Stresul oxidativ

n timp, concentraia de oxigen atmosferic a crescut prin procesele de

fotosintez i, ca atare, diferite tipuri de aprare antioxidante au fost induse n
celulele anaerobe.

Celulele anaerobe sunt facultativ anaerobe i pot exista n absena sau prezena
oxigenului.

Viaa aerobic a evoluat pe msur ce sisteme de aprare antioxidante

suplimentare au fost dezvoltate pentru a combate concentraia crescut de
oxigen atmosferic.

Pentru acele organisme care pot utiliza oxigen, exist avantaje speciale
energia obinut este mai mare i viteza de obinere este mai mare.

Toate organismele multicelulare au nevoie de oxigen.

Dar oxigenul este un agent de oxidare lent.

Alte specii ale oxigenului, dar i ale azotului sunt ageni de oxidare mai
puternici.

Stresul oxidativ

Stres oxidativ dezechilibru intre

producia de specii reactive ale
oxigenului i azotului i capacitatea
antioxidant a organismului.
Dei micile fluctuaii n concentraia
acestor oxidani la starea de echilibru
pot juca de fapt, un rol n
semnalizarea intracelular, aprarea
contra intruilor, creteri necontrolate
a concentraiilor acestor oxidani n
starea de echilibru pot s conduc la
reacii n lan mediate de radicalii
liberi care atac, fr discernmnt,
proteine, lipide, polizaharide i ADN

Specii reactive ale oxigenului (ROS)

- radicalul superoxid
- radicalul hidroperoxil
- radicalul peroxil
- radicalul alcoxil
- radicalul hidroxil
- peroxidul de hidrogen
- hipocloritul
- acidul hipocloros
- ozonul
- oxigenul singlet

O2
HO2
RO2
RO
OH
H2O2
HOCl
HOCl
O3
1O
2

Radicalul superoxid (O2)

In vivo, O2 este produs att enzimatic ct i nonenzimatic.

Sursele enzimatice includ:

oxidaze NADPH situate pe membrana celulelor polimorfonucleare,

macrofagelor i celulelor endoteliale:
NADPH + 2O2

NAD(P)H oxidaza

2 O 2 + NADP+ + H+

oxigenaze citocrom P450-dependente

xantin oxidaza: conversia hipoxantin xantin acid uric

Xantin oxidaza

H2O + O2

+ 2H+ + 2 O2

Surse neenzimatice:

sunt atunci cnd un singur electron este transferat direct la

oxigen de ctre coenzime sau grupri prostetice reduse (de
exemplu flavine sau proteine fier-sulf), sau de diverse xenobiotice
reduse n prealabil de diverse enzime (ex. adriamicin medicament anticancer sau paraquat ierbicid).
Lanul respirator mitocondrial: Aproximativ 1-2% din totalul de O2
consumat este convertit la O2 n acest fel.

Ionul superoxid poate accepta electroni, jucnd rol de agent oxidant,

sau poate ceda electroni rol reductor.

Poate reaciona cu el nsui genernd ap oxigenat i oxigen triplet,

reacie care poart numele de dismutare - spontan sau sub aciunea
enzimei superoxid dismutaza (SOD):
2 O2 + 2H+

H2O2 + O2

La interacia cu ioni ai metalelor tranziionale n stare oxidat (Fe3+,

Cu2+) produce radicalul hidroxil, cel mai reactiv dintre ROS (reacia
Fenton):
3O
2+
O2 + Fe3+
2 + Fe
Fe2+ + H2O2 Fe3+ + OH + HO

Reacia cu radicalul hidroxil cu formarea oxigenului singlet:

O2 + OH

O2 + HO

n organism, rolul radicalului superoxid i a moleculelor derivate din el

este n primul rnd de protecie mpotriva microorganismelor.

Peroxidul de hidrogen (apa oxigenat - H2O2)

este produs n special din radicalul superoxid prin reducere monovalent.

2 O2 + 2H+

H2O2 + 3O2

Macrofagele i neutrofilele produc H2O2

Apa oxigenat poate trece rapid prin membranele celulare.

Este descompus de catalaz: 2 H2O2 H2O + O2

Ca i radicalul superoxid, ea nu este o substan foarte reactiv dar efectul su nociv

se manifest prin generarea radicalului hidroxil (reacia Fenton)
Fe2+ + H2O2

Fe3+ + OH + HO

Aceast reacie poate fi catalizat la nivel celular de ctre fier, cupru sau alte
metale prezente aici.

n cazul anemiei feriprive, administrarea de preparate cu fier poate duce la creterea

stresului oxidativ, de aceea este recomandat administrarea concomitent de
compui antioxidani (vitamina C, E, extracte naturale cu polifenoli, etc).

