Machine Translated by Google

Capitolul 23

Rolul senescenței în hepatic

Boli
R. Pacheco-Rivera1 , J. Arellanes-Robledo2 , MC Garcı́
a de Leo´ n2 , M. Shibayama1 i J. Serrano-Luna1
1 2
Cinvestav-IPN, Mexico City, Mexic; Instituto Nacional de Medicina Genómica, Mexico City, Mexic

INTRODUCERE (Blagosklonny, 2003; Chen et al., 2001; Cheung și Deng, 2008;

Parrinello și colab., 2003; Sahin și DePinho, 2012; Sarkisian și
La mamifere, îmbătrânirea este un proces complex care afectează colab., 2007; Sedelnikova și colab., 2004; Serrano și colab.,
majoritatea funcțiilor biologice și are rădăcinile în modificări 1997).
caracteristice atât în celule, cât și în biomolecule. Îmbătrânirea
CS a fost definit pentru prima dată cu peste cinci decenii în
umană este asociată cu o scădere treptată a funcțiilor fiziologice
urmă de Hayflick și Moorhead (1961) ca un fenomen care
ale organismului, ceea ce duce la o susceptibilitate crescută la boli
limitează capacitatea proliferativă a fibroblastelor umane de
și moarte (Badiola et al., 2015). Deși s-au făcut eforturi mari
cultură normală, ducând la eventuala întrerupere a ciclului său
pentru a descoperi cauzele îmbătrânirii, procesul de îmbătrânire
celular, lăsând în același timp activitatea metabolică intactă.
rămâne incomplet înțeles (Vijg și Campisi, 2008). Cu toate acestea,
Pentru a contextualiza aceste descoperiri ale lui Hayflick și
există un consens general că îmbătrânirea este asociată cu
Moorhead, este util să ne amintim că în 1881, biologul german
acumulări progresive de leziuni celulare. O serie de factori de stres
August Weismann a sugerat: „moartea se datorează în
au fost descriși ca contribuind la această deteriorare a celulelor,
detrimentul țesutului cauzat de diviziunea celulară limitată, care
inclusiv reacții oxidative, scurtarea telomerilor și o scădere a
duce la afectarea funcțiilor organelor. ” (Shay și Wright, 2000).
reparării ADN-ului, care pot declanșa o serie de evenimente
Acest concept a fost infirmat ani mai târziu de către laureatul
celulare cunoscute sub numele de răspuns la deteriorarea ADN- Nobel Alexis Carrel. La Institutul Rockefeller (1912), Carrel și
ului (DDR) (Meeker și Argani, 2004). ). Dacă ADN-ul este reparat,
Ebeling au început o cultură de celule cardiace de pui
atunci proliferarea este stabilită. Dimpotrivă, dacă daunele devin
embrionare, pe care au putut să o păstreze timp de peste 20 de
ireparabile, celula menține ciclul celular în așteptare. Acest lucru
ani (Campisi, 2014; Carrel, 1914; Ebeling, 1919, 1922; Shay și
poate duce la moarte prin apoptoză sau o afecțiune cunoscută sub
Wright, 2000) explicând categoric creșterea nelimitată a culturii.
numele de senescență celulară (CS). CS se caracterizează printr-o
Cu toate acestea, mediul de cultură utilizat în aceste studii s-a
pierdere ireversibilă a potențialului proliferativ, precum și
dovedit în cele din urmă a fi preparat cu un extract de embrion
modificări specifice în morfologia celulară și expresia genelor și
de pui contaminat cu celule vii (Campisi, 2014; Shay și Wright,
diferă de fenomenul de repaus celular (d'Adda di Fagagna, 2008;
2000). Acest lucru ar explica categoric succesul creșterii sale
Rossiello et al., 2014). Deși ambele stări implică o întrerupere a
nelimitate.
ciclului celular, repausul apare de obicei în celulele sănătoase care
Acest fapt nu a fost niciodată admis de Carrel care a mai propus
se pot autodiviza în condiții specifice (Badiola și colab., 2015;
că „boala și moartea sunt cauzate în principal de anumite
Blagosklonny, 2014). CS este considerat unul dintre cei mai
fluide, umori pe care le-a numit el, care pot fi modificate
importanți contributori la îmbătrânire (Burton și Krizhanovsky,
progresiv odată cu vârsta și pot afecta organismul”.
2014). Senescența este rezultatul diferitelor modificări degenerative
Ani mai târziu, Hayflick și Moorhead au efectuat o serie de
(scurtarea telomerilor, instabilitatea cromozomială, deteriorarea
experimente în care au cultivat simultan un număr egal de
ADN-ului, stresul oxidativ și producția de ROS, expunerea la
fibroblaste normale de la băieți (celule în pasajul 40 al
oncogene etc.), care induc o întrerupere ireversibilă a ciclului
populației) și fete cu puține duplicări (celule în pasajul 10). Ca
celular.
control, au folosit o cultură de populații de celule mixte. Când
celulele masculine s-au oprit

Fiziopatologia ficatului. http://dx.doi.org/10.1016/B978-0-12-804274-8.00023-0 295

