An I Medicin General

Formula leucocitar
Leucocitele, sau globulele albe, sunt celule ale sistemului imun, implicate n aprarea organismului att mpotriva bolilor infecioase ct i a substanelor strine. Formula leucocitar permite stabilirea proporiilor dintre diferitele serii leucocitare din sngele periferic. Se determin examinnd la ntmplare diferite zone ale frotiului de snge colorat panoptic (May Grunwald Giemsa). Se identific 100 de leucocite i se exprim n procente valoarea gsit pentru fiecare grup de celule. Valorile normale ale leucocitelor n sngele periferic sunt redate n tabelul de mai jos. Tipuri de celule Neutrofile nesegmentate Neutrofile segmentate Eozinofile Bazofile Limfocite Monocite 2-3 55-65 1-3 0,5-1 25-30 6-8

Materiale necesare: lame de sticl degresate, lame de sticl cu marginea lefuit, ace sterile, vat, alcool, microscop optic, colorant May Grunwald Giemsa, ap distilat, pipete Pasteur, pipete gradate. Tehnica efecturii frotiului: Curai vrful degetului cu o bucat de vat mbibat n alcool. Cu un ac steril se face rapid o singur puncie la vrful degetului curat suficient de adnc pentru ca sngele s se scurg liber din locul de puncie. Se terge prima pictur de snge cu o bucat de vat, iar cnd apare a doua pictur se recolteaz pe marginea unei lame lefuite. Lama se aplic pe o alt lam degresat orizontal n aa fel nct unghiul de contact s fie de aproximativ 30 de grade. Se imprim apoi lamei lefuite o micare de translaie uoar pentru a permite sngelui s se etaleze n strat subire. Imediat dup efectuarea frotiului, lama se agit pentru uscare rapid. Frotiul bine executat are dou margini paralele longitudinale. Colorarea frotiului sanguin: Dup uscare frotiul va fi aezat pe un stativ sub care se gsete o tav metalic. Se acoper cu un numr cunoscut de picturi din soluia May Grunwald i se las 2-3 minute, timp necesar pentru fixarea stratului de snge pe lam. Fixarea are loc prin evaporarea alcoolului metilic. Urmeaz colorarea propriu-zis. Pe frotiu se pun un numr egal de picturi de ap distilat cu acela al picturilor de colorant. Se omogenizeaz i se las astfel 3-4 minute, dup care lichidul va fi ndeprtat i nlocuit cu soluia Giemsa diluat n proporie de 1 pictur soluie Giemsa la 1ml de ap distilat. Se las n repaus 20 de minute, apoi lama se spal la robinet i se usuc la temperatura camerei. Citirea frotiului: se face la microscop cu obiectivul de imersie n lumin puternic (cu condensatorul ridicat i diafragma deschis). Parcurgerea frotiului se face n zig-zag, pentru a nu se pierde elementele de dimensiuni mari, care se aeaz la margine. Se aplic pe frotiu o pictur de ulei de cedru. Se coboar obiectivul de imersie pn ce lentila atinge pictura de ulei i cu micrometrul se fixeaz imaginea. Se caut 100 de leucocite i

dup identificarea lor se noteaz n rubrica corespunztoare a tabelului Schilling. Se calculeaz procentajul leucocitelor. Tabelul are 7 rnduri i 10 coloane. Fiecare coloan conine 10 leucocite identificate. Tip de leucocite Metamielocite Neutrofile nesegmentate Neutrofile segmentate Eozinofile Bazofile Monocite Limfocite 1 4 1 1 3 10 1 4 1 4 10 1 2 58 5 1 14 19 100

10

10

10

10

10

10

10

10

Tabelul Schilling

Neutrofile de la stnga la dreapta: neutrofil segmentat, metamielocit, neutrofil nesegmentat Neutrofilele au un diametru de 10, citoplasma colorat n roz, conin granulaii neutrofile de culoare violet. Dup forma nucleului se mpart n mai multe tipuri: - Metamielocitul: are nucleul oval sau reniform; este o form tnr; n sngele periferic procentajul fiind de 0,5%; - Neutrofilul tnr nesegmentat: are nucleul n form de bastona; procentajul n sngele periferic este de 2-3%; - Neutrofilul segmentat: are nucleul lobat, unit prin puni fine filiforme; este elemetul cel mai rspndit n sngele periferic (60-70%).

Eozinofil n stnga-imagine microscopic, n dreapta imagine schematic Eozinofilele au diametrul de 10-16, nucleul de form bilobat (bisac), citoplasma conine granulaii colorate rou-crmiziu; procentajul normal 2-4%.

Bazofil n stnga-imagine microscopic, n dreapta imagine schematic Bazofilele au diametrul de 11-13, nucleul trilobat (form de trefl) iar citoplasma conine granulaii mari, colorate n albastru nchis.

Monocit n stnga-imagine microscopic, n dreapta imagine schematic Monocitele sunt elementele figurate cele mai mari din snge, diametrul atingnd 30. Au un nucleu reniform, cu aspect spumos, colorat violaceu. Citoplasma se coloreaz n cenuiu, albastru, ca fumul de igar. Uneori citoplasma prezint granulaii fine azurofile. Procentajul normal este de 4-8%.

Limfocit n stnga-imagine microscopic, n dreapta imagine schematic Limfocitele. Morfologic se disting cel puin 2 tipuri: -limfocitul mic, cu diametrul de aproximativ 7; -limfocitul mare, cu diametrul de 10-15 Limfocitele au nucleul relativ mare, colorat n albastru nchis, cu nuan violacee i o citoplasm puin, colorat n albastru deschis, ca cerul senin. Procentajul normal este de 2030%. Modificri patologice ale formulei leucocitare Neutofile - Creterea numrului de granulocite neutrofile n sngele periferic peste 70% se numete neutrofilie; o ntlnim n infeciile acute, hemoragii acute, infarct miocardic etc. Neotropenia, scderea numrului de neutrofile este prezent adesea n viroze, agranulocitoz. Eozinofile - Eozinofilia la valori mai mari de 5%. Se observ n alergii, helmintiaze, colagenoze, neoplasme, intoxicaii medicamentoase etc. Eozinopenia apare n infecii bacteriene sau dup tratament cu steroizi, stress. Bazofilele - Bazofilia este rar, o ntlnim uneori n ciroze, leucemii cronice, endocardit septic, anemii hemolitice, variol, varicel. Bazopenia este foarte rar poate s apar n reacii alergice sau n condiii de stress. Monocitele - Creterea numrului de monocite, monocitoza, se produce n mononucleoza infecioas, leucemia monocitar, endocardita septic. Limfocitele - Limfocitoza apare n viroze, leucemia limfatic cronic, hepatit, tuberculoz, lues. Limfopeniile apar dup tratament cu corticoizi, n strile de stress etc.