Med Gas Res. 2011; 1:29.

Publicat online 20 dec 2011. doi:10.1186/2045-9912-1-29

PMCID: PMC3298518
PMID:22185664

Mecanisme de acțiune implicate în terapia cu ozon: este vindecarea

indusă printr-un stres oxidativ ușor?
Masaru Sagai 1șiVelio Bocci 2

Informații despre autor Note despre articol Informații privind drepturile de autor și licență Declinare a răspunderii

Abstract

Mecanismele potențiale de acțiune ale terapiei cu ozon sunt revizuite în această

lucrare. Eficacitatea terapeutică a terapiei cu ozon se poate datora parțial stresului
oxidativ controlat și moderat produs de reacțiile ozonului cu mai multe
componente biologice. Limita dintre eficacitatea și toxicitatea ozonului poate
depinde de puterea stresului oxidativ. Ca și în cazul exercițiilor fizice, este bine
cunoscut faptul că exercițiile fizice moderate sunt bune pentru sănătate, în timp
ce exercițiile excesive nu sunt.

Stresul oxidativ sever activează factorul transcripțional nuclear kappa B

(NFκB), ducând la un răspuns inflamator și leziuni tisulare prin producerea
de COX2, PGE2 și citokine. Cu toate acestea, stresul oxidativ moderat
activează un alt factor transcripțional nuclear, factorul 2 legat de
factorythroid nuclear 2 (Nrf2). Nrf2 induce apoi transcrierea elementelor de
răspuns antioxidant (ARE). Transcrierea ARE are ca rezultat producerea a
numeroase enzime antioxidante, cum ar fi SOD, GPx, glutation-s-
transferaza (GSTr), catalaza (CAT), hemoxigenaza-1 (HO-1), NADPH-
chinona-oxidoreductaza (NQO). -1), enzimele de fază II ale metabolismului
medicamentelor și proteinele de șoc termic (HSP). Atât antioxidanții liberi,
cât și enzimele antioxidante nu numai că protejează celulele de oxidare și
inflamație, dar pot fi capabili să inverseze stresul oxidativ cronic. Pe baza
acestor observații, terapia cu ozon poate activa, de asemenea, Nrf2 prin
stres oxidativ moderat și poate suprima NFκB și răspunsurile inflamatorii. În
plus, activarea Nrf2 are ca rezultat protecția împotriva
boli neurodegenerative, cum ar fi bolile Alzheimer și Parkinson.
Răspunsurile imune ușoare sunt induse prin alți factori transcripționali
nucleari, cum ar fi factorul nuclear al celulelor T activate (NFAT) și
proteina-1 activată (AP-1).

În plus, eficacitatea terapiei cu ozon în bolile vasculare poate fi explicată și prin

activarea unui alt factor transcripțional nuclear, factorul inductibil de hipoxie-
1α (HIF-1a), care este, de asemenea, indus prin stresul oxidativ moderat.
Recent, aceste concepte au devenit larg acceptate. Este subliniată
versatilitatea ozonului în tratarea bolilor vasculare și degenerative, precum și a
leziunilor cutanate, a herniei de disc și a leziunilor carioase primare ale
rădăcinii la copii. Sunt justificate cercetări ulterioare capabile să elucideze dacă
mecanismele de acțiune ale terapiei cu ozon implică factori de transcripție
nucleari, cum ar fi Nrf2, NFAT, AP-1 și HIF-1α.

Cuvinte cheie:ozonoterapia, stresul oxidativ, activitatea NFκB, activitatea Nrf2,

elementul de răspuns antioxidant (ARE), factorul nuclear al celulelor T activate (NFAT),
proteina activată-1 (AP-1), factorul inductibil de hipoxie-1α (HIF-1α)

Introducere

Terapia cu ozon, sau mai precis, principala autohemoterapie ozonată

(O3-AHT), este folosit de aproape 40 de ani. Primul raport despre terapia
cu ozon a fost publicat de Wolff în 1974.1 ]. Deși terapia cu ozon este
folosită acum în întreaga lume, nu a fost încă acceptată ca medicament
ortodox în toate țările.

Cu aproximativ două decenii în urmă, atât oxidul de azot (NO) cât și monoxidul de
carbon (CO) erau considerați doar poluanți toxici ai aerului sau gaze derivate din
fumul de țigară. Cu toate acestea, astăzi, ele sunt considerate gaze esențiale,
deoarece atât NO, cât și CO sunt responsabili pentru acțiuni fiziologice foarte
importante în organism.2 -4 ]. În mod similar, hidrogenul sulfurat, un gaz toxic,
este acum utilizat ca medicament pentru tratamentul osteoporozei.5 ,6 ]. În plus, s- a
raportat că radiațiile cu doze mici au efecte benefice în celulele radiate, în special
prin prelungirea duratei de viață a celulelor prin intermediul
mecanism de hormesis [7 ]. Astfel, înțelegerea noastră despre compușii toxici
și efectele lor în organism pare să se schimbe constant, deoarece ne- am dat
seama că toxicitatea depinde în întregime de doză.

Atât exercițiile fizice, cât și restricția calorică sunt exemple excelente ale efectului
hormetic [8 ]. Este bine cunoscut faptul că exercițiile fizice moderate sunt benefice pentru
sănătate. În plus, restricția calorică este, de asemenea, bine cunoscută pentru a întârzia
debutul bolii și mortalitatea.9 ], pentru a promova sănătatea și pentru a crește
longevitatea prin inducerea sirtuinei 1 (SIRT1), o genă responsabilă de longevitate [10
].

Unul dintre scopurile acestei revizuiri este de a propune o ipoteză asupra

mecanismelor de acțiune a ozonului din punct de vedere al stresului oxidativ și
al factorilor de transcripție nucleari, deoarece stresul oxidativ acționează ca un
al doilea mesager în diferite căi de semnalizare intracelulară. Mai mult, celulele
pot induce rapid răspunsuri biologice împotriva stresului oxidativ pentru a
menține homeostazia biologică și a se adapta la astfel de stres. Și, unii factori
nucleari induc diferite răspunsuri biologice împotriva stresului oxidativ.

Sunt incluse constatările experimentelor și studiilor pe animale privind

aplicațiile clinice ale terapiei cu ozon. În plus, explorăm posibilitatea ca
mecanismele de acțiune ale terapiei cu ozon să fie prin activarea
sistemelor de protecție antioxidantă, unde stresul oxidativ moderat poate
induce activarea factorilor transcripționali nucleari, cum ar fi factorul 2
legat de factorul nuclear eritroid 2 (Nrf2) , factorul inductibil de hipoxie-1α
(HIF-1α), factorul nuclear al celulelor T activate (NFAT) și proteina-1 activată
(AT-1).

1. Paradoxul ozonului: ozonul este întotdeauna toxic?

1.1. Reacția cu ozonul și componentele biologice

Pryor și colab.11 ] au descris anterior mecanismele implicate în toxicitatea

pulmonară a ozonului. Pe scurt, ozonul inhalat reacționează cu polinesaturații
acizii grași (PUFA), care se găsesc în lipidele stratului de căptușeală alveolar
(ALL), pentru a produce produse specifice ozonului, denumite produse de
ozonare lipidă (LOP). Ozonul poate reacționa și cu acizii grași nesaturați
pentru a produce ozonidă Criegee în absența H. 2O. Cu toate acestea, în
prezența lui H2O, aldehide și peroxid de hidrogen (H 2O2) sunt produse [11 ].
Din moment ce H2O este abundent în sistemul pulmonar, principala reacție cu
ozonul va fi formarea de aldehidă și H 2O2produse. Reacția netă este
următoarea:

H2O2+ Fe++---------------------→ OH∘+ OH-+ Fe+++

Se propune ca LOP-urile să fie speciile mai probabil să acționeze ca molecule

de transducție a semnalului. Aceste produse pot activa lipaze specifice,
cum ar fi fosfolipaza A2 sau fosfolipaza C, pentru a elibera acidul arahidonic
(AA). De fapt, nivelurile de AA cresc de peste 10 ori în spălările endobronșice
obținute de la șobolani expuși la 1,1 ppm de ozon timp de 5 zile.12 ]. AA
eliberat poate fi apoi convertit în alți mediatori chimici, cum ar fi diferite
prostaglandine (PG) și factori de activare a trombocitelor (PAF), prin
ciclooxigenaze (COX) și lipoxigenaze (LOX) pentru a induce un răspuns
inflamator. Mai mult, s-a raportat că 4-hidroxinonenalul (4-HNE), cel mai toxic
tip de aldehidă [13 ,14 ] si H2O2[15 ,16 ], au capacitatea de a participa la
transducția semnalului.

1.2. Efectele ozonului asupra căilor respiratorii: hiperreactivitate și inflamație a

căilor respiratorii

Hiperreactivitatea căilor respiratorii este unul dintre semnele anterioare ale

inhalării de ozon. O creștere a hiperreactivității căilor respiratorii este însoțită de
inflamarea căilor respiratorii. Aceste modificări sunt similare cu cele ale fumatului.
Lin și colab.17 ] au propus mecanismele de semnalizare din spatele inflamației
căilor respiratorii induse de fumat. Pe scurt, sa demonstrat că extractul de fum de
țigară (CSE) adăugat într-un sistem de cultură celulară de celule musculare
netede traheale umane se leagă de receptorul Toll-like 4 (TLR4). TLR4 activează
apoi NADPH-oxidaza prin molecule adaptoare, cum ar fi MyD88, pentru a produce
specii reactive de oxigen (ROS). În plus, ROS activează protein kinazele activate
cu mitogen (MAPK) și MAPK fosforilează partea IκBα
al factorului nuclear kappa B și al complexului IκBα (NFκB-IκBα) găsit în
fracțiile de citosol. Ca rezultat, NFkB este eliberat din complex și acest NFkB
liber intră în nuclee pentru a activa gena COX2. COX2 produce apoi PGE2,
care stimulează un număr de citokine, printre care TNFα și IL-6.
Eicosanoida și citokinele induc apoi inflamația căilor respiratorii în timpul
stadiului incipient al expunerii. Aceste reacții apar și în celulele epiteliale
ale căilor respiratorii, celulele endoteliale și macrofage. Această cascadă de
semnalizare este susținută și de constatările lui Williams și colab. [18 ]. Ei
au demonstrat că șoarecii knockout TRL2 sau TLR4 nu au hiperreactivitate a
căilor respiratorii și infiltrare de neutrofile chiar și după o expunere la ozon
de 3 ppm. Aceste observații sugerează cu tărie că există o relație puternică
între inflamație și TLR.

Există experimente bune [19 ,20 ] și clinice [21 ] studii care arată că expunerea
prin inhalare la ozonul troposferic prelungit dăunează sistemului respirator și
organelor extrapulmonare. Pielea, dacă este expusă pe larg, poate contribui, de
asemenea, la deteriorarea [22 ,23 ]. prin urmarereactivitatea puternică a
ozonului,care are o valoare a potențialului electrochimic, E °= +2,076 V,a
contribuit la stabilirea dogmei conform căreia ozonul este întotdeauna toxic și
aplicarea sa medicală trebuie interzisă.Cu toate acestea, se va demonstra că
această dogmă nu este susținută prin compararea acțiunii ozonului pe suprafața
plămânilor față de sângele uman. Evident că trebuie spus că ozonul nu trebuie
niciodată inhalat de nimeni din clinică. Cu toate acestea, se pare că ozonul poate
fi produs în corpul nostru similar cu NO, CO și H 2S: s-a raportat că calea de oxidare
a apei catalizată de anticorpi a produs o specie moleculară suplimentară cu o
semnătură chimică față de cea a ozonului.24 ]. Această specie este, de asemenea,
generată în timpul izbucnirii oxidative a neutrofilelor umane activate și în timpul
inflamației.25 ].

Punctele fundamentale de luat în considerare sunt: topografia,

caracteristicile anatomice și biochimice ale organelor expuse zilnic la ozon
versus capacitatea antioxidantă puternică a sângelui expus la o doză mică și
precis calculată de ozon pentru câteva minute. Este clar cum sistemul
respirator supus unui stres oxidativ cronic poate elibera lent, dar constant, o
cantitate imensă de compuși toxici deja menționați capabili să acționeze local
și să intre în circulație și să provoace daune grave.
1.3. Originea, distribuția și soarta compușilor toxici eliberați de sistemul
pulmonar în timpul și după expunerea la ozon

La nivelul spațiului aerian, celulele alveolare sunt în mod constant

suprapuse de o peliculă compusă din apă, săruri și o multitudine de
biomolecule, cum ar fi o abundență de fosfolipide surfactanți și o cantitate
foarte mică de proteine, antioxidanți lipofili și hidrofili. Orice gaz inspirat,
în funcție de concentrația și presiunea sa relativă, trebuie mai întâi să se
dizolve în stratul apos înainte de a ajunge la microcirculația alveolară și la
eritrocite. Acest proces presupune un transport fizic reglat de un gradient
de presiune si un proces de difuzie. Pe de altă parte, se știe că ozonul, în
contact cu apa biologică, nu respectă legea lui Henry și, deși este de zece
ori mai solubil decât oxigenul, nu este transferat în capilarele alveolare
deoarece reacționează imediat cu biomoleculele prezente. în stratul de
căptușeală alveolar (ALL).Trebuie subliniat că grosimea medie a ALL este de
numai 0,2 microni[26 ]. După cum s-a emis ipoteza [11 ], ozonul nu pătrunde
în celule, dar oxidează antioxidanții disponibili și reacționează instantaneu
cu acizii grași polinesaturați ai surfactantului (PUFA) prezenți la interfață
pentru a forma specii reactive de oxigen (ROS), cum ar fi peroxidul de
hidrogen și un amestec de LOP eterogene, inclusiv radicali lipoperoxil,
hidroperoxizi, malonildialdeid, izoprostani, ozonide și alchenali, în special
4-HNE [27 -29 ]. Deoarece colesterolul este o componentă a fluidelor de
căptușeală epiterică (ELF) și deoarece legătura sa dublă este ușor atacată
de ozon, poate da naștere la oxisteroli activi biologic.30 ,31 ] din care 3β-
hidroxi-5-oxo-5,6-secocolestan-6-al (CSeco) a fost implicat în toxicitatea
pulmonară, boala Alzheimer și ateroscleroza.

