LP 9

I. Analiza macroscopica a produselor vegetale ce contin cumarine

Produs vegetal: Meliloti herba
Specie:
Familie:
Denumire populara:

Aspect:

Dimensiuni:

Culoare:

Gust:

Miros:

Produs vegetal: Ammi majoris fructus

Specie:
Familie:
Denumire populara:

Aspect:

Dimensiuni:

Culoare:

Gust:

Miros:

Produs vegetal: Ammi visnagae fructus

Specie:
Familie:
Denumire populara:

Aspect:

Dimensiuni:

Culoare:

Gust:

Miros:

Produs vegetal: Angelicae radix

Specie:
Familie:
Denumire populara:

Aspect:

Dimensiuni:

Culoare:

Gust:

Miros:

II. Extractia si identificarea derivatilor flavonoidici

Produsul vegetal pulverizat (0,2 g) se extrage cu metanol (10-15 ml), prin
refluxare, in 3 reprize a cte 10 minute fiecare. Pe extractele metanolice reunite, obtinute
dupa racire si filtrare (prin vata), se executa reactii de identificare pentru derivatii
flavonoidici.
A. Reactii imprimate de nucleul benzopiranic
1. Reactia Shibata (reactia cianidinei / cianidolului)
OH

OH
OH

HO

OH

HO

Mg / Zn
OH
OH

HCl conc.

OH

OH
cianidol
cianidol
- rosu-

cvercetol
cvercetol

- galben -

-rosu-

-galben-

3 - 4 ml extract metanolic se trateaza cu 0,5 ml acid clorhidric conc. si cu putina

pulbere sau 1-2 fragmente de span de magneziu. Aparitia in timp a unei coloratii rosii
indica prezenta flavonolilor. Coloratia portocalie este caracteristica flavonelor, iar cea
rosie-violacee flavanonelor.

2. Fuziunea alcalina
OH
OH
HO

HO

O
KOH 50-70%
OH
OH

cvercetol
cvercetol

OH

OH

OH

130

OH
floroglucina
floroglucina

HOOC
ac. protocatehic
protocatehic
ac.

3. Reactia cu acizii minerali concentrati

HO

HO

R
OH

OH
OH

OH

OH

sarede
deflaviliu
flaviliu
sare

flavonol
flavonol

B. Reactii imprimate de oxidrilii grefati pe nucleul benzopiranic

1. Reactia citro-borica (reactia Wilson)
flavonol + reactiv citro-boric fluorescenta galben-verzuie
Reactiv citro-boric: solutie 5% acid citric in acetona anhidra saturata cu acid
4% metanol
2. Reactia oxalo-borica (reactia Taubock)
flavonoli + acid boric + acid oxalic fluorescenta galben-verzuie
HO

O
4

OH

HO

R
3

OR 1

O
B

CO

CO

CO

O
CO

3. Reactia cu metale plurivalente (AlCl3) coloratie galben intens

HO

O
4

OH

HO

O
4

O
Al
Cl

Cl

O
Al

Cl

Cl

R
3

OR 1

boric +

2-3 ml extract metanolic se trateaza cu 2-3 ml solutie apoasa de AlCl 3 2,5%. Reactia
este pozitiva, daca coloratia galbena se intensifica si apare si o fluorescenta galbenverzuie sau albastra in UV.

C. Reactii imprimate de oxidrilii grefati pe nucleul fenolic

1. Reactia de reducere a ionilor metalici cu urmatorii reactivi:
R. Tollens

R. Fehling

R. Folin

2. Reactia de formare a fenolatilor

OH

ONa
OH

HO

ONa
HO

NaOH
OH
OH

O
cvercetol

cvercetol
- galben deschis-galben deschis-

OH
OH

fenolat
fenolat
- galben intens-

-galben intens-

3 - 4 ml extract metanolic se dilueaza cu apa distilata, in cazul unei coloratii

intense initiale a acestuia. Se imparte volumul rezultat in parti egale in 2
eprubete. Intr-una din eprubete se aduc ctiva ml de hidroxid de sodiu 10% si se
compara coloratia obtinuta cu cea a solutiei din eprubeta martor. Intensificarea
coloratiei galbene in solutia metanolica alcalinizata evidentiaza prezenta
compusilor flavonici.

Analiza cromatografica pe strat subtire (C.S.S.) a flavonoidelor

Suport: Kieselgel 60 Fertigplatten (Merck) (10 20)
Solvent: acetat de etil-acid formic-acid acetic glacial-apa (100:11:11:27)
Revelare: examinare in lumina U.V.
Etaloane: rutozida, cvercetol
Proba: extract metanolic din Sophorae flos
Pregatirea probei: Extractul metanolic din Sophorae flos se aduce la sec intr-o capsula,
pe baia de apa, iar reziduul obtinut se reia cu putin metanol pentru spotare pe placa
cromatografica.