Facultatea de Medicină

Formula leucocitară

Fiziologie, anul I

Lucrare practică.

Pentru uz intern
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
 Frotiu periferic.
Definiție.
Prelevare şi întindere pe lamă într-un strat subţire a unei picături dintr-un lichid biologic
(sânge, lichid cefalorahidian, secreţie, urină), a unui produs patologic (puroi, scurgere)
sau a celulelor dintr-un ţesut sau dintr-un organ (ganglion, vagin etc.) în vederea unei
observaţii microscopice.

-se pune o picătură de sânge de sânge pe o lamă de sticlă și întinderea acestuia

(utilizând o altă lamă de sticlă). Astfel se obţine un strat foarte subţire de sânge. Scopul
este de a obţine o zonă în care celulele sunt distanţate suficient pentru a fi numărate şi
diferenţiate. Lama este lăsată să se usuce la aer după care se fixează prin imersie în
metanol. După fixare se colorează prin metoda May‐Grünwald‐Giemsa. Pe lama astfel
pregătită se pot distinge unele caracteristici ale celulelor: structurile bazofile (care se
colorează cu coloranţi bazici) se colorează în albastru; structurile acidofile sau eozinofile
(care se colorează cu coloranţi acizi) se colorează în roşu în timp ce structurile neutrofile
se colorează cu ambii coloranţi şi rezultă o coloraţie violet spre brun.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Formula leucocitară reprezintă raportul dintre diferitele tipuri de leucocite. Această
determinare se realizează examinând un frotiu de sânge periferic.

-Există mai multe tipuri de leucocite (globule albe). Diferenţa majoră între ele este
reprezentată de prezenţa sau absenţa granulaţiilor din citoplasmă. Leucocitele sunt
clasificate cel mai frecvent în granulocite şi agranulocite.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Granulocitele (leucocitele polimorfo‐nucleare) se împart în funcţie de caracteristici
morfologice în:

-Neutrofile: reprezintă cel mai numeros grup de leucocite prezente într‐o

probă de sânge, în mod normal. Pe frotiul periferic citoplasma neutrofilelor
prezintă numeroase granulaţii de culoare violacee şi cu un nucleu de culoare
violet‐închis. Neutrofilele au un diametru de 10‐15 μm.

-Neutrofilele din sângele periferic pot fi sub‐clasificate conform gradului de maturizare

indicat de modificările de la nivelul nucleului:

-metamielocit forma cea mai tânără din sângele periferic, prezintă un

nucleu mare rotund sau reniform cu citoplasmă abundentă colorată într‐un
albastru deschis

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

-neutrofil tânăr nesegmentat prezintă un nucleu alungit şi curbat (în
formă de potcoavă sau forma literei S) cu citoplasmă abundentă de culoare roz.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

neutrofil segmentat – neutrofilul matur cu un nucleu format din 2
până la 5 segmente sau lobi, cu citoplasmă colorată într‐un roşu pal.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Eozinofilul are un diametru de 12‐14 μm, nucleul este frecvent mare,
caracteristic bilobat (doi lobi) cu o citoplasmă eozinofilică (roşu deschis), cu
granulaţii mari de mărime uniformă de culoare roz‐roşu cărămiziu, prin colorare
cu eozină.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Bazofilul are un diametru de 11‐13 μm. Nucleul este în general mare,
neregulat, având câteodată trei lobi, cu o citoplasmă bazofilă conţinând
granulaţii mari de culoare albastru‐închis care se pot suprapune cu nucleul.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Agranulocitele (leucocite mononucleare) sunt caracterizate de aparenta absenţă a
granulaţiilor din citoplasmă. Deşi numele lor arată o lipsă a granulaţiilor din citoplasmă și
aceste celule conţin granulaţii (care eventual nu se colorează prin această metodă):

-Limfocitele au un diametru de 8‐10 μm. Nucleul este mare, în general rotund,

ovalar, eventual uşor neregulat, dantelat. Citoplasma limfocitelor este bazofilă,
de cantitate mică (în cerc sau semilună în jurul nucleului).

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Monocitele sunt cele mai mari dintre elementele figurate ale sângelui cu un
diametru de 15‐25 μm. Nucleul este mare, rotund, dantelat sau lobat, iar
citoplasma este de culoare cenuşiu‐albăstrui.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

MATERIALE NECESARE
– frotiuri periferice colorate
– microscop optic cu obiectiv de imersie (90x)
– ulei de imersie (ulei de cedru)

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Obţineţi iniţial o imagine clară a frotiului periferic cu obiectivul de putere mică (10x). Nu
mai modificaţi focalizarea pentru pasul următor. Rotiţi parţial turela microscopului în aşa
fel încât să aveţi acces la zona examinată a lamei între obiectivele 10x şi 90x. Puneţi o
picătură de ulei de imersie în mijlocul lamei în zona luminată a frotiului. Rotiţi în poziţie
obiectivul de imersie de 90x, fixat corect acesta atinge picătura de ulei de imersie.
Lucraţi din acest moment numai cu microviza.
Scanaţi frotiul în zigzag examinând şi centrul şi părţile laterale ale lamei de sticlă. Găsiţi
astfel 100 de leucocite consecutive şi identificați‐le pe baza caracterelor morfologice.
Notaţi aceste leucocite identificate în tabelul lui Schilling. Treceţi câte 10
leucocite identificate în fiecare coloană.
La sfârșit curăţaţi spaţiul de lucru! Ştergeţi uleiul vărsat de pe orice porţiune a
microscopului sau masa de lucru. Asiguraţi‐vă că aţi închis flaconul de ulei de imersie.
NU CURĂŢAŢI obiectivul de imersie de ulei.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
REZULTATE
Adunaţi numărul de leucocite de pe fiecare coloană a tabelului lui Schilling. Exprimaţi
rezultatul în procente

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

INTERPRETAREA REZULTATELOR
Raportul normal între diferitele tipuri leucocitare:
metamielocit < 1 %
neutrofil nesegmentat 1‐2 %
neutrofil segmentat 55‐65 %
eozinofil 2‐4 %
bazofil 0‐1 %
limfocit 23‐35 %
monocit 4‐8 %

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Neutrofilia se referă la creşterea numărului de neutrofile în sângele periferic. Cea mai
comună cauză a neutrofiliei este infecţia bacteriană. La fel, numărul de neutrofile creşte
în orice inflamaţie acută şi poate fi cauzat şi de boli maligne.

-Devierea la stânga înseamnă prezenţa în sânge în proporţii crescute a neutrofilelor

tinere, mai puţin diferenţiate. Acesta în general reflectă eliberarea timpurie, prematură
a celulelor mieloide din măduva osoasă, locul de generare a neutrofilelor.

-Devierea la dreapta înseamnă prezenţa în sînge a neutrofilelor îmbătrânite,

hipersegmentate,reflectând eliberarea inadecvată sau producţia insuficientă a neutrofilelor

-Neutropenia se referă la un număr anormal de scăzut de neutrofile. Poate fi cauzat de

diverse condiţii, de exemplu producţie scăzută în măduva osoasă sau infecţii virale.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.