Capacitatea antioxidantă prezentă în LLA umană este extrem de limitată și,

deși diferite porțiuni ale tractului respirator pot avea niveluri diferite de
antioxidanti, acestea sunt întotdeauna irelevante în comparație cu cantitatea
de antioxidanți care, în sânge, îmblânzesc ușor reactivitatea la ozon. În primul
rând, luând în considerare întinderea suprafeței alveolare (1 m 2/kg greutate
corporală) la un om de 70 kg, se poate calcula că volumul normal al ALL
variază doar între 17 și 25 ml, în timp ce 5 L de sânge includ aproximativ 2,7
L de plasmă. Mai mult decât atât, masa eritrocitară, în valoare
până la aproximativ 2,3 kg, are o capacitate antioxidantă enormă datorită
antioxidanților hidrolipofili și enzimelor capabile să reducă orice antioxidant în
câteva minute.32 ]. Eritrocitele, prin activitatea glucozo-6-fosfat dehidrogenazei
în ciclul pentozei, pot furniza continuu echivalenți reducători de NADPH.
Cantitatea de albumină plasmatică care acționează ca „compus de sacrificiu”
împotriva oxidanților este impresionantă (99,9% mai mare decât în ALL). Mai
mult, eritrocitele au un conținut de GSH de aproximativ 2,2 mM (de aproape 800
de ori mai mare decât plasma) și, prin urmare, conțin o rezervă uriașă. În cursul
evoluției, organismele aerobe au dezvoltat un sistem antioxidant sofisticat
împotriva oxigenului și, deși aproximativ 2% din oxigenul inhalat generează anion
superoxid, acesta este în mod normal neutralizat la un pO alveolar. 2 presiune de
100 mm Hg. Este util, totuși, să rețineți că șobolanii care inhalează oxigen pur
(presiune alveolară la aproximativ 700 mmHg) mor în decurs de
60-66 ore.33 ], ozonul este mult mai reactiv decât oxigenul, iar respirația aerului
care conține 10,0 ppm de ozon provoacă moartea în 4 ore la șobolani. Pentru a
înțelege efectele unei expuneri zilnice la ozon de 8 ore (aprilie-octombrie), trebuie
să cunoaștem nivelurile medii de ozon din mediu care variază considerabil din
mai multe motive. Actul SUA pentru Aer Curat a stabilit un nivel de ozon de 0,06
ppm ca o concentrație medie de 8 ore pentru a proteja sănătatea lucrătorilor
(Agenția pentru Protecția Mediului din SUA, 2005).
Evaluarea studiilor recente [34 ,35 ] permite stabilirea unei concentrații medii de
ozon din mediu de 0,09 ± 0,01 ppm. Cu toate acestea, concentrația de ozon din
aerul urban poate depăși 0,8 ppm în condiții de poluare ridicată [27 ]. Timp de 8
ore în repaus (un volum curent de aproximativ 10 l/min și o reținere a ozonului
inspirat de nu mai puțin de 80%), doza de ozon se ridică la 0,70-0,77 mg zilnic
sau 21,0-23,1 mg lunar. Acesta este probabil aportul minim de ozon, deoarece
activitatea fizică crește volumul de aer inhalat și, la ora de vârf, nivelul de ozon
poate crește cu ușurință la 200-300 ppb, reducând funcțiile pulmonare și sporind
riscul de deces cardiovascular.21 ,34 -36 ]). Mai mult, toxicitatea este cu siguranță
sporită de prezența NO2, CO, SO2și particule în suspensie (PM10). Pe această
bază, pare clar cum ozonul a generat ROS și LOP-uri la nivelul ALL, după ce a fost
stins minim de insuficienți, antioxidanții vor acționa ca semnale celulare capabile
să activeze factorul nuclear-kappa B (NF-κB), NO-sintaza. , unele protein kinaze,
sporind astfel sinteza și eliberarea de TNFα, IL-1, IL-8, IFNy și TGFβ1 și posibila
formare de specii de nitrare. Cu un flux tot mai mare
în spațiul alveolar al neutrofilelor și al macrofagelor activate, va începe un cerc
vicios, perpetuând producerea unui exces de ROS, inclusiv acid hipocloros.37
,38 ]. Mai mult, în timpul verii, există un flux continuu de ozon care intră în
spațiul respirator și, de asemenea, însuși faptul că ozonul se dizolvă în ALL și
reacționează imediat; astfel, în fiecare secundă, mai mult ozon reacționează
astfel încât într-o perioadă de 6 luni doza cumulată (probabil până la 150-300
mg ozon) devine cu adevărat dăunătoare. În mod similar, expunerea de câteva
luni la ozon sau la un stres oxidativ prelungit din cauza unei boli inflamatorii
cronice (ateroscleroză, diabet, cancer) poate crește nivelurile plasmatice de 4-
HNE până la 5-20 μM și, în ciuda detoxificării continue, acestea pot exercita
efecte patologice ca cele observate în studiile in vitro efectuate cu celule
leucemice [39 ], celulele epiteliale ale cristalinului [ 40 ], celule T Jurkat [41 ] și
la testarea colesterolului secoaldehidă (CSeco) în cardiomioblaste [31 ].
Interesant este că toleranța la ozon sau 4-HNE este mult mai ușor atinsă prin
stres oxidativ mic și repetat decât după o oxidare continuă și grea.42 ,43 ]. Pe
de altă parte, un nivel endogen normal de 4-HNE (0,1-0,7 μM) pare să
acționeze ca un agent de apărare împotriva lui însuși și a altor compuși toxici.13
,44 ]. Astfel, comportamentul biologic al HNE este un exemplu iluminator al
modului în care nivelul seric fiziologic al unei aldehide potențial toxice produsă
de peroxidarea normală este utilizat cu competență pentru menținerea
homeostaziei.

În cele din urmă, merită să menționăm că suprafața vastă a pielii, posibil

expusă ore întregi la ozon și radiații UV, poate contribui la toxicitatea
generală: mai multe studii efectuate prin expunerea șoarecilor fără păr la
ozon au arătat nu numai epuizarea antioxidanților pielii, ci și inducerea unui
stres oxidativ remarcabil [22 ,23 ]. În consecință, oamenii, care trăiesc în țări
fierbinți și în timpul verii, devin deosebit de sensibili la ozon și iradierea UV.
Dimpotrivă, o expunere cvasitotală (excluzând gâtul și capul) a voluntarilor
umani la o concentrație foarte scăzută de ozon într-o cabină de saună timp
de 20 de minute are ca rezultat o creștere foarte tranzitorie a LOP-urilor în
circulația periferică care exercită efecte terapeutice în pacienţii cu ischemie
cronică a membrelor [45 ,46 ] interpretat ca datorită unei induceri a
enzimelor antioxidante și HO-1. În concluzie, deși ozonul nu este singurul
vinovat pentru efectele negative asupra sănătății, el contribuie semnificativ
pentru a exacerba bolile respiratorii și crește mortalitatea la aproximativ 40%
din populația totală a SUA [21 ]. Problema este legată de concentrația
anormală de ozon a ozonului troposeric și de creșterea continuă a producției
de compuși nocivi din cauza arderii în exces a cărbunelui, petrolului și
pădurilor virgine. În timpul acestui secol, dacă activitățile umane continuă să
elibereze în atmosferă cantitatea reală de emisii globale, Pământul va
experimenta un nou maxim termic paleocen-eocen sau"o perioadă de
febră"cu consecinţe dramatice. Toxicitatea generală, datorată agresivității
constante a ozonului asupra plămânilor și parțial asupra pielii expuse,
asociată cu eficiența relativă a sistemului de detoxifiere, depășit progresiv
de stresul peren, favorizează efecte patologice precum inflamația și
degenerarea celulară în special asupra plămânilor, ficat (fibroză), inimă,
rinichi și creier [47 ,48 ]. În consecință, organele vitale pot fi considerate a fi
supuse unui fel de „ploaie toxică” produsă în sistemul pulmonar. Evident,
aceste cunoștințe au popularizat ideea de toxicitate pentru ozon dar, în
secțiunea următoare, se va clarifica că generalizarea acestui concept este
incorectă.

2. Cum acționează o doză adecvată de ozon asupra sângelui uman?

În perioada 1970-2000, autohemoterapia ozonată a fost efectuată în mod

empiric din cauza generatoarelor de ozon imprecise și a necunoașterii
mecanismelor de acțiune a ozonului în sângele uman. Cu toate acestea, până
în 1998, două evenimente cruciale au schimbat perspectiva: în primul rând,
noi generatoare de ozon cu fotometre precise capabile să măsoare cu
precizie (la 253,7 nm) concentrația de ozon au devenit disponibile și, în al
doilea rând, a fost clarificat cum funcționează ozonul atunci când este
amestecat cu sânge ex vivo. [49 ,50 ]. Oxigenul se echilibrează cu apa
extracelulară și intraeritrocitară înainte de a se lega de hemoglobină până
când este complet oxigenată, așa cum arată creșterea rapidă a pO2de la
aproximativ 40 până la 400 mmHg. Ozonul, de zece ori mai hidrosolubil decât
oxigenul, se dizolvă ușor în mediul apos al plasmei și este parțial (între 20 și
40%) stins de antioxidanți hidrofili, cum ar fi glutationul redus, acizii ascorbic
și uric care acționează ca compuși de sacrificiu, în timp ce cea mai mare parte
reacţionează cu PUFA transportat de albumină. „Fereastra terapeutică” a fost
atent determinată și variază între 10 și 80 μg/ml
(0,21-1,68 μmol/ml) ozon per ml de sânge. Asigură un stres oxidativ mic și
precis, capabil să obțină eficacitate medicală, dar fără toxicitate. Trebuie
remarcat faptul că ozonul acționează ca un pro-medicament deoarece, în timpul
acestor reacții rapide, ozonul dispare dar generează doi mesageri cruciali:
primul este H.2O2iar al doilea este un amestec de LOP exemplificat în final de 4-
HNE (din PUFA omega-6) și 4-HHE (trans-4 hidroxi-2-hexenal din PUFA
omega-3).

Comportamentul și farmacodinamia H2O2au fost constatate: formarea

inițială a unui gradient între plasmă și apa intracelulară [51 ] permite
intrarea acestuia în eritrocite, limfocite și trombocite, dar concentrația sa
rămâne în jurul a câțiva micromoli deoarece se reduce rapid la H2O prin
GSH liber, catalază și GSH-Px [52 ]. Timpul său de înjumătățire este mai mic
de 60 de secunde și totuși concentrația sa intracelulară este critică,
deoarece pentru a activa unele căi biochimice (formarea GSSG cu activarea
ciclului pentozei în celule roșii și activarea unei tirozin kinaze în limfocite),
trebuie să atingă un prag critic care, totuși, nu este citotoxic.
Conceptul de prag este important din punct de vedere fiziologic și
înseamnă că o doză de ozon sub 10 μg/ml de gaz per ml de sânge, în
majoritatea cazurilor, este ineficientă din punct de vedere biologic
deoarece doza de ozon este total neutralizată de antioxidanții din plasmă.
Cu alte cuvinte, conceptul de prag ajută la înțelegerea faptului că o doză
prea mică de ozon poate fi ineficientă (efect placebo), în timp ce o doză
mai mare decât cea terapeutică poate fi toxică. Este aproape inutil să
adăugăm că eritrocitele spălate cu soluție salină, suspendate în soluție
salină,53 ] care a favorizat conceptul de toxicitate pentru ozon. Cu condiția
ca doza de ozon să se încadreze în intervalul bine definit, există doar o
scădere tranzitorie (nu mai mult de 25%) a capacității antioxidante
puternice a plasmei.54 ] complet reconstituit în 20 de minute datorită
eficienței sistemului redox [32 ]. Nu există nici afectarea eritrocitelor și nici
a altor celule: hemoliza este neglijabilă (de la 0,4 până la 1,2%), nu există
scurgeri de K+ și methemoglobina rămâne normală.55 ]. Trebuie adăugat
că eritrocitele ozonate prezintă o glicoliză îmbunătățită cu o creștere a
nivelurilor de ATP și 2,3-DPG, care sunt capabile să modifice curba de
disociere a HbO2spre dreapta, confirmând observarea unei livrări
îmbunătățite de oxigen în
boală arterială obstructivă periferică. Date extinse au fost raportate în
recenzii [56 -58 ] și două cărți [46 ,50 ]. Acum este clar că o doză
„fiziologică” de ozon (cel mai frecvent variază între 20 și 40 μg/ml de ozon
per ml de sânge) declanșează un stres oxidativ acut și precis calculat, capabil
să activeze mai multe procese biologice rezumate în tabel.Tabelul
1.1 . Ce se întâmplă în timpul perfuziei rapide a sângelui hiperoxigenat-
ozonat în donator? Hiperoxigenarea sângelui (pO 2, la aproximativ 400
mmHg) este irelevant deoarece, în timpul perioadei de perfuzie de 15 min,
se amestecă cu sângele venos astfel încât pO venoasă finală 2presiunea
relativă este cu greu modificată. Oxigen-ozon se comportă în mod similar
atunci când acest amestec de gaz intră în contact fie cu pielea umană
umedă [45 ] sau mucoasa colon-rectală de iepure [59 ], ozonul se dizolvă
imediat în apa care acoperă epiteliul și reacționează fie cu sebum, fie cu
mucoproteinele, fecalele și orice alte biomolecule prezente în filmul lichid
generând peroxid de hidrogen și LOP. Doar LOP-urile sunt absorbite prin
limfatice și capilarele venoase și ajung mai întâi la ficat și apoi intră în
circulația generală unde acestea au fost măsurate.59 ].

tabelul 1

Terapia cu ozon poate induce următoarele răspunsuri biologice

Îmbunătățește circulația sângelui și livrarea de oxigen în țesutul ischemic datorită NO, CO și

A)
crește nivelul de 2, 3-DPG intraeritrocitar.
b) Îmbunătățește metabolismul general prin îmbunătățirea livrării de oxigen.

c) Reglează enzimele antioxidante celulare și inducerea HO-1 și HSP70.

d) Induce o activare ușoară a sistemului imunitar și intensifică eliberarea factorilor de creștere.
e) Nu produce efecte secundare acute sau tardive.

Asigură o stare de bine surprinzătoare la majoritatea pacienților, probabil prin stimularea

f)
sistemul neuroendocrin.
g) Activează sistemele neuroprotectoare.
Deschide într-o fereastră separată

Referințe: [46 ,58 ,81 ,84 ,119 ]

Următorul pas important a fost evaluarea distribuției, a soartei și a semnificației

biologice a alchenalelor. După cele 5 minute se amestecă sângele cu amestecul
de gazeex vivo,sângele ozonat este gata pentru a fi infuzat înapoi în
pacient donator. Atât ozonul, cât și peroxidul de hidrogen au fost epuizate,
dar alchenalele au format aducte fie cu Chist 34 de albumină, fie/și GSH și
vor fi infuzate în circulația pacientului. Ei vor interacționa cu celulele
endoteliale și apoi cu miliarde de celule ale diferitelor organe.46 ]. Doar în
cazul în care un ozonoterapeut inexpert folosește o doză excesivă de ozon,
el poate oxida Cys 34 la acid sulfenic: RSOH, care totuși poate fi redus din
nou.

