Vacile cu potenial genetic
ridicat au nregistrat BCS mai sczut dect vacile cu potenial mediu. S-a
presupus c ratele mai sczute ale concepiei la vacile cu potenial ridicat se
datoreaz calitii necorespunztoare a ovocitelor, mai degrab dect oricruia
dintre parametrii metabolici msurai la momentul IA.
Performanele reproductive ale vacilor au sczut n ultimele decade, n
paralel cu creterea impresionant a produciilor de lapte. Necesitile
metabolice pentru producia mare de lapte genereaz un NEB mai amplu, pe
durata cruia nivelurile sanguine ale glucozei, insulinei, IGF-1, leptinei i T3 sunt
n general reduse, n timp ce concentraiile hepatice ale TAG i plasmatice ale
NEFA (i probabil BHB) sunt crescute. NEB i consecinele sale metabolice sunt
asociate cu dezvoltarea folicular i ovulaia pp., variabilitate n concentraiile
plasmatice ale P4 i afectarea dezvoltrii ovocitare, i scderea fertilitii.
Fertilitatea vacilor de lapte reflect influenele cumulative ale componentelor
metabolice i endocrine care au fost modificate i exagerate prin selecia pentru
producii mari de lapte, precum i a unor afeciuni (complicaiile bacteriene ale
involuiei uterine, mastitele). BE pare a fi cel mai important factor, dar trebuie
avute n vedere i controlate interaciunile complexe dintre toi aceti factori,
dac dorim s nelegem mai mult i s ameliorm fertilitatea.


Capitolul 2.
Managementul reproduciei la vacile de lapte


Principalul factor limitativ al instalrii gestaiei i obinerii unor parametri
reproductivi optimi este reprezentat de depistarea estrului. Spre exemplu, n
S.U.A., n fermele de vaci de lapte de nivel mediu (ca producie de lapte i sistem
de exploatare) aproximativ 50% din perioadele estrale trec neobservate
(Stevenson, 2005). n practic se utilizeaz numeroase protocoale terapeutice de
inducere a estrului i sincronizare a ovulaiei, n vederea efecturii nsmnrii
artificiale programate. Amplele dezbateri legate de efectele secundare generate
de utilizarea progestagenelor i estrogenilor sintetici n acest scop, au orientat
practica spre generarea unor protocoale terapeutice bazate pe alte categorii
hormonale, ctignd teren asocierea GnRH-PGF
2
alfa, sau utilizarea doar a
PGF
2
alfa.
Administrarea PGF
2
alfa sau a analogilor si sintetici n faza luteal a ciclului
sexual este urmat de ovulaie la 3-5 zile dup tratament. Variabilitatea
rspunsului generat a determinat utilizarea celei de-a doua doze de PGF
2
alfa la
14 zile interval, n vederea obinerii unor rezultate superioare, iar nsmnarea
artificial programat complinete gradul sczut de depistare a estrului.
Ovulaia poate fi sincronizat cu mai mult acuratee n cazul utilizrii GnRH
(naintea PGF
2
alfa, precum i dup aceasta, ca n cazul protocolului Ovsynch).
Administrarea GnRH este urmat de atrezia foliculului dominant sau ovulaie
(dac se intervine pe parcursul fazei luteale a ciclului), sau administrarea GnRH
stimuleaz maturarea folicular i ovulaia foliculului dominant (dac se intervine
n cursul fazei foliculinice a ciclului), iar recrutarea unui nou val folicular se va
produce n cel mult 4 zile dup tratament (Dolezel i col., 2002).
IA programat este o practic obinuit n efectivele de vaci de lapte pentru
a mbunti eficiena reproductiv, avnd n vedere c vacile sunt inseminate
independent de depistarea estrului. nsmnarea artificial programat necesit:
sincronizarea dezvoltrii foliculare
regresia corpului luteal
sincronizarea inducerii ovulaiei


1. Protocoale terapeutice bazate pe utilizarea PGF2alfa

a. Utilizarea PGF2alfa pentru a reduce intervalul ntre ftri

Vacile trebuie s aib un CL (majoritatea au un nou CL n primele 2 sptmni
post partum)

Inducerea estrului cu PGF2alfa prezint multiple avantaje:
Iniiaz ciclicitatea stimuleaz pregtirea natural a tractului genital
pentru gestaie, ameliornd starea de sntate a uterului (efectul E2)
Permite fermierului s nregistreze data estrului, urmtorul estru fiind
astfel previzibil i utilizabil
Ofer ocazia inseminrii dac aparatul genital este normal i sntos i
dac s-a scurs suficient timp de la parturiie
Reduce timpul necesar depistrii estrului


b. Potenialele avantaje ale terapiei cu PGF2alfa

Posibil inseminarea timpurie, n puerperiumul timpuriu, favoriznd un service
period optim. mbuntete depistarea estrului astfel:
Cldurile sunt mai previzibile
Depistarea estrului necesit mai puin timp
PGF2alfa grupeaz vacile prin data intrrii n estru, rmnnd
sincronizate i la ciclul urmtor (ciclurile urmtoare)
Permite reducerea agresivitii antibioterapiei intrauterine, prin aciunea de
curare exercitat asupra uterului, fr a contamina laptele sau carnea (nu se
impune parcurgerea unei perioade de ateptare)