Copyright © 2017 Elsevier Inc. Toate drepturile rezervate.
Machine Translated by Google
296 SECȚIUNEA j II Fiziopatologia ficatului
divizându-se, cultura mixtă a fost examinată și au observat că
numai celulele feminine au continuat să se dubleze în cultură.
Acest studiu clasic a oferit dovezi convingătoare că celulele au
capacitatea de a-și „aminti” vârsta în cultură (numărul de duplicări),
chiar și atunci când sunt înconjurate de celule mai tinere; erorile
tehnice potențiale, cum ar fi prezența unui virus contaminant, au
fost argumente puțin probabile pentru a explica de ce numai
celulele masculine au încetat să se reproducă.
Ca atare, Hayflick și Moorhead (1961) au demonstrat, prin
experimente controlate și bine concepute, că fibroblastele umane
normale dintr-o cultură s-au duplicat de un număr finit de ori,
fenomen care s-a întâmplat când s-a atins faza III a culturii (termen
care înseamnă că replicarea celulară apare diminuată și într-un
stadiu final) (Hayflick, 1965). Aceste rezultate au adus controverse
lucrărilor lui Carrel și Hayflick. Cu toate acestea, deoarece
încercările unor cercetători de a repeta experimentele lui Carrel
au eșuat în mod repetat, modelul lui Hayflick a fost în cele din
urmă favorizat.
În urma observațiilor lor, Hayflick și Moorhead au început să
speculeze existența unor factori celulari care ar putea fi pierduți
pe parcursul diviziunilor consecutive și astfel să limiteze proliferarea
normală a țesuturilor, observând că un astfel de fenomen ar putea
fi asociat cu procesul de îmbătrânire (Collado et al., 2007). ).
Hayflick a sugerat că numărul de duplicări pe care le poate
atinge o populație de celule normale poate fi expresia in vitro a
longevității sale potențiale maxime. În plus, totuși, astfel de
niveluri de duplicare nu sunt niciodată atinse in vivo din cauza
modificărilor moleculare din cultură care marchează pierderea
iminentă a capacității de replicare, care într-un organism viu ar
crește boala și moartea (Collado et al., 2007; Hayflick, 1985; Shay
și Wright, 2000). Mai mult, CS in vitro este de obicei însoțită de
modificări morfologice, deoarece celulele devin mari, plate,
vacuolizate și ocazional multinucleate. Cu toate acestea, in vivo,
celulele senescente își păstrează morfologia normală (Munoz-
Espin și Serrano, 2014).
În prezent, știm că poate exista o legătură între numărul de
diviziuni ale unei linii celulare individuale și pierderea ADN-ului
telomeric (Moyzis și colab., 1988). Telomerii sunt structuri
specializate care se găsesc la capetele cromosomelor care permit
aceste terminale. , la unele specii, să se combine cu membrana
nucleară. Telomerii au un rol important în menținerea integrității
cromozomiale și a stabilității genomice, deoarece împiedică
contopirea cromozomilor. Când o celulă se divide, telomerul ei este
scurtat, limitând capacitatea de proliferare a celulei. Într-adevăr,
limita Hayflick este numărul de diviziuni necesare pentru a atinge
această stare critică (Hayflick, 1965; Ishikawa, 2000).
Elizabeth Blackburn (1990) a determinat că telomerele ciliatelor
protozoare Tetrahymena thermophila constau din repetări de
nucleotide TTGGGG. În mod similar, în 1988, Robert Moyzis a
raportat că telomerii din celulele umane
constau din mii de repetări ale secvenței TTAGGG. Descoperirea
acestei secvențe a permis măsurători ale lungimii telomerilor
umani. Studiul telomerilor din diferite țesuturi a fost centrat pe
corelația dintre dimensiunea telomerilor, îmbătrânirea și procesele
de deteriorare a celulelor. Cu toate acestea, lungimea medie a
telomerilor în celulele unui individ este eterogenă.
Senescența replicativă, care depinde de tipul celulei, precum
și de specie și vârstă, implică alterarea funcției celulare și oprirea
ireversibilă a proliferării celulare, controlată de gene multiple și
limitează numărul de diviziuni celulare (Cristofalo și Pignolo, 1993;
Pignolo). i colab., 1993; Stanulis-Praeger, 1987).
Telomeraza, enzima responsabilă cu menținerea lungimii
telomerilor, a fost descoperită de Greider și Blackburn (1985,
1987). Telomeraza poate preveni eroziunea telomerilor și poate
proteja telomerii, deoarece conține un mucegai ARN care servește
la sinteza telomerilor (Collado și colab., 2007). Celulele somatice,
cu unele excepții, nu se divid la infinit, deoarece nu exprimă
telomeraza (Holt și colab., 1997; Prowse și Greider, 1995).
Evenimentele de instabilitate genomică declanșate de
prezența telomerilor disfuncționali, sunt asociate cu tranziția
leziunilor benigne la cancer malign; prin urmare, există o propunere
că patologiile care conduc la o proliferare celulară rapidă pot
favoriza formarea carcinomului (Meeker și Argani, 2004).
Mecanismul CS este antagonic pleiotrop, deoarece promovează
supraviețuirea la vârsta fragedă, limitând în același timp
dezvoltarea cancerului și restrângând longevitatea, determinând
acumularea de celule senescente (Kirkwood și Austad, 2000).
Senescența prematură indusă de stres, descrisă inițial pentru
fibroblastele diploide normale, apare ca răspuns la deteriorarea
nespecifică a ADN-ului întregului genom, cauzată de stresul
oxidativ, supraexprimarea oncogenelor sau radiațiile ionizante.
Astfel de efecte sunt imposibil de prevenit prin alungirea telomerilor
(d'Adda di Fagagna, 2008; Naka și colab., 2004; Pazolli și Stewart,
2008).
Studii recente au arătat că o populație de celule în creștere
poate fi ținta combinării diferitelor presiuni fiziologice care
acționează simultan. Astfel de presiuni activează căile de
semnalizare conduse de supresorul tumoral p53 și proteina
retinoblastomului (Rb).
Fenotip senescent
O oprire a ciclului celular duce nu numai la absența creșterii;
aceste celule dobândesc, de asemenea, caracteristici fenotipice
complexe care demonstrează schimbări profunde la nivel de gene
care le supun devenirii senescente. Ei adoptă o formă aplatizată
mărită (Hayflick, 1965) generată de o expansiune a compartimentului
lizozomal (Lee et al., 2006) datorită masei lor lizozomale crescute
(Dimri et al., 1995) și prezintă niveluri ridicate de senescență
asociate
Machine Translated by Google
Rolul senescenței în bolile hepatice Capitolul | 23 297
Activitatea b-galactozidazei (SA-bGal) (Dimri et al., 1995). Pe lângă
autofagie și un fenotip secretor foarte proinflamator (SASP) (Coppe
și colab., 2008; Freund și colab., 2010; Kuilman și colab., 2010),
majoritatea acestor celule exprimă p16INK4a , un inhibitor CDK,
care este nuși
este prezent
colab., înBrenner
1996; mod normal în celulele
și colab., repaus (Alcorta
1998; Serrano și
colab., 1997). p16INK4a își mărește expresia în timp (Nielsen și
colab., 1999) și este legat funcțional de o reducere a tulpinii
celulare în unele țesuturi în timpul îmbătrânirii (Janzen și colab.,
2006). Acești supresori tumorali, p16, p21 și p53, pot fi utilizați
ca markeri de senescență.
Formarea structurilor heterocromatine cunoscute sub
denumirea de focare heterocromatine asociate cu senescența
(SAHF) este o altă caracteristică determinantă, generată de
p16INK4a , atunci
Rb și când stimulează
provoacă tăcereactivarea
a genelorsupresoarelor
inductoare detumorale
proliferare (Narita și colab., 2003). Mai mult, celulele a căror
senescență se datorează semnalizării constante DDR formează
focare nucleare numite ADN-SCARS, segmente de ADN cu variații
de cromatină care conțin telomeri disfuncționali sau focare induse
de disfuncția telomerică și care stimulează procesul de senescență
(Rodier și Campisi, 2011).
Printre efectele sale dăunătoare, răspunsul supresor tumoral a
fost asociat cu limitări legate de vârstă asupra capacității țesuturilor
de a se regenera și a celulelor stem de a prolifera (Janzen și
Scadden, 2006; Krishnamurthy și colab., 2006; Molofsky și colab.,
2006) . Cu toate acestea, acum știm că fenotipul secretor asociat
senescenței, sau SASP, indus în celule, implică mult mai mult decât
o încetare a diviziunii celulare, întrucât SASP poate avea efecte
benefice sau dăunătoare, în funcție de contextul fiziologic.
Datorită cantității mari de chemokine secretate, senescente
celulele pot atrage potențial diferite subpopulații de celule imune,
care pot fi activate și pot participa la un răspuns imun, contribuind
posibil la procesul de supraveghere imună, limitând tumorigeneza
și reglând fiziologia normală a țesuturilor (Coppe et al., 2008;
Freund et al. , 2010). În cele din urmă, un efect benefic al CS este
că ajută la repararea țesuturilor, recuperând închiderea întârziată
a plăgii și lipsa de diferențiere a miofibroblastelor (Campisi și
colab., 2011; Demaria și colab., 2014).
CĂI DE SENESCENȚĂ
La eucariotele superioare, proteinele supresoare tumorale Rb și
p53 sunt gardieni esențiali ai CS. Acest fenomen poate fi declanșat
direct de deteriorarea ADN-ului și de genele onco care pot provoca
o rată de senescență prematură. De asemenea, ROS poate provoca
daune directe ADN-ului și poate accelera scurtarea telomerilor,
ducând la senescență. Acești stimuli determină activarea căilor
efectoare ale senescenței.
Cele mai studiate căi sunt căile p53-p21 și p16-Rb. Locusul INK4/
ARF permite exprimarea a două proteine importante, inclusiv
p16INK4a și ARF sau p14 (Fig. 23.1). În multe tipuri de cancer, p53
se pierde deoarece este inactiv sau gena TP53 are mutații. Ca
factor de transcripție, p53 transcrie genele țintă pentru a regla
diferite procese biologice celulare, inclusiv oprirea ciclului celular,
apoptoza, senescența, metabolismul energetic și apărarea
antioxidantă, pentru a preveni tumorigeneza.
În timpul senescenței, p53 este reglat de DDR, mediat de
proteinele ATM/ATR și Chk1/Chk2 care sunt stabilizate prin
fosforilarea p53. Rupere în coloana vertebrală a ADN-ului de fosfat
de zahăr care poate duce la expunerea la
FIGURA 23.1 Locus INK4A/ARF.
ARF și p16 sunt codificate de acest
locus, ARF nu permite legarea
MDM2 la p53 conducând la
stabilizarea expresiei p53 și p21
și, în plus, p16 se leagă de CDK4/6
împiedicând fosforizarea Rb și
separarea E2F-urilor.
Machine Translated by Google
298 SECȚIUNEA j II Fiziopatologia ficatului
rupturile monocatenar sau generarea de rupturi duble catenare
ADN (DSB) sunt activatori ai DDR. Acestea sunt evenimente
periculoase deoarece provoacă instabilitate cromozomială. ADN-ul
monocatenar și DSB-urile sunt detectate de complexe specializate
care recrutează și activează două proteine kinaze, ATR și ATM,
respectiv la locurile leziunilor ADN. Recrutarea oricăreia dintre
aceste kinaze în leziune determină fosforilarea histonei H2AX
(ɣH2AX). ɣH2AX este esențial pentru stabilizarea complexelor de
reparare a ADN-ului și pentru promovarea reparării eficiente
(Celeste și colab., 2002). Cu toate acestea, p53 rămâne o țintă cheie
a căii DDR. Fosforilarea p53 multisite mediată de DDR reduce
legarea MDM2 la molecula p53, care, la rândul său, permite
înlocuirea fragmentelor de ubiquitină prin acetilare, rezultând
stabilizarea p53 și activarea completă (Lavin și Gueven, 2006).
Calea ATR previne legarea MDM2 la p53, permițând stabilizarea
p53, care, la rândul său, transactivează p21, o țintă transcripțională
importantă a p53, pentru a induce senescența dependentă de p53.
p21 este un inhibitor al ciclului celular care promovează inhibarea
CDK/ciclinei și oprirea ciclului celular în faza G1/S, fapt care se
corelează bine cu ratele de creștere în scădere observate în
culturile senescente.
În celulele umane, pierderea p21 este suficientă pentru a preveni
senescența; cu toate acestea, în fibroblastele embrionare de
șoarece, lipsa p21 nu promovează senescența (Carnero și Beach,
2004; Pantoja și Serrano, 1999). Aceste constatări arată că există
cel puțin un efector necesar în aval în celulele necesare pentru a
induce oprirea p53 în timpul senescenței. Alți efectori p53, cum ar
fi 14-3-3s și GADD45, precum și reglarea în jos a myc, sunt
potențial efectori redundanți ai senescenței (Ho și colab., 2005).
Mai mult, s-a raportat că PAI-1 (inhibitorul activatorului de
plasminogen-1) și alte gene țintă p53 sunt implicate în senescența
dependentă de p53 (Kortlever și colab., 2006).
Scurtarea telomerilor, stresul celular sau Ras oncogen pot, de
asemenea, activa p53 și promova CS, ceea ce limitează
evenimentele potențiale sau excesive de semnalizare și
transformare. Inhibarea funcției p53 potențează în mod
substanțial durata de viață a mai multor tipuri de celule în cultură.
Activitatea de scurtare a telomerilor controlează deteriorarea ADN-
ului asociată cu instabilitatea genomică și permite activarea p53 in vivoantiproliferative,
În majoritatea tipurilor de celule, activarea p53 este crucială pentru
inițierea răspunsului de senescență în urma leziunilor ADN. În
unele celule, p53 este, de asemenea, important pentru menținerea
senescenței în oprirea creșterii. În alte celule, p53 este necesar
doar pentru a stabili oprirea creșterii senescenței, care ulterior
devine ireversibilă și independentă de p53 (Beausejour și colab., 2003).
Un alt supresor tumoral implicat în senescență este p16. p16,
care a fost descoperit de Serrano și colab., în 1993, este codificat
de locusul INK4a/ARF și se leagă de ciclinele CDK4/6, prevenind
fosforilarea proteinelor familiei Rb (Fig. 23.1). În celulele
nesenescente, p16 este prezent
în concentrații scăzute, promovând ciclina D să se lege de CDK4/6
și permite fosforilarea Rb, care eliberează factorul de transcripție
E2F pentru a permite progresia ciclului celular. Când p16 este
prezent, se leagă de CDK4/6 pentru a bloca fosforilarea Rb,
conducând la oprirea ciclului celular și CS (Serrano și colab., 1993).
Rb este, prin urmare, o genă supresoare tumorală importantă, iar
inactivarea ei în tumorile umane prin inhibarea p16 are un impact
pozitiv asupra reprogramării nucleare; creșterea atât a numărului
de celule reprogramate, cât și a cineticii dediferențierii în celulele
în proliferare (Li et al., 2009). expresia p16 este de asemenea
reglată de Rb; deoarece fosforilarea Rb are ca rezultat creșterea
expresiei p16 care inhibă CDK4/6, rezultând niveluri crescute de Rb
hipofosforilat, care la rândul său duce la scăderea expresiei p16 (Li
și colab., 1994). În unele cazuri, expresia p16 este crescută în
celulele Rb negative, indicând alte mecanisme de reglare a p16
(Rayess et al., 2012). S-a demonstrat că proteina Rb este implicată