Distribuția 4-HNE și a alchenalelor similare are relevanță farmacotoxicologică:

datorită toxicității intrinseci a aldehidelor, este important să se cunoască
metabolismul și soarta acestora: Alary et al. [60 ] au raportat că aproximativ
70% din 4-HNE este excretat în urină în decurs de 2 zile după administrarea
sa intravenoasă la șobolani. Siems și Grune [61 ], după ce a investigat
metabolismul 4-HNE în mai multe celule și organe de mamifere, a demonstrat
că 4-HNE, la o concentrație de 100 μM, a fost degradat în 3 minute de incubare
la 37°C și a durat doar 10-30 s. pentru a restabili nivelul fiziologic de
aproximativ 0,2 μM. Cinetica dispariției din sângele ușor ozonat a substanțelor
reactive la acid tiobarbituric (TBARS), inclusiv MDA și 4-HNE a fost măsurată
la șase pacienți cu degenerescență maculară legată de vârstă (ARMD), iar
timpul lor de înjumătățire a fost echivalent cu 4,2 ± 1,7 min.62 ]. Pe de altă
parte, atunci când aceleași probe au fost incubate in vitro (la 37°C și pH 7,3),
nivelurile LOPs cu greu au scăzut în următoarele 9 ore, indicând stabilitatea lor
într-un mediu acelular și sugerând relevanța catabolismului celular.49 ]. În
general, se pare că mamiferele au dezvoltat un mecanism eficient de
detoxifiere pentru a metaboliza 4-HNE și a minimiza toxicitatea acestuia:
Awasthi și colab. [42 ] nu numai că au indicat șase enzime: glutation S-
transferaze, aldocetoreductaze, aldozo reductază, aldehid dehidrogenaze
Cyp450 4A și enzime de β-oxidare, importante în metabolismul 4-HNE, dar ei
și alți autori [40 ,43 ,44 ] au subliniat că celulele precondiționate de stres 4-
HNE pot dezvolta un răspuns adaptativ semnificativ prin reglarea pozitivă a
sintezei γ-glutamat cistein ligaza, γ-glutamiltransferaza, γ-glutamil
transpeptidază, HSP-70, hemoxigenaza-1 și o varietate de enzime
antioxidante. Există acum un consens amplu cu privire la importanța inducerii
toleranței celulare la nivelurile submicromolare de 4-HNE.13 ,63 -66 ]. În acest
moment, pare util
să subliniem că organismele de mamifere, pentru controlul toxicității 4-HNE din cauza
stresului oxidativ și menținerea acesteia la un nivel plasmatic fiziologic de 0,3-0,7 μM,
determină următoarele procese:

A)Diluare, un calcul simplu indică faptul că o injectare în bolus a unei doze de

500 μM 4-HNE în 10 ml de plasmă, odată diluată într-un volum plasmatic- lichid
extracelular de 12 l, indiferent de orice alt proces, produce o concentrație de
până la 0,04 μM.

b) detoxifiere,datorită inactivării directe a 4-HNE cu GSH și ascorbat sau

interacțiunii cu miliarde de celule dotate cu enzime detoxifiante.42 ]

c) Excreţie,în bilă și urină după detoxifierea hepatică [67 ] și excreția

renală [60 ], și

d) Interiorizarea celulelor, acesta este un punct crucial și interesant deoarece

efectele biologice consecvente pot fi fie negative, fie pozitive. Expunerea de
câteva luni la ozonul inhalat sau la un stres oxidativ prelungit din cauza unei
boli cronice (ateroscleroză, diabet, inflamație) poate crește, eventual,
nivelurile plasmatice de 4-HNE până la 5-20 μM și, în ciuda detoxificării
continue, pot exercita efecte patologice. efecte. Interesant este că toleranța la
ozon sau la 4-HNE este mult mai ușor atinsă prin stres oxidativ mic și repetat
decât după o oxidare continuă și grea [42.43]. Pe de altă parte, un nivel
endogen normal de 4-HNE (0,1-0,7 μM) pare să acționeze ca un agent de
apărare împotriva lui însuși și a altor compuși toxici. În această etapă,
alchenalele dobândesc marea valoare pentru a declanșa ipotetic
mecanismele moleculare care conduc la obținerea eficacității medicale fără
toxicitate.Acest aspect este discutat în secțiunea următoare.
3. Stresul oxidativ și factorii transcripționali nucleari în
carcinogeneză

Inflamația cronică joacă un rol critic în creșterea (transformarea)

neoplazicului, precum și în multe alte boli. Inflamația este indusă prin
activarea NFκB de diverși factori inflamatori, cum ar fi LPS și stresul
oxidativ sever derivat din medicamentele care induc iNOS, COX-2 și
citokine inflamatorii. Acești factori induc supraviețuirea, creșterea și
proliferarea celulelor tumorale și duc la neoplazie.68 ]. Prin urmare,
inhibarea NFκB este o țintă importantă pentru prevenirea și tratamentul
cancerului. De exemplu, se știe că inhibitorii NFkB, cum ar fi vitamina E,
resveratrolul, curcumina, catechina și aspirina pot întârzia sau suprima
creșterea tumorii.

3.1. Mecanisme anti-neoplazice ale Nrf2

Inflamația cronică joacă un rol critic în creșterea neoplazică, precum și

în multe alte boli inflamatorii. Prin urmare, inhibarea NFkB este o țintă
importantă pentru prevenirea și eventual tratamentul cancerului. Are
Nrf2 un rol în terapia cu ozon? Li și colab.69 ] a demonstrat că Nrf2, un
important factor de transcripție nuclear citoprotector, suprimă activarea
NFκB. După cum se arată în Fig.Fig.1 (stânga1 (partea stângă), Nrf2 este
de obicei prezent în citosol ca un complex cu proteina Keap-1. Întrebarea
este: sunt alchenalele capabile să disocieze acest complex?
Proteina Keap-1 are două grupe SH și formarea de aducti poate
determina o modificare conformațională favorizând disocierea acesteia.
Pe lângă alte căi de experimentat și un stres oxidativ ușor, Nrf2 este
eliberat din acest complex și este transportat în nucleu. Nrf2 transportat
formează un nou complex cu proteina Maf și induce transcripția diferitelor
enzime antioxidante și de detoxifiere de fază II prin legarea la elementul
de răspuns antioxidant (ARE) de pe ADN. Enzimele antioxidante
specifice care sunt activate includ SOD, catalaza (CAT), GSH, GSH-
reductaza, GPx, GSH-Stransferaza (GSTr), HO-1, NADPH chinina-
oxidoreductaza 1 (NQO1), proteina de soc termic 70 (HSP70). ), și
enzimele de fază II.
Sulforafanul (SFN), o componentă din broccoli este cea mai comună
fitochimică care induce transcripția diferitelor enzime antioxidante prin
activarea Nrf2. De fapt, SFN singur poate acționa și ca un factor de stres
oxidativ în celule.

3.2. Fitochimicele anti-neoplazice nu sunt eficiente la șoarecii knockout

Nrf2

În secțiunea anterioară, efectele anti-neoplazice ale fitochimicelor, cum ar fi

SFN, au fost explicate cu privire la activarea lor prin intermediul Nrf2. Este bine
cunoscut faptul că SFN posedă efecte chimiopreventive puternice prin
inducerea enzimelor celulare detoxifiante/antioxidante prin intermediul Nrf2.70
]. Dacă aceste efecte sunt într-adevăr mediate prin Nrf2, atunci acțiunile SFN ar
trebui să fie inactive la șoarecii knockout Nrf2 și active la șoarecii de tip sălbatic.
Într-adevăr, această observație a fost făcută de Xu și colab.68 ] când au examinat
eficacitatea chimiopreventivă a SFN în tipul sălbatic Nrf2 (+/+) și Nrf2
șoareci knockout (-/-). O aplicare topică a 100 nmol de SFN o dată pe zi
timp de 14 zile înainte de tratamentele cu 7,12-dimetil-benz(a)antracen/ 12-
Otetradecanoil-forbol-13-acetat a scăzut incidența tumorilor cutanate în
Nrf2 (+/ +) șoareci comparativ cu grupul tratat cu vehicul. Mai important,
nu au existat efecte chimiopreventive provocate de pretratamentul SFN la
șoarecii Nrf2 (-/-). Luate împreună, aceste rezultate demonstrează, pentru
prima dată, că șoarecii Nrf2 (-/-) sunt mai sensibili la tumorigeneza pielii și
că efectele chemopreventive ale SFN sunt mediate prin activarea Nrf2.

3.3. Stresul oxidativ indus de efort moderat induce activarea Nrf2

Exercițiul moderat și sever are ca rezultat producerea de ROS atât în mușchi, cât și
în organele interne. ROS nu sunt doar toxice, ci joacă, de asemenea, un rol important
în semnalizarea celulară și în reglarea expresiei genelor. Se știe că exercițiile fizice
moderate sunt bune pentru sănătate, spre deosebire de exercițiile severe. Cu toate
acestea, mecanismele de acțiune a ROS produse în timpul exercițiului nu sunt pe
deplin înțelese.

Producția de ROS în timpul efortului se datorează în primul rând tulburărilor

sistemului mitocondrial de transport de electroni induse prin creșterea
consumului de oxigen, creșteri ale activității NADPH-oxidazei rezultate din
ischemie și reperfuzie a organelor interne și inflamației induse prin
infiltrarea celulelor inflamatorii, precum macrofagele și neutrofilele.
Nivelurile de producție de ROS pot depinde și de intensitatea exercițiilor
fizice.

Gomez-Cabrera et al [71 ] au raportat că exercițiile fizice moderate au ca

rezultat activarea kinazelor MAP și a căii NFκB și, în consecință, exprimarea
eNOS, iNOS și MnSOD. Interesant, toate aceste modificări au fost eliminate
atunci când producția de ROS a fost inhibată cu alopurinol, un inhibitor al
NADPH-oxidază. Aceste descoperiri sugerează că producția de ROS indusă
de exercițiu are ca rezultat expresia și activarea enzimelor antioxidante, cum
ar fi MnSOD și GPx, în primul rând prin activarea căii NFκB. Cu toate
acestea, dovezi privind inducerea antioxidantilor
enzimele prin calea NFκB încă lipsesc. Astfel, nu putem respinge
posibilitatea ca și Nrf2 să fie activat. Astfel, a ipoteza că exercițiile
moderate induc expresia enzimelor antioxidante și că producția de ROS
induce activarea NFκB și Nrf2 poate fi rezonabil, dar rămâne de
clarificat.

3.4. Răspunsuri biologice induse prin activarea Nrf2/Keap1/ARE

Nrf2 este activat de stresul oxidativ ușor și crește transcripția ARE.72 , 73

]. Acesta poate fi un posibil mecanism din spatele efectelor antineoplazice
ale acestei căi. Alte răspunsuri biologice potențiale provocate printr-o
activare a căii Nrf2/Keap1/ARE sunt rezumate în tabelMasa 2.2 .
Punctele de la 1 la 7 au fost deja discutate de Dinkova- Kostova [74 ], în
timp ce punctele 8 și 9 vor fi discutate în secțiunile următoare.

masa 2
Răspunsuri biologice induse prin activarea Nrf2/ARE cu stres oxidativ ușor

1) Creșterea nivelurilor de antioxidanți direcți, cum ar fi GSH, CO și bilirubină.

2) Stimularea regenerării GSH prin glutation și tioredoxin reductază.
Creșterea nivelurilor de enzime care detoxifică oxidanții și electrofilele (ex. catalaza, SOD,
3)
GPx, GSTr, NADPH-chinona oxidoreductaza (NQO1), HO-1, HSP70, etc).
4) Creșterea nivelurilor enzimelor de faza II.
5) Inhibarea inflamației mediate de citokine prin inducerea leucotrienei B4 reductazei.
6) Reducerea supraîncărcării cu fier și a stresului oxidativ ulterior indus de feritina crescută.
7) Recunoașterea, repararea și îndepărtarea proteinelor deteriorate.

8) Protecție împotriva apoptozei induse de stresul oxidativ*.

9) Creșterea activității de reparare a ADN-ului*.

Deschide într-o fereastră separată

Ref de la 1) la 7): Dinkova-Kostova AT [74 ].

Referințe de la 8) la 9): Villeneuve NF. [78 ].

3.5. Nrf2 este asociat cu apoptoza și repararea ADN-ului

Numeroase rapoarte sugerează că stresul oxidativ induce apoptoza celulară, iar
antioxidanții, cum ar fi nivelurile crescute de HO-1, protejează celula
împotriva apoptozei. HO-1 este indus de Nrf2 și previne apoptoza. De
exemplu, lucrarea complexă a lui Brunt și colab.75 ] a demonstrat că
apoptoza celulelor musculare netede vasculare umane este indusă de H2O2și
că activarea promotorului HO-1 prin Nrf2 protejează aceste celule de efectele
apoptotice ale H2O2. Mai mult, apoptoza indusă fie prin intermediul cromului
(VI) [76 ] sau LPS [77 ] protejat de asemenea de inducția HO-1 dependentă de
Nrf2. Aceste descoperiri sugerează că efectele anti-apoptotice se datorează
activării sistemelor de protecție antioxidantă induse prin activarea Nrf2.

Nrf2 s-a dovedit, de asemenea, a fi implicat în repararea ADN-ului (#9 în

tabel Masa 2).2 ). Villeneuve și colab.78 ] a descoperit că Nrf2 este asociat
în mod semnificativ cu repararea ADN-ului. De fapt, s-a descoperit că atât
Nrf2, cât și p21 reglează echilibrul fin între viață și moarte prin controlul
nivelurilor ROS. Adică, efectele citoprotectoare, în special cele privind
repararea ADN-ului sau apoptoza, sunt probabil dependente de
magnitudinea stresului oxidativ. Prin urmare, activarea mediată de p21
a căii de semnalizare Nrf2 poate fi primul mecanism de apărare utilizat
pentru a reduce ROS în condiții de stres scăzut. La niveluri scăzute de
stres oxidativ, p21 activează răspunsul antioxidant dependent de Nrf2,
care protejează celula de deteriorarea celulară indusă de ROS. La
niveluri moderate de stres oxidativ, care implică deteriorarea ADN-ului,
p21 induce oprirea ciclului celular pentru a permite repararea ADN-ului.
La niveluri ridicate de stres oxidativ sau în punctul de nereturnare, Nrf2
este distrus și, prin urmare,

În concluzie, s-a demonstrat că răspunsul antioxidant dependent de Nrf2

protejează împotriva bolilor legate de stresul oxidativ, cum ar fi cancerul.
79 ,80 ] boli neurodegenerative [81 ,82 ], boala cardiovasculara [83 -85 ],
emfizem pulmonar [86 ], inflamație [87 ,88 ] și îmbătrânirea [89 ]. Acest
context va fi util pentru evaluarea rolului Nrf2, dar relevanța sa reală
rămâne să fie demonstrată prin experimente selectate legate de terapia cu
ozon.
4. Răspunsuri biologice și efecte terapeutice induse de
ozonoterapia

Versatilitatea aplicațiilor de terapie cu ozon este impresionantă, dar există

unele limitări și, prin urmare, terapia cu ozon nu este un panaceu. Din datele
disponibile, bolile vasculare și unele degenerative sunt cele mai potrivite
pentru a fi tratate, în timp ce bolile infecțioase acute și cronice precum
infecția cu HIV și hepatita cronică C nu pot fi vindecate cu ozonoterapia,
deoarece atât virusurile, cât și alți agenți patogeni, fie liberi în plasma sau/și
prezente în interiorul celulelor, nu pot fi inactivate de către mesagerii
ozonului și sunt de fapt bine protejate de capacitatea antioxidantă puternică a
sângelui.

4.1. Rezultate clinice în bolile arteriale obstructive periferice (POAD)

De la lucrarea inițială a lui Rokitansky [90 ], au fost efectuate mai multe studii
clinice mici asupra POAD care arată o îmbunătățire consistentă a circulației
locale după un ciclu de 13-18 AHT ozonat [revizuit în Bocci, 46]. Este bine
cunoscut faptul că chiar și o obstrucție modestă a arterelor membrelor din cauza
aterosclerozei, diabetului sau bolii Buerger (tromboangeita obliterantă) duce la
o reducere progresivă a fluxului sanguin către membru.

