IZOLAREA VIRUSURILOR IN

CULTURI CELULARE

EFECTE CITOPATICE
AVANTAJE / DEZAVANTAJE ALE
SISTEMELOR DE IZOLARE VIRALA
AVANTAJE DEZAVANTAJE
ANIMAL DE LAB Infectie naturala Cost / etica

O.G.E.

Cost

Susceptibilitate
limitata

CULTURI DE
CELULE

Sensibilitate buna
/ disponibilitate

Susceptibilitate
variabila
Mediu nutritiv

solutie salina tamponata - Earle, Hanks
substane nutritive (SFV, lizate proteice)- Serul fetal de vitel (SFV) contineo
serie de factori ce actioneaza pentru a stimula cresterea si diviziunea
celular (hormoni nonpeptidici, factori de adeziune ce intervin n atasarea
celulelor pe un substrat celular solid, factori de crestere) SFV este
adugat n proportie de 10% n mediul de cretere si 2-5% n mediul de
ntretinere
vitamine si aminoacizi eseniali
antibiotice i antifungice

Condiii necesare
Asespsie riguroasa
pH adecvat
Temperatur constant
atmosfer cu 5-10% CO2

Componentele culturilor de celule: Celule dispersate+ mediu nutritiv
CLASIFICAREA CULTURILOR DE CELULE

Culturi de organ
Culturi de celule dispersate
Culturi primare- pot fi mentinute n vitro timp
limitat (3-5 pasaje).
Tulpini celulare pot fi mentinute n vitro timp de
50-60 de pasaje. - Cariotipul cromozomial este cel
al tipului de origine - diploid - ceea ce certific
netumorigenitatea culturii
Linii celulare - CELULE TRANSFORMATE

CELULE TRANSFORMATE

1. conin gene implicate n imortalizarea n vitro (cultivare nr. infinit
pasaje) modificari cromozomiale => cariotip heteroploid

2. se multiplic haotic, cerine nutritive foarte sczute (se multiplic
la concentraii foarte sczute de SFV), glicoliza anaerob = sursa
principala de energie

3. membran celular modificat n compoziie (absena fibronectinei
=> independente de aderarea la un suport solid

4. nu au inhibitie de contact, se dispun dezordonat diferit de esutul
din care deriv
5. telomeraza activa
6. inoculate la animale, pot reproduce tumora de provenienta
7. modificarea morfologiei
8. au antigene de suprafa diferite codificate de virus sau de celulele
gazda=> neoantigene
9. aglutineaz uor cu lectinele (antigene vegetale)
10. modificarea mesagerilor secunzi (AMPc)
Echipament de laborator

Hote cu flux laminar pentru obtinerea, si
propagarea culturilor de celule si izolarea
virala


TIPURI DE EFECTE CITOPATICE
SINCITIAL: HIV, v rujeolos, VRS, herpes
PICNOTIC LITIC- enterovirusuri (v.
poliomielitice; v. Coxsackie; ECHO)
INCLUZIONAR- intranuclear,
intracitomplasmatic, mixt
EFECT CITOPATIC SINCITIAL
Celule normale ECP picnotic litic
EFECT CITOPATIC
INCLUZIONAR

Intracitoplasmatic acidofil: v rabic, v vaccinal

Intranuclear -acidofil: papovavirusuri
- bazofil: adenovirusuri

Mixt: v herpetice, v rujeolos

INCLUZII
CITOPLASMATICE
(RABIE)
patognomonic in SNC - CORPII
BABES NEGRI in cornul lui Ammon
si neuronii piramidali din cerebel
INCLUZII INTRANUCLEARE
(BOALA CU INCLUZII CMV)
INCLUZII
INTRANUCLEARE