c. Controlul ciclului sexual controlul farmaceutic al estrului i fertilitii

1. PGF2alfa (Lutalyse, Estrumate) administrarea prostaglandinei va induce
luteoliza la vacile care au CL:
a). administrarea la ntmplare (random use on all cows)
vor rspunde 66-75%
depistarea estrului i inseminarea
repetarea PGF la 11 zile la cele care nu au rspuns la prima doz, apoi
depistarea estrului i inseminarea

b). protocolul cu dou administrri:
2 administrri la 11 zile interval, cu depistare i inseminare
2 administrri la 11 zile interval i IA dublu-orb la 72 i 96 de ore
c). examinarea transrectal a vacilor i injectarea doar acelora care au CL



d. Beneficiile protocoalelor terapeutice de sincronizare a IA

Eforturile susinute au permis elaborarea multor protocoale terapeutice care
s optimizeze utilizarea primelor clduri post partum. Se pune ns problema:
sunt aceste protocoale terapeutice mai rentabile dect metodele tradiionale ?
Pentru a obine un rspuns la aceast ntrebare, vom parcurge rezultatele
ctorva studii al cror obiect a fost reprezentat de compararea diferitelor
protocoale de utilizarea aPGF2alfa, aplicate n perioada puerperal.


1. Examenul transrectal comparativ cu terapia cu PGF2alfa
Au fost comparate dou protocoale aplicate n patru efective (Kristula i col.,
1992, cit. de Stevenson, 1996). Unul dintre ele a constat n administrarea PGF
oricrei vaci anestrice n prima zi de luni dup 50 de zile de la parturiie; al doilea
protocol s-a bazat pe administrarea PGF vacilor anestrice crora li s-a
diagnosticat corp luteal.
Primul protocol a determinat inseminarea mai timpurie i mai puine zile de
anestru (tabelul 1), rezultnd cu 30% mai multe gestaii pe unitatea de timp. Cu
alte cuvinte, administrarea PGF independent de prezena CL a permis ca mai
multe vaci s devin gestante mai timpuriu n lactaie.

Tabelul 1. ETR comparativ cu PGF (din Kristula i col., 1992, J Dairy Sci
75:2713, cit. de Stevenson, 1996)

Parametrul ETR PGF
Nr. de vaci 184 186
Zile pn la prima IA 78 72 *
Rata concepiei la prima IA (%) 42 47
Rata gestaiei (%) 82 85
Nr. zile de anestru post partum 110 97 *
Procent de reformare 14 17

* semnificativ diferit (P < 0,5) fa de lotul ETR

Dac lum n considerare costul ETR (2 USD) i al PGF (3 USD), rezult un
cost pe vac mai mare cu 3,73 USD n cazul utilizrii PGF, fa de programul
tradiional de ETR. Numrul zilelor de anestru a sczut cu 13.
n cazul n care o zi de anestru cost doar 1 USD, rezult c programul cu
PGF a economisit 9,27 USD pe vac.


2. Depistarea estrului comparativ cu administrarea PGF pe baza nivelului
progesteronului n lapte

Metoda tradiional de depistare a estrului a fost comparat cu metoda
bazat pe dozarea P4 n lapte (Stevenson i Pursley, 1994, cit. de Stevenson,
1996). Vacile din lotul martor (metoda tradiional) au fost IA la primul estru
manifestat dup 42 de zile pp. n al doilea lot, dozarea P4 n lapte a fost utilizat
pentru a identifica nivelurile crescute ale P4, ca dovad a prezenei esutului
luteal. Vacilor cu P4 crescut li s-a administrat PGF.
Vacile crora li s-a administrat PGF (pe baza nivelului P4) au fost
inseminate mai timpuriu i au avut intervalele ntre ftri mai scurte (tabelul 2).
Rata concepiei a fost similar n ambele loturi. Avnd n vedere lotul cruia i s-a
administrat PGF, mai puine vaci comparativ cu martorul au fost reformate
pentru tulburri de reproducie (33% fa de 55%) i mai multe (tot comparativ cu
martorul) pentru producia necorespunztoare de lapte (34% fa de 12%).

Tabelul 2. Lot martor comparat cu lot cruia i s-a administrat PGF (Stevenson i
Pursley, 1994, J Dairy Sci 77:1755, cit. de Stevenson, 1996)

Parametru Lot martor P4 lapte i PGF
Nr. de vaci 72 127
Zile pn la prima IA 84 71 *
Rata concepiei la prima IA (%) 35 42
Rata gestaiei (%) 74 73
Intervalul ntre ftri (zile) 406 383 *
Rata reformrii (%) 17 14

* semnificativ diferit (P < 0,5) de lotul martor

Avnd n vedere costul ETR (2 USD), al PGF (3 USD) i al determinrii
progesteronului (6 USD), costul pe vac a fost cu 13,57 USD mai mare n cazul
lotului cu PGF, comparativ cu martorul. Intervalul ntre ftri ns, a fost redus cu
23 de zile. Lund n considerare un cost de 1 USD pe zi de anestru, rezult c
protocolul bazat pe dozarea progesteronului i administrarea prostaglandinei a
economisit 9,43 USD pe vac.