Ischemia tisulară și orice traumatism minor facilitează formarea unui

ulcer, care nu se va vindeca din cauza oxigenării reduse, a lipsei de nutrienți
și a factorilor de creștere indispensabili procesului de reparare. Terapia
cu ozon duce în primul rând la activarea glicolizei cu o creștere a adenozin
trifosfat (ATP) și 2,3-difoshoglicerat (2,3-DPG). În consecință, curba
sigmoidală de legare a oxigenului a Hb se deplasează spre dreapta și crește
eliberarea de oxigen în țesuturile ischemice. Intrarea modestă, dar critică
a lui H2O2în eritrocit se reduce prompt la apă prin acţiunea GSH. Formarea
crescută de GSH oxidat ca GSSG modifică raportul GSH/GSSG, dar această
modificare este corectată rapid fie prin expulzarea uneia dintre GSSG, fie
prin reducerea acesteia prin GSH-reductază în detrimentul acidului ascorbic
sau tioredoxinei. Este de remarcat faptul că această reciclare critică are
loc în 3 minute [32 ]. Mai mult, cel
activarea glucozo-6-fosfat dehidrogenazei (G6PDH) poate oferi putere
reducătoare și activează glicoliza.91 ]. Trebuie remarcat faptul că profilul
metabolic al sângelui ozonat este practic peste impozabil cu cel al sângelui
pur și simplu oxigenat.92 ].

Conform clasificării Fontaine-Leriche, pacienții fie în stadiul II (claudicație intermitentă și durere tranzitorie), fie în
stadiul III (durere continuă, cianoză și, eventual, ulcere inițiale) obțin cele mai bune rezultate. Stadiul IV include
necroza incipientă a degetelor de la picioare și durerea insuportabilă duce la amputație chirurgicală care poate
fi redusă sau amânată cu AHT-ozonat în aproximativ 50% din cazuri. În comparație cu pentoxifilină și prostanoizi
(standardul de aur al tratamentului ortodox), HTA ozonată s-a dovedit mai eficientă și fără efecte secundare în
boala vasculară ischemică. Nu există nicio diferență substanțială în rezultatele fie folosind AHT sau ozonării
extravasculare a sângelui, care este o metodă invazivă și costisitoare. Folosind procedura anterioară [93.94],
28 de pacienți, randomizat pentru a primi fie propriul lor sânge ozonat, fie un ciclu de perfuzie cu prostaciclină
au fost evaluate. Toți pacienții au continuat tratamentul convențional cu statine, medicamente antihipertensive
și antiagregante plachetare. Terapia cu ozon s-a dovedit mai eficientă decât prostaciclina în ceea ce privește
reducerea durerii și îmbunătățirea calității vieții, dar nu s-a observat nicio diferență semnificativă în
vascularizarea membrelor inferioare în niciunul dintre grupuri, cel mai probabil datorită duratei scurte a
tratamentului (14 tratamente în 7). săptămâni). În această patologie complexă, tratamentele mai prelungite
asociate cu terapia topică cu ulei ozonat pot duce la o vindecare satisfăcătoare a ulcerelor, deoarece este o
greșeală oprirea prea devreme a terapiei. De fapt, această terapie ar trebui continuată pe viață cu tratamente
mai puțin frecvente. Un program îmbunătățit pentru un studiu în curs constă în două AHT ozonate (225 ml
sânge plus 25 ml soluție de citrat de sodiu 3,8%), administrate săptămânal timp de cel puțin 4 luni. La pacienții
din stadiul III și IV, terapia topică este cea mai importantă atunci când este efectuată cu apă ozonată și ulei de
măsline, deoarece ajută la accelerarea vindecării ulcerelor. Cât de bine funcționează AHT-ul ozonat, este evident
prin faptul că durerea chinuitoare nocturnă dispare după primele două-trei tratamente, indicând îmbunătățirea
fluxului sanguin în țesutul ischemic și lipsa „furtului” de sânge din mușchiul subperfuzat. . terapia topică este
cea mai importantă atunci când este efectuată cu apă ozonată și ulei de măsline deoarece ajută la accelerarea
vindecării ulcerelor. Cât de bine funcționează AHT-ul ozonat, este evident prin faptul că durerea chinuitoare
nocturnă dispare după primele două-trei tratamente, indicând îmbunătățirea fluxului sanguin în țesutul
ischemic și lipsa „furtului” de sânge din mușchiul subperfuzat. . terapia topică este cea mai importantă atunci
când este efectuată cu apă ozonată și ulei de măsline deoarece ajută la accelerarea vindecării ulcerelor. Cât
de bine funcționează AHT-ul ozonat, este evident prin faptul că durerea chinuitoare nocturnă dispare după
primele două-trei tratamente, indicând îmbunătățirea fluxului sanguin în țesutul ischemic și lipsa „furtului” de
sânge din mușchiul subperfuzat. .
Se justifică o confirmare experimentală a activității Nrf2 în ceea ce privește
mecanismele pozitive care induc sistemele de protecție antioxidantă. În
plus, Nrf2 poate fi un mecanism potențial implicat în reglarea în creștere a
enzimelor antioxidante celulare și inducerea HO-1 și HSP70 (Tabel(Tabelul
1,1 , c). S-a demonstrat deja că concentrațiile terapeutice de ozon pot
induce atât HO-1 cât și HSP70.95 ], dar rolul lui Nrf2 rămâne de stabilit. Se
pare evident că activitatea terapeutică a ozonului în POAD se datorează
unei îmbunătățiri a fluxului sanguin și a livrării de oxigen în zonele
ischemice. Mai mult, s-a demonstrat recent că un factor de transcripție
nuclear, factorul inductibil de hipoxie-1α (HIF-1α), poate participa la
îmbunătățirea rezultatelor țesuturilor ischemice.96 -98 ]. HIF-1α, o
moleculă exprimată omniprezent, reglează o serie de gene (adică
elemente de răspuns la hipoxie, HRE) care provoacă răspunsuri
compensatorii în timpul stărilor de hipoxie, compromis metabolic și stres
oxidativ. Activarea HIF-1α are ca rezultat creșterea factorului de creștere a
endoteliului vascular (VEGF), a eritropoietinei (EPO) și a enzimelor glicolitice,
toate acestea crescând proliferarea și supraviețuirea celulară.
Mai mult, o creștere a biosintezei VEGF poate stimula neoangiogeneza și,
în consecință, poate îmbunătăți fluxul sanguin și crește biosinteza
eritropoietinei, care mărește livrarea de oxigen. O creștere a enzimelor
glicolitice îmbunătățește metabolismul glucozei și, în consecință, crește
biosinteza NO și CO, care stimulează, de asemenea, fluxul sanguin și
livrarea de oxigen în țesuturile hipoxice. Prin urmare, aceste răspunsuri
biologice pot induce efectele terapeutice excelente ale stresului oxidativ
ușor indus de ozon în POAD. În plus, punctele a) și b) din tabelMasa 22
poate fi explicată prin rolul HIF-1α. În starea normoxică, HIF-1α este
inactivată de prolină hidroxilaze (PHD) și VHL din citosol. Pe de altă parte, în
hipoxie, PDH-urile și VHL sunt inactivate de stres oxidativ ușor, iar
HIF-1α este eliberat din PHD și VHL, transferat în nuclee, unde HIF-1α
formează un heterodimer cu HIF-1β și are ca rezultat transcrierea. a
elementelor de răspuns la hipoxie (HRE) pe ADN. S-a raportat că
aproximativ 2000 de gene din HRE sunt reglementate de HIF-1α [99 ]
inclusiv gene implicate în reglarea apoptozei, reglarea pH-ului și proteoliză,
precum și în angiogeneză, eritropoieză și metabolismul glucozei. O altă
remarcă se referă la postularea că 4-HNE care ajunge în mediul măduvei
osoase poate favoriza eliberarea de staminal.
celule, care pot fi capabile să activeze angiogeneza în țesuturile ischemice. Se speră
să clarifice dacă vreuna dintre aceste ipoteze este valabilă în viitorul apropiat.

Milioane de oameni suferă de ischemie cronică la nivelul membrelor, creierului și inimii,

care reprezintă cauza majoră de deces la nivel mondial. Acest lucru are un impact socio-
economic uriaș, în special în țările în curs de dezvoltare. Dacă numai medicina ortodoxă
va accepta AHT ozonată ca adjuvant la medicația standard, se va observa un mare salt
înainte. Este foarte regretabil că, din cauza lipsei de sponsori și fonduri, nu a fost încă
posibil să se evalueze cu atenție rezultatele clinice controlate fie la pacienții cu accident
vascular cerebral, fie la pacienții cu insuficiență cardiacă cronică.

4.2. Relevanța terapiei cu ozon în degenerescența maculară legată

de vârstă (ARMD)

Numai în Marea Britanie, aproximativ 250.000 de pacienți afectați de forma

„uscă” (atrofică) de ARMD sunt potriviți pentru tratamentul cu AHT ozonat, dar
în întreaga lume există peste 30 de milioane de oameni care caută o terapie.
Cu toate acestea, oftalmologii pot prescrie doar antioxidanți și zinc, care sunt
minim eficienți. Din 1995, aproape 1.000 de pacienți cu forma uscată de ARMD
au fost tratați cu HTA ozonat la policlinica din Siena (Italia), iar trei sferturi au
arătat o îmbunătățire cu una până la două linii pe diagrama acuității vizuale
(revizuită în 46). Mai mult, este relevant faptul că boala nu progresează în
timpul terapiei cu ozon. De obicei, 15-18 tratamente, la o concentrație inițială
de ozon de 20 mg/ml de gaz per ml de sânge, treptat crescută la 60 mg/ml
(de două ori pe săptămână), urmate de două ședințe lunare ca terapie de
întreținere, permite menținerea îmbunătățirii.
Deși necontrolat, acest studiu subliniază că terapia cu ozon este singurul
tratament capabil să îmbunătățească dramatic calitatea vieții pacientului. În
această boală are loc degenerarea progresivă și moartea fotoreceptorilor
foveei centralis și a epiteliului retinian pigmentat (PRE) ca o consecință a mai
multor factori, dintre care unul este hipoxia cronică. Deși O 3-AHT induce un
răspuns pleiotrop, principalul avantaj se datorează unei livrări crescute de
oxigen către retină, care este țesutul corporal cu cel mai mare consum de
oxigen. Este de remarcat faptul că AHT este inutilă, chiar dăunătoare, în forma
exudativă a ARMD
și în tulburări multigenice și progresive (de exemplu, retinită pigmentară
și boala Stargardt recesivă). Forma exudativă, caracterizată printr-o creștere
vasculară coroidală aberantă și o hiperpermeabilitate vasculară sub retină
și PRE, este cauzată de ischemie agravată, care stimulează eliberarea
factorului de creștere a endoteliului vascular.99 ]. În forma exudativă se
pare că administrarea intravitrioasă a anticorpului anti-VEGF poate încetini
temporar angiogeneza cu o ușoară îmbunătățire funcțională. Trebuie
subliniat faptul că O3-AHT (în formă uscată) nu numai că îmbunătățește
activitatea vizuală, dar cel puțin, parțial, ajută pacientul să-și recapete
capacitatea de viață autonomă. În sfârșit, este interesant de informat că
doar în ultima lună s-a realizat un studiu preliminar care evaluează dacă
injectarea intravitreală de PRE staminal la pacienții nevăzători cu boala
Stargardt va putea restabili vederea. Deși pacienții vor primi o terapie
imunosupresoare, există și alte riscuri, dar după zece ani de studii
preliminare, încercarea trebuia efectuată.

4.3. Efectele terapiei cu ozon în diabet

Nefropatia diabetică indusă de diabetul zaharat este legată de stresul

oxidativ. Efectele terapeutice potențiale ale terapiei cu ozon au fost studiate la
șobolani diabetici induși de streptozotocină (STZ).100 ]. Inducerea diabetului
zaharat a crescut semnificativ tensiunea arterială, HbA1c, BUN, creatinina și
nivelurile MDA ale țesutului renal, în timp ce activitățile SOD, CAT și GPx
au fost reduse semnificativ. Tratamentul fie cu insulină, fie cu ozonoterapia a
inversat semnificativ efectele diabetului zaharat. Mai mult, o combinație de
terapie cu insulină și ozon a inversat și mai mult efectele diabetului zaharat
în comparație cu monoterapia. Astfel, administrarea de ozon la șobolanii
cu diabet zaharat a redus nivelurile markerilor de stres oxidativ și a
îmbunătățit activitățile enzimelor antioxidante renale, în special atunci când
șobolanii au fost tratați cu o combinație de ozon și insulină.
Acest rezultat inițial a sugerat că terapia cu ozon poate fi utilă pentru tratarea
pacienților diabetici, în special prin medierea răspunsurilor antioxidante.
Dovezile clinice că terapia cu ozon este utilă au fost raportate în mod anecdotic
de mai multe ori de către ozoterapeutii privați, dar încă nu a fost efectuat un
studiu clinic valid, controlat. Membru cronic
ischemia este adesea însoțită de diabet zaharat de tip 2 și acești pacienți
au fost tratați în mod avantajos cu AHT ozonat.46 ].
Necesitatea reducerii dozei de insulină, sugerând fie o secreție de
insulină îmbunătățită, fie/și o sensibilitate crescută la receptor, a devenit
o observație comună.

Întrucât ozonul este utilizat în toate spitalele cubaneze, ozonoterapeutii

cubanezi au efectuat un studiu clinic controlat randomizat la pacienți
diabetici cu boli arteriale periferice și picior diabetic.101 ]. Un grup (n = 51) a
fost tratat cu ozon administrat prin insuflare rectală a 200 ml de gaz cu o
doză de ozon de 10 mg împreună cu ozon topic atât sub formă de gaz cât și
ulei ozonat. Grupul de control (n = 49) a fost tratat cu antibiotice sistemice și
topice. Eficacitatea tratamentelor a fost evaluată prin compararea nivelului
de glucoză, a zonei ulcerelor și a mai multor markeri biochimici după numai
20 de zile de tratament. Un dezavantaj a fost lipsa unei urmăriri după terapia
de 20 de zile. Grupul experimental, după ce a primit o doză totală de 200 mg
ozon, a prezentat un control glicemic îmbunătățit, un stres oxidativ redus, o
creștere a SOD, o îmbunătățire semnificativă a leziunilor fără efecte
secundare și cu mai puține amputații decât grupul de control. Piciorul
diabetic uman este o boală cronică și aceste rezultate sunt și mai
surprinzătoare nu numai pentru că au fost obținute numai după 20 de zile de
terapie, ci și pentru că dintre cele cinci căi de administrare a ozonului,
[revizuit în 102], adică: (1) principalele și autohemoterapie ozonată minoră;
(2) circulația extracorporală a sângelui împotriva oxigenului-ozonului; (3)
expunerea cvasi-totală a corpului la oxigenozonă; (4) administrarea
intracavitară, subcutanată, intramusculară și (5) insuflarea cu ozon prin rect
este cea mai nesigură cale de administrare, deoarece nu știm niciodată
procentul dozei de ozon cu adevărat eficace insuflat în rect. Mai mult, în
Europa cel puțin 40% dintre pacienți: (i) refuză administrarea de ozon pe cale
rectă; (ii) o parte din doza de ozon poate fi eliminată involuntar imediat după
introducerea gazului; (iii) conținutul fecal și mucoproteinele abundente
neutralizează cu siguranță o parte din doza de ozon și (iv) în toate cazurile
ozonul, spre deosebire de oxigen, nu este absorbit de mucoasa rectală. În
experimentele anterioare cu iepuri [59 ], s-a clarificat că numai produsele de
peroxidare au putut fi detectate în sângele portal. Acest lucru se datorează
ozonului
reacționează imediat cu o varietate de biomolecule prezente în conținutul
luminal și doar unii dintre compușii generați sunt absorbiți și pot exercita
activitate terapeutică. Concentrația de ozon (50 mg/ml) utilizată la pacienții
cubanezi este prea mare și neînțeleaptă deoarece poate provoca crampe
intestinale dureroase. Mai mult, trebuie avut în vedere faptul că Eliakim et al.
[103 ], după clisme repetate la șobolani cu apă ozonată, au raportat apariția
unei colite microscopice. În consecință, deși rezultatele sunt spectaculoase, ele
trebuie confirmate, nu numai prin repetarea testului, ci, de preferință, prin
utilizarea strategiei de încredere a autohemoterapiei ozonate.104 ]. Pe
această bază, pare urgent să se organizeze un studiu clinic adecvat pentru a
evalua dacă un ciclu inițial care să includă cel puțin 32 de tratamente timp de
patru luni (de două ori pe săptămână) poate modifica parametrii critici,
inclusiv nivelurile glicemice și ale peptidei C-reactive, glicozilarea neenzimatică,
aldoza reductază. activitatea, produsele finale glicate avansate (AGE) și
echilibrul antioxidant-pro-oxidant. Deși mai costisitoare, stoichiometria precisă
a metodei AHT ozonate poate oferi informații mult mai precise decât
insuflația rectală. Strategia adoptată „începe jos, mergi încet” pare cea mai
idoneă pentru inducerea toleranței la ozon și reechilibrarea sistemului
redox.46 ]. Ținând cont de faptul că O2-O3terapia poate modifica nivelul
glicemic, este imperativ un control strict al nivelului de insulină.