Radicalul hidroxil (OH)

este cea mai reactiv specie.

reacioneaz rapid cu cele mai multe dintre substanele organice aflate n
sistemele biologice.
Poate fi generat din reacia peroxidului de hidrogen cu un ion metalic redus
(Fe, Cu) vezi reacia de mai sus.
radicalul hidroxil trece prin membranele celulare.
n prezena unui substrat organic (acizilor grai) formeaz un compui care
sunt radicali reacie n lan:
OH + R
HO + RH
R + 3O2
ROO + RH

HOR
R + H2O
ROO
ROOH + R

Acest tip de reacie n lan este caracteristic alterrii oxidative a acizilor

grai i a altor lipide, n cazul proteinelor i a acizilor nucleici (n
special a ADN-ului).

Radicalii peroxil organici (ROO)

sunt foarte importani n sistemele biologice, fiind produi fie din

componenii naturali fie din contaminani externi.
implicare n efectele radiaiilor ionizante, n procesele de
mbtrnire, n ischemie, etc.
Reacii:
R + O2

ROO

ROO + RH
ROO + RSH
ROO + CC
ROO + PhO

ROOH + R
ROOH + RS
ROO-CH2-C<
ROO + PhO

Specii reactive ale azotului (RNS)

- monoxidul

de azot
- dioxidul de azot

NO
NO2

- peroxinitratul
- acidul peroxinitros
- trioxidul de azot

ONOO
ONOOH
N2O3

- clorura de nitrozil

NO2Cl

- ion nitroniu

NO2+

- alchilperoxinitratul
- nitrozotiolii

ROONO
RSNO

Monoxidul de azot (NO)

este generat din arginin n cataliza NO-sintazei:

L arginin + NADPH,H+

L citrulin + NO + NADP+

NO reacioneaz rapid cu O2 i formeaz ONOO (peroxinitrat) rezult n medii cu

potenial oxidant foarte mare
Poate strbate distane considerabile i trece uor prin membranele celulare,
astfel nct este considerat declanatorul principal al ruperii lanurilor de ADN.

Mieloperoxidaza - MPO

Stresul oxidativ i poluani ai aerului

Stresului oxidativ mediat
de poluani poate rezulta
din:
generarea direct de specii
reactive ale oxigenului
(ROS);
funcia alterat a
mitocondriilor sau aciunea
NADPH oxidazei;
activarea celulelor
inflamatorii capabile s
genereze ROS i RNS;
deteriorarea ADN-ului n
procese oxidative.

SISTEME ANTIOXIDANTE
Aprarea antioxidant a organismului implic:
mecanisme enzimatice
mecanisme neenzimatice, care la rndul lor pot fi:
de provenien intern (proteine, molecule mici)
de provenien extern, din alimentaie vitamine, polifenoli,
antociani, etc)

Aceste mecanisme lucreaz n sinergie mpotriva

diverilor radicali liberi sau alte tipuri de oxidani.

Sisteme antioxidante enzimatice

Superoxid dismutaza (SOD) - metaloenzim, coninnd cupru i

zinc (pentru SOD din citosol) i mangan (pentru SOD din
mitocondrii):
2 O2- + 2 H+ O2 + H2O2

Catalaza snge, mduva osoas, rinichi, ficat, membranele

mucoaselor, peroxizomi:
2 H 2O2 O2 + H 2O

Glutation peroxidaza + glutation reductaza

H2O2 + 2 GSH GSSG + H2O
GSSG + NADPH + H+ 2 GSH + NADP+

Sistemul enzimatic de aprare mpotriva

speciilor reactive ale oxigenului

O2

O2-

Superoxid
dismutaza

Catalaza
H2O2

2 G-SH

OH
Glutatation
peroxidaza

H2O

Glutation
reductaza

GSSG

NADP+

NADPH+H+

Tioredoxinele i tioredoxin reductaza -sunt enzime cu o activitate

antioxidant intrinsec datorit resturilor de cistein din molecul,
care prin gruparea reductoare tioloc pot anihila diveri oxidani.
Hemoxigenaza (HO) - catalizeaz reacia de oxidare a hemului la
monoxid de carbon, biliverdin i fier.