3.Comparaii fcute ntre protocoale bazate pe mai multe administrri de
PGF2alfa

n cadrul studiului elaborat de ctre Pankowski i col., (1995, cit de
Stevenson, 1996) au fost comparate trei protocoale aplicate n trei efective
diferite. Primul lot a fost tratat cu PGF ntre zilele 25-32 postpartum. n scop
terapeutic - i cu o a doua doz de PGF ntre 53 i 60 de zile postpartum, n
vederea sincronizrii estrului pentru IA (lotul PG2).
Al doilea lot a fost tratat cu PGF ntre zilele 25-32 n scop terapeutic, iar
mai apoi, cu dou doze de PGF administrate la 14 zile interval, ntre 39-46 i 53-
60 de zile postpartum. (lotul PG3).
Aceste dou protocoale au fost comparate cu un protocol clasic, bazat pe
examinarea transrectal (ETR), infuzii intrauterine, terapie hormonal n faza
premergtoare inseminrii i o administrare de PGF ntre zilele 53-60, n ideea
sincronizrii estrului n vederea IA (lotul ETR).
Vacile crora li s-au administrat 3 doze de PGF au fost inseminate mai
timpuriu i au nregistrat mai puine zile de anestru comparativ cu protocolul
clasic (lotul ETR). Analiza detaliat a datelor a demonstrat c vacile din lotul PG3
au avut o rat a concepiei cu 11% mai mare precum i o rat a gestaiei
superioar cu 10% pe unitatea de timp.
Cercettorii au desprins concluzia c rezultatele superioare obinute la lotul
PG3 se datoreaz mai mult datorit ameliorrii performanelor reproductive ca
urmare a mbuntirii eficienei depistrii estrului, mai degrab dect efectului
terapeutic post partum generat de administrarea PGF ntre zilele 25 i 32.

Tabelul 3. Comparaia ntre ETR i PGF2alfa (dou fa de trei administrri) -
dup Pankowski i col., 1995, J Dairy Sci 78:1477, cit. de Stevenson, 1996

Parametru ETR PG2 PG3
nr. de vaci 472 443 461
Zile pp. pn la prima IA 71 71 63 *
Rata concepiei la prima IA (%) 43 45 47
Rata gestaiei (%) 88 86 88
Nr. zile de anestru post partum 113 114 107 *
Procentul de reformare 21 21 20

* semnificativ diferit (P < 0,5) fa de lotul ETR

Avnd n vedere costurile ETR i ale PGF de 2,25 USD, protocolul bazat pe
dou administrri de PGF a economisit 4,46 USD pe vac, iar cel bazat pe 3
administrri de PGF 3,61 USD, comparativ cu protocolul tradiional. Chiar dac
protocolul bazat pe 2 x PGF nu a redus numrul zilelor de anestru post partum, a
fost mai economicos comparativ cu protocolul clasic.
Protocolul axat pe 3 x PGF a sczut cu 6 numrul zilelor de anestru. Din
nou, dac estimm la 1 USD pierderile corespunztoare unei zile de anestru,
protocolul 3 x PGF a economisit 9,61 USD pe vac.


Concluzii
Economiile realizate per vac n cele trei studii enunate au fost foarte
asemntoare: 9,27 USD; 9,43 USD i 9,61 USD. Deoarece costurile i alte
elemente nu au fost uniforme n cele trei studii, nu a fost posibil compararea
direct a rezultatelor obinute. n orice caz, s-a demonstrat c utilizarea unor
protocoale de dirijare a estrului poate aduce beneficii financiare.
Protocoalele care utilizeaz PGF2alfa sunt mai ieftine i genereaz
rezultate cel puin la fel de bune dac nu chiar superioare comparativ cu
protocoalele tradiionale care apeleaz la examinarea transrectal post partal a
tuturor vacilor, sau cu cele bazate pe alte mijloace terapeutice, mai puin
economicoase.
Ameliorarea performanelor reproductive i economiile realizate pot fi puse
pe seama sincronizrii superioare a estrului, permind astfel o mai bun
depistare a cldurilor.


e. Ct ne cost inducerea estrului i nsmnrile artificiale ?

Pe lng faptul c ne ofer un cadru organizat pentru inseminare,
protocoalele terapeutice de inducere a estrului i IA permit realizarea unor
economii. Analizarea costurilor componentelor acestor programe ne va lmuri
asupra acestui aspect.