O dezbatere asupra unei aplicări dovedite științific a unei abordări

complementare bazată pe cunoștințele că O3-AHT poate atenua stresul
oxidativ cronic, a întârzia complicațiile grave și a îmbunătăți calitatea
vieții pacienților cu diabet zaharat.104 ]) și este urgent.

4.4. Posibile mecanisme de activare a sistemului imunitar prin

ozonoterapia

Celulele T joacă un rol foarte important în protejarea corpului nostru

împotriva componentelor străine: atunci când receptorul antigen al
celulelor T (TCR) recunoaște orice antigen străin, molecula ZAP-70 suferă
o tirozinfosforilare și apoi activează fosfolipaza C γ1 (PLCγ1) [105
]. PLCγ1 activat hidrolizează fosfatidilinozitol-4,5-bisfosfatul (PIP2), o lipidă
membranară, pentru a produce mesageri secundi, inozitol
trifosfat (IP3) și diacilglicerol (DG). IP3 se leagă de receptorul de inozitol
trifosfat (IP3R) de pe membrana reticulului endoplasmatic (ER), rezultând
o eliberare de Ca+2din ER în citosol. Creșteri ale Ca citosolic +2 nivelurile
activează calcineurina (CN), o fosfatază dependentă de Ca+2/
calmodulina, care defosforilează celulele T activate de factor nuclear
(NFAT) și le transportă în nucleu. NFAT induce apoi transcripția
citokinelor, cum ar fi IL-2, TNFα, IL-6 și IFNγ, și elemente de răspuns
imun pe ADN, care sunt apoi traduse în proteinele lor.106 ]. Citokinele
produse și produsele de transcripție ale elementelor de răspuns imun
susțin funcțiile imune ale corpului nostru. NFAT este, de asemenea,
exprimat în alte celule și țesuturi și se poate combina cu elementele ADN.
Cu toate acestea, combinația de NFAT cu ADN este indusă în primul rând
prin coexistența proteinei-1 activate (AP-1), un factor de transcripție
nuclear. AP-1 este activat prin calea Ras-MAPKs (protein kinaze activate
cu mitogen), care este, de asemenea, mediată de DG.

S-a raportat anterior că medicamentele imunosupresoare, cum ar fi

ciclosporina A și KF506 (tacrolimus), pot inhiba defosforilarea NFAT indusă de
CN și, prin urmare, transportul NFAT în nucleu.107 ]. Ca2+-antagoniştii, precum
medicamentele antihipertensive, inhibă Ca+2influxul în citosol și constricția
celulelor musculare netede vasculare. Cu toate acestea, mai multe studii
epidemiologice sugerează că utilizarea prelungită a Ca 2+-antagonistul poate
avea ca rezultat tumori sau dezvoltarea unor boli cronice. Ca 2+
-antagonistul inhiba Ca+2influxul în citosol al celulelor T și activitatea CN. Astfel,
ele pot induce, de asemenea, defosforilarea NFAT și transportul acestuia în
nucleu. În consecință, biosinteza citokinelor ar fi de asemenea inhibată. Acest
lucru poate explica de ce utilizarea pe termen lung a Ca 2+
-antagonistul poate avea ca rezultat tumori sau dezvoltarea unor boli cronice.
Mai mult, este bine cunoscut faptul că acești factori de transcripție nucleari
sunt, de asemenea, induși de stres oxidativ ușor. De exemplu, Maziere et al
[108 ] a descoperit că nivelurile ridicate de radiații UVA inhibă sistemul CN-
NFAT, iar nivelurile scăzute de UVA activează sistemul CN-NFAT. Prin urmare,
stresul oxidativ ușor indus de terapia cu ozon poate activa și NFAT și AP-1
pentru a activa apoi funcțiile imune. Acest lucru poate explica punctul d) din
tabelMasa 2.2 . Cu toate acestea
rămâne de văzut dacă o terapie ușoară cu ozon activează într-adevăr
sistemul CN-NFAT

Prin urmare, pe lângă această posibilă cale, trebuie reținut că mai multe
studii [109 -111 ] au fost efectuate prin utilizarea sângelui uman normal
tratat cu concentrații de ozon în „ferestrea terapeutică”. Cu acești parametri,
ozonul acționează asupra sângelui uman și dă o relație hormetică doză-
răspuns fără nicio toxicitate.112 ]. După incubare de până la 8-9 ore, plasma
a fost izolată și au fost măsurate mai multe citokine sintetizate și eliberate
de celulele imune precum IFNγ, TNFα, IL-2, IL-6 și IL-8, iar cantitățile lor
mici, dar consistente au fost măsurate. dependentă de concentrația de
ozon. În timpul fiecărei ședințe de ozonoterapie, această imunostimulare
blândă indusă se referă doar la aproximativ 4%
din limfocitele și monocitele prezente în sângele expuse la ozon ex vivo.46
]. S-a postulat că procentul mic de imunocite activateex vivode H2O2, prin
NFkB poate transfera activarea in vivo după perfuzia de sânge ozonat la
pacientul donator. Într-adevăr, după perfuzia de sânge în donator,
limfocitele activate, prin eliberarea de citokine, pot activa alte celule in
vivo.46 ]. Dacă acest lucru este adevărat, ședințele terapeutice repetate pot
inversa într-adevăr o stare de imunodepresie. De fapt, aceste observații au
sugerat utilizarea terapiei cu ozon atât în infecțiile
bacteriene și virale acute și cronice, ținând cont de faptul că toți agenții
patogeni, fie liberi în plasmă, fie localizați intracelular, sunt în mod
paradoxal bine protejați de capacitatea antioxidantă puternică a sângelui și
a celulelor.113 ]. Așa este, deoarece cu concentrația de ozon stabilită de
indicele terapeutic, nici ozonul și nici mesagerii săi nu pot produce un efect
bactericid sau virucid. Într-adevăr, spre deosebire de ceea ce se crede în
mod obișnuit, ozonul poate acționa doar ca terapie de susținere în bolile
infecțioase și știm deja că atât HIV [114 ] și infecțiile cronice cu hepatita C
nu pot fi tratate cu eficiență numai cu ozonoterapia decât dacă am combinat
simultan cu dozele adecvate de medicamente antivirale.

Mai mult decât atât, nu putem descoperi dacă terapia cu ozon poate fi utilă
în bolile autoimune, cum ar fi artrita reumatoidă, scleroza multiplă și
psoriazisul. Încă o dată, terapeuții privați de ozono le-au tratat
boli care pretind rezultate pozitive, care nu au fost niciodată raportate în
reviste medicale. Problema cheie este de a descoperi concentrația ideală
de ozon pentru stingerea activității celulelor T citotoxice și pentru a crește
numărul și activitatea celulelor T-regulatoare CD4+.46 ].

4.5. Poate ozonul să omoare celulele canceroase și să aibă efecte terapeutice?

O lucrare timpurie a lui Sweet et al [115 ] a stârnit un mare entuziasm,

demonstrând că ozonul inhibă selectiv creșterea unei varietăți de celule
canceroase umanein vitro.Din păcate, această abordare nu reflectă situația
pacientului, deoarece ozonul ca atare nu este niciodată capabil să ajungă la
nicio celulă canceroasă.in vivo.O altă posibilitate ipotetică a fost restabilirea
normoxiei și apoptozei celulelor tumorale după perfuzia de sânge ozonat.91
], dar experiența clinică la pacientul pre-terminal cu metastază hepatică sau/ și
pulmonară a arătat ireversibilitatea cancerului. O încercare experimentală [116
] pentru a insufla un amestec de ozon și oxigen în peritoneu într-un stadiu
avansat de cancer a condus la o rată de supraviețuire mai mare a iepurilor
tratați (adică 7/14) față de iepurii tratați simulator (adică 1/7). Într-o scrisoare,
Bocci [117 ] au sugerat că aceste efecte anti-tumorale pot fi induse printr-o
activare mediată de ozon/oxigen a imunosupravegherii organismului, ceea
ce este o posibilitate reală la un animal virgin. Într- adevăr, aceste rezultate
sunt evidente doar în oncologia experimentală, în special la șoareci și nu la
oameni, unde, odată ce cancerul este descoperit, sistemul imunitar este deja
suprimat. Pentru a fi obiectiv, există o serie de studii clinice destul de vechi și
necontrolate care demonstrează că terapia cu ozon prelungește speranța de
viață a pacienților cu cancer. Acest lucru este parțial adevărat în sensul că
autohemoterapia ozonată îmbunătățește calitatea vieții, așa cum se observă
adesea.46 ], dar nu poate bloca progresia tumorii. Inflamația cronică joacă un
rol critic în creșterea (transformarea) neoplazicului, precum și în multe alte
boli. NFκB este activat de diverși factori inflamatori, cum ar fi LPS și stresul
oxidativ sever derivat din medicamentele care induc iNOS, COX-2 și citokine
inflamatorii. Acești factori induc supraviețuirea, creșterea și proliferarea
celulelor tumorale și duc la neoplazie.118 ]. Prin urmare, inhibarea NFκB
este o țintă importantă pentru prevenirea și tratamentul cancerului. De
exemplu, se știe că inhibitorii NFκB, cum ar fi vitamina E, resveratrol,
curcumina, catechina și aspirina pot avea unele efecte în încetinirea creșterii
tumorii.

4.6. Un posibil mecanism prin care terapia cu ozon ameliorează

bolile neurodegenerative

Patogenia bolilor neurodegenerative este asociată semnificativ cu

stresul oxidativ. Stresul oxidativ crescut este, de asemenea, asociat cu
moartea celulelor neuronale în timpul patogenezei multiplelor boli
neurodegenerative cronice, inclusiv boala Alzheimer (AD), boala
Parkinson (PD), boala Huntington (HD) și scleroza laterală amiotrofică
(ALS). S-a descoperit că calea Nrf2/ARE protejează împotriva
neurodegenerării [81 ,119 ] După cum sa menționat anterior. Figura
Figura 22 demonstrează că PD poate rezulta din apoptoza celulelor
neuronale și moartea celulelor Nigral indusă prin ROS. Creșterea ROS
are ca rezultat disfuncția mitocondrială și neuro-inflamație, un numitor
comun al PD. Pe de altă parte, Nrf2 acționează ca o țintă emergentă
pentru a contracara disfuncția și inflamația mitocondrială. Nrf2
activează calea elementului de răspuns antioxidant (ARE), inclusiv o
baterie de gene citoprotectoare, cum ar fi antioxidanții și genele
antiinflamatorii, și câțiva factori de transcripție implicați în biogeneza
mitocondrială.119 ].
Jazwa et al [82 ] a mai descoperit că Nrf2 și HIF-1α joacă un rol crucial în
neuroprotecția și suprimarea neuroinflamației în bolile neurodegenerative, în
special prin activarea HO-1 prin calea Nrf2/ARE (pentru HO-1 vezi și Idriss și
colab.120 ]). Mai mult decât atât, medicamentele care activează Nrf2 pot fi, de
asemenea, candidați buni pentru inducerea HO-1, împreună cu alte enzime
antioxidante și de detoxifiere. De fapt, s-a raportat anterior că există multe
substanțe fitochimice care sunt eficiente în protejarea împotriva bolilor
neurodegenerative.121 -124 ]. Aceste constatări pot explica rațiunea (punctul
g) din tabelTabelul 1.1 . Astfel, investigații suplimentare asupra
efectelor terapiei cu ozon în activarea căii Nrf2/ARE sunt justificate. Într-
adevăr, mai multe observații anecdotice au fost făcute de către ozoterapeuti
privați care efectuează AHT ozonat la pacienții cu boala Alzheimer inițială.
Este regretabil că aceste observații promițătoare nu au fost niciodată
publicate și, prin urmare, parametrii precisi rămân necunoscuți. Încă o dată
medicina ortodoxă
rămâne sceptic cu privire la valoarea terapiei cu ozon și acest lucru face
progresul foarte dificil.

4.7. Utilizarea topică a terapiei cu ozon în infecțiile și leziunile pielii și

mucoasei

În ceea ce privește atât infecțiile și leziunile cutanate, cât și ale mucoasei, atât
apa ozonată, cât și gradații diferite de uleiuri vegetale ozonate standardizate
vor fi utilizate de două ori pe zi până la vindecarea completă. Atât apa ozonată,
cât și uleiurile s-au dovedit deja a fi excelenți dezinfectanți și stimulatori de
vindecare, mai eficienți decât antibioticele topice, factorii de creștere, numai
oxigenarea, larmele și terapiile cu presiune negativă. În concluzie, această
lucrare își propune să sublinieze posibilitatea unei noi abordări pentru
ameliorarea prognosticului sumbru al piciorului diabetic, ulcere și necroze
ischemice, decubit, abcese, fisuri anale, fistule, afte, stomatite cu osteomielite
inveterate, vulvovaginite și onicomicoze. Există studii experimentale [125 ,126
] care arată în mod clar avantajele utilizării uleiurilor ozonate și au fost revizuite
un număr mare de brevete pertinente [ 127 ,128 ]. Orice rană sau leziune
trebuie mai întâi curățată eventual cu apă ozonată sau H diluat2O2soluție,
deoarece îndepărtarea materialului purulent sau a fibrinei sau a celulelor
necrotice reduce semnificativ efectul uleiului ozonat din cauza prezenței
reziduale a substanțelor biologice.113 ]. Până în prezent, în țările occidentale
nu există încă atitudinea mentală de a folosi în mod profitabil uleiul ozonat, dar
odată ce un pacient a încercat asta, va continua să-l folosească.