Sisteme antioxidante neenzimatice

Endocompui cu aciune
antioxidant:

Proteinele ce conin grupri

tiol (-SH) metalotioneine

Proteinele de oc termic

Glutationul este un tripeptid

format din acid glutamic,
cistein i glicocol

Acidul uric (catab. purine)

Coenzima Q10 (lan respirator)

Acidul lipoic (dehidrogenaze de

cetoacizi)
S

H 2C

Melatonina - hormon,
derivat din serotonin,
respectiv triptofan

SH SH

S
CH

(C H 2)4

C OOH

C H2

Bilirubina - produsul de
catabolizare al hemului

H 2C

CH
C H2

(C H 2)4

C OOH

Exocompui cu aciune antioxidant

Vitamina C
protejeaz proteine, acizi grai, ADN mpotriva oxidrii.
este efectiv mpotriva radicalului superoxid, peroxinitritului, apei
oxigenate, acidului hipocloros, oxigenului singlet, oxidani i poluani din
aer, a oxidanilor scpai din neurofilele i macrofagele activate.

Vitaminele E

Este inserat printre lipoproteinele i acizii grai din structura

membranei celulare i lipoproteinelor plasmatice
are un rol protector mpotriva peroxidrii lipidelor determinat de
stresul oxidativ
Lucreaz cuplat cu vitamina C i SOD, catalaza, GSH-peroxidaza

Carotenoizii

sunt precursori ai vitaminei A.

Se acumuleaz n membranele celulare.
interacioneaz cu oxigenul singlet, radicalul superoxid i astfel,
previn oxidarea unor substraturi biologice, n special a acizilor grai
polinesaturai.
H3C

- caroten

CH3

CH3

H3C
3

15

6
5

15'

CH

CH3

H3C

CH3

CH3

CH3

5'

15
15'

CH3

CH3

- caroten

CH3

CH3

ciclu

- iononic

CH3

4'

H3C

CH3

Ciclu - iononic
CH3

CH3

H3C
15
15'

CH3

H3C

H3C

- caroten

H3C

CH3

CH3

CH3

H3C

Structur pseudo

CH3

ionon

Seleniul

nu este el nsui antioxidant, dar particip la aprarea organismului mpotriva ROS ca

i cofactor al enzimei glutation peroxidaza

Cuprul

Cofactor al enzimei superoxid dismutaza (SOD). Concentraiile crescute ale cuprului

pot indica o cretere a stresului oxidativ. S-a evideniat o cretere a cuprului seric n
cursul procesului de mbtrnire

Zincul

Dup fier, zincul este cel mai abundent ion metalic ce se gsete la om.
A fost gsit n componena mai mult de 1200 enzime (ex. SOD).
are efect protector asupra gruprii tiol din structura proteinelor i poate inhiba parial
reaciile de producere a ROS.
Deficitul de zinc crete sensibilitatea la leziuni produse de stresul oxidativ.
Studii efectuate pe persoanele vrstnice cu boli degenerative au pus n eviden un
raport Cu/Zn crescut

Manganul

cofactor pentru multe clase de enzime, incluznd oxidoreductaze, transferaze,

hidrolaze, multe implicate n homeostazia redox (ex. SOD-2 i arginaza)

Flavonoide, isoflavonoide, antociani din produsele vegetale

EFECTE ALE STRESULUI OXIDATIV

Modificri oxidative ale lipidelor
acizii grai nesaturai din membranele celulare
reacii n lan
Consecine - reducerea fluiditii i modificarea permeabilitii
membranei celulare iar, n final, dezorganizarea membranei
celulare.
factor important n etiopatogenia unor afeciuni cardiovasculare ca: ateroscleroza, hipertensiunea arterial,
neoxigenarea post-ischemic.
Marker important LDL oxidat
Vitaminele E i C au n special rol protector:
Vit E-OH + Lipid ox VitE-O + Lipid red
Vit E-ox + VitCred VitE-OH + VitCox
2 VitCox VitCred + VitCox.

Peroxidarea lipidelor

Produi de oxidare ai lipidelor

Oxidarea acidului linoleic

Oxidarea acidului arahidonic izoprostani

Produi de autooxidare a colesterolului

I: 7-hidroxicolesterol; II: 7-cetocolesterol; III: 7--hidroxicolesterol; IV: colesterol5,6-epoxid; V: colestan-3,5,6-triol; VI: colesterol-5,6-epoxid; VII: 5,6secosterol

Transformrile enzimatice ale colesterolului n oxisteroli

CYP7A1: colesterol-7-hiddroxilaza; CYP3A4: colesterol-4-hidroxilaza;

CYP46: colesterol -24-hidroxilaza; CYP27A1: sterol 27-hidroxilaza;
Ch - 25 - OHlase: colesterol-25-hidroxilaza.

Modificri oxidative ale proteinelor

Se modific preferenial catenele laterale ale resturilor urmtorilor

aminoacizi: lizina, valina, cisteina, tirozina, fenilalanina, arginina,
metionina, histidina.

