Analiza farmacognostic a produsului vegetal Belladonnae folium

Introducere
Belladonnae folium, frunza de mtrgun, este un produs vegetal cu un
important coninut n alcaloizi tropanici, care i confer proprieti terapeutice,
exploatate nc din antichitate, dar i proprieti toxice, care au limitat folosirea sa,
astzi preparatele obinute din acest produs fiind folosite rar, preferndu-se alte
medicamente cu toxicitate mai redus sau netoxice. Datorit toxicitii, extractul de
frunze i chiar din toat planta era folosit ca otrav n trecut, alturi de cel de cucut,
ciumfaie sau mselari. n prezent, se folosete sub supravegherea medicului,
pentru uz intern i extern, n strile spastice ale musculaturii netede, n enterocolite
spastice, hipersecreii digestive i bronice, stri astmatice. n industrie se folosete la
extragerea alcaloizilor, n special a atropinei.
Frunzele de mtrgun se gsesc sub form uscat i mrunit sau sub form
de pulbere. Se mai gsete i extract din frunze de belladonna.
Cap. I. Date generale privind specia
Atropa belladonna, mtrguna, face
parte din Increngtura Spermatophyta,
subncrengtura Angiospermae,
clasa
Dicotyledoneae, subclasa Rosidae, ordinul
Scrophulariales, familia Solanaceae (***
Atlas Botanic, ediia a II-a, Editura
Didactic i Pedagogic, Bucureti, 1985,
pag. 188 195). Se mai numete cinstit,
cireaa-codrului, cireaa-lupului, doamnacodrului, doamna mare, floarea-codrului,
floarea cucului, gugi, iarba-codrului,
iarba-lupului,
mprteasa-buruienilor,
matragon, ndrgul, papalu, ilidonie.
Fitocenologic este ncadrat n Atropion,
Fagion (Constantin Prvu Universul Plantelor, ediia a II-a, Editura Enciclopedic,
Bucureti, 1997, pag. 374).
Belladonnae folium, frunz de mtrgun, reprezint
Atropa belladonna L.
frunza plantei Atropa belladonna L. (Solanaceae), cu sau
fr vrfuri tulpinale, uscat dup recoltare. Conine cel puin 0,3% alcaloizi totali
exprimai n hiosciamin (C17H23NO3) (*** Farmacopeea Romn, ediia a X-a,
Editura Medical, Bucureti, 1993, pag. 151).

Specia este originar din centrul Europei i este rspndit n Europa central
i meridional, n nordul Africii, n sud-vestul Asiei i n America de Nord. Pentru
proprietaile ei medicinale este cultivat n Frana, Belgia, Olanda, Marea Britanie,
Federaia Rus i alte ri din C.S.I., Polonia, Ungaria, Bulgaria, Romnia (zonat n
judeele Braov, Vlcea, Mure, Cara-Severin, Neam, Suceava, Vrancea). Este
comun n toate regiunile pduroase din Carpai, ntlnit n pduri i la margini de
pdure, n tufriuri, luminiuri, poieni, tieturi de pdure, pe soluri suficient de
umede, afnate, bogate n humus, din zona montan, mai ales n etajul fagului
(Constantin Prvu Universul Plantelor, ediia a II-a, Editura Enciclopedic,
Bucureti, 1997, pag. 374).
Teofrast (sec.III .Hr.) o numete mandragora, astzi denumire popular la
italieni. Botanistul Clusius (sec. XVII) o numete belladonna. Linn o numete
tiinific, Atropa belladonna, dup particularitile ei biologice. Atropos, n mitologia
greac, este zeia destinului, cea care poate tia firul vieii muritorilor, iar belladonna
vine din italian i nseamn doamn frumoas aluzie la folosirea n secolele
trecute a picturilor din sucul acestei plante pentru a mri i a da strlucire ochilor
(Dan Bllu, Daniela Baconi Toxicologia substanelor organice naturale i
nrudite, Editura Tehnoplast Company SRL, Bucureti, 2001, pag. 62).
Mtrguna este o plant erbacee, peren, cu miros neplcut, hemicriptofit,
mezofit, mezoterm, acid-neutrofil. Genetic are 2n=72 cromozomi. Necesit
umiditate ridicat att n sol ct i n atmosfer. Temperaturile optime de vegetaie
sunt ridicate, 25 30C. Este sensibil la gerurile trzii de primvar i la cele
timpurii de toamn (-4C). Peste iarn, acoperit cu zpad, suport temperaturi pn
la -30C.
Rdcina este pivotant n primul an de vegetaie, apoi devine un rizom gros,
cilindric, multicapitat, brun-deschis sau cenuiu, din care pornesc rdcini lungi de 40
50 cm, uneori chiar 1 m, groase pn la 4 cm.
Tulpina este erect, verde sau murdar-rocat-violet, ramificat, glandulosproas n partea superioar, nalt de la 50 la 150 cm, dar poate atinge i 200 cm.
Frunzele, de culoare verde, sunt alterne la baz i opuse n partea superioar,
ovate, alungit-ovate sau eliptice, acuminate, cu marginea ntreag, uor ngustate la
baz, cu nervaiune penat, glabre sau cu peri foarte rzlei, cu peiol scurt sau
aproape sesile.
Florile sunt brun-violete sau brun-purpurii, solitare, nutante, cu pediceli de 1
1,5 cm glandulos-pubesceni. Caliciul este persistent, alctuit din 5 sepale cu vrful
oval, ascuit, glandulos-pubescente. Corola este campanulat-tubuloas, gamopetal.
Androceul prezint filamente staminale proase la baz i antere mari, galbene.