în focarele heterocromatine asociate senescenței (SAFH) ca răspuns
la senescența indusă de oncogene în celulele primare (Narita și
colab., 2003). Rb a fost, de asemenea, raportat a fi un factor cheie
în senescența indusă de HMG2 în celulele WI38, indicând un alt
mecanism de ajustare asociat cu Rb în senescență (Shi et al., 2013).
În îmbătrânire există o expresie crescută a p16 care este
independentă de scurtarea telomerilor. Mai mult, s-a demonstrat
că expunerea la radiații ionizante sau agenți de deteriorare a ADN-
ului crește, de asemenea, expresia p16, ducând la senescență
(Meng și colab., 2003; Wang și colab., 2006). Calea p16/Rb
colaborează cu cascada de semnalizare mitogenă prin inducerea
ROS, care activează protein kinaza C delta (PKCD), astfel încât
producția de ROS are ca rezultat un feedback pozitiv între ROS și
PKC delta care permite inducerea ireversibilă a ciclului celular
( Takahashi și colab., 2006). Toate aceste date sugerează că p16
joacă un rol major în inducerea și stabilirea senescenței (Ohtani
și colab., 2004).
Serrano i colab. (1997) au arătat că semnalele de creștere
aberante furnizate de formele active constitutiv de Ras oncogen
induc rapid expresia p16 fără scurtarea telomerilor atât în celulele
umane, cât și în cele de rozătoare. Introducerea Ras oncogen în
celulele normale determină exprimarea mai multor proteine
și in vitro. inclusiv p16 și p53 (Land și colab., 1983). Prin
urmare, se crede că celulele normale pot avea un senzor care
detectează semnale de creștere aberante, precum și numărul de
diviziune celulară sau activarea genelor onco și care poate induce
expresia p16 (Ohtani și colab., 2004).
Pe de altă parte, s-a raportat că p16 este activat ca răspuns la
stresul oxidativ, posibil prin p38-MAPK (un membru al familiei
protein kinazelor activate de stres). Senescența este indusă de
activarea secven ială a semnalizării MEK kinazei urmată de
acumularea MAP kinazelor MKK3 și MKK6, rezultând în
Machine Translated by Google
Rolul senescenței în bolile hepatice Capitolul | 23 299
activarea p38 (Iwasa și colab., 2003). Deși această cale este
independentă de calea de deteriorare a ADN-ului p53, activarea
constitutivă a Raf-MEK-ERK poate, de asemenea, induce p53 și
poate produce o reglare în sus a p21 (Lin et al., 1998), probabil
datorită inducerii crescute a Ras în timpul oxidativ . stres, cu
afectarea concomitentă a ADN-ului și răspunsul ulterior la această
deteriorare (Lee și colab., 1999).
STRES OXIDAT ȘI CELULA HEPATICĂ
SENESCENZA
Chiar dacă viața a început într-un mediu anoxic, în timp, nivelurile
de oxigen au crescut treptat, iar mai târziu oxigenul molecular a
devenit o cerință, deoarece viața s-a adaptat la disponibilitatea
oxigenului (Ye et al., 2015). Acest proces de adaptare a fost un pas
critic în evoluție, deoarece a promovat utilizarea noi a căilor de
semnalizare moleculară care au fost anterior implicate în procesele
anoxice pentru a face față biotoxicității speciilor reactive derivate
din oxigen molecular (Rees și Howard, 2003). Astfel, ca derivați
inerenți ai acumulării de oxigen, speciile reactive de oxigen (ROS)
au devenit, de asemenea, o componentă critică în evoluția vieții,
deoarece efectele lor asupra căilor de semnalizare redox
influențează mai multe procese fiziologice, inclusiv CS. În această
secțiune, ne vom concentra atenția asupra rolului stresului oxidativ
asupra CS al ficatului.
Stresul oxidativ
Prin definiție, un radical liber conține un singur electron nepereche;
cu toate acestea, deși oxigenul molecular are doi electroni
nepereche în orbitali diferiți, nu este în sine un radical liber.
Astfel, termenul ROS se referă la un număr de molecule reactive
chimic derivate din oxigen molecular (Ye et al., 2015). ROS exercită
o gamă largă de efecte biologice, variind de la funcții de reglare
fiziologică la modificări moleculare și contribuie astfel la patogeneza și inducerea scurtării telomerilor (von Zglinicki). , 2002), care are
diferitelor boli (Yang și Lee, 2015). ROS sunt molecule foarte
reactive care conțin oxigen, cum ar fi anionul superoxid (O$ ) și
radicalul hidroxil (HO), precum și derivați ai oxigenului care nu
conțin electroni nepereche, cum ar fi peroxidul2deoxigenul
hidrogen (H2O2),
singlet
(1 O2) și acid hipocloros (HOCl). Ele sunt produse în principal de
lanțul respirator mitocondrial, citocromul P450 și auto-oxidarea
substraturilor endogene, cum ar fi proteinele heme, catecolaminele
și chinonele, printre altele (Sid et al., 2013). În condiții fiziologice
normale, celulele sunt protejate de stresul oxidativ printr-o serie de
antioxidanți endogeni care mențin un echilibru între producția de
prooxidanți și capacitatea antioxidantă. Un dezechilibru al stresului
oxidativ apare atunci când antioxidanții intracelulari nu sunt capabili
să neutralizeze prooxidanții
precum ROS. Acest lucru are ca rezultat mai multe modificări
oxidative care pot influența soarta celulelor (Bouayed și Bohn, 2010).
Datorită naturii lor extrem de reactive, ROS poate modifica diferite
căi de semnalizare și poate modula diferite procese fiziologice și
biochimice, cum ar fi expresia genelor, adeziunea celulară,
metabolismul celular, ciclul celular și moartea celulară și
senescența, printre altele; Ca rezultat, stresul oxidativ a fost
confirmat a fi un numitor comun al unui număr de boli, inclusiv boli
hepatice (Alfadda și Sallam, 2012). S-a propus că daunele induse
de stresul oxidativ pot reprezenta o legătură comună între
diferitele forme de boli hepatice cronice. Această propunere este
susținută de faptul că radicalii liberi sunt jucători cheie nu numai
în funcționarea normală a ficatului, ci și în geneza și progresia
steatozei hepatice, fibrozei, cirozei și carcinomului hepatocelular
(HCC) (Ha et al., 2010; Mari et al. al., 2010). Prin urmare, nu este
surprinzător faptul că stresul oxidativ este strâns asociat cu
patogeneza bolilor hepatice. Unul dintre motivele pentru care
stresul oxidativ este o componentă inerentă a ficatului este faptul
că activitatea multor enzime implicate în lipogeneză, oxidarea
acizilor grași, colesterolul și metabolismul fosfolipidelor sunt
reglate de starea redox a parenchimului hepatic, care poate
influențează echilibrul redox al micromediului celular (Serviddio et
al., 2013). Astfel, în urma leziunilor hepatice de către diferiți factori
etiologici (Parola și Robino, 2001), SRO produse în mod endogen
ar putea avea un impact acumulativ, așa cum se evidențiază în
principal prin creșterea peroxidării lipidelor, care, la rândul său,
joacă un rol critic în progresia bolii cronice. boli hepatice (Nair et
al., 2010).
Mai multe studii au propus producția de ROS ca unul dintre
principalii activatori și stabilizatori ai senescenței celulare.
Deși această propunere nu este complet elaborată, există dovezi
care demonstrează o contribuție directă a ROS asupra ambelor căi
DDR și activate de redox (Chen și colab., 1995; Lu și Finkel, 2008)
ca rezultat o activare DDR și senescență. Până în prezent, atât
studiile experimentale, cât și cele clinice au susținut puternic
asocierea senescenței celulare cu bolile hepatice cronice. În afară
de structurile hepatice specifice parenchimatoase sau non-
parenchimatoase, alte studii au evidențiat apariția CS în două
decoruri paradoxale: (1) ca supresor tumoral și (2) ca promotor
tumoral; și în două procese fiziologice: (1) îmbătrânirea și (2)
repararea țesuturilor (Krizhanovsky et al., 2008; Rodier și Campisi,
2011). Faptul că CS este implicat în multiple procese fiziologice îi
conferă o complexitate care poate fi eventual elucidată prin
descifrarea mecanismelor care induc activarea lui, cum ar fi stresul
oxidativ. În acest sens, dovezile au arătat că producția crescută de
ROS prin disfuncția mitocondrială este declanșată după o DDR și
activarea ulterioară a CS, care la rândul său este o consecință a
activării p21. Aceste secvențe de evenimente mențin a
Machine Translated by Google
300 SECȚIUNEA j II Fiziopatologia ficatului
buclă de feedback dinamic care este la fel de necesară pentru
stabilitatea opririi creșterii în timpul stabilirii fenotipului senescent
(Passos et al., 2010). Un fenomen similar a fost observat în timpul
activării căii p16/Rb, care induce niveluri intracelulare ridicate de
ROS, activând astfel PKCD, care, la rândul său, promovează generarea
ulterioară de ROS pentru a stabili o buclă de feedback pozitiv
pentru a susține semnalizarea ROS-PKCD (Takahashi și colab. .,
2006). Alte studii au raportat că activarea căilor Ras, p21 și p53
sunt, de asemenea, strâns legate de producția crescută de ROS
(Lee și colab., 1999; Macip și colab., 2002, 2003). Faptul că, în
aceste rapoarte, tratamentul cu N-acetilcisteină a blocat oprirea
ciclului celular și, prin urmare, CS a permis investigatorilor să
concluzioneze că acumularea de ROS este un mediator important
al CS și, de asemenea, a propus că ROS sunt agenți cauzali ai
acestui proces. Nu există nicio îndoială că aceste dovezi converg
în concept și că ROS joacă un rol cheie în procesul CS; cu toate
acestea, dacă ROS sunt fie o consecință, fie un actor cauzal în CS
este încă o chestiune de discuție care ar trebui clarificată.
Specii reactive de oxigen și hepatice
Boli
O varietate de surse de radicali liberi se găsesc în ficat și pot fi
clasificate ca mitocondriale, în principal din Complexele I și III,
și extra mitocondriale, cum ar fi citocromul P450, xantinoxidaza,
oxid nitric sintaza și NADPH oxidaza. În timp ce neutrofilele și
celulele Kupffer sunt producătorii primari de radicali liberi,
principalele locuri de eliberare a ROS în hepatocite sunt sistemul
citocromului P450 și mitocondriile. O sursă mecanicistă importantă
de ROS este metabolismul lipidic, care este dependent de echilibrul
redox al ficatului, iar alterarea acestuia este strâns legată atât de
steatohepatita alcoolică, cât și de cea nealcoolică (Rolo et al., 2012;
Serviddio et al., 2013). Deși aceste surse multiple de ROS sunt
strict controlate în hepatocitele normale, în bolile hepatice poate
apărea o supraproducție de radicali liberi care depășesc apărarea
antioxidantă și poate induce leziuni hepatice (Serviddio et al.,
2013). Acest scenariu plasează ficatul ca o țintă continuă a stresului
oxidativ și a echilibrului redox. Astfel, nu este surprinzător faptul
că un număr tot mai mare de descoperiri au arătat o asociere
strânsă între bolile hepatice și producția de ROS (Rolo și colab.,
2012). Rapoartele clinice și experimentale au sugerat că debutul
CS ar putea fi un fenomen intrinsec încă de la începutul leziunii
hepatice, cum ar fi apariția nodulilor neoplazici (Paradis și colab.,
2001; Ramakrishna și colab., 2013). Această propunere se bazează
pe faptul că atât senescența replicativă, cât și cea prematură au
fost observate atât în celulele hepatice parenchimatoase, cât și în
cele neparenchimatoase (Kang și colab., 2011; Krizhanovsky și
colab., 2008; Schnabl și colab., 2003).
Folosind un model de leziuni hepatice care imită progresia
secven ială a HCC, de la fibroză la ciroză i HCC (Schiffer
et al., 2005), am confirmat că aspectul CS este intrinsec inițierii
leziunii hepatice, deoarece a fost observată o creștere cronologică
a CS de-a lungul progresiei HCC (Pacheco-Rivera et al., 2016). Deși
nu am determinat nivelurile de ROS în această investigație, faptul
că HCC a fost indus cu administrarea continuă de dietilnitrozamină,
un producător hepatotoxic și puternic de ROS (Verna și colab.,
1996), sugerează că aspectul cronologic al CS a fost însoțit de
inducerea persistentă a ROS . . Într-un studiu recent, Aravinthan et
al. (2015) au investigat rolul senescenței hepatocitelor în
dezvoltarea rezistenței la insulină. Folosind celule HepG2, ei au
demonstrat că tratamentul cu H2O2 a indus CS în ciuda stimulării
cu insulină. Acest fenomen a fost însoțit de o localizare nucleară
persistentă a FoxO1, un factor de transcripție care, printre altele,
promovează expresia genelor implicate în stoparea ciclului celular
și detoxifierea ROS. Mai mult, o creștere și o scădere a expresiei
transportatorilor de glucoză 2 și, respectiv, 4 (GLUT2 și GLUT4), a
fost propusă ca semnătură a senescenței, deoarece acest model a
fost găsit în HepG2 senescent, în țesutul hepatic cirotic uman și
în seturile de date privind bolile hepatice disponibile public. . Într-
un studiu diferit al aceluiași grup de cercetare, profilurile de
expresie genetică ale celulelor HepG2 supuse stresului oxidativ au
fost comparate cu seturi de date publice de microarray obținute
din probe cirotice umane, iar rezultatele lor au arătat că profilul de
reglare genică a celulelor HepG2 senescente indus de tratamentul
cu H2O2 a fost similar cu cel din ficatul cirotic uman. Interesant,
modelele de profil de expresie a genelor ale hepatocitelor
senescente au fost în mod semnificativ legate de modificări ale
reglării ciclului celular, morfologiei, metabolismului și activării
celulelor stelate, care apar împreună cu funcția sintetică afectată
în senescență (Aravinthan și colab., 2014). Deși aceste rezultate
sugerează o relație strânsă între senescența hepatocitelor și
acțiunea ROS, utilizarea unui agent stresor extern pentru a induce
CS poate fi un factor cheie care ar putea funcționa într-o manieră
asincronă în secvența evenimentelor moleculare implicate în
producția intrinsecă de ROS. Dovezi mai directe au demonstrat o
interconexiune strânsă între senescență, ROS și semnalizarea
TGF-b în bolile hepatice cronice.
Borkham-Kamphorst și colab. (2014) au arătat că supraexprimarea
proteinei bogate în cisteină 61 (CCN1/CYR61) a inhibat semnificativ
producția de colagen de tip I și a indus ROS care duce la CS și
apoptoză in vivo și in vitro. Acest efect a fost asociat cu o atenuare
a semnalizării TGF-b și, ca rezultat, supraexpresia CCN1/CYR61 a
atenuat fibrogeneza hepatică într-un model de ligatură a căilor
biliare. Această analiză arată un exemplu clar de inducție a ROS și
CS ca un mecanism molecular potențial pentru repararea și
remodelarea țesuturilor promovate de „manipularea” CCN1/CYR61
în timpul leziunii hepatice. Într-un raport similar, dar contrastant,
dioscina, o saponină steroidă vegetală, a promovat CS, dar a scăzut
stresul oxidativ indus de CCl4 în celulele stelate hepatice activate
(HSC). Printre altele, aceasta
Machine Translated by Google