1. Costul depistrii estrului

Problema major rezid n stabilirea unui criteriu acceptabil de estimare a
costurilor depistrii estrului. Dac toate vacile vor fi IA pe parcursul unui sezon
definit (inseminare i parturiie sezonier), valoarea depistrii estrului ar putea fi
determinat pe baza numrului total de vaci gestante la sfritul sezonului de
inseminare. Poate c o valoare similar ar putea fi obinut prin calcularea
numrului de femele gestante la 100 sau 150 de zile de lactaie, sau al numrului
de gestante rezultate n urma unei runde de IA programate. n acest mod ar
putea fi determinat valoarea depistrii estrului, drept component a ecuaiei
ratei gestaiei.
Deoarece protocoalele de IA programat sunt n mod primar gndite pentru
sincronizarea estrului naintea primei IA, vacile trebuie totui urmrite n vederea
depistrii estrului care se repet atunci cnd femelele nu rmn gestante.
O cale de a elimina aproape complet depistarea estrului ar fi diagnosticarea
rapid a gestaiei (de exemplu n ziua a 15-a, fapt imposibil deocamdat), nainte
ca femela s repete cldurile; un nou protocol de sincronizare ar elimina
necesitatea depistrii estrului.
O alt modalitate ar fi diagnosticarea G cu ajutorul ecografiei la 28-30 de
zile i reprogramarea estrului femelelor negestante. Chiar i astfel, vor mai exista
femele care vor repeta cldurile dup 21-23 de zile dup IA, vor fi depistate n
estru i inseminate naintea diagnosticrii gestaiei prin ECO.
Prin urmare, sistemul actual de inseminare necesit depistarea zilnic a
estrului n vederea evidenierii acelor femele care repet estrul. De aceea, poate
c ar fi util ca preul depistrii estrului s fie privit ca valoare fix, cum ar fi cea a
mulsului.

2. Costurile comparative a nou protocoale aplicate pentru inducerea
estrului i IA

n tabelul nr. 4 sunt prezentate costurile echivalente aplicrii a nou
protocoale pentru inducerea estrului i IA. Costurile totale nu includ costurile
determinate de depistarea estrului, prezumndu-se ns c depistarea se face
zilnic.
Sunt aproximate costurile preparatelor hormonale, ETR, dozrii P4 n lapte
i contenionrii animalelor. Nu toate programele analizate au fost la fel de
eficiente n inducerea estrului i facilitarea IA.
Costul per gestaie deriv din nmulirea costului total per vac, cu rezultatul
mpririi dintre valoarea absolut a vacilor inseminate ca urmare a aplicrii
protocolului i valoarea absolut a ratei gestaiei (Ex. ptr protocolul 2: 100
inseminate mprit la 40 gestante rezult 2,5 ; costul total per vac de 8,22,
nmulit cu 2,5 va da 20,55 costul per gestaie). Poate acest calcul nu este
complet realist, ns ne ofer o idee asupra costurilor relative ale diferitelor
protocoale, exclusiv costul depistrii estrului.
Cel mai ieftin a fost Protocolul 4, n care vacile au fost depistate i IA. Cele
care nu au fost observate n estru n primele 6 zile au primit o doz de PGF.
Protocoalele 3, 2 i 1 au fost urmtoarele ca valoare sczut a costurilor.
Trebuie s subliniem c Protocolul 4 a necesitat cea mai intens depistare a
estrului. Este evident c includerea costului depistrii estrului ar avea o influen
major asupra costului final al protocoalelor analizate. De exemplu, Protocolul 9
este printre cele mai scumpe dintre cele comparate, ns, datorit faptului c nu
este necesar depistarea estrului pentru prima IA, protocolul rmne extrem de
atractiv. De asemenea devine evident c costul depistrii estrului influeneaz
costul per gestaie n cadrul fiecrui protocol, exceptndu-l pe ultimul.
Deoarece depistarea estrului nu poate fi eliminat complet, rmne n
discuie modalitatea de estimare a costurilor reale ale unui protocol de inducere a
estrului i IA.
Sunt multe variabile care influeneaz raportul costuri/beneficii ntr-un
anumit efectiv, avnd n vedere numrul vacilor, sistemul de exploatare, costurile
i disponibilitatea forei de munc calificat amd. Alegerea celui mai bun
protocol depinde i de posibilitile de depistare a estrului, precum i de
rezultatele obinute n depistarea estrului. Efectivele n care exprimarea i
depistarea estrului sunt superioare vor fi cel mai bine ajutate cu protocoale care
vizeaz o ct mai redus intervenie hormonal.



2. Protocoale terapeutice bazate pe asocierea GnRH i PGF2alfa

Asocierea GnRH i PGF2alfa are n vedere tocmai asigurarea unei aciuni
complementare ntre cea de stimularea a creterii foliculare i ovulaiei,
exercitat de ctre GnRH, cu cea luteolitic, caracteristic GnRH. Acumularea
unor cunotine tot mai complexe legate de fiziologia foliculogenezei a permis
elaborarea unor protocoale terapeutice tot mai sofisticate (tabelul nr. 5), pornind
de la varianta iniial OVSYNCH. Rezultatele diferite precum i opiunile
manageriale recomand utilizarea unuia sau altuia dintre protocoale n funcie de
disponibilitatea financiar a beneficiarului.
Vom trece n revist cteva aspecte legate de fiecare protocol terapeutic,
prezentnd i date comparative privind costurile implicate.

a. Protocolul OVSYNCH

Procedeul Ovsynch a fost introdus n anul 1995 de ctre Pursley i col., fiind
denumit astfel datorit faptului c succesiunea GnRH-PGF2alfa-GnRH asigura
sincronizarea ovulaiei. IA programat oricnd ntre 8 i 24 de ore consecutiv
ultimei doze de GnRH asigur o fecunditate optim.
Administrarea primei doze de GnRH ntr-un moment necunoscut al ciclului
sexual induce ovulaia la 65% dintre femele i asigur emergena unui nou val
folicular la 100% din cazuri. Injectarea PGF2alfa asigur luteoliza CL spontan
sau indus de GnRH, iar cea de-a doua doz de GnRH sincronizeaz momentul
ovulaiei foliculului dominant rezultat din valul folicular care i-a nceput
dezvoltarea ulterior primei administrri a GnRH. Ovulaia indus de cea de-a
doua doz de GnRH se produce la 85% dintre femelele tratate.
Avantajul procedeului Ovsynch este reprezentat de faptul c poate fi aplicat
n orice moment al ciclului sexual, rezultatele optime nefiind condiionate de
inducerea ovulaiei consecutiv primei administrri a GnRH.