Gineceul are un stil filiform, mai lung dect staminele, terminat cu stigmat papilos,
discoidal, verzui. Perioada de nflorire cuprinde lunile iunie, iulie, august.
Fructul este o bac sferic de mrimea unei ciree, la nceput verde, apoi
neagr, suculent, foarte otrvitoare. Seminele sunt reniform-ovale, rugoase, brune.
Frunzele, Belladonnae folium, se recolteaz pe timp frumos, fr rou, cu puin
timp nainte ca planta s nfloreasc i n timpul nfloririi, n lunile iulie, august. Se
rup mpreun cu peiolul, care este mai bogat n alcaloizi. Se evit frunzele
nglbenite sau atacate de insecte. Se usuc la umbr n strat subire, ntorcndu-se
des, sau nirate pe sfoar ca frunzele de tutun. Se pot usca artificial nti la circa
40C, apoi la 50 60C. La plantele de cultur recoltarea se face de 3 4 ori pe var.
Chimic, ntreaga plant conine alcaloizi tropanici pn la aproximativ 1%.
Frunzele i herba conin alcaloizi tropanici: hiosciamin (78 98% din
cantitatea de alcaloizi), norhiosciamin, noratropin, scopolamin, atroscin,
atropamin, beladonin, urme de scopin i tropin. Mai conin piridin, Nmetilpirolin, N-metilpirolidin, tetrametil-diaminobutan, putrescein, urme de
cuschigrin, nicotin, helaradin, diferii aminoacizi acid cisteic, acid aspartic, acid
glutamic, metionin, arginin, glicin, -alanin, leucin, izoleucin, lizin, prolin,
tirozin, -fenilalanin, ornitin, valin, serin, cistein, asparagin, triptofan,
histidin , enzime (fosfataze, polifenoloxidaze), flavone (kmpferol, quercetol),
cumarine (scopoletina), acid cofeic, acid clorogenic, acid neclorogenic, acid ascorbic,
substane minerale cu K, Na, Ca, P, Mg, Fe, Mn, Co, Zn, B, Cu, Mo, Pb.
Florile, fructele i seminele conin alcaloizi tropanici i alte substane
organice.
Rdcinile conin alcaloizi tropanici, din care hiosciamina reprezint cca 90%,
scopolamin, apoatropin, beladonin, tropin, scopin, urme de atropin etc.,
aceleai baze volatile ca n frunze, dar diferite procentual, enzime, cumarine
(scopoletin, umbeliferon), substane minerale. (Constantin Prvu Universul
Plantelor, ediia a II-a, Editura Enciclopedic, Bucureti, 1997, pag. 374 375.)

