incipiul metodei: un inocul standardizat al tulpinii testate este insamantat intr-un gradient

discontinuu de concentratii ale antibioticului, fie in placi cu mediu agarizat, fie in tuburi cu bulion
nutritiv. Dupa incubarea adecvata, se citeste valoarea C.M.I. prin observarea macroscopica a
tuburilor: in primele tuburi, cu concentratii mari de antibiotic, cresterea culturii nu este vizibila,
microorganismele fiind omorate sau inhibate in prezenta antibioticului. Concentratia de antibiotic
corespunzatoare tubului cu cea mai mica concentratie, care inhiba cresterea vizibila a culturii
microbiene, reprezinta valorea C.M.I. (mcg/ml) pentru antibioticul respectiv. In tuburile urmatoare,
inclusiv tubul martor de crestere, mediul se tulbura ca urmare a cresterii microbiene. In tubul martor
de sterilitate, obligatoriu mediul trebuie sa ramana steril (limpede), iar pe placile cu mediu agarizat,
coloniile lipsesc. Determinarea C.M.I. se utilizeza pentru stabilirea dozei terapeutice si a caii de
administrare in cazul infectiilor severe, supravegherea evolutiei rezistentei bacteriilor la antibiotice,
cuantificarea activitatii bactericide a substantelor antimicrobiene. Aceasta metoda permite si aflarea
valorii C.M.B. (concentratia minima bactericida) pentru antibioticul testat. Pentru aceasta, se
preleveaza 0.01 ml sau 0.1 ml din tuburile utilizate pentru tehnica dilutiilor in mediu lichid (din tubul
la care s-a stabilit valoarea C.M.I. si din tuburile anterioare care prezinta concentratii superioare de
antibiotic) si se insamanteaza pe suprafata unor placi cu mediu solid nesuplimentat cu antibioticul
testat. Dupa incubare, se va observa dezvoltarea microorganismelor la dilutia corespunzatoare C.M.I.
Valoarea C.M.B. este data de cea mai mica concentratie de antibiotic care reduce numarul coloniilor
pana la 99.9%.

2.2. Metoda E-test

La ora actuala, exista variante ale metodei difuzimetrice pentru determinarea valorii C.M.I.. O astfel
de varianta este E-testul (Epsilometer test), ce utilizeaza benzi impregnate cu diferite antibiotice ale
caror concentratii variaza exponential si sunt inscrise pe banda respectiva. Zona de inhibitie a
cresterii microorganismului testat are aspect de elipsa, al carei diametru variaza direct proportional
cu gradientul de concentratie a antibioticului difuzat in mediu, diminuandu-se odata cu scaderea
concentratiei astfel ca, la o anumita valoare, zona de inhibitie a cresterii va intersecta banda,
concentratia inscrisa pe banda la acest nivel indicand valorea C.M.I.

3. Controlul de calitate in testarea sesibiltatii la antibiotice

Obiective:

- QC (quality control)are drept scop sa asigure:

- precizia si fiabilitatea tehnicii de testare a sensibilitatii

- performanta reactivilor utilizati

- performanta personalului care efectueaza testele.