S-tiolarea i S-glutationilarea proteinelor

Nitrarea, halogenarea i oxidarea tirozinei ditirozina

Modificarea proteinelor cu lipide peroxidate

(la lizina in special)

Glicarea proteinelor - Reacia Maillard

Modificri oxidative ale acizilor nucleici

Aciunea asupra deoxiribozei

P

P
O

CH2

baz

O2
H

P
O

CH2

baz

baz
O

baz

CH2

+
MA

OH

CH2

OH

Aciunea asupra catenelor polinucleotidice ale acizilor nucleici

Ruperea
monocatenar
8-oxo-guanina

Fapi-guanin

Modificarea
bazei

Legtur
ADN-protein
Acid oxaluric

8-oxo-adenina
Aduct cu derivat
de lipide oxidate
5-OH-metiluracil

Glicol-timin

Excizia
bazei

Rupere
dublucatenar

dG-malonaldehid

d-guanozin-lizin

Formarea 8-hidroxideoxiguaninei i 2,6-diamino-4- hidroxi-5formamidopiridinei din guanin

Impactul NO i ROS asupra cilor intrinsece i extrinsece

care regleaz apoptoza (moartea celular)

Boli umane care au fost asociate cu stresul oxidativ

crescut, pe baza unor biomarkeri ai afectrii oxidative
Biomarker
Malondialdehida

Boal asociat
Boala Alzheimer
Scleroz amiotrofic
lateral

HNE
hidroxinonanenen

Biomarker
Scderea
concentraiei de
GSH sau a
raportului
GSH/GSSG

Boal asociat
Sindrom distres
respiratorie acut (adult)
Boli hepatice alcoolice

Astm

Boala Alzheimer

Ateroscleroz

Scleroz amiotrofic
lateral

Leshmania cutanat

azbestoz

Diabet

Astm

preeclampsie

Ataxia telangietacsia

Boala Alzheimer

Cancer

Ateroscleroz

Boli cardiovasculare

Boli cardiovasculare

Cataract

Boal pulmonar
obstructiv cronic

Diabet tip I i II

Mild cognitive imairment

Pacieni HIV pozitivi

Boala Parkinson

Fibroz idiopatic
pulmonar

Biomarker

Boal asociat

Biomarker

Boal asociat

F2-isoprostan

Sindrom detres
respiratorie acut
(adult)

Scderea
concentraiei de
GSH sau a
raportului
GSH/GSSG

Sindrom de detres
respirator

Boli cronice i acute de

ficat datorate alcoolului

Retinopatia la
prematuri

Sindrom acut al anemiei

falciforme

Artrit reumatoid

Boala Alzheimer

Sindrom Werner

Astm
ateroscleroz
By-pass
cardiopulmonar
Boli cardiovasculare
Boli renale cronice
Boal pulmonar
obstructiv cronic

Biomarker

Boal asociat

Biomarker

Boal asociat

F2-isoprostan

Boli ale arterelor

coronare

Proteine
S-glutationilate

Cataract

Boala CreutzfeldtJakob

Diabet tip I i II

Boala Crohn

Ataxia Friedreich

Fibroza chistic

Infecii cu HIV

Diabet tip I i II

Hiperlipidemie

Boala Down

Carcinom renal

Insufucien cardiac

Sferocitoz

Ciroz hepatic

Uremie asociat cu
hemodializ sau dializ
peritoneal

Biomarker
Proteine
carbonilate

Boal asociat
Aceruloplasminemie

Biomarker
Cl-Tir

Boal asociat
Sindrom distres
respiratorie acut
(adult)

Miocardit acut
autoimun

Astm

Pancreatit scut

Ateroscleroz

Boala Alzheimer

Boli cardiovasculare

Scleroz amiotrofic
lateral

Insuficien renal
cronic

Astm

Boal coronarian

Displazie
bronhopulmonar

Fibroz chistic

Cataractogenez

Artrit reumatoid

Sindrom de oboseal
cronic

Di-Tir

Sindrom distres
respiratorie acut
(adult)

Hepatit C cronic

Ateroscleroz

Boli renale cronice

Fibroz chistic

Boal pulmonar
obstructiv cronic

Boli renale stadiu final

Biomarker
Proteine
carbonilate

Boal asociat
Insuficien renal
cronic

Biomarker
Proteine
carbonilate

Boal asociat
Boal Crohn

Fibroz chistic

Progeria

Diabet tip I i II

Psoriazis

Infecie cu Heliobacter
pylori i inflamaie

Artrit reumatoid

Fibroz idiopatic
pulmonar

Sarcoidoz

Artrit cronic juvenil

Sepsis

Cancer pulmonar

Amiloidoz sistemic

Meningit

Uremie

Boala Parkinson

Sindrom Werner

Preeclampsie