Prin extracie, hiosciamina, care este esterul tropinei cu acidul (-)tropic i deci
are caracter levogir, trece n atropin, care este un racemic, fiind esterul tropinei cu
acid (+)tropic.
Frunzele i rdcinile plantei au utilizri terapeutice n medicina uman i
veterinar.
Principiile active, n special alcaloizii, au urmtoarea aciune farmacodinamic:
inhib terminaiile nervoase parasimpatice, excit sistemul nervos central,
accelereaz ritmul cardiac, provoac midriaz, dilat bronhiile, diminueaz secreiile
i peristaltismul intestinal, relaxeaz musculatura neted.
Frunzele se administreaz sub form de pilule, tinctur i extract fluid. Tinctura
de frunze trebuie s conin 0,03 g% alcaloizi totali, exprimai n hiosciamin, iar
extractul fluid 0,25 g% alcaloizi totali. Din frunze se obine extractul uscat de
beladon, care este o pulbere galben-brun, nehigroscopic, cu miros caracteristic i
gust amar, toxic.
n medicina uman, ca preparate de uz intern, pentru combaterea crizelor
astmatice i a altor afeciuni se utilizeaz la prescripia medicului i sub supraveghere
medical: pilule, igri antiastmatice, tinctur, extract alcoolic, alcaloizi extrai.
Pentru tratarea astmului, bronitelor astmatiforme, encefalitei, colicilor
gastrointestinale, colicilor cilor biliare, ulcerului gastric, gastritei i ca antivomitiv:
a) pilule, din pulbere de frunze de 0,05 g doz luat o dat i 0,30 g n 24 ore;
b) tinctur, din frunze de 3 ori pe zi cte 8 picturi pentru brbai i de 3 ori pe
zi cte 6 picturi pentru femei; picturile se administreaz diluate cu ap;
tratamentul ulcerului i gastritei dureaz 3 4 sptmni; numrul de
picturi trebuie respectat, mrirea numrului la 10 producnd uscciunea
gurii; se verific dozele prescrise nainte de prepararea reetelor. (Constantin
Prvu Universul Plantelor, ediia a II-a, Editura Enciclopedic, Bucureti,
1997, pag. 376.)
Pentru uz extern, pentru tratarea fisurilor anale, fisurilor snilor, ulcerelor
varicoase, durerilor nevralgice se folosete alifie, pregtit din 1 2 g extract alcoolic
la 8 10 g baz unguent. Se amestec foarte bine pn la uniformizare. Se aplic
local.
n medicina veterinar, pentru uz intern, pentru tratarea constipaiilor spastice,
bronitelor cronice, ca antispasmodic i calmant gastrointestinal se folosete infuzie,
din 3 g frunze uscate i mrunite, recoltate n timpul nfloritului, peste care se toarn
200 ml ap clocotit. Se las acoperit 10 minute, se strecoar, se rcete i se
administreaz prin breuvaj bucal. Se mai administreaz pilule, boluri, pulbere de
plant, extract, tinctur de beladon care conine 0,03% alcaloizi.

Totalul alcaloizilor din beladon intr n compoziia medicamentelor Bergonal,

Fobenal, Foladon, Bergofen, Distonocalm, extractul sau tinctura n Calmogastrin,
Pasinal, Tusomag. Atropina extras este folosit n Carbocif, Laxatin, Lizadon.
Toxicitatea plantei i produselor obinute de la ea se datoreaz coninutului n
alcalozi. Toate prile plantei sunt otrvitoare. Alcaloidul principal, hiosciamina, se
transform n atropin n timpul uscrii plantei. Semnele intoxicaiei la animale
constau din refuzul hranei, dilatarea maxim a pupilei i micorarea irisului, uscarea
mucoasei bucale, sete mare, colici, balonarea stomacului, puls accelerat i slab,
respiraie grea, peristaltism intestinal absent, constipaie, stare de nelinite. n final
poate surveni moartea. La om intoxicaia se manifest prin nroirea feei, respiraie
accelerat, urticarie, eczem cutanat, excitaii, halucinaii, furie, sete accentuat,
constipaie, mrirea pupilei, uscarea gtului, rgueal, agitaie, delir, moarte. Se
apreciaz c 2 3 fructe consumate provoac moartea unui copil i 10 20 fructe
consumate ucid un adult.
La om se intervine cu splturi stomacale, tratament cu crbune activ,
purgative cu sare amar, comprese umede pe piept, administrarea de ctre medic de
tonice respiratorii i cardiace. La animale se intervine pentru evacuarea coninutului
prin sifonaj, purgative, clisme, administrarea de tanin, crbune medicinal, injecii cu
pilocarpin sau ezerin, cofein, friciuni pentru activarea circulaiei. Ca neutralizant
se folosete iodura de potasiu. (Constantin Prvu Universul Plantelor, ediia a II-a,
Editura Enciclopedic, Bucureti, 1997, pag. 374 376)
La noi n ar primele culturi experimentale au fost iniiate de B. Pater (1922),
care a obinut prima oar de la specia Atropa belladonna dou varietai constante:
Atropa flava i Atropa intermedia, stabilind o corelaie ntre coninutul n pigment
nchis i coninutul n alcaloizi al plantei (*** Farmacognozie, Vol. II, Institutul de
Medicin i Farmacie Bucureti, Facultatea de Farmacie, 1980, pag. 164).