Rolul senescenței în bolile hepatice Capitolul | 23 301

efectul antifibrotic a fost asociat cu atenuarea căilor de semnalizare
TGF-b/Smad, Wnt/b-catenina, MAPK și mitocondriale (Zhang et al.,
2015). O investigație a arătat că Sirtuin 6 (SIRT6), o enzimă care
promovează rezistența la deteriorarea ADN-ului și stresul oxidativ,
joacă un rol central în CS indus de semnalizarea ROS și TGF-b în
celulele HCC (Feng et al., 2015). În acest raport, ROS și TGF-b au
preregulat expresia SIRT6 prin inducerea unei activări susținute a
căilor ERK și Smad. SIRT6 reglat în sus nu numai că a abrogat
efectul de inducere al TGF-b și ROS asupra CS, dar a fost și
necesar pentru ca calea ERK să suprime expresia p16 și p21. În
plus, reglarea în sus a SIRT6 a promovat tumorigenitatea celulelor
HCC și a contribuit la efectul inhibitor al căii ERK asupra CS.
Această activare a buclei de feedback integrată de SIRT6 și TGF-b
are potențialul de a modula atât tumorigenicitatea, cât și
senescența și reprezintă un exemplu clar al complexității
moleculare din jurul activării senescenței.
factori determinanți asupra apariției și progresiei diferitelor tipuri
de HCC multifocale. Această ipoteză intrigantă provine din
propunerea conform căreia HCC multifocale sunt fie de la un HCC
de origine multicentrică, fie HCC de metastază intrahepatică (Feo
și Pascale, 2015). Astfel, în acest scenariu, ROS ar putea modula
activarea CS în micromediul HCC și, ca rezultat, senescența/ROS
ar putea fi un binom molecular decisiv care stabilește soarta HCC
multifocală (Fig. 23.2). Această propunere ipotetică ridică, de
asemenea, întrebări pentru a determina dacă apariția senescenței
binomiale/ROS este un eveniment tranzitoriu, sporadic sau specific
al unui stadiu determinat de dezvoltare a HCC. Deși am arătat că
concomitent cu dezvoltarea HCC indusă de dietilnitrozamină există
și o apariție cronologică a CS (Pacheco-Rivera et al., 2016),
asocierea acestuia cu generarea de ROS și contribuția lor la soarta
tipului HCC multifocal nu a fost . investigat. Această propunere
intrigantă reprezintă o linie de chestionare care merită investigată.