Kawate i col. (2004) au urmrit variaiile progesteronemiei n cazul utilizrii
protocolului Ovsynch ncepnd cu cea de-a 60 a zi postpartum. Astfel, 50% dintre
vacile care au avut progesteronemia crescut att la debutul tratamentului (la
administrarea primei doze de GnRH), ct i la momentul administrrii PGF
2
alfa, au
rmas gestante, iar n cazul n care iniial progesteronemia a fost sczut, iar la
momentul administrrii PGF
2
alfa, crescut, 62,5% dintre vacile inseminate au rmas
gestante. n cazul unei pante descendente a progesteronemiei ntre cele dou
momente analizate, procentul gestaiei obinute a fost de 16,7%, iar n situaia
progesteronemiei sczute pe parcursul ntregii perioade analizate, la niciuna dintre
femelele inseminate nu s-a instalat gestaia.
n acest studiu se relev i creterea semnificativ a progesteronemiei ntre
ziua administrrii GnRH i cea a administrrii PGF
2
alfa. Autorii acestui studiu
sugereaz i faptul c niveluri superioare ale progesteronemiei nregistrate naintea
inseminrii reduc secreia uterin a PGF
2
alfa, contribuind astfel la pstrarea
gestaiei. innd cont de aceste afirmaii, devine evident rolul esenial jucat de o
progesteonemie corespunztoare naintea inseminrii, precum i de efectul negativ
exercitat de niveluri sczute ale progesteronului circulant, aa cum se nregistreaz
n cazul vacilor cu producii mari de lapte.
Deoarece rata concepiei la prima IA postpartum la vacile cu producii mari
de lapte este sub 40% (Fricke i Sterry, 2006), peste 60% dintre vacile
inseminate nu vor rmne gestante.

OVSYNCH asigur :
sincronizarea ovulaiei ntr-un interval de 8 ore (ntre 24 i 32 de ore dup
cea de-a doua administrare de GnRH)
nsmnare artificial programat se face la 20 de ore dup cea de-a
doua doz de GnRH
protocolul se desfoar fr depistarea estrului
se aplic la vaci aflate n orice faz a ciclului sexual i de aceea, se
prefer ca femelele s fie ciclice
a doua doz de GnRH induce ovulaia foliculului recrutat dup prima
GnRH
rata G este ntre 30 40% (SUA fermierul obine SUB 20% G pentru
fiecare 21 de zile de depistare a estrului)
femelele trebuie observate pentru depistarea estrului dup 18-24 de zile
pentru reinseminare (dac este cazul)
20% dintre femele pot exprima estrul ntre zilele 6 i 9 ale protocolului



b. Protocolul SELECT SYNCH

Acest procedeu const n adminsitrarea unei doze de GnRH (Cystorelin,
Fertagyl) tuturor femelelor, urmat la 7 zile de o doz de PGF2alfa (Lutalyse,
Estrumate). Depistarea estrului va ncepe la 24-36 de ore dup administrarea
PGF i va continua n urmtoarele 3-4 zile. Toate animalele depistate n estru vor
fi inseminate 10-12 ore mai trziu. Majoritatea femelelor vor exprima estru ntre
zilele 2 i 4 consecutive PGF.
Intrarea n estru i rata concepiei vor fi determinate de numrul femelelor
cu activitate ciclic la iniierea tratamentului, precum i de numeroi factori
manageriali. Utilizarea metodei Select Synch pe 500 femele din 7 efective a
generat o intrare n estru de peste 70% i o rat a concepiei ntre 60-65%. A
rezultat o rat de sincronizare a gestaiilor de 45%. Comparativ cu metoda
bazat pe 2 administrri de PGF la 14 zile interval, intrarea n estru i
sincronizarea gestaiilor au crescut cu 10%.
Beneficiile majore ale metodei Select Synch sunt simplitatea i puternica
sincronizare a estrului. ntre 75-80% dintre femele vor manifesta clduri n
intervalul dintre a 2-a i a 4-a zi dup administrarea prostaglandinei. Chiar dac
restul femelelor vor intra n estru n afara acestui interval, nu va fi necesar un
efort aa mare (i cheltuieli aferente) pentru a le cuprinde i pe acestea.

