Capacitatea de inhibare a peroxidului de hidrogen

(Hydrogen peroxyde scavenging activity)

Capacitatea de inhibare a peroxidului de hidrogen se testeaz conform metodei publicate
de Nagulendran [KR. NAGULENDRAN et al., 2007].
Principiul metodei
Capacitatea de inhibare a peroxidului de hidrogen se estimeaz prin titrarea prin substituie
[ZHANG XY, 2000] (soluia de analizat nu reacioneaz direct, de aceea se transform ntr-o
combinaie chimic care poate fi apoi titrat cu soluia de concentraie cunoscut).
Aparatura
Baloane pentru titrare
Pipete de 1ml
Pipete gradate 10 ml
Reactivi
Soluie de peroxid de hidrogen H2O2 (0,1 mM)
Soluie de molibdat de amoniu (NH4)6Mo7O244H2O (3%) (se dizolv 150 g molibdat de
amoniu n 1l ap distilat, soluia obinut se toarn n 1 l de acid azotic HNO 3 concentrat (i nu
invers!!!), precipitatul czut se dizolv treptat. Se las pentru 48 ore. Dac cade precipitat, se
decanteaz atent [. . . . , 1974])
Soluie de acid sulfuric H2SO4 (2M)
Iodur de potasiu KI (1,8 M)
Tiosulfat de sodiu N2S2O3 (5,09 mM)
Acid azotic concentrat HNO3
Metoda de lucru
n baloane pentru titrare se amestec 1 ml de prob cu 1 ml de soluie de peroxid de
hidrogen H2O2 (0,1 mM). Apoi se adaog 2 picturi de soluie de molibdat de amoniu, 10 ml de
acid sulfuric H2SO4 (2M) i 7 ml de iodur de potasiu KI (1,8 M). Soluia obinut se titreaz cu
tiosulfat de sodiu N2S2O3 (5,09 mM) pn la dispariia culorii galbene. Se nregistreaz volumul
(V1) de tiosulfat de sodiu N2S2O3 (5,09 mM) cheltuit pentru titrare.
n alt balon pentru titrare se introduce aceleai substane fr prob. Soluia obinut se
titreaz cu tiosulfat de sodiu N2S2O3 (5,09 mM) pn la dispariia culorii galbene. Se nregistreaz
volumul (V0) de tiosulfat de sodiu N2S2O3 (5,09 mM) cheltuit pentru titrare.

Exprimarea rezultatelor
Procentul de peroxid de hidrogen inhibat se calculeaz conform formulei:
(2.6)
Unde
V0 - volumul de tiosulfat de sodiu N 2S2O3 (5,09 mM) cheltuit pentru titrarea probei de
control n prezena peroxidului de hidrogen (fr prob)
V1 - volumul de tiosulfat de sodiu N 2S2O3 (5,09 mM) cheltuit pentru titrarea probei n
prezena peroxidului de hidrogen.

Pregtirea probelor pentru analiz

Probele care conin cte 10 g pine/50 ml soluie sunt termostatate la 37 0,1C timp de
15 minute n mediu acid (pH=2,0), creat prin adugarea soluiei 1,5N de HCl. Concomitent,
probe similare sunt termostatate

la pH = 8,2 (NaHCO 3 0,08 M). Dup administrarea

trifermentului ( 1 pastil la 1 prob), amestecul

este incubat pentru dou ore la 370,1 C i

agitare continu.
Prelevarea aliquotelor pentru pentru analiz (cte 5 ml) s-a efectuat

la finele

experimentului. Fiecare aliquot era centrifugat timp de 10 min (6000 rot/min), apoi filtratul
(cte 1 ml) era supus analizei.

1. KR. NAGULENDRAN, S. VELAVAN, R. MAHESH and V. HAZEENA BEGUM. In

Vitro Antioxidant Activity and Total Polyphenolic Content of Cyperus rotundus
Rhizomes,E-Journal of Chemistry, Vol. 4, No.3, pp. 440-449, July 2007