4.8. Problema durerilor de spate și a bolilor ortopedice a fost

rezolvată cu succes cu ozon

În realitate, utilizarea ozonului în hernia discală este o adevărată descoperire și,

în timp ce utilizarea AHT ozonată este încă privită cu suspiciune, aplicarea
ozonului în durerile de spate este practic acceptată în întreaga lume. De-a lungul
vieții, durerea de spate este un simptom comun tulburător care poate afecta cel
puțin o dată până la 80% din populație. Sub control radioscopic, 3 până la 7 ml
din amestecul de gaze (de obicei ozon 3% și oxigen 97%), cu o concentrație de
ozon de 30-35 μg/ml sunt administrate direct în centrul
spațiul intersomatic corespunzător herniei de disc [129 ]. Un neurochirurg
expert o poate face în aproximativ zece minute și, după o odihnă
adecvată, pacientul se ridică frecvent uimit de dispariția durerii.

Care sunt mecanismele de acțiune? Ele sunt destul de diferite de cele

ale ozonului din sânge. Ozonul se dizolvă ușor în apanucleul pulpossi
reactioneaza cu glicoproteinele macromoleculare compuse din
carbohidrati si lanturi polipeptidice, si anume proteoglicani si colagen
de tip II si IV. Formarea ROS este probabil urmată de generarea de
radicali hidroxil conform reacției lui Fenton:

PUFA + O3+ H2O ------------------ → aldehida 1 + aldehida 2 + H2O2

deoarece urme de ioni catalitici de fier pot fi eliberate cu ușurință din ac

în timpul injectării. Prin utilizarea tehnicii de captare a spinului prin
rezonanță paramagnetică electronică (EPR), formarea tranzitorie a
radicalului hidroxil, care are un timp de înjumătățire de 1 × 10 -9sec la
37°C, a fost demonstrat [130 ]. Radicalul hidroxil este cel mai reactiv
radical care atacă și descompune orice biomoleculă aflată la îndemâna
lui: reabsorbția rapidă a produșilor hidrolitici și a apei libere duc la o
contracție progresivă a nucleului și frecvent la o dispariție progresivă a
materialului herniat. Procesul inflamator indus de hernie dispare ulterior.

O abordare și mai simplă și populară pentru tratarea durerilor de spate este

administrarea de gaz în mușchii paravertebrali corespunzând fie punctelor
declanșatoare, fie metamerilor herniei de disc. Este o abordare ușoară
constând în una sau până la patru injecții a câte 5-10 ml de amestec de gaze
pe loc efectuate foarte lent. Concentrația de ozon nu trebuie să depășească
20-25 μg/ml, deoarece este dureroasă. În timp ce prima este o procedură
directă, aceasta este una indirectă numită și „o acupunctură chimică” de către
Bocci [50 ]. Mecanismele de acțiune ale metodelor indirecte au fost amplu
discutate [131 ] iar beneficiul terapeutic este de aproape 80% pentru
procedura directa si de aproximativ 73% pentru acupunctura chimica. Până
acum, ambele metodologii au fost aplicate din Canada
în China, India și Europa și aproape un milion de oameni au beneficiat de
aceasta.

4.9. Utilizarea ozonului în stomatologie

Aceasta este o altă utilizare surprinzătoare a ozonului, utilizat în principal la copii

pentru tratarea leziunilor carioase primare, folosind un dispozitiv special de izolare
a dintelui care este tratat cu ozon-oxigen timp de aproximativ 60 de secunde.
Aceasta procedura sterilizeaza leziunile dentare si permite remineralizarea dintelui.
Procedura a fost inventată și propagată de prof. Edward Lynch [132 ] și a fost definită
drept „Revoluția în stomatologie”

5. Calitatea vieții (QOL) în urma terapiei cu ozon

Terapia cu ozon este propusă pentru a asigura o stare de bine

surprinzătoare la majoritatea pacienților, parțial, prin stimularea
sistemului neuroendocrin. Mecanismele prin care terapia cu ozon
stimulează sistemul neuroendocrin nu sunt încă clare. Cu toate acestea,
recent a fost raportat [133 ] că vulnerabilitatea celulelor neuroendocrine
indusă prin stresul mitocondrial și oxidativ este asociată cu inhibarea căii
antioxidante Nrf2/ARE/Keap1 și cu scăderea expresiei antioxidante și a
enzimelor de conjugare de fază I/II, dintre care majoritatea sunt ținte
transcripționale ale sistemului neuroendocrin Nrf2. s-a găsit, de
asemenea, asociat cu calea Nrf2. Este regretabil că până acum nu a fost
posibilă evaluarea comparativă a intensității și formei ritmului circadian al
ACTH, cortizolului, hormonului de creștere și dehidro-epi-androsteronului
(DHEA), la voluntari normali înainte și după AHT ozonată. Mai mult, s-a
postulat o eliberare de endorfine și posibil o eliberare crescută de
serotonină pentru a explica sentimentul de euforie și bunăstare post
ozonoterapia.

Evident, este necesară o evaluare medicală a QOL la ozonoterapia. Până în

prezent, Di Paolo et al., [94 ] singurul grup care a raportat QOL după
ozonarea sângelui extravascular și un analog de prostaglandine la
pacienții cu POAD, care a fost în conformitate cu Evaluarea Internațională
a Calității Vieții (IQOLA). Pacienții au fost notați de la 0 la 4 la claudicație,
durere, prurit, picioare grele, stare generală de bine, insomnie, apetit, slăbiciune,
vedere, vindecare, digestie și dureri articulare. Terapia EBOO a demonstrat un QOL
excelent. Astfel, astfel de evaluări QOL sunt importante, deoarece, de asemenea, pot
clarifica dacă terapia cu ozon este eficientă. În ceea ce privește HTA ozonată, pe lângă
o puncție venoasă, evaluarea QOL este și mai bună, cu efecte secundare minime,
dacă este cazul.46 ,134 ,135 ].

6. Observații finale

În ultimele patru decenii milioane de O 3-HTA au fost efectuate în Europa fără

nicio problemă și cele patru decese înregistrate [135 ] s-au datorat administrării
intravenoase directe de O2-O3, practică interzisă încă din 1984. Ozonul,
generat extempore din oxigenul medical, trebuie utilizat imediat și reprezintă
aproximativ 3% din amestecul de gaze. Eritrocitele, după ozonizare, își mențin
durata de viață obișnuită în circulație.46 ]. Metoda care utilizează sticle neutre,
sterile de sticlă sub vid este absolut lipsită de toxicitate, costul setului de unică
folosință pentru fiecare tratament este de cincisprezece euro și o asistentă
calificată poate efectua cu ușurință întreaga procedură în aproximativ 35 de
minute [56 ]. Singurul inconvenient este puncția venoasă la care pacienții sunt
totuși complianți. Trebuie subliniat faptul că tratamentul nu este doar perfect
tolerat, dar majoritatea pacienților cu degenerescență maculară legată de
vârstă (DMRA) și vasculopatii au raportat o senzație de bine și euforie pe tot
parcursul ciclului. Acest fapt explică de ce complianța pacienților rămâne
excelentă de-a lungul anilor.
Aproape inutil să spunem că dacă ozonoterapia îmbunătățește starea
patologică, ea trebuie continuată prin adoptarea terapiei de întreținere
(două-trei ședințe lunare) pe o perioadă nedefinită.

Aplicarea terapiei cu ozon în toate spitalele publice este încă întârziată de

prejudecăți, lipsă de finanțare, concurență comercială a marii farmaceutice și
mai ales de dezinteresul de neînțeles, dacă nu chiar obstrucție, din partea
autorităților sanitare precum FDA din SUA și European Medical. Asociere.
Dimpotrivă, este folosit în mod obișnuit în Rusia, Ucraina și China, unde
majoritatea pacienților sunt tratați cu ozonterapie. Ozonul este ieftin și nu poate
fi brevetat și este regretabil că autoritățile locale de sănătate, preocupate
permanent de creșterea costurilor medicale, nu
 nu doresc să profite de această procedură ieftină. Spre deosebire de alte
abordări complementare, toate mecanismele biochimice, fiziologice și
farmacologice provocate de ozon sunt în domeniul medicinei ortodoxe.
Există deja dovezi bune că ozonoterapia este mai utilă în ischemia cronică
a membrelor decât standardul de aur (analogii de prostaciclină) și pacienții
cu leziuni cutanate sunt foarte recunoscători pentru că pot folosi uleiul
ozonat. A fost propusă o schemă de ozonterapie blândă asociată unui stil
de viață corect pentru a întârzia îmbătrânirea.46 ,136 ].

Așa cum sa întâmplat pentru alte abordări medicale inovatoare, mulțumită pentru
eforturile multor medici experți, terapia cu ozon va fi în cele din urmă acceptată
de medicina ortodoxă. Dar acest lucru se va întâmpla numai atunci când, prin
efectuarea de studii clinice randomizate și bine controlate în boli adecvate,
valabilitatea și atoxicitatea acestuia vor fi demonstrate fără echivoc.

Interese concurente

Autorii declară că nu au interese concurente. Nu au fost disponibile fonduri

pentru M Sagai și V Bocci pentru acest studiu.

Contribuțiile autorilor

MS a descris în primul rând mecanismul de acțiune al NFκB, Nrf2,

HIF1α, NFAT, AP-1 în condiții normale și patologice. Și apoi VB a descris
originea, distribuția și soarta ozonului și datele clinice ale terapiei cu
ozon. Ambii autori au adunat referințe, au rafinat căutarea de noi
informații și au aprobat manuscrisul final.

Referințe
1. Wolff HH. Die Behandlung peripherer Durchbutungsstorungen mit Ozon.Erfahr Hk.
1974;23:181–184. [Google Academic ]
2. Nakao A, Sugimoto R, Billiar TR, McCurry KR. Gaz medical antioxidant terapeutic.J Clin
Biochem Nutr.2009;44:1–13. [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

3. Moncada S, Palmer RM, Higgs EA. Oxid nitric: fiziologie, fiziopatologie și

farmacologie.Pharmacol Rev.1991;43:109–142. [PubMed ] [Google Academic ]
4. Morse D, Sethi J, Choi AM. Semnalizare dependentă de monoxid de carbon.Crit Care Med.
2002;30:S12–17. [PubMed ] [Google Academic ]

5. Calvert JW, Jha S, Gundewar S, Elrod JW, Ramachandran A, Pattillo CB, Kevil CG, Lefer DJ.
Hidrogenul sulfurat mediază cardioprotecția prin semnalizarea Nrf2.Circ Res.2009;105
:365–374. [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

6. Xu ZS, Wang XY, Xiao DM, Hu LF, Lu M, Wu ZY, Bian JS. Hidrogenul sulfurat
protejează celulele osteoblastice M C 3 T2 O
3 - E-1 împotriva H2-afectarea oxidativă
indusă-implicații pentru tratamentul osteoporozei.Free Radic Biol Med.2011;50
:1314– 1323. [PubMed ] [Google Academic ]

7. Jolly D, Meyer J. O scurtă trecere în revistă a hormesis radiațiilor.Australas Phys Eng Sci Med.
2009;32:180–187. [PubMed ] [Google Academic ]

8. Calabrese EJ. Hormesis este esențial pentru toxicologie, farmacologie și evaluarea

riscurilor.Hum Exp Toxicol.2010;29:249–61. [PubMed ] [Google Academic ]

9. Colman RJ, Anderson RM, Johnson SC, Kastman EK, Kosmatka KJ, Beasley TM, Allison DB,
Cruzen C, Simmons HA, Kemnitz JW, Weindruch R. Restricția calorică întârzie debutul
bolii și mortalitatea la maimuțele rhesus.Ştiinţă.2009;325:201–204. [articol gratuit PMC
] [PubMed ] [Google Academic ]

10. Cohen HY, Miller C, Bitterman KJ, Wall NR, Hekking B, Kessler B, Howitz KT, Gorospe M,
de Cabo R, Sinclair DA. Restricția calorică promovează supraviețuirea celulelor de mamifere
prin inducerea deacetilazei SIRT1.Ştiinţă.2004;305:390–392. [PubMed ] [Google Academic ]

11. Pryor WA, Squadrito GL, Friedman M. Mecanismul în cascadă pentru a explica toxicitatea
ozonului: rolul produselor de ozonare a lipidelor.Free Radic Biol Med.1995;19:935– 941. [
PubMed ] [Google Academic ]

12. Shimasaki H, Takatori T, Anderson WR, Horten HL, Privett OS. Alterarea lipidelor
pulmonare la șobolanii expuși la ozon.Biochem Biophys Res Commun.1976;68:1256–
1262. [PubMed ] [Google Academic ]

13. Dianzani MUl. 4-Hidroxinonenal și semnalizare celulară.Free Radi Res.1998;28:553–

560. [PubMed ] [Google Academic ]
14. Page S, Fischer C, Baumqartner B, Haas M, Kreusel U, Loidl G, Hayn M, Ziegler-
Heitbrock HW, Neumeier D, Brand K. 4-Hydroxynonenal previne activarea NFκB și
exprimarea factorului de necroză tumorală prin inhibarea fosforilării IκB și proteoliză
ulterioară.J Biol Chem.1999;274:11611–11618. [PubMed ] [Google Academic ]

15. Groeger G, Quiney C, Cotter TG. Peroxid de hidrogen ca moleculă de semnalizare a supraviețuirii
celulare.Semnal antioxid Redox.2009;11:2655–2671. [PubMed ] [Google Academic ]

16. Hao Q, Rutherford SA, Low B, Tang H. Reglarea selectivă a semnalizării peroxidului de
hidrogen de către receptorul tirozin fosfatază-alfa.Free Radic Biol Med.2006;41:302– 310. [
PubMed ] [Google Academic ]

17. Lin CC, Lee IT, Yang YL, Lee CW, Kou YR, Yang CM. Inducerea COX-2/PGE2/IL-6 este
crucială pentru inflamația căilor respiratorii indusă de extractul de fum de țigară: rolul
TLR4 - activării NADPH oxidazei dependente.Free Radic Biol Med.2010;48:240– 254. [
PubMed ] [Google Academic ]

18. Williams AS, Leung SY, Nath P, Khorasani NM, Bhavsar P, Issa R, Mitchell JA, Adcock
IM, Chung KF. Rolul TLR2, TLR4 și MyD88 în hiperreactivitatea căilor respiratorii induse
de ozon murin și neutrofilie.J Appl Physiol.2007;103:1189– 1195. [PubMed ] [ Google
Academic ]

19. Lippman M. Efectele ozonului asupra sănătății, o revizuire critică.J Am Air Pollut Control
Asoc.1989;39:672–695. [PubMed ] [Google Academic ]

20. Bhalla DK, Gupta SK. Leziuni pulmonare, inflamații și stimuli inflamatori la șobolanii expuși
la ozon.J Toxicol Environ Health.2000;59:211–228. [PubMed ] [Google Academic ]

21. Jerrett M, Burnett RT, Pope CA, Ito K, Thurston G, Krewski D, Shi Y, Calle E, Thun M. Expunerea și
mortalitatea la ozon pe termen lung.N Engl J Med.2009;360:1085–1095. [articol gratuit PMC ] [
PubMed ] [Google Academic ]

22. Valacchi G, Pagnin E, Corbacho AM, Olano E, Davis PA, Packer L, Cross CE. Expunerea in vivo
la ozon induce răspunsuri antioxidante/legate de stres în plămânii și pielea murine.Free Radic
Biol Med.2004;36:673–681. [PubMed ] [Google Academic ]

