SPECTROFOTOMETRIA

Principiu:
metoda optica de analiza pentru
 Identificarea
 Separarea
 si dozarea

unor compusi chimici folosind interactiunea substantelor cu radiatia electromagnetica.

Caracteristicile radiatiei electromagnetice:

1. Lungimea de unda (λ) - nm
2. Frecventa (ν) - osc/s

Caracteristicile luminii obisnuite:

1. Policroma
2. Vizibila cu ochiul liber
3. Lungimea de unda= 400-750 nm
4. Descompusa cu ajutorul unei prisme/retea de difractie in radiatii luminoase cu diferite
lungimi de unde cu culori diferite

Radiatia monocromatica are o singura lungime de unda sau un domeniu

foarte ingust de lungimi de unda din spectru.
 
Principiu tehnicii: Substantele absorb selectiv radiatia monocromatica.
SPECTROFOTOMETRIA DE ABSORBTIE MOLECULARA IN MEDIU
VIZIBIL

Legile absorbtiei radiatiilor monocromatice

Un fascicul de lumina monocromatica de intensitate initiala, I0, care traverseaza o solutie

omogena aflata intr-o cuva transparenta isi diminua intensitatea,I t, datorita fenomenelor
de absorbtie si reflexie care apar la interactiunea cu substanta I t<I0 .

1. Legea lui Lambert

Intensitatea uni fascicul de lumina monocromatica care traverseaza un mediu absorbant

scade exponential cu cresterea grosimii stratului absorbant, l.
 
It=I0e-kl
k=coeficient de absorbtie
L/l= drum optic (grosimea stratului absorbant)

2. Legea lui Beer

Intensitatea uni fascicul de lumina monocromatica care traverseaza un mediu absorbant

scade exponential cu cresterea concentratiei mediului absorbant, c.
 
It=I0e-kc
k=coeficient de absorbtie
c= concentratia mediului absorbant

3. Legea Lambert-Beer:

It=I0e-kcl
k=coeficient de absorbtie
c= concentratia mediului absorbant
l= drum optic
Parametri spectrofotometrici:

1. Transmitanta T

 este procentul de radiatie monocromatica care traverseaza stratul absorbant.

 T=(It/I0)x100

2. Absorbanta/extinctia A/E

 este proportia de radiatie monocromatica absorbita de mediu.

 E= ln (It/I0) = klc

k=coeficient de absorbtie
c= concentratia mediului absorbant
l= drum optic

COLORIMETRIA

 aplicatie a spectrofotometriei de absorbtie moleculara in mediul vizibil

 se bazeaza pe faptul ca substantele absorb selectiv radiatia monocromatica, iar
o substanta colorata prezinta cel putin un maxim de absorbtie in domeniul
vizibil (λmax).

-se aplica pentru urmatoarele substante:

1. Substante cu culoare proprie
2. Substante care in prezenta de reactiv fie se coloreaza ele sau se coloreaza solutia in
care se gasesc
3. Substante ce distrug culoarea solutiei in care sunt adaugate.
-trebuie respectate urmatoarele regului:
1. Specificitatea
2. Culoarea sa fie stabila in timp
3. Sa fie respectata legea Lambert-Beer
4. Sa existe λmax.

 METODE DE DETERMINARE A CONCENTRATIILOR UNOR SUBSTANTE

FOLOSIND SPECTROFOTOMETRIA

1. Curba de etalonare

2. Metoda standardului

- se folosesc 3 solutii:

a) Proba

b) Blanc (solvent si reactiv, daca este cazul)

c) Standard (solvent plus reactivi plus substanta de analizat in

concentratii cunoscute)

- citirea extinctiei se face fata de blanc (unde E=0) 

- concentratia probei este egala cu concentratia standardului inmultit cu raportul

dintre extinctia probei si cea a standardului.

Cp= Cs X (Ep/Es)