GENUL SALMONELLA.

MICROBIOLOGIA I
DIAGNOSTICUL DE
LABORATOR AL
SALMONELOZELOR
 CLASIFICARE

Genul: Salmonella (Daniel Elmer Salmon, veterinar american, a

descoperit bacteria n 1885)
Specii: Salmonella enterica, Salmonella bongori (anterior subspecia
V)
Subspecii ale speciei S.enterica: enterica (subsp. I), salamae
(subsp. II), arizonae (subsp. IIIa), diarizonae (subsp. IIIb), houtenae
(subsp. IV), indica (subsp. VI)

Majoritatea tulpinilor izolate din patologii umane (99,5%) aparin

s/s S.enterica enterica cu peste 2500 de serovariante: S. London,
S. Enteritidis, S. Typhi, S.Paratyphi A, S. Paratyphi B,
S.Choleraesuis, etc

Salmonella enterica subspecia enterica serovar Typhi

sau
Salmonella Typhi (S. Typhi)
 CLASIFICAREA KAUFFMAN-WHITE
(conform structurii antigenice)
Ag O 67 varieti antigenice (O1, O2, O3, ... O65,
etc), permite repartizarea salmonelelor n
serogrupe (A, B, C, D, E,...Z, O51,...)
Fracii antigenice majore desemneaz grupa:
O2 grupa A; O4 B, O6 C, O9 D, etc
Fracii antigenice minore O1, O12 - sunt comune
Ag H definete serovariante n cadrul grupei.
Structura flagelinei este determinat de 2 gene
cromozomale diferite, care se exprim simultan
sau alternativ (variaie de faz, frecvena 10-4)
Ag H faza 1 Ha; Hb; Hc; Hd; Hg,m
Ag H faza 2 H1,2; H1,5; H1,7;
Serovar monofazic: O1,2,12:Ha (S.Paratyphi A)
Serovar difazic: O1,4,12:HbH1,2 (S.Paratyphi B)
Ag Vi (K), poliozidic, termolabil, prezent la
S.Typhi, S.Paratyphi C, S.Dublin. Este
concentrat la polii bacteriei. Mascheaza Ag
O. Distrus prin fierbere 10 min.
S. Typhi O9,12:Hd:Vi+ / O9,12:Hd:Vi-

Conform patogenitii pentru gazd se disting:

I. Salmonele monopatogene (umane) (S.Typhi,
S.Paratyphi A, S.Paratyphi B)
II. Salmonele bipatogene (patogene pentru om i
animale, ubicvitare) majoritatea.
Grupa Serovarul Antigenul O Vi Antigene H
faza 1 faza 2
A Paratyphi A 1,2,12 a -
B Paratyphi B 1,4,5,12 b 1,2
Wien 1,4,12,27 b l,w
Typhimurium 1,4,5,12 i 1,2
Derby 1,4,12 f,g -
C Paratyphi C 6,7 + c 1,5
Virchov 6,7 r 1,2
Infantis 6,7 r 1,5
Bovismorbificans 6,8 r 1,5
D Typhi 9,12 + d -
Enteritidis 1,9,12 g,m -
Panama 1,9,12 l,v 1,5
Dublin 1,9,12 + g,p -
Gallinarum 1,9,12 - -
E London 3,10 l,v 1,6
Anatum 3,10 e,h 1,6
Caractere morfologice
Salmonella bacterii gram-, mobile
peritriche (S.Gallinarum, imobil),
asporogene.
 Caractere de cultur
1. Medii de mbogire : Muller, Kauffman (medii cu
bil, tetrationat de Na), bulion cu selenit de Na
2. Medii DD de izolare a culturii pure: Endo, Levin,
Ploskirev (colonii S, lactozo -); mediul Wilson-Blair
cu sulfit de bismut (colonii negre)
3. Medii DD de acumulare i difereniere: Olkeniki,
Kligler (glucoza A/AG, lactoza-, H2S+, ureaza-)
Teste primare: utilizeaz citratul de Na, produc H2S,
MR+, LDC+, mobilitate+, celelalte teste
negative.
Teste secundare: scindeaz glucidele A/AG, indol-,
ornitindecarboxilaza+, etc
EXCEPIE: S.Typhi citrat-, H2S-, scindeaz glucoza
pn la acid;
S.Paratyphi A H2S+/-, LDC-
FACTORI DE PATOGENITATE

Fimbrii (adeziune)
Capacitatea de a penetra n celule (sistem de
secretie III) i de multiplicare intracelular
(Macrofage, celule epitel)
Endotoxina
Citotoxine (SLT) inhib sinteza proteic
(necroz)
Enterotoxine (LT, ST) activeaz
adenilat/guanilatciclazele membranare (diaree)
Siderofori (captarea Fe)
Ag Vi (antifagocitar, inhib activarea C, rezisten
la activitatea bactericid a serului)
 Majoritatea salmonelelor (98%) sunt sensibile la
bacteriofagul O1. Exist bacteriofagi cu specificitate
de specie i variant.