Inducerea senescenței a fost, de asemenea, una dintre

modalitățile prin care cercetătorii determină eficiența agenților
chimioterapeutici împotriva cancerului. Majoritatea acestor agenți BOLI HEPATICE ȘI SENSCENȚĂ
sunt inductori puternici de stres oxidativ, cum ar fi cisplatina. Într-
un studiu, cisplatina a promovat un fenotip senescent în liniile Boli hepatice legate de alcool
celulare HCC dependente de activarea p53 și p21 și de generarea
Boala alcoolică hepatică (ALD) este una dintre principalele cauze
intracelulară de ROS (Qu et al., 2014). Deși activarea senescenței
de morbiditate și mortalitate hepatică; ea cuprinde un spectru
pare a fi o consecință naturală a inducerii stresului oxidativ,
larg de leziuni hepatice, pornind de la steatoza simpla la hepatita
generarea de ROS ar putea dicta consecințe celulare diferite în
legata de alcool la ciroza si HCC. Fiziopatologia ALD este un complex
funcție de concentrația generală la niveluri de stare de echilibru
și de locul de generare (Panieri și colab., 2013) sprijină
complexitatea binomului senescență/ROS prin conferință . are un
rol important pentru producția de ROS și participarea acestuia ca
factor decisiv în progresia și agresivitatea cancerului. Alți
cercetători au raportat că celulele melanomului care în mod
normal au un potențial ridicat de a forma tumori subcutanate au
puține șanse să facă acest lucru după transplantul intravenos sau
intrasplenic. Motivul pentru care se întâmplă acest lucru este că
celulele metastatice experimentează o sarcină de stres oxidativ în
sânge și organele viscerale, care nu este prezentă în tumorile
subcutanate stabilite. Pentru a depăși această barieră, celulele
suferă modificări metabolice reversibile în timpul metastazelor
care le măresc capacitatea de a rezista la stresul oxidativ. S-a
constatat că potențialul membranei mitocondriale, masa și
nivelurile de ROS au scăzut în celulele metastatice circulante mai
mult decât în tumorile subcutanate, crescând posibilitatea ca
funcția mitocondrială să fie redusă în celulele melanomului
circulant într-un efort de a reduce generarea de ROS. În timpul
procesului normal de îmbătrânire, modificările metabolice FIGURA 23.2 Reprezentarea ipotetică a contribuției CS și ROS asupra
mitocondriale sunt implicate în inducerea și menținerea CS soartei HCC multifocale. Imaginea prezintă două scenarii, (1) Nodulii pre
(Correia-Melo și Passos, 2015). neoplazici sunt delimitați de prezența celulelor senescente (culoare
Prin urmare, chiar dacă investigația nu a arătat dacă stresul albastră) induse de generarea ROS și provoacă HCC de origine
multicentrică în timpul procesului de carcinogeneză. Acest statut ar putea
oxidativ limitează și inițierea și creșterea timpurie a celulelor
fi un pas tranzitoriu către dezvoltarea HCC a metastazelor intrahepatice.
canceroase cutanate primare (Piskounova și colab., 2015), nu este (2) Celulele HCC autosuficiente dobândesc un fenotip asemănător
nerezonabil să se emite ipoteza că activarea senescenței și/sau senescentului (culoare albastră) pentru a rezista la efectele stresului
generarea ROS sunt oxidativ circulant și suferă modificări metabolice reversibile pentru a produce HCC de metasta
Machine Translated by Google
302 SECȚIUNEA j II Fiziopatologia ficatului
fenomen; totuși, stresul oxidativ este un factor important în boală,
deoarece consumul de alcool crește producția de ROS și scade
nivelurile de antioxidanți celulari (O'Shea et al., 2010). A fost
studiată validitatea criteriilor clinice în prezicerea rezultatului în
ALD. Într-un studiu, s-a arătat că creșterea ariei nucleare a
hepatocitelor a fost legată de disfuncția hepatică și sugerează
senescența hepatocitelor, deoarece mărirea nucleară este o
caracteristică morfologică recunoscută a CS (Ben-Porath și
Weinberg, 2005). Pe de altă parte, oprirea celulară ireversibilă care
limitează potențialul proliferativ al unei celule este un semn
distinctiv al CS și este mediată de p21 (d'Adda di Fagagna, 2008).
Astfel, p21 are un rol cheie în stabilitatea opririi ciclului celular și
joacă un rol vital în inducerea senescenței (d'Adda di Fagagna,
2008). Într-un studiu, Aravinthan și colab. (2013a, b) au demonstrat
expresia hepatocitelor a markerului de senescență p21 la o cohortă
de pacienți cu consum de alcool și ALD.
Mai mult, au găsit o relație puternică între creșterea expresiei
p21 a hepatocitelor, fibroza avansată și un rezultat negativ legat
de ficat.
Boală hepatică grasă non-alcoolică
Boala ficatului gras nonalcoolic (NAFLD) este o cauză principală a
bolii hepatice cronice la nivel mondial, având în vedere un spectru
larg de afecțiuni hepatice, de la steatoză simplă, la tohepatită cu
sau fără fibroză, până la ciroză și HCC (de Alwis și Day, 2008). La
șoareci ob/ob NAFLD este asociată cu o expresie crescută a
inhibitorului ciclului celular p21 și cu afectarea regenerării hepatice
(Torbenson și colab., 2002). Combinația dintre regenerarea
afectată și incidența crescută a cancerului în NAFLD sugerează o
îmbătrânire accelerată.
Un studiu efectuat în 1988 asupra bolilor legate de alcool,
înainte ca senescența să fi fost descrisă în bolile hepatice, a
demonstrat o relație strânsă între creșterea aria nucleară a
hepatocitelor, fibroza avansată și disfuncția hepatică (Gonzalez-
Reimers și colab., 1988). În NAFLD, a fost descrisă prin apariția
scurtării premature a telomerilor, a zonei nucleare crescute a
hepatocitelor, a fibrozei avansate și a expresiei p21, în studii
separate (Nakajima și colab., 2006, 2010; Richardson și colab.,
2007). Aravinthan și colab. (2013a, b) au efectuat un studiu pe 15
specimene arhivate de biopsie cu ac hepatic încorporat în parafină
fixate în formol de la 70 de pacienți din spectrul NAFLD și în 43
de biopsii cu ac hepatic la momentul transplantului hepatic din ficat
donator de vârstă și sex, care a servit drept controale.
Alte 12 probe obținute în timpul fazei de regenerare a leziunii
ischemice acute de reperfuzie în urma transplantului de ficat au
servit ca țesut de control pozitiv pentru exprimarea markerilor
ciclului celular. În acest studiu, autorii au găsit o corelație strânsă
între steatoza hepatică și telomerii mai scurti; de asemenea au
descris că proporția de
hepatocitele cu leziuni ADN identificate prin prezența ɣH2AX au
crescut în paralel cu gradul de steatoză. Autorii sugerează că
acumularea de grăsime în hepatocite cauzează deteriorarea ADN-
ului și eroziunea telomerilor, posibil mediată de stresul oxidativ
(Aravinthan et al., 2013b). O ruptură critică a telomerilor și a ADN-
ului dublu catenar duc la CS și la oprirea permanentă a ciclului
celular. Autorii au găsit, de asemenea, un model de oprire a ciclului
celular în faza G1/S predominantă a hepatocitelor în NAFLD, cu
expresie crescută a Mcm-2 în comparație cu ficatul normal. În
plus, a existat o expresie crescută a proteinei p21. O caracteristică
izbitoare a fost asocierea expresiei p21 cu stadiul de fibroză, care
sugerează acumularea de hepatocite senescente cu progresia bolii.
În concluzie, studiul a demonstrat o legătură între deteriorarea
ADN-ului, senescență și îmbătrânire în NAFLD; în plus, ei
demonstrează că există o relație strânsă între proporția de
hepatocite senescente și un rezultat clinic advers.
Virusul Hepatitei C cronice
Infecția cronică cu virusul hepatitei C (VHC) afectează aproximativ
170 de milioane de oameni din întreaga lume. Mai mult, 20% dintre
aceste persoane afectate dezvoltă ciroză, cu un risc mare de a
dezvolta HCC. Un risc crescut de ciroză legată de VHC este asociat
cu steatoza hepatică, vârsta înaintată și consumul mai mare de
alcool (Adinolfi și colab., 2001; Poynard și colab., 2001). Potențialul
de regenerare al ficatului este foarte mare; cu toate acestea,
numărul total de diviziuni ale celulelor hepatocitelor este finit.
Capacitatea ficatului normal de a se regenera poate fi redusă odată
cu vârsta (Fry et al., 1984). S-a sugerat că în timpul infecției cronice
cu VHC, turnover-ul hepatocitelor crește; prin urmare, scurtarea
telomerilor este raportată în țesutul hepatic (Miura și colab.,
1997). Telomerii scurti critic declanșează senescența replicativă.
Marshall i colab. (2005) au găsit o relație puternică între stoparea
hepatocitelor G1, regenerarea hepatică afectată și creșterea
cirozei la pacienții cu VHC cronic. Ei au arătat o stopare crescută a
ciclului celular al hepatocitelor, măsurată prin expresia proteinei de
întreținere a mini-cromozomului 2 (Mcm-2) în probele de biopsie
hepatică, această expresie a fost crescută la pacienții cronici cu
VHC.
În plus, cercetătorii au descoperit că p21 este exprimat predominant
în hepatocite și a fost corelat cu stadiul de fibroză.
Virusul Hepatitei B cronice
Infecția cronică cu virusul hepatitei B (VHB) poate duce la
dezvoltarea hepatitei cronice, cirozei și HCC. La fel ca și în cazul
VHC, infecția cronică cu VHB este asociată cu vârsta, stoparea
ciclului celular și CS. Într-un studiu, autorii au evaluat producția
de antigen HBV în legătură cu stoparea ciclului celular și CS in
vitro folosind linii celulare hepG2 și hepG2.2.15
Machine Translated by Google
Rolul senescenței în bolile hepatice Capitolul | 23 303
(Tachtatzis et al., 2015). Celulele HepG2.15 au fost transfectate cu HBV
sub-genomic; astfel producția de HBV este rezultatul transcripției
transgenei. Autorii au descoperit că oprirea ciclului celular indusă in vitro
prin adăugarea de peroxid de hidrogen a determinat niveluri crescute de
HBsAg supernatant și ADN VHB; de asemenea, a fost observată o expresie
crescută a expresiei HBcAg. În schimb, nu s-a observat niciun efect asupra
producției de HBsAg sau HBV ADN în celulele se nescente, cu doar o
creștere minoră a colorării HBcAg citoplasmatice. Autorii au descoperit,
de asemenea, că au fost detectate mai puține telomeres la pacienții cu
infecție cronică cu VHB în comparație cu martorii cu ficat sănătos; totuși,
atunci când telomerii au fost detectați, aceștia au fost mai scurti decât
martorii (Tachtatzis et al., 2015). Scurtarea larg răspândită a telomerilor
este în concordanță cu îmbătrânirea accelerată în cazul VHB cronic (Kim
și colab., 2009).
Într-un alt studiu, Zhu și colab. (2015) au investigat funcția
moleculară a unui HBx natural care lucrează cu o variantă umană care are
35 de aminoacizi detectați la celulele C-terminale (HBxD35). De asemenea,
celule de cultură hepatică netumorigenă imortalizate (MIHA și LO) și SK-
Hep1 modificate cu lentivirus-HBxD35. Folosind o analiză de scanare la
nivelul întregului genom și o validare PCR, autorii au identificat o
proteină 2 specifică stopării creșterii (GAS2) ca țintă directă a HBxD35 la
nivel transcripțional. În plus, HBxD35 se leagă de regiunea promotoare
a GAS2 și își diminuează expresia pentru a promova proliferarea
hepatocitelor și tumorigeneza. Pe de altă parte, proteina HBx totală nu s-
a legat de regiunea promotor GAS2, ceea ce duce la dereglarea stopului
celular, CS și apoptoza mediată de p53. Mai mult, proteina HBx poate
induce fibroza hepatica si ciroza.
Fibroza hepatică
Fibroza hepatică este o consecință patologică frecventă a bolilor hepatice
cronice și rezultă din acumularea progresivă a unui exces cantitativ de
țesut din matricea extracelulară (ECM). Depunerea cicatricilor rezultă
dintr-un proces alterat de vindecare a rănilor. La mulți pacienți, insulta
continuă a parenchimului hepatic duce în cele din urmă la ciroză (Mallat
și Lotersztajn, 2013). Acumularea ECM în timpul leziunii hepatice cronice
este determinată de populația heterogenă de miofibroblaste, în principal
de celule derivate din HSC și din fibroblaste rezidente. Miofibroblastele
sunt celule foarte proliferative, cu supraviețuire sporită, care migrează și
se acumulează în locurile de afectare hepatică ca răspuns la efectele
paracrine/autocrine ale unei game largi de factori de creștere, citokine
și mediatori lipidici (Fig. 23.3).
Rolul CS în bolile hepatice cronice a fost subliniat
scrutinul. Îmbătrânirea accelerată a hepatocitelor și acumularea de
hepatocite senescente au fost demonstrate în diverse afecțiuni hepatice
cronice (Aravinthan și colab., 2013a,b;
Marshall i colab., 2005; Nakajima i colab., 2006; Richardson i colab.,
2007; Wood și colab., 2014). În plus, aceste studii arată că proporția
crescută de hepatocite senescente este asociată independent cu creșterea
stadiului de fibroză, afectarea funcției hepatice și un rezultat advers
legat de ficat, inclusiv moartea legată de ficat (Aravinthan et al., 2013a,b;
Gonzalez-Reimers). et al., 1988; Marshall et al., 2005; Nakajima et al., 2006,
2010; Richardson et al., 2007; Wood et al., 2014).
Ciroză
La om, ciroza este indusă de o mare varietate de hepatotoxine. Indiferent
de etiologia sa, ciroza evoluează lent de-a lungul mai multor ani, iar
moartea și reînnoirea cronică a hepatocitelor sunt factori predispozanți
majori (Friedman, 2003).
Evoluția bolilor hepatice cronice este foarte heterogenă de la un pacient
la altul. Printre pacienții cu factori de risc identici, unii progresează rapid
spre ciroză și HCC. Patogenia cirozei hepatice nu este complet elucidată.
Deși la majoritatea pacienților cauza bolii hepatice cronice poate fi
identificată, există încă un mic procent de pacienți fără factori de risc
aparenti (Kodali și colab., 1994). Datorită scăderii rezervei parenchimatoase
funcționale și modificării fluxului sanguin hepatic, ciroza este asociată
cu complicații care pun viața în pericol.
În plus, ficatul cirotic este considerat o stare precanceroasă. Rapoartele
recente ale OMS indică faptul că ciroza reprezintă 170.000 de decese în
Europa pe an (Mallat și Lotersztajn, 2013). Au fost făcute multe încercări
de a identifica posibili factori de risc genetici pentru dezvoltarea cirozei;
printre altele, s-a propus scurtarea telomerilor ca factor genetic, iar
condițiile cu turnover celular mare, cum ar fi bolile cronice ale ficatului,
accelerează
scurtarea telomerilor, ceea ce duce la afectarea proliferării celulare și a
CS. Oprirea creșterii celulare și CS par a fi o stare profibrotică. Unele
studii au investigat relația dintre ciroză și scurtarea telomerilor, arătând
că scurtarea telomerilor este un marker al cirozei și se corelează cu b-
galactozidaza asociată senescenței în 84% din probele de ciroză, în
special în hepatocite (Mallat și Lotersztajn, 2013).
CS contribuie la disfuncția tisulară legată de vârstă, macro H2A1, o
variantă a histonei H2A, este un marker al SAFH care face sinergie cu
metilarea ADN-ului pentru a reduce la tăcere genele supresoare de tumori
din fibroblastele umane. Într-un studiu recent, a fost raportată relația
dintre variantele de îmbinare macro H2A1, macro H2A1.1 și macro
H2A1.2 și carcinogeneza hepatică. Autorii au descoperit că nivelurile de
proteine ale ambelor izoforme macro H2A1 au fost crescute în ficatul
rozătoarelor foarte în vârstă și a oamenilor și au fost markeri
imunohistochimici robusti ai cirozei umane și ai HCC (Borghesan și
colab., 2016).
Machine Translated by Google

304 SECȚIUNEA j II Fiziopatologia ficatului

FIGURA 23.3 Senescență și fibroză. Într-un model de șobolan, DEN a fost administrat la o doză de 50 mg/kg, timp de 16 săptămâni. TEM (coloana din stânga) arată celule
stelate în stare de repaus în ficatul netratat (NT) cu picături de retinol (RD) în citoplasmă și nuclei (N); la 12, 14 și 16 săptămâni de tratament DEN, celulele hepatice
stelate devin celule asemănătoare miofibroblastelor (MLC) inactivate. Colorația cu roșu Sirius (coloana din mijloc) arată dezvoltarea fibrelor de colagen (fibroză) în jurul
parenchimului hepatic. Săgețile arată septuri fibrotice. Activitatea b-galactozidazei în țesutul hepatic (coloana din dreapta). Săgețile arată celule pozitive SA-b-gal care
apar în principal în zonele fibrotice și reprezintă celule senescente induse de tratamentul DEN.