SELECT SYNCH permite:
depistarea estrului la 24-36 de ore dup PGF
animalele depistate n estru vor fi inseminate 10-12 ore mai trziu
75-80% dintre femele vor manifesta clduri n intervalul dintre a 2-a i a 4-
a zi dup administrarea prostaglandinei
rat a concepiei ntre 60-65%
depistarea estrului i IA programat la 72 de ore dup PGF2alfa
depistarea estrului surprinde 60-70% dintre femele n estru n primele 48-
60 de ore dup PGF celelalte IA la 72 de ore
COMPARATIV cu OvSynch i Cosynch, costurile se reduc cu 30-40%,
prin NEADMINISTRAREA celei de-a doua doze de GnRH


3. Protocoale teraputice derivate din OVSYNCH

Thatcher i col. au propus n 1998 protocolul Presynch, rezultat n urma
unei modificri a procedeului Ovsynch, modificare menit a contracara unele
neajunsuri semnalate la utilizarea Ovsynch. Prin utilizarea Ovsynch, vacile aflate
ntre zilele 14 i 15 ale ciclului sexual (aproximativ 10% din femelele ciclice), n
mod frecvent nu genereaz un nou CL consecutiv primei administrri a GnRH i
drept urmare, ovulaia nu va fi sincronizat n cazul acestor femele, iar IA
programat nu va avea succes. n cadrul protocolului Presynch, dou doze de
PGF2alfa se administreaz la 26 i 14 zile naintea primei administrri a GnRH
din succesiunea terapeutic Ovsynch.n acest mod se asigur faptul c
majoritatea vacilor se vor afla ntre zilele 5 i 12 ale ciclului sexual, la momentul
primei administrri a GnRH. Rata gestaiei este superioar n cazul utilizrii
Presynch (43%), comparativ cu rezultatele obinute ulterior implementrii
Ovsynch (29% - Moriera i col, 2000).

Utilizarea PGF2alfa reduce intervalul dintre ciclurile estrale, ameliornd
depistarea estrului, ns nu sincromizeaz vacile care nu ovuleaz, femele care
pot reprezenta 15-30% dintre femelele lactante.
Termenul Co-Synch a fost utilizat pentru o variant particular a Ovsynch,
n cadrul creia, IAP se face concomitent cu cea de-a doua administrare a
GnRH. Comparativ cu procedeul original, este necesar o contenie mai puin,
ns rata concepiei este inferioar celei obinute prin utilizarea Ovsynch.
Heat-Synch reprezint o modificare a Pre-Synch, n sensul utilizrii unei
doze de cipionat de estradiol (ECP) n locul celei de-a doua administrri de
GnRH. Administrarea unui estrogen n absena progesteronului (CL a fost lizat n
urm cu 24 de ore) i n prezena unui folicul ovulator va induce ovulaia prin
stimularea eliberrii GnRH din hipotalamus, care la rndul su va determina
secreia LH, reprezentnd stimulul necesar ovulaiei.
Comparativ cu procedeul Pre-Synch, n cadrul cruia a doua doz de GnRH
este administrat la 48 de ore dup PGF2alfa, ECP se administreaz la 24 de
ore consecutiv injectrii PGF2alfa. IAP se face la 48 de ore consecutiv
administrrii ECP, rata concepiei fiind similar cu cea obinut n urma
administrrii GnRH. Utilizarea ECP nu este la fel de eficient ca cea a GnRH, n
cazul administrrii la vacile aciclice. Trebuie avut n vedere i preul mult mai mic
al dozei de ECP, comparativ cu cel al GnRH.
Easy Breeder (Ovsynch + CIDR) presupune introducerea unei spirale
intravaginale cu progestagen, de-a lungul intervalului dintre administrarea GnRH
i a PGF2alfa, urmnd ca dup extragerea CIDR s se fac IAP la 48-64 de ore,
sau s se recurg la depistarea estrului n primele 72 de ore consecutiv
administrrii PGF2alfa, iar femelele nedepistate s fie IAP la 80 de ore. Utilizarea
CIDR a determinat creterea fertilitii la vacile aciclice, neavnd niciun efect la
femelele ciclice.

Tabelul nr. 6. Costuri comparative ale protocoalelor terapeutice bazate pe
PGF2alfa sau ascocierea GnRH i PGF2alfa
Protocol Numrul de contenii Costuri
PGF2alfa GnRH IA Total Medicaie IA Total
1 x PGF 1 1 2 6,5 7 13,5
2 x PGF 2 1 3 13 7 20
Select
Synch
1 1 1 3 15,25 7 22,25
Ovsynch 1 2 1 4 23 7 30
CoSynch 1 2 1 3 23 7 30
Presynch 3 2 1 6 36 7 43


Costurile estimate la nivelul lunii noiembrie 2007, au avut n vedere
urmtoarele valori per doz : PGF2alfa = 6,5 lei ; GnRH = 8,75 lei ; IA = 7 lei.
Preurile avute n vedere sunt preuri medii, iar doza de material seminal utilizat
pentru IA este de valoare i calitate medii.