Habitat: intestinul omului, animalelor, psrilor,

reptilelor. Vertebratele acvatice (psri, reptile),
psrile domestice, bovinele, ovinele, porcinele, etc
sunt frecvent contaminate (carne, ou)
Rezistena n mediul extern: salmonelele rezist la
70C 30 min., rezistente la frig i concentraii mari
de sare. Supravieuesc mai multe sptmni n
mediu sec i luni n ap. Se nmulesc n produse
alimentare la temperatura camerei.
 ROLUL SALMONELELOR N PATOLOGIA UMAN

SALMONELOZE:
I. Febre tifo-paratifoide
II. Salmoneloze digestive (toxi-infecii alimentare, gastro-
enterite)
III. Manifestri extra-digestive:
- bacteriemii nontifoidice
- infecii pleuro-pulmonare
- afeciuni osteo-articulare (osteite, osteomielite, artrite
septice, etc)
- infecii nozocomiale
- infecii cardio-vasculare (pericardit, arterite)
- infecii urinare
- infecii abdominale (colecistit, abces al ficatului, splinei)
- infecii ale SNC (meningit, abces al creierului, abces
epidural, etc)
FEBRELE TIFO-PARATIFOIDE

Agenii cauzali S.Typhi, S.Paratyphi A, B, (C)

Sursa de infecie omul bolnav, purttorul
Contaminarea fecal-oral (ap, alimente), contact
direct
Doza infectant 105 - 106 bacterii
OMS anual 18 33 mln cazuri de febr tifoid,
500.000 600.000 cazuri de deces
 PATOGENEZA
- Traversarea epiteliului intestinal intact
- Invazia i multiplicarea intracelular la nivelul
plcilor Peyer i esutului limfoid al tubului
digestiv (perioada de incubaie)
- Ptrunderea n ganglionii limfatici mezenterici cu
multiplicarea salmonelelor n macrofage
(perioada prodromal)
I sptmn de boal (bacteriemie). Invadarea
fluxului sangvin via sistemul limfatic (diseminarea
germenilor) cu eliberarea endotoxinei. Endotoxina
pe cale sangvin parvine la centrii neurovegetativi
ai ventriculului 3, determinnd febr, stare de tifos,
colaps cardio-vascular, etc.
II sptmn de boal (difuzie parenchimatoas)
Bacteriile sunt fixate n organele SRE i se
multiplic n ficat, splin, mduv osoas, esut
limfoid, etc. Din aceast perioad ncepe
eliminarea salmonelelor cu saliva, materiile fecale,
urina, bila, etc.
III-IV sptmn de boal (faza alergic). Din ficat
salmonelele ptrund n cile biliare, apoi iari n
intestin. La nivelul plcilor Peyer se dezvolt o
reacie de hipersensibilitate tip 4 - necroz, ulceraii
 Manifestri clinice
I. Perioada de incubaie - 1-3 sptmni
II. Perioada prodromal (de invazie) 1-3 zile
III. Perioada de stare. Debut brutal, cu frison, febr
39-41 grade, cefalee, bradicardie, urmnd
frecvent deliriu calm, rareori agitat, stupoare,
somnolen, posibil com. Erupii cutanate
(rozeole) apar pe abdomen, torace, spate n ziua
a 8-9 de boal (embolii limfatice cu bacterii).
Constipaie, uneori diaree, tulburri
cardiovasculare. Durata 7-10 zile.
Complicaii: hemoragii intestinale, perforarea
intestinului, peritonit, miocardit, meningit,
psihoz etc.
IV. Perioada de reconvalescen (1-3-6 luni)
 Imunitatea celular, umoral
5-10% convalesceni purttori pn la 3
luni (cu depistarea salmonelelor n bil
sau/i urin)
3-5% convalesceni (cu litiaz biliar)
purttori cronici (1-10 ani toat viaa)
Recidive sunt posibile (descrcri
bacteriemice din focare profunde, forme L),
se caracterizeaz prin simptome atenuate i
evoluie de scurt durat
 DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL
FEBRELOR TIFO-PARATIFOIDE

PRELEVATE: snge (perioada febril, n

special I sptmn de boal), urin
(ncepnd cu a II sptmn), materii fecale
(II-III sptmn de boal), exsudat din
rozeole, ser sangvin (din ziua a 7-ea), bil,
mduv osoas
METODE DE DIAGNOSTIC