CONCLUZIE studiile au susținut puternic asocierea senescenței celulare cu

bolile hepatice cronice la nivelul expresiei genelor. Prin urmare,
CS este un proces complex care este controlat activ de celule ca
este o provocare majoră creșterea detectării biomarkerilor
răspuns la o varietate de stres. CS contribuie la disfuncția
care identifică celulele senescente în îmbătrânirea și bolile
tisulară legată de vârstă. Până în prezent, atât experimental cât și clinic
hepatice.
Machine Translated by Google
Rolul senescenței în bolile hepatice Capitolul | 23 305
CONFIRMARE
Acest capitol a fost susținut de grantul nr. 83710 de la CONACT.
REFERINȚE
Adinolfi, LE, Gambardella, M., Andreana, A., Tripodi, MF, Utili, R., Ruggiero, G., 2001.
Steatoza accelerează progresia leziunilor hepatice la pacienții cu hepatită
cronică C și se corelează cu genotipul specific VHC și visceral. obezitatea.
Hepatologie 33, 1358e1364.
Alcorta, DA, Xiong, Y., Phelps, D., Hannon, G., Beach, D., Barrett, JC, 1996. Implicarea
inhibitorului kinazei dependente de ciclină p16 (INK4a) în senescența
replicativă a fibroblastelor umane normale. Proc.
Natl. Acad. Sci. SUA 93, 13742e13747.
Alfadda, AA, Sallam, RM, 2012. Speciile reactive de oxigen în sănătate și
boala. J. Biomed. Biotehnologia. 2012, 936486.
Aravinthan, A., Challis, B., Shannon, N., Hoare, M., Heaney, J., Alexander, GJ, 2015.
Rezistența selectivă la insulină în senescența hepatocitelor. Exp. Cell Res. 331,
38e45.
Aravinthan, A., Pietrosi, G., Hoare, M., Jupp, J., Marshall, A., Verrill, C., Davies, S.,
Bateman, A., Sheron, N., Allison, M., Alexandru, GJ,
2013a. Expresia hepatocitelor a markerului de senescență p21 este legată de
fibroză și de un rezultat advers legat de ficat în ficatul legat de alcool.
boala. PLoS One 8, e72904.
Aravinthan, A., Scarpini, C., Tachtatzis, P., Verma, S., Penrhyn-Lowe, S., Harvey, R.,
Davies, SE, Allison, M., Coleman, N., Alexander, G. , 2013b. Senescența
hepatocitelor prezice progresia bolii hepatice grase non-alcoolice. J. Hepatol.
58, 549e556.
Aravinthan, A., Shannon, N., Heaney, J., Hoare, M., Marshall, A., Alexander, GJ, 2014.
Semnătura genei hepatocitelor senescente în boala cronică de ficat. Exp.
Gerontol. 60, 37e45.
Badiola, I., Santaolalla, F., Garcia-Gallastegui, P., Del Rey, AS, Unda, F., Ibarretxe, G.,
2015. Bazele biomoleculare ale procesului de senescență și cancer. O nouă
abordare a tratamentului oncologic legat de îmbătrânire.
Imbatranire Res. Apoc. 23, 125e138.
Beausejour, CM, Krtolica, A., Galimi, F., Narita, M., Lowe, SW, Yaswen, P., Campisi, J.,
2003. Inversarea senescenței celulare umane: rolurile căilor p53 și p16. EMBO
J. 22, 4212e4222.
Ben-Porath, I., Weinberg, RA, 2005. Semnalele și căile de activare
senescența celulară. Int. J. Biochim. Cell Biol. 37, 961e976.
Blackburn, EH, 1990. Telomerii: structură și sinteză. J. Biol. Chim. 265, 5919e5921.
Blagosklonny, MV, 2003. Senescență celulară și stop hipermitogen.
EMBO Rep. 4, 358e362.
Blagosklonny, MV, 2014. Geroconversie: pas ireversibil către celular
senescența. Ciclul celular 13, 3628e3635.
Borghesan, M., Fusilli, C., Rappa, F., Panebianco, C., Rizzo, G., Oben, JA, Mazzoccoli,
G., Faulkes, C., Pata, I., Agodi, A., Rezaee , F., Minogue, S., Warren, A., Peterson,
A., Sedivy, JM, Douet, J., Buschbeck, M., Cappello, F., Mazza, T., Pazienza, V.,
Vinciguerra, M., 2016. Hipometilarea ADN-ului și varianta de histonă
macroH2A1 atenuează sinergic senescența indusă de chimioterapie pentru a
promova progresia carcinomului hepatocelular. Cancer Res. 76, 594e606.
Borkham-Kamphorst, E., Schaffrath, C., Van de Leur, E., Haas, U., Tihaa, L., Meurer,
SK, Nevzorova, YA, Liedtke, C., Weiskirchen, R., 2014. efectele antifibrotice ale
CCN1/CYR61 în miofibroblastele portal primare sunt mediate prin inducerea
speciilor reactive de oxigen, rezultând în
senescență celulară, apoptoză și semnalizare TGF-beta atenuată. Biochim.
Biophys. Acta 1843, 902e914.
Bouayed, J., Bohn, T., 2010. Antioxidanți exogeni cu două tăișuri
sabii in stare redox celulara: efecte benefice asupra sanatatii la
doze fiziologice versus efecte nocive la doze mari. Oxid. Med.
Cell Longev. 3, 228e237.
Brenner, AJ, Stampfer, MR, Aldaz, CM, 1998. Expresie crescută a p16 cu prima oprire
a senescenței în celulele epiteliale mamare umane și capacitate de creștere
extinsă cu inactivarea p16. Oncogene 17, 199e205.
Burton, DG, Krizhanovsky, V., 2014. Consecințele fiziologice și patologice ale
senescenței celulare. Cell Mol. Life Sci. 71, 4373e4386.
Campisi, J., 2014. Biologia celulară: începutul sfârșitului. Natura 505, 35e36.
Campisi, J., Andersen, JK, Kapahi, P., Melov, S., 2011. Senescenta celulară: o legătură
între cancer și boala degenerativă legată de vârstă?
Semin. Cancer Biol. 21, 354e359.
Carnero, A., Beach, DH, 2004. Absența p21WAF1 cooperează cu c-myc în ocolirea
senescenței induse de Ras și îmbunătățește cooperarea oncogenă.
Oncogene 23, 6006e6011.
Carrel, A., 1914. Starea actuală a unei tulpini de țesut conjunctiv douăzeci
în vârstă de opt luni. J. Exp. Med. 20, 1e2.
Celeste, A., Petersen, S., Romanienko, PJ, Fernandez-Capetillo, O., Chen, HT,
Sedelnikova, OA, Reina-San-Martin, B., Coppola, V., Meffre, E., Difilippantonio,
MJ, Redon, C., Pilch, DR, Olaru, A., Eckhaus, M., Camerini-Otero, RD, Tessarollo,
L., Livak, F., Manova, K., Bonner, WM, Nussenzweig, MC, Nussenzweig, A., 2002.
Instabilitatea genomică la șoareci lipsiți de histonă H2AX. Știința 296, 922e927.
Collado, M., Blasco, MA, Serrano, M., 2007. Cellular senescence in
cancer și îmbătrânire. Celula 130, 223e233.
Coppe, JP, Patil, CK, Rodier, F., Sun, Y., Munoz, DP, Goldstein, J., Nelson, PS, Desprez,
PY, Campisi, J., 2008. Fenotipurile secretoare asociate senescenței relevă
celulele- funcțiile neautonome ale RAS oncogen și supresorul tumoral p53.
PLoS Biol. 6, 2853e2868.
Correia-Melo, C., Passos, JF, 2015. Mitocondriile: sunt actori cauzali în senescența
celulară? Biochim. Biophys. Acta 1847,
1373e1379.
Cristofalo, VJ, Pignolo, RJ, 1993. Senescența replicativă a celulelor asemănătoare
fibroblastelor umane în cultură. Physiol. Rev. 73, 617e638.
Chen, Q., Fischer, A., Reagan, JD, Yan, LJ, Ames, BN, 1995.
Deteriorarea oxidativă a ADN-ului și senescența celulelor fibroblastice diploide
umane. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 92, 4337e4341.
Chen, QM, Prowse, KR, Tu, VC, Purdom, S., Linskens, MH, 2001.
Decuplarea fenotipului senescent de scurtarea telomerilor în fibroblastele
tratate cu peroxid de hidrogen. Exp. Cell Res. 265, 294e303.
Cheung, AL, Deng, W., 2008. Disfuncția telomerilor, instabilitatea genomului și
cancerul. Față. Biosci. 13, 2075e2090. d'Adda di Fagagna, F., 2008. Trăind într-
o pauză: senescența celulară ca răspuns la deteriorarea ADN-ului. Nat. Rev. Cancer
8, 512e522. de Alwis, NM, Day, CP, 2008. Boala ficatului gras non-alcoolic: the
ceața se limpezește treptat. J. Hepatol. 48 (Supliment. 1), S104eS112.
Demaria, M., Ohtani, N., Youssef, SA, Rodier, F., Toussaint, W.,
Mitchell, JR, Laberge, RM, Vijg, J., Van Steeg, H., Dolle, ME, Hoeijmakers, JH, de
Bruin, A., Hara, E., Campisi, J., 2014. Un rol esențial pentru senescent celule în
vindecarea optimă a rănilor prin secreția de PDGF-AA. Dev. Celula 31, 722e733.
Machine Translated by Google
306 SECȚIUNEA j II Fiziopatologia ficatului
Dimri, GP, Lee, X., Basile, G., Acosta, M., Scott, G., Roskelley, C., Medrano, EE,
Linskens, M., Rubelj, I., Pereira-Smith, O., et al., 1995. Un biomarker care
identifică celulele umane senescente în cultură
și în îmbătrânirea pielii in vivo. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 92, 9363e9367.
Ebeling, AH, 1919. O tulpină de țesut conjunctiv vechi de șapte ani. J. Exp.
Med. 30, 531e537.
Ebeling, AH, 1922. O tulpină de fibroblaste veche de zece ani. J. Exp. Med. 35,
755e759.
Feng, XX, Luo, J., Liu, M., Yan, W., Zhou, ZZ, Xia, YJ, Tu, W., Li, PY, Feng, ZH, Tian, DA,
2015. Sirtuin 6 promovează trans formând factorul de creștere-beta1/H2O2/
HOCl-mediat de îmbunătățire a tumorigenicității celulelor de carcinom
hepatocelular prin suprimarea senescenței celulare. Cancer Sci. 106, 559e566.
Feo, F., Pascale, RM, 2015. Carcinom hepatocelular multifocal: metastază
intrahepatică sau carcinogeneză multicentrică? Ann. Transl.
Med. 3, 4.
Freund, A., Orjalo, AV, Desprez, PY, Campisi, J., 2010. Rețele inflamatorii în timpul
senescenței celulare: cauze și consecințe. Trends Mol. Med. 16, 238e246.
Friedman, SL, 2003. Fibroză hepatică de la bancă la pat. J. Hepatol. 38
(Supliment. 1), S38eS53.
Fry, M., Silber, J., Loeb, LA, Martin, GM, 1984. Replicarea celulară întârziată și
redusă și scăderea nivelurilor de ADN polimerază-alfa în ficatul regenerant
al șoarecilor îmbătrâniți. J. Cell.
Physiol. 118, 225e232.
Gonzalez-Reimers, E., Brajin-Rodriguez, MM, Batista-Lopez, N., Santolaria-Fernandez,
F., Martinez-Riera, A., Essardas-Daryanani, H., 1988. Hepatocite și zone
nucleare și infiltrare grasă a ficatului în boala alcoolică cronică a ficatului.