23. Valacchi G, Fortino V, Bocci V. Acțiunea duală a ozonului asupra pielii.Br J Dermatol.
2005;153:1096–1100. [PubMed ] [Google Academic ]

24. Wentworth P Jr, McDunn JE, Wentworth AD, Takeuchi C, Nieva J, Jones T, Bautista C,
Ruedi JM, Gutierrez A, Janda KD, Babior BM, Eschenmoser A, Lerner RA. Dovezi pentru
formarea de ozon catalizat de anticorpi în distrugerea și inflamația
bacteriilor.Ştiinţă.2002;298:2195–99. [PubMed ] [Google Academic ]
25. Yamashita K, Miyoshi T, Arai T, Endo N, Itoh H, Makino K, Mizugishi K, Uchiyama T, Sasada
M. Producția de ozon de către aminoacizi contribuie la uciderea bacteriilor.Proc Natl Acad
Sci, SUA.2008;105:16912–7. [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

26. Bastacky J, Lee CY, Goerke J, Koushafar H, Yager D, Kenaga L, Speed TP, Chen Y, Clements
JA. Stratul de căptușeală alveolar este subțire și continuu: microscopie electronică cu scanare
la temperatură joasă a plămânului de șobolan.J Appl Physiol.1995;79:1615– 1628. [ PubMed ]
[Google Academic ]

27. Mustafa MG. Baza biochimică a toxicității ozonului.Free Radic Biol Med.1990;9:245–
265. [PubMed ] [Google Academic ]

28. Esterbauer H, Schaur RJ, Zollner H. Chimia și biochimia 4-hidroxinonenalului,

malonaldehidei și aldehidelor înrudite.Free Radic Biol Med.1991;11:81– 128. [
PubMed ] [Google Academic ]
29. Schaur RJ. Aspecte de bază ale reactivității biochimice a 4-hidroxinonenalului.Mol
Aspecte Med.2003;24:149–159. [PubMed ] [Google Academic ]

30. Pulfer MK, Taube C, Gelfand E, Murphy RC. Expunerea la ozon in vivo și formarea de
oxisteroli biologic activi în plămâni.J Pharmacol Exp Ther.2005;312:256– 264. [
PubMed ] [Google Academic ]

31. Sathishkumar K, Haque M, Perumal TE, Francis J, Uppu RM. Un produs major de
ozonizare al colesterolului, 3-beta-hidroxi-5-oxo-5,6-secocolestan-6-al, induce
apoptoza la cardiomioblastele H9c2.FEBS Lett.2005;579:6444– 6450. [PubMed ] [
Google Academic ]

32. Mendiratta S, Qu ZC, May JM. Reciclarea ascorbatului eritrocitar: efecte antioxidante în
sânge.Free Radic Biol Med.1998;24:789–797. [PubMed ] [Google Academic ]

33. Crapo JD. Modificări morfologice ale toxicității pulmonare ale oxigenului. Ann Rev
Physiol.1986;48:721–731. [PubMed ] [Google Academic ]

34. Ruidavets JB, Cournot M, Cassadou S, Giroux M, Meybeck M, Ferrieres J. Poluarea aerului
cu ozon este asociată cu infarctul miocardic acut.Circulaţie.2005;111:563– 569. [ PubMed
] [Google Academic ]

35. Tager IB, Balmes J, Lurmann F, Ngo L, Alcorn S, Kunzli N. Expunerea cronică la ozonul
ambiental și funcția pulmonară la adulții tineri.Epidemiologie.2005;16:751– 759. [
PubMed ] [Google Academic ]

36. Aris RM, Christian D, Hearne PQ, Kerr K, Finkbeiner WE, Balmes JR. Inflamația căilor
respiratorii indusă de ozon la subiecții umani, determinată prin spălarea căilor respiratorii și
biopsie.Am Rev Respir Dis.1993;148:1363–1372. [PubMed ] [Google Academic ]
37. Spicett CM, Jerlich A, Panasenko OM, Arnhold J, Pitt AR, Stelmaszynska T, Schaur
RI. Reacțiile acidului hipocloros, speciile reactive de oxigen produse de
mieloperoxidază, cu lipide.Acta Biochim Pol.2000;47:889–
899. [PubMed ] [Google Academic ]

38. Bocci V. Este adevărat că ozonul este întotdeauna toxic? Sfârșitul dogmei.Toxicol Appl
Pharmacol.2006;216:493–504. [PubMed ] [Google Academic ]

39. Zhang W, He Q, Chan LL, Zhou F, El Naghy M, Thompson EB, Ansari NH. Implicarea
caspazelor în apoptoza indusă de 4-hidroxi-alchenal în celulele leucemice umane.Free
Radic Biol Med.2001;30:699–706. [PubMed ] [Google Academic ]

40. Choudhary S, Zhang W, Zhou F, Campbell GA, Chan LL, Thompson EB, Ansari NH. Produsele
finale ale peroxidării lipidelor celulare induc apoptoza în celulele epiteliale ale cristalinului
uman.Free Radic Biol Med.2002;32:360–369. [PubMed ] [Google Academic ]

41. Larini A, Bianchi L, Bocci V. Efectul 4-hidroxinonenalului asupra capacității antioxidante

și inducerea apoptozei în celulele T Jurkat.Radic liber Res.2004;38:509– 516. [PubMed ] [
Google Academic ]

42. Awasthi YC, Ansari GA, Awasthi S. Reglarea semnalizării mediate de 4-

hidroxinonenal de către glutation S-transferaze.Metode Enzimol.2005;401:379–
407. [PubMed ] [Google Academic ]

43. Iles KE, Dickinson DA, Wigley AF, Welty NE, Blank V, Forman HJ. HNE crește HO-1 prin
activarea căii ERK în celulele epiteliale pulmonare.Free Radic Biol Med.2005;39
:355–364. [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

44. Barrera G, Pizzimenti S, Dianzani MU. 4-hidroxinonenal și reglarea ciclului

celular: efecte asupra căii pRb/E2F.Free Radic Biol Med.2004;37:597– 606. [
PubMed ] [Google Academic ]

45. Bocci V, Borrelli E, Valacchi G, Luzzi E. Expunere aproape totală a corpului la un amestec de
oxigen-ozon într-o cabină de saună.Eur J Appl Physiol Occup Physiol.1999;80:549– 554. [
PubMed ] [Google Academic ]

46. Bocci V.Ozon Un nou medicament medical.2. Dordrecht, Olanda: Springer Publ; 2011. [
Google Academic ]

47. Poli G, Schaur RJ. 4-Hidroxinonenal în patomecanismele stresului oxidativ.Viața

IUBMB.2000;50:315–321. [PubMed ] [Google Academic ]
48. Chiarpotto E, Castello L, Leonarduzzi G, Biasi A, Poli G. Role of 4-hydroxy-2,3-nonenal in
the pathogenesis of fibrosis.BioFactors.2005;24:229–236. [PubMed ] [Google Academic
]
49. Bocci V, Valacchi G, Corradeschi F, Aldinucci C, Silvestri S, Paccagnini E, Gerli R.
Studies on the biological effects of ozone. 7. Generarea de specii reactive de oxigen
(ROS) după expunerea sângelui uman la ozon.J Biol Regul Homeost Agenti.1998;12
:67–75. [PubMed ] [Google Academic ]

50. Bocci V.Terapia cu oxigen-ozon O evaluare critică.Dordrecht, Olanda, Kluwer

Academic Publishers; 2002. [Google Academic ]

51. Stone JR, Collins T. Rolul peroxidului de hidrogen în răspunsurile proliferative

endoteliale.Endoteliul.2002;9:231–238. [PubMed ] [Google Academic ]

52. Bocci V, Aldinucci C. Utilizarea peroxidului de hidrogen ca medicament medical.Riv Ital Ossigeno-
Ozonoter.2005;4:30–39. [Google Academic ]

53. Goldstein BD, Balchum OJ. Efectul ozonului asupra peroxidării lipidelor din globulele roșii.
Proc Soc Exp Biol Med.1967;126:356–359. [PubMed ] [Google Academic ]

54. Rice-Evans C, Miller NJ. Statutul antioxidant total în plasmă și fluide corporale.Metode
Enzimol.1994;234:279–293. [PubMed ] [Google Academic ]

55. Travagli V, Zanardi I, Silvietti A, Bocci V. O investigație fizico-chimică asupra efectelor

ozonului asupra sângelui.Int J Biol Macromol.2007;41:504–511. [PubMed ] [Google
Academic ]

56. Bocci V. Aspecte științifice și medicale ale terapiei cu ozon, Stadiul tehnicii.Arch Med Res.
2006;37:425–435. [PubMed ] [Google Academic ]

57. Bocci V. Cazul pentru oxigenozonoterapia.Br J Biomed Sci.2007;64:44–

47. [PubMed ] [Google Academic ]

58. Bocci V, Borrelli E, Travagli V, Zanardi I. Paradoxul ozonului: ozonul este un oxidant puternic,
precum și un medicament medical.Medicinal Res Rev.2009;29:646–682. [PubMed ] [Google
Academic ]

59. Bocci V, Borrelli E, Corradeschi F, Valacchi G. Efecte sistemice după insuflarea

colorectală de oxigen-ozon la iepuri.Int J Med Biol Environ.2000;28:109– 113. [
Google Academic ]

60. Alary J, Geuraud F, Cravedi JP. Soarta 4-hidroxinonenalului in vivo: dispoziție și căi
metabolice.Mol Aspecte Med.2003;24:177–187. [PubMed ] [Google Academic ]

61. Siems W, Grune T. Metabolismul intracelular al 4-hidroxinonenalului.Mol Aspecte Med.

2003;24:167–175. [PubMed ] [Google Academic ]

62. Bocci V. Ozonoterapia normalizează echilibrul redox celular?Ipoteze Med.1996;

46:150–154. [PubMed ] [Google Academic ]
63. Zhang H, Liu H, Iles KE, Liu RM, Postlethwait EM, Laperche Y, Forman HI. 4-
hidroxinonenalul induce gama-glutamil transpeptidaza de șobolan prin semnalizarea
elementului de răspuns electrofil mediat de protein kinaza mitogenactivată/factorul
nuclear eritroid 2 legat de factorul 2.Am J Respir Cell Mol Biol.2006;34:174– 181. [articol
gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

64. Takahashi Y, Takahashi S, Yoshimi T, Miura T, Mochitate K, Kobayashi T. Creșterea

nivelurilor de ARNm de y-glutamil-transferaza și hemo-oxigenază-1 în plămânul șobolanului
după expunerea la ozon.Biochem Pharmacol.1997;53:1061–1064. [PubMed ] [ Google
Academic ]

65. Chen JZ, Sharma R, Yang Y, Singhal SS, Sharma A, Saini MK, Singh SV, Zimniak P, Awasthi
S, Awasthi YC. Metabolismul accelerat și excluderea 4-hidroxinonenalului prin inducerea
RLIP 76 și hGST 5.8 este un răspuns adaptiv timpuriu al celulelor la căldură și stresul
oxidativ.J Biol Chem.2001;276:41213–41223. [PubMed ] [Google Academic ]

66. Forman HJ, Dickinson DA, Iles KE. Căile de semnalizare HNE care conduc la eliminarea
acestuia.Mol Aspecte Med.2003;24:189–194. [PubMed ] [Google Academic ]

67. Yamamoto Y. Soarta hidroperoxidului lipidic din plasma sanguină.Radic liber Res.
2000;33:795–800. [PubMed ] [Google Academic ]

68. Xu C, Huang MT, Shen G, Lin W, Khor TO, Conney AH, Kong AN. Inhibarea
tumorigenezei pielii induse de 7,12-dimetilbenzo(a)-antracen la șoarecii C57BL/6 de
către sulforafan este mediată de factorul 2 legat de factorul nuclear E2.Cancer Res.
2006;66:8293–8296. [PubMed ] [Google Academic ]

69. Li W, Khor TO, Xu C, Shen G, Jeong WS, Yu S, Kong AN. Activarea semnalizării Nrf2-
antioxidant atenuează răspunsul inflamator NF kappa B și provoacă apotoza.Biochem
Pharmacol.2008;76:1485–1489. [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

70. Kwak MK, Kensler TW. Direcționarea semnalizării NRF2 pentru chimioprevenția
cancerului.Toxicol Appl Pharmacol. 2010;244:66–76. [PMC gratuit articol ] [
PubMed ] [Google Academic ]

71. Gomez-Cabrera MC, Domenech E, Vina J. Exercițiul moderat este un antioxidant:

Upregulation of antioxidant genes by traning.Free Radic Biol Med.2008;44:126– 131. [
PubMed ] [Google Academic ]

72. Itoh K, Chiba T, Takahashi S, Ishii T, Igarashi K, Katoh Y, Oyake T, Hayashi N, Satoh K,
Hatayama I, Yamamoto M, Nabeshima Y. Un heterodimer Nrf2/small Maf mediază
inducerea fazei II gene enzimelor de detoxifiere prin elemente de răspuns antioxidant.
Biochem Biophys Res Commun.1997;236:313–322. [PubMed ] [Google Academic ]
73. Motohashi H, Yamamoto M. Nrf2-Keap1 definește un mecanism de răspuns la stres important din
punct de vedere fiziologic. Trends Mol Med.2004;10:549–557. [PubMed ] [Google Academic ]

74. Dinkova-Kostova AT. Fitochimice ca protectori împotriva radiațiilor ultraviolete:

Versatilitatea efectelor și mecanismelor.Planta Med.2008;74:1548– 1559. [
PubMed ] [Google Academic ]

75. Brunt KB, Fenrich KK, Kiani G. Protecția celulelor musculare netede vasculare umane de
apoptoza indusă de H2O2 prin codependența funcțională între HO-1 și AKT.Arterioscler
Tromb Vasc Biol.2006;26:2027–2034. [PubMed ] [Google Academic ]

76. He X, Lin GX, Chen MG, Zhang JX, Ma Q. Protecție împotriva stresului oxidativ indus
de crom (VI) și a apoptozei de către Nrf2 în nucleu și perturbarea asocierii nucleare
Nrf2/Keap 1.Toxicol Sci.2007;98:298–309. [PubMed ] [Google Academic ]

77. Khodagholi F, Tusi SK. Stabilitatea Nrf2 de către tBHQ previne apoptoza indusă de LPS în
celulele PC12 diferențiate.Mol Cell Biochim.2011;354:97–112. [PubMed ] [Google Academic
]

78. Villeneuve NF, Sun Z, Chen W, Zhang DD. Nrf2 și p21 reglează echilibrul fin între viață și
moarte prin controlul nivelurilor ROS.Ciclul celulei.2009;8:3255–3256. [articol gratuit
PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

79. Slocum SL, Kensler TW. Nrf2: controlul sensibilității la agenți cancerigeni.Arch
Toxicol.2011;85:272–284. [PubMed ] [Google Academic ]

80. Martin-Montalvo A, Villalba JM, Navas P, de Cabo R. NRF2, cancer and calorie
restriction.Oncogene.2011;30:505–520. [articol gratuit PMC] [PubMed ] [Google
Academic ]