Cap. II. Analiza farmacognostic a produsului vegetal

1. Determinarea identitii produsului vegetal
Produsul vegetal Belladonnae folium se poate identifica prin examen
macroscopic, pe produsul vegetal uscat sau umectat, i prin examen microscopic n
seciune transversal i n pulbere.

1.1. Examen macroscopic

Frunzele sunt scurt peiolate sau aproape sesile, subiri, ovate, alungit ovate sau
eliptice, acuminate, cu marginea ntreag, uor ngustate la baz, cu nervaiune penat
i peri pe faa inferioar, mai ales pe nervur. Nervurile secundare traverseaz limbul
pn la marginea acestuia, iar nervurile teriare formeaz o reea de ochiuri.
Lungimea este de aproximativ 13 cm, iar limea este de circa 7 cm.
Culoarea este verde pe faa superioar i mai deschis pe faa inferioar.
Mirosul este slab, caracteristic.
Gustul este amar, neplcut.

1.2. Examen microscopic

Seciunea transversal prezint o stuctur heterogen asimetric. Epidermele
sunt unistratificate, acoperite cu o cuticul subire i prezint peri tectori i peri
glandulari. Perii tectori sunt pluricelulari, au pereii
Belladonnae folium
subiri i netezi sau uor punctai. Perii glandulari, n
form de mciuc, au picior mono- sau pluricelular i gland unicelular sau
pluricelular. esutul palisadic este unistratificat. n parenchimul lacunar se gsesc
celule mari, cenuii, pline cu nisip microcristalin de oxalat de calciu. n nervura
principal, foarte proeminent pe faa inferioar, se gsete un fascicul libero-lemnos
bicolateral, cu un periciclu slab dezvoltat, celulozic.
Pulberea este verde sau verde-brun i prezint fragmente de parenchim
clorofilian cu stomate de tip anisocitic i epiderm cu cuticul striat, cu celulele
sinuate, celule cu nisip oxalic, fragmente de vase lemnoase de calibru mic, fragmente
de peri tectori pluricelulari i peri glandulari cu gland unicelular, rar pluricelular.
Impurificri: Nu se admit impurificri cu frunze de Scopolia carniolica Jacq.
mutulic (Solanaceae), Phytolacca americana L. i Phytolacca esculenta Van
Houtte crmz (Phytolaccaceae).
1. Seciune transversal prin Belladonnae folium:

1. Epiderma superioar cu cuticul; 2. esut palisadic; 3. parenchim lacunar;

4. colenchim; 5. periciclu; 6. liber; 7. lemn; 8. liber; 9. colenchim; 10. celule cu nisip

oxalic; 11. pr tector; 12. pr glandular.
2. Pulbere de Belladonnae folium:
1. pr glandular;
2. celule epidermice cu cuticul
striat;
3. palisade;
4. stomat
anisocitic;
5. vas lemnos
inelat;
6. celul cu nisip
oxalic;
7. esut lacunar;
8. pr tector.