Dependență de alcool. 22, 195e203.
Greider, CW, Blackburn, EH, 1985. Identificarea unei activități specifice transferazei
terminale a telomerilor în extractele de tetrahymena. Celula 43, 405e413.
Greider, CW, Blackburn, EH, 1987. Transferaza terminală a telomerilor
tetrahymena este o enzimă ribonucleoproteică cu două tipuri de specificitate
primer. Celula 51, 887e898.
Ha, HL, Shin, HJ, Feitelson, MA, Yu, DY, 2010. Stresul oxidativ și
antioxidanti in patogeneza hepatica. Lumea J. Gastroenterol. 16, 6035e6043.
Hayflick, L., 1985. Biologia celulară a îmbătrânirii. Clin. Geriatr. Med. 1,
15e27.
Hayflick, L., 1965. Durata de viață limitată in vitro a celulei diploide umane
tulpini. Exp. Cell Res. 37, 614e636.
Hayflick, L., Moorhead, PS, 1961. Cultivarea în serie a omului
tulpini de celule diploide. Exp. Cell Res. 25, 585e621.
Ho, JS, Ma, W., Mao, DY, Benchimol, S., 2005. Reprimarea transcripțională
dependentă de p53 a c-myc este necesară pentru oprirea ciclului celular G1 .
Mol. Celulă. Biol. 25, 7423e7431.
Holt, SE, Aisner, DL, Shay, JW, Wright, WE, 1997. Lipsa de reglare a ciclului celular al
activității telomerazei în celulele umane. Proc. Natl.
Acad. Sci. SUA 94, 10687e10692.
Ishikawa, F., 2000. Ceasul îmbătrânit: capodopera ceasornicarului. Celulă. Mol.
Life Sci. 57, 698e704.
Iwasa, H., Han, J., Ishikawa, F., 2003. Protein kinaza p38 activată de mitogen
definește calea comună de semnalizare a senescenței. Genes Cells 8, 131e144.
Janzen, V., Forkert, R., Fleming, HE, Saito, Y., Waring, MT, Dombkowski, DM, Cheng,
T., DePinho, RA, Sharpless, NE,
Scadden, DT, 2006. Îmbătrânirea celulelor stem modificată de inhibitorul
kinazei dependent de ciclină p16INK4a. Natura 443, 421e426.
Janzen, V., Scadden, DT, 2006. Celulele stem: bune, rele și reformabile.
Natura 441, 418e419.
Kang, TW, Yevsa, T., Woller, N., Hoenicke, L., Wuestefeld, T., Dauch, D., Hohmeyer,
A., Gereke, M., Rudalska, R., Potapova, A., Iken , M., Vucur, M., Weiss, S.,
Heikenwalder, M., Khan, S., Gil, J.,
Bruder, D., Manns, M., Schirmacher, P., Tacke, F., Ott, M.,
Luedde, T., Longerich, T., Kubicka, S., Zender, L., 2011. Supravegherea
senescenței hepatocitelor pre-maligne limitează dezvoltarea cancerului
hepatic. Natura 479, 547e551.
Kim, H., Oh, BK, Roncalli, M., Park, C., Yoon, SM, Yoo, JE,
Park, YN, 2009. Schimbare mare de celule hepatice în ciroza hepatică legată
de virusul hepatitei B. Hepatologie 50, 752e762.
Kirkwood, TB, Austad, SN, 2000. De ce îmbătrânim? Natura 408,
233e238.
Kodali, VP, Gordon, SC, Silverman, AL, McCray, DG, 1994.
Boala hepatică criptogenă în Statele Unite: dovezi suplimentare pentru
hepatita non-A, non-B și non-C. A.m. J. Gastroenterol. 89, 1836e1839.
Kortlever, RM, Higgins, PJ, Bernards, R., 2006. Inhibitorul-1 al activatorului de
plasminogen este o țintă critică în aval a p53 în inducerea senescenței
replicative. Nat. Cell Biol. 8, 877e884.
Krishnamurthy, J., Ramsey, MR, Ligon, KL, Torrice, C., Koh, A., Bonner-Weir, S.,
Sharpless, NE, 2006. p16INK4a induce o scădere dependentă de vârstă a
potențialului de regenerare al insulelor. Natura 443, 453e457.
Krizhanovsky, V., Yon, M., Dickins, RA, Hearn, S., Simon, J., Miething, C., Yee, H.,
Zender, L., Lowe, SW, 2008. Senescența celulelor stelate activate limitează
fibroza hepatică. Celula 134, 657e667.
Kuilman, T., Michaloglou, C., Mooi, WJ, Peeper, DS, 2010.
esența senescenței. Genes Dev. 24, 2463e2479.
Land, H., Parada, LF, Weinberg, RA, 1983. Conversia tumorigenă a fibroblastelor
embrionare primare necesită cel puțin două gene onco cooperante. Natura
304, 596e602.
Lavin, MF, Gueven, N., 2006. Complexitatea stabilizării și activării p53. Moartea
celulară diferă. 13, 941e950.
Lee, AC, Fenster, BE, Ito, H., Takeda, K., Bae, NS, Hirai, T., Yu, ZX, Ferrans, VJ,
Howard, BH, Finkel, T., 1999. Proteinele Ras induc senescența prin modificarea
nivelurilor intracelulare ale speciilor reactive de oxigen. J. Biol. Chim. 274,
7936e7940.
Lee, BY, Han, JA, Im, JS, Morrone, A., Johung, K., Goodwin, EC, Kleijer, WJ, DiMaio,
D., Hwang, ES, 2006. Beta-galactozidaza asociată senescenței este beta
lizozomal -galactozidaza. Aging Cell 5, 187e195.
Li, H., Collado, M., Villasante, A., Strati, K., Ortega, S., Canamero, M., Blasco, MA,
Serrano, M., 2009. Locusul Ink4/Arf este o barieră pentru reprogramarea
celulelor iPS. Natura 460, 1136e1139.
Li, Y., Nichols, MA, Shay, JW, Xiong, Y., 1994. Reprimarea transcripțională a
inhibitorului kinazei P16 dependent de ciclină de tip D de către produsul genei
de susceptibilitate la retinoblastom pRb. Cancer Res. 54, 6078e6082.
Lin, AW, Barradas, M., Stone, JC, van Aelst, L., Serrano, M.,
Lowe, SW, 1998. Senescența prematură care implică p53 și p16 este activată
ca răspuns la semnalizarea mitogenă constitutivă MEK/MAPK. Genes Dev. 12,
3008e3019.
Lu, T., Finkel, T., 2008. Radicali liberi și senescență. Exp. Cell Res. 314,
1918e1922.
Machine Translated by Google
Rolul senescenței în bolile hepatice Capitolul | 23 307
Macip, S., Igarashi, M., Berggren, P., Yu, J., Lee, SW, Aaronson, SA, 2003.
Influența speciilor reactive de oxigen induse în deciziile de soartă celulară
mediate de p53. Mol. Celulă. Biol. 23, 8576e8585.
Macip, S., Igarashi, M., Fang, L., Chen, A., Pan, ZQ, Lee, SW, Aaronson, SA, 2002.
Inhibarea acumulării ROS mediată de p21 poate salva senescența indusă
de p21. EMBO J. 21, 2180e2188.
Mallat, A., Lotersztajn, S., 2013. Mecanisme celulare ale fibrozei tisulare. 5.
Perspective noi asupra fibrozei hepatice. A.m. J. Physiol. Fiziol celular. 305,
C789eC799.
Mari, M., Colell, A., Morales, A., von Montfort, C., Garcia-Ruiz, C.,
Fernandez-Checa, JC, 2010. Controlul redox al funcției hepatice în sănătate
si boala. Antioxid. Semnal redox 12, 1295e1331.
Marshall, A., Rushbrook, S., Davies, SE, Morris, LS, Scott, IS, Vowler, SL, Coleman,
N., Alexander, G., 2005. Relația dintre stoparea hepatocitelor G1 ,
regenerarea hepatică afectată și fibroza în infecția cronică cu virusul
hepatitei C. Gastroenterologie 128, 33e42.
Meeker, AK, Argani, P., 2004. Scurtarea telomerilor apare precoce în timpul
tumorigenezei mamare: o cauză a destabilizarii cromozomilor sub
transformarea malignă mincinoasă? J. Glanda mamară. Biol. Neoplazia 9,
285e296.
Meng, A., Wang, Y., Van Zant, G., Zhou, D., 2003. Radiațiile ionizante și
busulfanul induc senescența prematură în celulele hematopoietice ale
măduvei osoase murine. Cancer Res. 63, 5414e5419.
Miura, N., Horikawa, I., Nishimoto, A., Ohmura, H., Ito, H., Hirohashi, S., Shay,
JW, Oshimura, M., 1997. Scurtarea progresivă a telomerilor și reactivarea
telomerazei în timpul carcinogenezei hepatocelulare . Cancer Genet.
Cytogenet. 93, 56e62.
Molofsky, AV, Slutsky, SG, Joseph, NM, He, S., Pardal, R., Krishnamurthy, J.,
Sharpless, NE, Morrison, SJ, 2006. Creșterea expresiei p16INK4a scade
progenitorii creierului anterior și neurogeneza în timpul îmbătrânirii.
Natura 443, 448e452.
Moyzis, RK, Buckingham, JM, Cram, LS, Dani, M., Deaven, LL, Jones, MD, Meyne,
J., Ratliff, RL, Wu, JR, 1988. O secvență ADN repetitivă extrem de conservată,
(TTAGGG) n, prezent la telomerii cromozomilor umani. Proc. Natl. Acad. Sci.
SUA 85,
6622e6626.
Munoz-Espin, D., Serrano, M., 2014. Senescența celulară: de la fiziologie la
patologie. Nat. Pr. Mol. Cell Biol. 15, 482e496.
Nair, J., Srivatanakul, P., Haas, C., Jedpiyawongse, A., Khuhaprema, T., Seitz, HK,
Bartsch, H., 2010. Excreția urinară mare a leziunilor ADN-ului derivate de
peroxidarea lipidelor la pacienții cu cancer -boli hepatice predispuse. Mutat.
Res. 683, 23e28.
Naka, K., Tachibana, A., Ikeda, K., Motoyama, N., 2004. Senescența prematură
indusă de stres în fibroblastele de ataxie telangiectazie care exprimă
hTERT. J. Biol. Chim. 279, 2030e2037.
Nakajima, T., Moriguchi, M., Katagishi, T., Sekoguchi, S., Nishikawa, T.,
Takashima, H., Kimura, H., Minami, M., Itoh, Y., Kagawa, K., Tani, Y.,
Okanoue, T., 2006. Scurtarea prematură a telomerilor și răspunsul
regenerativ afectat în hepatocite ale persoanelor cu NAFLD. Ficat Int. 26,
23e31.
Nakajima, T., Nakashima, T., Okada, Y., Jo, M., Nishikawa, T., Mitsumoto, Y.,
Katagishi, T., Kimura, H., Itoh, Y., Kagawa, K., Yoshikawa, T., 2010. Măsurarea
dimensiunii nucleare este o metodă simplă de evaluare a îmbătrânirii
hepatocelulare în boala hepatică grasă nealcoolică: comparație cu FISH
cantitativ specific telomerilor și imunohistochimia p21. Pathol. Int. 60,
175e183.
Narita, M., Nunez, S., Heard, E., Narita, M., Lin, AW, Hearn, SA, Spector, DL,
Hannon, GJ, Lowe, SW, 2003. Formarea și tăcere het-erocromatinei
mediate de Rb a genelor țintă E2F în timpul senescenței celulare. Celula
113, 703e716.
Nielsen, GP, Stemmer-Rachamimov, AO, Ino, Y., Moller, MB,
Rosenberg, AE, Louis, DN, 1999. Transformarea malignă a neurofibromului
în neurofibromatoza 1 este asociată cu CDKN2A/
inactivarea p16. A.m. J. Pathol. 155, 1879e1884.
O'Shea, RS, Dasarathy, S., McCullough, AJ, 2010. Boala alcoolică a ficatului. A.m.
J. Gastroenterol. 105, 14e32 test 33.