81. Johnson JA, Johnson DA, Kraft AD, Calkins MJ, Jakel RJ, Vargas MR, Chen PC. Calea
Nrf2-ARE: un indicator și modulator al stresului oxidativ în neurodegenerare.Ann
NY Acad Sci.2008;1147:61–69. [PMC gratuit articol ] [
PubMed ] [Google Academic ]
82. Jazwa A, Cuadrado A. Direcționarea hemoxigenazei-1 pentru neuroprotecție și
neuroinflamație în bolile neurodegenerative.Țintele CurrDrug.2010;11:1517–
1531. [PubMed ] [Google Academic ]

83. Bocci V, Travagli V, Zanardi I. Terapia cu oxigen-ozon poate ameliora tulburările

cardiovasculare ?Tulburări cardiovasculare și hematologice-ținte medicamentoase.2009;9
:78– 85. [PubMed ] [Google Academic ]

84. Bocci V, Zanardi I, Travagli V. Ozon: un nou medicament medical în bolile vasculare.Am J
Cardiovas Drugs.2011;11:73–82. [PubMed ] [Google Academic ]
85. Li J, Ichikawa T, Janichi JS, Cui T. Targeting the Nrf2 pathway against cardiovascular disease.
Opinie expertă asupra țintelor.2009;13:785–794. [PubMed ] [Google Academic ]

86. Ishii Y, Morishima Y, Kimura T, Kimura T, Kiwamoto T, Iizuka T, Hegab AE, Hosoya T,
Nomura A, Sakamoto T, Yamamoto M, Sekizawa K. Factorul de transcripție Nrf2 joacă
un rol esențial în protecția împotriva elastazei- inflamație pulmonară indusă și
emfizem.J Immunol.2005;175:6968–6975. [PubMed ] [Google Academic ]

87. Reuter S, Gupta SC, Chaturvedi MM, Aggarwal BB. Stresul oxidativ, inflamația și
cancerul: cum sunt ele legate?Free Radic Biol Med.2010;49:1603–1616. [articol gratuit
PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

88. Singh S, Vrishni S, Singh BK, Rahman I, Kakkar P. Mecanismul de răspuns la stres
Nrf2-ARE: un punct de control în disfuncțiile mediate de stresul oxidativ și boala
inflamatorie cronică.Radic liber Res.2010;44:1267–1288. [PubMed ] [Google
Academic ]

89. Li M, Fukagawa NK. Modificări legate de vârstă în semnalizarea redox și funcția

VSMC.Antioxid Redox Semnal.2010;12:641–655. [PMC gratuit

articol ] [PubMed ] [Google Academic ]

90. Rokitansky O. Klinik und biochemie der ozonotherapie.Hospitalis.1982;52:643–

647. [Google Academic ]

91. Bocci V, Larini A, Micheli V. Restaurarea normoxiei prin ozonoterapia poate controla
creșterea neoplazică: O revizuire și o ipoteză de lucru.J Altern Complem: Med.2005;
11:257–265. [PubMed ] [Google Academic ]

92. Travagli V, Zanardi I, Bernini P, Nepi S, Tenori L, Bocci V. Efectele tratamentului sanguin cu
ozon asupra profilului metabolit al sângelui uman.Intern J Toxicol.2010;29:165– 174. [
PubMed ] [Google Academic ]

93. Bocci V, Di Paolo N. Oxigenarea-ozonarea sângelui în timpul circulației extracorporale

(EBOO). Partea a III-a: o nouă abordare medicală.Ozon Science Ing.2004;26:195– 205. [
Google Academic ]

94. Di Paolo N, Bocci V, Salvo DP, Palasciano G, Biagioli M, Meini S, Galli F, Ciari I, Maccari
F, Cappelletti F, Di Paolo M, Gaggiotti E. Oxigenarea și ozonarea sângelui extracorporal
(EBOO): un studiu controlat la pacienții cu boală arterială periferică.Int J Artif Organs.
2005;28:1039–1050. [PubMed ] [Google Academic ]

95. Bocci V, Aldinucci C, Mosci F, Carraro F, Valacchi G. Ozonarea sângelui uman induce
o reglare remarcabilă a hemoxigenazei-1 și a proteinei de stres termic-70.Mediatori
Inflamm.2007. ID articol 26785. [articol gratuit PMC ] [PubMed ]
96. Wang GL, Jiang BH, Rue EA, Semenza GL. Factorul 1 inductibil de hipoxie este un
heterodimer bazic-helixloop-helix-PAS reglat de O celular2tensiune.Pro Natl Acad Sci
USA.1995;92:5510–5514. [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

97. Siddiq A, Aminova LR, Ratan RR. Factori de transcripție sensibili la activitatea
prolil 4-hidroxilazei: de la hidroxilare la expresia genelor și neuroprotecție. Față
Biosci.2008;13:2875–2887. [PMC gratuit

articol ] [PubMed ] [Google Academic ]

98. Siddiq A, Aminova LR, Ratan RR. Enzimele prolil 4-hidroxilazei factor inductibil de
hipoxie: Etapa centrală în lupta împotriva hipoxiei, compromisului metabolic și
oxidativ stres.Neurochema Res.2007;32:931–946. [PMC gratuit

articol ] [PubMed ] [Google Academic ]

99. Manalo DJ, Rowan A, Lavoie T, Natarajan L, Kelly BD, Ye SQ, Garcia JG, Semenza GL. Reglarea
transcripțională a răspunsurilor celulelor endoteliale vasculare la hipoxie de către HIF-
1.Sânge.2005;105:659–669. [PubMed ] [Google Academic ]

100. Morsy MD, Hassan WN, Zalat SI. Îmbunătățirea markerilor de stres oxidativ renal după
administrarea de ozon în nefropatia diabetică la șobolani.Diabeteol Metabol Syndr.2010;2
:29–35. [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

101. Martınez-Sanchez G, Al-Dalain SM, Menendez S, Re L, Giuliani A, Candelario-Jalil E,

Alvarez H, Fernández-Montequín JI, León OS. Eficacitatea terapeutică a ozonului la
pacienții cu picior diabetic.Eur J Pharmacol.2005;523:151–161. [PubMed ] [Google
Academic ]

102. Bocci V, Zanardi I, Michaeli V, Travagli V. Mecanisme de acțiune și interacțiuni

chimice-biologice între ozon și compartimente corporale: o evaluare critică a diferitelor
căi de administrare.Terapia actuală cu medicamente.2009;4:159–173. [Google
Academic ]

103. Eliakim R, Karmeli F, Rachmilewitz D. Clismă cu ozon: un model de colită microscopică la

șobolani.Dig Dis Sci.2001;46:2515–2520. [PubMed ] [Google Academic ]

104. Bocci V, Zanardi I, Huijberts MSP, Travagli V. Diabetul și stresul oxidativ cronic.
O perspectivă bazată pe posibila utilitate a terapiei cu ozon. Diabe Metabo Syndr:
Cercetare clinică și recenzii.2011;5:45–49. [PubMed ] [Google Academic ]
105. Smith-Garvin JE, Koretzky GA, Jordan MS. Activarea celulelor T.Annu Rev Immunol.
2009;27:591–619. [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

106. Amasaki Y. Inhibitorii calcineurinei și sistemul calcineurină-NFAT.Nihon Rinsyo Meneki

Gakkai Kaishi (Jpn J Clin Immunol)2010;33:249. [PubMed ] [Google Academic ]
107. Kaminuma O. Inhibitori selectivi ai factorului nuclear al celulelor T activate:
potențiale medicamente terapeutice pentru tratamentul bolilor imunologice și inflamatorii. Ținte
pentru medicamente pentru alergii Inflamm.2008;7:35–40. [PubMed ] [Google Academic ]

108. Maziere C, Morliere P, Louandre C, Conte MA, Gomilla C, Santus R, Antonicelli

F, Hornebeck W, Mazière JC. Dozele mici de UVA activează factorul de transcripție NFAT
în fibroblastele umane printr-o cale calciu-calcinurină.Free Radic Biol Med.
2005;39:1629–1637. [PubMed ] [Google Academic ]

109. Bocci V, Paulesu L. Studii privind efectele biologice ale ozonului 1. Inducerea
interferonului gamma asupra leucocitelor umane.hematologică.1990;75:510– 515. [
PubMed ] [Google Academic ]

110. Bocci V, Luzzi E, Corradeschi F, Paulesu L, Di Stefano A. Studies on the biological

effects of ozone 4. An attempt to define conditions for optimal induction of
cytokines.Limfokină Citokină Res.1993;12:121–126. [PubMed ] [Google Academic ]

111. Bocci V, Valacchi G, Corradeschi F, Fanetti G. Studies on the biological effects

of ozone 8. Effects on the total antioxidant status and on interleukin-8
production.Mediatori Inflamm.1998;7:313–317. [PMC gratuit

articol ] [PubMed ] [Google Academic ]

112. Bocci VA, Zanardi I, Travagli V. Ozonul care acționează asupra sângelui uman produce o
relație hormetică doză-răspuns.J Medicină translaţională.2011;9:66–76. [articol gratuit PMC
] [PubMed ] [Google Academic ]

113. Burgassi S, Zanardi I, Travagli V, Montomoli E, Bocci V. Cât de multă activitate

bactericidă a ozonului este compromisă de componentele plasmei?J.Appl Microbiol.
2009;106:1715–1721. [PubMed ] [Google Academic ]

114. Bocci V, Venturi G, Catucci M, Valensin PE, Zazzi M. Lipsa eficacității terapiei
cu ozon în infecția cu HIV.Clin Microbiol Infec.1998;4:667–669. [PubMed ]
[Google Academic ]

115. Sweet F, Kao MS, Lee S. Ozonul inhibă selectiv creșterea celulelor canceroase umane.
Ştiinţă.1980;209:931–933. [PubMed ] [Google Academic ]

116. Schulz S, Haussler U, Mandic R, Heverhagen JT, Neubauer A, Dünne AA, Werner JA,
Weihe E, Bette M. Tratamentul cu ozon/oxigen-pneumoperitoneu are ca rezultat
remisia completă a carcinoamelor cu celule scuamoase de iepure.Int J Cancer.2008;
122:2360–2367. [PubMed ] [Google Academic ]

117. Bocci V. Ozonul cu adevărat „vindecă” cancerul?Int J Cancer.2008;123:1222. [

PubMed ] [Google Academic ]
118. Kwak MK, Kensler TW. Direcționarea semnalizării NRF2 pentru cancer
chimioprevenire.Toxicol articol ] [Appl Pharmacol.2010;244:66–76. [PMC gratuit
PubMed ] [Google Academic ]

119. Tufekci KU, Civi Bathway E, Genc S, Genc K.Calea Nrf2/ARE: O țintă promițătoare
pentru a contracara disfuncția mitocondrială în boala Parkinson.Boala Parkinson; 2011.
în presă . [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

120. Idriss NK, Blann AD, Lip GY. Hemoxigenaza-1 în bolile cardiovasculare.J Am Coll
Cardiol.2008;52:971–978. [PubMed ] [Google Academic ]

121. Scapagnini G, Sonya V, Nader AG, Zella D, Fabio G. Modularea căii Nrf2/ARE prin
polifenoli alimentari: O strategie neuroprotectivă nutrițională pentru tulburările
cognitive și neurodegerative.Mol Neurobiol.2011. în presă . [articol gratuit PMC ] [
PubMed ]

122. Kweon MH, Adhami VM, Lee JS, Mukhtar H. Supraexprimarea constitutivă a
hemoxigenazei-1 dependente de Nrf2 în celulele A459 contribuie la rezistența la
apoptoză indusă de epigalocatechin 3-galat.J Biol Chem.2006;44:33761– 33772. [
PubMed ] [Google Academic ]

123. Neymotin A, Calingasan NY, Wille E, Naseri N, Petri S, Damiano M, Liby KT,
Risingsong R, Sporn M, Beal MF, Kiaei M. Efectul neuroprotector al activatorilor
Nrf2/ARE, CDDO etilamidă și CDDO trifluorethlamide, în un model de șoarece al
sclerozei laterale amiotrofice.Free Radic Biol Med.2011;51:88–96. [articol gratuit
PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

124. Fiul TG, fitochimice Camandola. S, Mattson MP. Dietă hormetică Med.2008;10
Neuromoleculă articol ] [PubMed :236–46. [PMC gratuit

] [Google Academic ]

125. Miura T, Iwai A, Tamoto K, Yamazaki A, Nochi H.Componentele și mecanismul de acțiune

antiinflamator al uleiului de măsline ozonizat.În lucrările celui de-al 19-lea Congres Mondial al
Ozonului al IOA: 31 august-3 septembrie 2009; Tokyo; p. 145–166. [Google Academic ]

126. Valacchi G, Lim Y, Belmonte G, Miracco C, Zanardi I, Bocci V, Travagli V. Uleiul de susan
ozonat îmbunătățește vindecarea rănilor cutanate la șoarecii SKH1.Regenerator pentru
răni.2010;19:107–115. [PubMed ] [Google Academic ]

127. Travagli V, Zanardi I, Bocci V. Aplicarea topică a ozonului și a uleiurilor ozonate ca agenți
antiinfecțioși: o perspectivă asupra revendicărilor de brevet. Brevete recente privind descoperirea
medicamentelor antiinfecțioase.2009;4:130–142. [PubMed ] [Google Academic ]
128. Travagli V, Zanardi I, Valacchi G, Bocci V. Ozon și uleiuri ozonate în piele
boli: o recenzie.Mediatori Inflamm.2010. (2010 Articolul ID 610418, EPUB 2010) 4 iulie,
Review. [articol gratuit PMC ] [PubMed ]

129. Andreula CF, Simonetti L, De Santis F, Agati R, Ricci R, Leonardi M. Minimally

invasive oxygen-ozone therapy for lombar disc herniation.Am J Neuroradiol.
2003;24:996–1000. [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

130. Bocci V, Pogni R, Corradeschi F, Busu E, Cervelli C, Bocchi L, Basosi R. Oxygenozone in

orthopaedics: EPR detection of hydroxyl free radicals in ozone-treated "nucleus pulposus"
material.Riv Neuroradiol.2001;14:55–59. [Google Academic ]

131. Bocci V, Bianchi L, Larini A. The ozone enigma in medicine. Relația biochimică
dintre ozon și fluidele corporale poate explica efectele sale biologice, terapeutice
și toxice.Riv Ital Ossigeno-Ozonoterapia.2003;2:113– 120. [Google Academic ]

132. Lynch E.Ozon: Revoluția în stomatologie.Copenhaga, cărți Quintessence; 2004. [

Google Academic ]

133. Chandiramani N, Wang X, Margeta M. Baza moleculară pentru vulnerabilitatea la

stresul mitocondrial și oxidativ într-o linie celulară neuroendocrină CR1-G1.Plus unu.
2011;6in presa. [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

134. Bocci V, Zanardi I, Travagli V. Oxigen/ozon ca amestec de gaze medicale. O evaluare

critică a diferitelor metode clarifică aspectele pozitive și negative. Cercetarea gazelor
medicale.2011;1:6. [articol gratuit PMC ] [PubMed ] [Google Academic ]

135. Jacobs MT. Untersuchung uber Zwischendalle und typische Komplikationen in der
ozon-Sauersoff - Therapie.OzoNachrichten.1982;1:5. [Google Academic ]

136. Bocci V, Zanardi I, Travagli V. Potentiality of oxygen-ozon therapy to improve the

health of aging people.Curr Aging Sci.2010;3:177–187. [PubMed ] [Google Academic
]