Tabelul nr. 7. Eficiena protocoalelor terapeutice (dup Olson, 2006)

Protocol Estrul exprimat Rata gestaiei
2 x PGF 57% 35%
Select Synch 67% 45%
Ov-Synch IA P 52%
CO-Synch IA P 55%

Datele inserate n tabelul nr. 7 reprezint valori medii generate prin
consultarea mai multor surse bibliografice i sistematizate de ctre Olson (2006).
Este evident saltul calitativ realizat prin utilizarea GnRH n asociere cu PGF2alfa
(rate ale gestaiei cuprinse ntre 45 i 55%), comparativ cu rezultatele obinute
prin utilizarea doar a PGF2alfa, aspect total explicabil prin faptul c PGF2alfa
induce doar luteoliza, nu i iniierea unui nou val folicular.

Fr ndoial, proprietarul femelelor este cel care decide protocolul care
urmeaz a fi aplicat, ns n cunotin de cauz. Este obligatoriu s-i furnizm
toate informaiile necesare, astfel nct decizia acestuia s fie corect. Nu exist
protocol terapeutic ineficient, ci doar erori manageriale!
Exist cteva aspecte importante care ne permit obinerea unor rezultate
ct mai bune:
1. asigurai-v naintea iniierii oricrui program de sincronizare, c exist un
procent ridicat de femele cu activitate ciclic
2. alimentaia este un factor extrem de important n influenarea ciclicitii.
Folosii sistemul BCS pentru a urmri efectele alimentaiei.
3. Primiparele, femelele btrne, distociile i reteniile placentare sunt
asociate cu reducerea fertilitii. Aceste femele trebuie grupate separat,
pentru a li se asigura o alimentaie suplimentar i ngrijiri medicale
corespunztoare.
4. asigurai-v c exist suficient for de munc pentru depistarea estrului
i inseminare, i c fiecare persoan este pregtit corespunztor sarcinii
repartizate.
5. verificai nc o dat containerul cu azot lichid, dozele de material seminal
congelat i celelalte consumabile, pentru a v asigura de existena unor
stocuri suficiente.
6. verificai starea padocurilor, porilor, standurilor de IA, travaliului mobil
etc., astfel nct toate acestea s prezinte siguran pentru oameni i
animale.