Ohtani, N., Yamakoshi, K., Takahashi, A., Hara, E., 2004. Calea p16INK4a RB:
legătura moleculară între senescența celulară și supresia tumorii. J. Med.
Investi. 51, 146e153.
Pacheco-Rivera, R., Fattel-Fazenda, S., Arellanes-Robledo, J., Silva Olivares, A.,
Aleman-Lazarini, L., Rodriguez-Segura, M., Perez Carreon, J., Villa-Trevino ,
S., Shibayama, M., Serrano-Luna, J., 2016. Dubla colorare a beta-
galactozidazei cu fibroză și markeri de cancer relevă aspectul cronologic
al senescenței în carcinogeneza hepatică indusă de dietilnitrozamină.
Toxicol. Lett. 241, 19e31.
Panieri, E., Gogvadze, V., Norberg, E., Venkatesh, R., Orrenius, S., Zhivotovsky,
B., 2013. Speciile reactive de oxigen generate în diferite compartimente
induc moartea celulelor, supraviețuirea sau senescența. Radic liber.
Biol. Med. 57, 176e187.
Pantoja, C., Serrano, M., 1999. Fibroblastele murine lipsite de p21 suferă
senescență și sunt rezistente la transformare prin Ras oncogen.
Oncogene 18, 4974e4982.
Paradis, V., Youssef, N., Dargere, D., Ba, N., Bonvoust, F., Deschatrette, J.,
Bedossa, P., 2001. Senescență replicativă în ficatul normal, hepatita C
cronică și carcinoamele hepatocelulare . Zumzet. Pathol. 32, 327e332.
Parola, M., Robino, G., 2001. Molecule și ficat legate de stresul oxidativ
fibroză. J. Hepatol. 35, 297e306.
Parrinello, S., Samper, E., Krtolica, A., Goldstein, J., Melov, S., Campisi, J., 2003.
Sensibilitatea la oxigen limitează sever durata de viață replicativă a
fibroblastelor murine. Nat. Cell Biol. 5, 741e747.
Passos, JF, Nelson, G., Wang, C., Richter, T., Simillion, C., Proctor, CJ, Miwa, S.,
Olijslagers, S., Hallinan, J., Wipat, A., Saretzki, G., Rudolph, KL, Kirkwood,
TB, von Zglinicki, T., 2010. Feedback-ul între p21 și producția de oxigen
reactiv este necesar pentru senescența celulară. Mol. Syst. Biol. 6, 347.
Pazolli, E., Stewart, SA, 2008. Senescența: binele rău și disfuncțional. Curr.
Opinează. Genet. Dev. 18, 42e47.
Pignolo, RJ, Cristofalo, VJ, Rotenberg, MO, 1993. Celulele senescente WI-38 nu
reușesc să exprime EPC-1, o genă indusă în celulele tinere la intrarea în
starea G0 . J. Biol. Chim. 268, 8949e8957.
Piskounova, E., Agathocleous, M., Murphy, MM, Hu, Z., Huddlestun, SE, Zhao, Z.,
Leitch, AM, Johnson, TM, DeBerardinis, RJ, Morrison, SJ, 2015. Stresul
oxidativ inhibă distanța metastaze de către celulele melanomului uman.
Natura 527, 186e191.
Poynard, T., Ratziu, V., Charlotte, F., Goodman, Z., McHutchison, J., Albrecht, J.,
2001. Rate și factori de risc de progresie a fibrozei hepatice la pacienții cu
hepatită cronică CJ Hepatol. 34, 730e739.
Prowse, KR, Greider, CW, 1995. Reglarea de dezvoltare și specifică țesutului a
telomerazei de șoarece și a lungimii telomerilor. Proc. Natl.
Acad. Sci. SUA 92, 4818e4822.
Qu, K., Lin, T., Wang, Z., Liu, S., Chang, H., Xu, X., Meng, F., Zhou, L., Wei, J., Tai,
M., Dong, Y., Liu, C., 2014. Specii reactive de oxigen
Machine Translated by Google
308 SECȚIUNEA j II Fiziopatologia ficatului
generarea este esențială pentru senescența accelerată indusă de
cisplatină în carcinomul hepatocelular. Față. Med. 8, 227e235.
Ramakrishna, G., Rastogi, A., Trehanpati, N., Sen, B., Khosla, R., Sarin, SK, 2013.
De la ciroză la carcinomul hepatocelular: noi perspective moleculare
asupra inflamației și senescenței celulare. Cancer de ficat 2, 367e383.
Rayess, H., Wang, MB, Srivatsan, ES, 2012. Senescența celulară și gena
supresoare a tumorii p16. Int. J. Cancer 130, 1715e1725.
Rees, DC, Howard, JB, 2003. Interfața dintre lumile biologice și anorganice:
metaloclusteri de fier-sulf. Stiinta 300, 929e931.
Richardson, MM, Jonsson, JR, Powell, EE, Brunt, EM,
Neuschwander-Tetri, BA, Bhathal, PS, Dixon, JB,
Weltman, MD, Tilg, H., Moschen, AR, Purdie, DM, Demetris, AJ, Clouston,
AD, 2007. Fibroza progresivă în steatohepatita nonalcoolică: asociere cu
regenerarea alterată și o reacție ductulară. Gastroenterologie 133, 80e90.
Rodier, F., Campisi, J., 2011. Four faces of cellular senescence. J. Cell Biol. 192,
547e556.
Rolo, AP, Teodoro, JS, Palmeira, CM, 2012. Rolul stresului oxidativ în patogeneza
steatohepatitei nonalcoolice. Radic liber. Biol.
Med. 52, 59e69.
Rossiello, F., Herbig, U., Longhese, MP, Fumagalli, M., d'Adda di Fagagna, F.,
2014. Leziuni ireparabile ale ADN-ului telomeric și semnalizare DDR
persistentă ca mecanism cauzal comun al senescenței și îmbătrânirii
celulare. Curr. Opinează. Genet. Dev. 26, 89e95.
Sahin, E., DePinho, RA, 2012. Axa îmbătrânirii: telomeri, p53 și mitocondrii.
Nat. Pr. Mol. Cell Biol. 13, 397e404.
Sarkisian, CJ, Keister, BA, Stairs, DB, Boxer, RB, Moody, SE, Chodosh, LA, 2007.
Senescența indusă de oncogene dependentă de doză in vivo și evaziunea
acesteia în timpul tumorigenezei mamare. Nat. Cell Biol. 9, 493e505.
Schiffer, E., Housset, C., Cacheux, W., Wendum, D., Desbois
Mouthon, C., Rey, C., Clergue, F., Poupon, R., Barbu, V., Rosmorduc, O.,
2005. Gefitinib, un inhibitor EGFR, previne dezvoltarea carcinomului
hepatocelular la ficatul de șobolan cu ciroză.
Hepatologie 41, 307e314.
Schnabl, B., Purbeck, CA, Choi, YH, Hagedorn, CH, Brenner, D., 2003.
Senescența replicativă a celulelor stelate hepatice umane activate este
însoțită de un fenotip inflamator pronunțat, dar mai puțin fibrogen.
Hepatologie 37, 653e664.
Sedelnikova, OA, Horikawa, I., Zimonjic, DB, Popescu, NC, Bonner, WM, Barrett,
JC, 2004. Celulele umane senescente și șoarecii îmbătrâniți acumulează
leziuni ADN cu rupturi nereparabile cu două catene.
Nat. Cell Biol. 6, 168e170.
Serrano, M., Hannon, GJ, Beach, D., 1993. Un nou motiv de reglare în controlul
ciclului celular care provoacă inhibarea specifică a ciclinei D/CDK4.
Natura 366, 704e707.
Serrano, M., Lin, AW, McCurrach, ME, Beach, D., Lowe, SW, 1997.
Rasul oncogen provoacă senescența celulară prematură asociată cu
acumularea de p53 și p16INK4a. Celula 88, 593e602.
Serviddio, G., Bellanti, F., Vendemiale, G., 2013. Biologie radicală liberă pentru
medicină: învățare din boala ficatului gras nonalcoolic. Radic liber.
Biol. Med. 65, 952e968.
Shay, JW, Wright, WE, 2000. Hayflick, limita lui și îmbătrânirea celulară.
Nat. Pr. Mol. Cell Biol. 1, 72e76.
Shi, X., Tian, B., Liu, L., Gao, Y., Ma, C., Mwichie, N., Ma, W., Han, L., Huang, B.,
Lu, J., Zhang, Y., 2013. Proteina Rb este esențială pentru formarea
focarelor heterocromatice asociate senescenței induse de HMGA2 în
celulele WI38 primare. J. Genet. Genomica 40, 391e398.
Sid, B., Verrax, J., Calderon, PB, 2013. Rolul stresului oxidativ în
patogeneza bolii hepatice induse de alcool. Radic liber. Res. 47, 894e904.
Stanulis-Praeger, BM, 1987. Senescența celulară revizuită: o recenzie.
Mech. Îmbătrânire Dev. 38, 1e48.
Tachtatzis, PM, Marshall, A., Aravinthan, A., Verma, S., Penrhyn Lowe, S., Mela,
M., Scarpini, C., Davies, SE, Coleman, N., Alexander, GJ, 2015. Corecție:
infecția cronică cu virusul hepatitei B: relația dintre expresia antigenului
hepatitic B, lungimea telomerilor, senescență, inflamație și fibroză. PLoS
One 10, e0134315.
Takahashi, A., Ohtani, N., Yamakoshi, K., Iida, S., Tahara, H., Nakayama, K.,
Nakayama, KI, Ide, T., Saya, H., Hara, E., 2006 .
Semnalizarea mitogenă și calea p16INK4a-Rb cooperează pentru a
impune senescența celulară ireversibilă. Nat. Cell Biol. 8, 1291e1297.
Torbenson, M., Yang, SQ, Liu, HZ, Huang, J., Gage, W., Diehl, AM, 2002.
Supraexpresia STAT-3 și reglarea în sus a p21 însoțesc regenerarea
afectată a ficatului gras. A.m. J. Pathol. 161, 155e161.
Verna, L., Whysner, J., Williams, GM, 1996. Date mecanice ale N-
nitrozodietilaminei și evaluarea riscului: bioactivare, formarea aductului
ADN, mutagenitate și inițierea tumorii. Pharmacol. Acolo. 71, 57e81.
Vijg, J., Campisi, J., 2008. Puzzle-uri, promisiuni și un remediu pentru îmbătrânire. Natură
454, 1065e1071.
von Zglinicki, T., 2002. Stresul oxidativ scurtează telomerii. Trends Biochim. Sci.
27, 339e344.
Wang, Y., Schulte, BA, Zhou, D., 2006. Senescența celulelor stem hematopoietice
și leziunea pe termen lung a măduvei osoase. Ciclul celular 5, 35e38.
Wood, MJ, Gadd, VL, Powell, LW, Ramm, GA, Clouston, AD,
2014. Reacția ductulară în hemocromatoza ereditară: legătura dintre
senescența hepatocitelor și progresia fibrozei. Hepatologie 59, 848e857.
Yang, HY, Lee, TH, 2015. Enzimele antioxidante ca biomarkeri bazați pe redox:
o scurtă trecere în revistă. BMB Rep. 48, 200e208.
Ye, ZW, Zhang, J., Townsend, DM, Tew, KD, 2015. Stresul oxidativ, reglarea
redox și bolile diferențierii celulare. Biochim.
Biophys. Acta 1850, 1607e1621.
Zhang, X., Han, X., Yin, L., Xu, L., Qi, Y., Xu, Y., Sun, H., Lin, Y., Liu, K., Peng, J.,
2015. Efecte puternice ale dioscinei împotriva fibrozei hepatice.
Sci. Rep. 5, 9713.
Zhu, R., Mok, MT, Kang, W., Lau, SS, Yip, WK, Chen, Y., Lai, PB, Wong, VW, To,
KF, Sung, JJ, Cheng, AS, Chan, HL , 2015.
Silenciarea trunchiată a GAS2 dependentă de HBx promovează
hepatocarcinogeneza prin dereglarea ciclului celular, senescența și
apoptoza mediată de p53. J. Pathol. 237, 38e49.