2. Analiza chimic calitativ

2.1. Analiza chimic calitativ a soluiei apoase
A pus n eviden prezena alcaloizilor, flavonoidelor i cumarinelor.
2.2. Identificarea prin CSS a constituenilor chimici activi
2.2.1. Identificarea prin CSS a alcaloizilor
Prin cromatografie n strat subire s-au identificat hiosciamina i scopolamina.
Prepararea soluiei de analizat: 1 g produs vegetal pulverizat se agit cu 10 ml
acid sulfuric 0,05M timp de 5 minute i se filtreaz.Filtratul se dilueaz cu 10 ml ap,
se alcalinizeaz cu 1 ml hidroxid de amoniu conc. i se agit cu 10 ml eter. Dup
separarea celor dou faze, soluia extractiv eteric se deshidrateaz pe sulfat de
sodiu anhidru, se filtreaz i se concentreaz pe baie de nisip pn la sec. Reziduul se
dizolv n 0,25 ml metanol. Se aduce la start n band.
Substan de referin: hiosciamina soluie 0,01% n metanol.
Faza fix: silicagel G, plac activat 30 minute la 105C.
Faza mobil: aceton ap amoniac conc. (90 : 7 : 3).
Reactiv: Dragendorff.
Rezultate: Martor: Rf1= 1,5/14 = 0,11 spot portocaliu hiosciamina;
Rf2= 10,7/14 = 0,76 spot portocaliu scopolamina.
Proba: Rf1= 1,5/14 = 0,11 spot portocaliu;
Rf2= 10,5/14 = 0,75 spot portocaliu.
Deoarece valorile Rf i coloraia spoturilor probei corespund cu cele ale
martorului, se poate trage concluzia c proba conine hiosciamin i scopolamin.

Cromatograma obinut prin CSS pentru identificarea alcaloizilor tropanici din

Belladonnae folium:
Martor: Rf1= 1,5/14 = 0,11
Rf2= 10,7/14 = 0,76
Proba: Rf1= 1,5/14 = 0,11
Rf2= 10,5/14 = 0,75
Rf

- 0,76

0,75

0,11

3. Analiza chimic cantitativ

3.1. Determinarea umiditii
Se bazeaz pe variaia masei produsului vegetal prin uscare, variaie datorat
evaporrii apei coninute.
Tehnic: 5 g frunz de mtrgun se usuc la 105 C pn la mas constant.
Umiditatea determinat: 12%.
3.2.

Determinarea substanelor solubile

5g produs vegetal, pulverizat i trecut prin sita VI, se cntresc la balana

analitic i se aduc ntr-un flacon cu dop rodat; se adaug 100 g din solventul
prevzut, se agit energic de cteva ori, se las la macerat timp de 23 ore, se agit din
nou timp de o or i se filtreaz, ndeprtnd primele poriuni de filtrat. 20,0 g filtrat
se evapor la sicitate pe baia de ap, ntr-o fiol de cntrire n prealabil cntrit.
Fiola de cntrire cu reziduu se usuc n etuv, la 105 C, timp de 3 ore, se rcete n
exicator i se cntrete.
Reziduul reprezint substanele solubile i se raporteaz la 100 g prudus
vegetal.
3.3.

Determinarea cantitativ a principiilor active

3.3.1. Dozarea alcaloizilor

Soluia cloroformic purificat, ce conine alcaloizi tropanici din Belladonnae

folium, se menine la etuv o or, la 105 C, pentru ndeprtarea alcaloizilor baze
volatile. Se adaug un mic exces de cloroform pentru solubilizarea alcaloizilor baze
nevolatile. Se trateaz cu o cantitate bine cunoscut, n exces, de acid sulfuric 0,02 N
pentru transformarea alcaloizilor baz n alcaloizi sare, dup care se titreaz cu NaOH
0,02 N n prezena roului de metil, pn la coloraie galben.

Cap. III. Concluzii

Datorit toxicitii ridicate, trebuie luate anumite precauii n timpul

conservrii, manipulrii i eliberrii produsului sau formelor farmaceutice obinute pe
baza acestuia.
Produsul se conserv ferit de lumin i de umiditate la Separandum. Cnd se
prescrie Belladonnae folium se folosete pulbere de frunz de mtrgun.Pulberea
trebuie s conin cel mult 0,3% alcaloizi totali, iar n cazul depirii se dilueaz cu
lactoz. Concentraia se verific annual. Produsul are proprieti anticolinergice, i se
folosete ca antispastic.
Alcaloizii coninui n frunz, ca de altfel n ntreaga plant, i confer
mtrgunei proprieti medicinale i utilizri deosebit de importante.