Bibliografie

Allrich RD. 1994. Endocrine and neural control of estrus in dairy cows. J.
Dairy Sci. 77:2738-2744.
Austin et al. 1999. Effect of duration of dominance of the ovulatory follicle on
onset of estrus and fertility in heifers. J. Anim. Sci. 77:2219-2226.
Baumann, D.E. 1999. Bovine somatotropin and lactation: from basic science
to commercial application. Domest. Anim. Endocrinol. 17:1101-116
Beam SW and WR Buttler. 1999. Effects of energy balance on follicular
development and first ovulation in postpartum dairy cows. JRF Suppl. 54:411-
424.
Britt JH et al. 1986. Determinants of estrus behavior in lactating Holstein
cows. J. Dairy Sci. 69:2195-2202.
Butler, W.R. 1998. Review: effect of protein nutrition on ovarian and uterine
physiology in dairy cattle. J. Dairy Sci. 81:2533-2539.
Buttler WR. 2000. Nutritional interactions with reproductive performance in
dairy cattle. Anim. Reprod. Sci. 60-61:449-457.
Casida, L.E. 1961. Present status of the repeat-breeder cow problem.
J.Dairy Sci. 44:2323-2329
Collier RJ et al. 1997. Post-approval evaluation of POSILAC bovine
somatotropin in 28 commercial dairy herds. J. Dairy Sci. 80 (Suppl. 1):169
(Abstr.).
deVries MJ, RF Veerkamp. 2000. Energy balance of dairy cattle in relation
to milk production variables and fertility. J. Dairy Sci. 83:62-69.
Dolezel R., Cech S, Zajic J, Havlicek V. (2002). Oestrus Synchronization by
PGF2alpha and GnRH in Intervals according to Stage of Follicular Development
at Time of Initial Treatment in Cows.. ACTA VET. BRNO, 71:101-108
Dransfield, M.B., R.L. Nebel, R.E. Pearson, and L.D. Warnick. 1998. Timing
of insemination for dairy cows identified in estrus by a radiotelemetric estrus
detection system. J. Dairy Sci. 81: 1874-1882.
Fricke PM, Sterry RA. (2006). Management Strategies to Improve Fertility in
Lactating Dairy Cows.. Proceeedings of High Plains Dairy Conference : 89-98
Huszenicza G. et al. 2004. Postpartum resumption of cyclic ovarian
function, first oestrus and reconception and their relation to energy metabolism in
high-producing dairy cows. Veterinarski glasnik, vol 58, no. 1 / 2 : 9-27
Kawate N.et al. (2004). Improved conception in timed-artificial insemination
using a progesterone releasing intravaginal device and Ovsynch protocol in
postpartum suckled Japanese Black beef cows. Theriogeneology 61: 399-406
Kinsel ML et al. 1998. Risk factors for twinning in dairy cows. J.Dairy Sci.
81:989-993.
Kirby CJ et al. 1997. Follicular function in lactating dairy cows treated with
sustained-release bovine somatotropin. J. Dairy Sci. 80:273-285.
Loeffler SH, MJ de Vries, and YH Schukken. 1999a. The effects of time of
disease occurrence, milk yield, and body condition on fertility of dairy cows. J.
Dairy Sci. 82:2589-2604.
Loeffler i col., 1999b. Use of AI technician scores for body condition,
uterine tone and uterine discharge in a model with disease and milk production
parameters to predict pregnancy risk at first AI in Holstein dairy cows.
Theriogenology 51:1267-1284.
Lopez H, LD Satter, MC Wiltbank. 2004. Relationship between level of milk
production and estrous behavior of lactating dairy cows. Anim. Reprod. Sci.
81:209-223.
Lucy MC, 2001. Reproductive Loss in High-Producing Dairy Cattle: Where
Will It End? J Dairy Sci 84:1277-1293
Lucy MC. 2000. Regulation of ovarian follicular growth by somatotropin and
insulin-like growth factors in cattle. J. Dairy Sci. 83:1635-1647.
Lucy MC i col. 1992. Influence of diet composition, dry matter intake, milk
production, and energy balance on time of postpartum ovulation and fertility in
dairy cows. Anim. Prod. 54: 323-331
Lucy MC i col. 1998. Reproductive endocrinology of lactating dairy cows
selected for increased milk production. J. Anim. Sci. 76 (Suppl. 1):296. (Abstr.)
Mann GE i col. 1999. The regulation of interferon-tau production and
uterine hormone receptors during early pregnancy. J.Reprod.Fertil. Suppl.,
54:317-328.
Moriera F et al., 2000. Pregnancy rates to a timed insemination in lactating
dairy cows pre-synchronized and treated with bovine somatotropin: cyclic versus
anestrus cows. J Dairy Sci. 83 (Suppl 1):134 (Abstr.)
Olson JD. 2006. Ten Lessons That We Have Learned about Systematic
Breeding Programs for Dairy Cattle. High Plains Dairy Conference, 77-88
Opsomer et al. 2000. Risk factors for post partum ovarian dysfunction inhigh
producing dairy cows in Belgium: a field study. Theriogenology 53:841-857.
Opsomer G et al. 1998. An analysis of ovarian dysfunction in high yielding
dairy cows after calving based on progesterone profiles. Reprod. Domest. Anim.
33:193-204.
Pursley J.R., R.W. Silcox, and M.C. Wiltbank. 1998. Effect of time of
artificial insemination on pregnancy rates, calving rates, pregnancy loss, and
gender ratio after synchronization of ovulation in lactating dairy cows. J. Dairy
Sci. 81:2139-2144.
Pursley JR, Mee MO, Wiltbank MC. 1995. Synchronization of ovulation in
dairy cows using PGF2alpha and GnRH. Theriogenology 44:915
Pursley, J.R., M.C. Wiltbank, J.S. Stevenson, J.S. Ottobre, H.A. Garverick,
and L.L. Anderson. 1997b. Pregnancy rates per artificial insemination for cows
and heifers inseminated at a synchronized ovulation or synchronized estrus. J.
Dairy Sci. 80:295-300.
Pursley, J.R., M.R. Kosorok, and M.C. Wiltbank. 1997a. Reproductive
management of lactating dairy cows using synchronization of ovulation. J.Dairy
Sci. 80:301-306
Sartori RF et al. 2000. Differences between lactating cows and nulliparous
heifers in follicular dynamics, luteal growth, and serum steroid concentrations. J.
Anim. Sci. 78 (Suppl. 1):212 (Abstr.).
Schmitt, E.J., T. Diaz, M. Drost, and W.W. Thatcher. 1996. Use of a
gonadotropin-releasing hormone agonist or human chorionic gonadotropin for
timed insemination in cattle. J. Anim. Sci. 74:1084-1091.
Silvia W. J. 1998. Changes in reproductive performance of Holstein dairy
cows in Kentucky from 1972 to 1996. J. Dairy Sci. 81 (Suppl. 1) : 224 (Abstr.).
Snijders SEM et al., 2001. Genetic merit for milk production and
reproductive success in dairy cows. Anim Reprod Sci. 65:17-31
Stahl TJ, BJ Conlin, AJ Seykora, and GR Steuernagel. 1999.
Characteristics of Minnesota dairy farms that significantly increased milk
production from 1989-1993. J. Dairy Sci. 82:45-51.
Stevenson J. (2005). Breeding Strategies to Optimize Reproductive
Efficiency in Dairy Herds. Vet Clin Food Anim 21:349-365
Stevenson J. 1996. What will programed breeding cost you ? Hoard`s
Dairyman, March 25, 252-252
Stevenson JS. 2000. Are your cows cycling; if not, why ? Hoards Dairyman
145:202-203
Sturman H., EA Oltenacu, RH Foote. 2000. Importance of inseminating only
cows in estrus. Theriogenology 53:1657-1667.
Thatcher WW, Risco CA, Moreira F.1998. Practical Manipulation of the
estrus cycle in dairy animals. Proceeding of the thirstyfirst annual conference,
American association of bovine practitioners. Sept 24-26, 1998, Spokane,
Washington
Vailes LD and JH Britt.1990. Influence of footing surface on mounting and
other sexual behaviors of estrual Holstein cows. J. Anim. Sci. 68:2333-2339.
Wolfenson D et al. 2000. Impaired reproduction in heat-stressed cattle:
basic and applied aspects. Anim. Reprod. Sci. 60-61: 535-547.