Examenul microscopic RIF, Gram

 Examenul bacteriologic
Hemocultura 10-15 ml snge se
insmneaz n 100 ml bulion biliat,
mediul Rappoport, bulion glucozat 1% sau
mediu bifazic pentru mbogirea
salmonelelor. Se incubeaz la 37 grade i
n zilele 1, 2, 3, 5, 7 i 10 se repic pe un
mediu DD (Endo, Levin, Ploskirev, W-B)
pentru izolarea culturii pure. Coloniile
lactozo- se repic pe mediul Kligler
(Olkeniki) pentru acumularea culturii pure
i identificarea preliminar.
 Identificarea final - n baza studiului
caracterelor morfotinctoriale, de
cultur, biochimice, antigenice (RA pe
lam cu seruri imune polivalente
ABCDE, seruri monovalente anti-O de
grup (O2, O4, O6, O9, etc) , seruri
monospecifice anti-H (de variant),
seruri anti-Vi, sensibilitatea la
bacteriofagi).
Rezultatul definitiv negativ-n ziua a 11.
 Rozeolocultura (exsudatul din rozeole se inoculeaz n
3-5 ml bulion biliat)
Mielocultura (0,5 ml mduva osoas din stern n 3-5
ml bulion biliat)
Bilicultura (dup 3-6 luni de la vindecare, 5-10 ml bil
se ntroduc n BP)
Roseolo-, mielo- i bilicultura se examineaz ca i
hemocultura

Coprocultura (din spt. 2) 3-5 g materii fecale se

nsmneaz direct pe medii DD i pe medii de
mbogire (Muller, Kauffman). Rezultat pozitiv ziua
4-5, rezultat negativ peste 3 zile.
Urocultura (10 ml urin se centrifugheaz, sedimentul
se examineaz ulterior ca i coprocultura)
 Serodiagnostic (din II sptmn)
1. RA Widal - la diluii ale serului bolnavului se adaug
diagnosticuri OH din S.Typhi, Paratyphi A i B. Titrul
diagnostic 1/200 sau creterea n dinamic a titrului
2. RA modificarea Felix (utilizarea separat a
diagnosticurilor O i H).
Anticorpii anti-O (Ig M) apar primii (ncepnd cu ziua 7-8)
i dispar dup 2-3 luni (maximum spt. II-III).
Anticorpii anti-H (Ig M, apoi Ig G) apar mai trziu (10-12
zi) i persist o durat mai lung. n debut de
reconvalescen (sptmna a IV) titrul Ac anti-O i
anti-H se egaleaz.
3. RHAI (cu diagnosticuri eritrocitare O)
4. ELISA detecteaz separat anticorpii IgM i IgG contra
unei proteine din membrana extern a S.Typhi.
INVESTIGAREA PURTTORILOR

Coproculturi repetate
Urocultura
Bilicultura
Serodiagnostic
1. Reacia de Vi-aglutinare (eritrocite sensibilizate cu
Ag Vi). Titrul diagnostic - 1/40
2. Reacia de latex-aglutinare
3. Determinarea izotipului de imunoglobuline Ig G
TRATAMENTUL I PROFILAXIA
Tratament:
- Fluorochinolone
- Cefalosporine de generaia III
- Cloramfenicol
- Ampicilin
- Cotrimoxazol
Antibiograma este obligatorie, tulpinile multirezistente sunt
frecvente!!!
Profilaxia specific: vaccinarea selectiv (zone endemice, militari,
personal medical, etc)
- Vaccin chimic TABTe
- Vaccin antitifoidic inactivat
- Vaccin atenuat Ty21a (administrare oral, imunitate local
sIgA), contraindicat gravidelor, copiilor, imunodeprimailor
- Vaccin subunitar din Ag Vi (areactogen, imunitate 3-5 ani)
SALMONELOZE DIGESTIVE
(gastro-enterite, toxi-infecii alimentare)

Consecutive consumului de alimente contaminate

cu salmonele (ou, maionez, patiserie cu crem,
carne, lactate, etc).
Agenii cauzali: salmonele bipatogene

Gr. B (S. Typhimurium, S. Paratyphi B, S. Heidelberg,

S. Derbi)
Gr. C (S. Choleraesuis, S. Newport, S. Paratyphi C)
Gr. D (S. Enteritidis, S. Dublin)
Gr. E (S. Anatum)
 PATOGENEZA GASTROENTERITELOR

Sursa de infecie: animalele domestice i

psrile (bolnave sau purttori cronici), persoane
bolnave sau purttori sntoi de salmonele
Transmiterea pe cale alimentar (alimente
contaminate direct de la surs sau pe parcursul
procesului tehnologic), prin ap sau contact
direct. Rareori prin inhalare de praf contaminat.
Doza infectant n funcie de virulena tulpinii,
receptivitatea gazdei, vrst, utilizarea AB,
concentraia inoculului, etc
 Salmonelele depesc aciditatea gastric i ajung n intestinul
subire, unde ader prin pili la suprafaa celulelor M
(preponderent) i a enterocitelor. Prin sisteme de secreie (tipul
III) salmonelele injecteaz mai multe proteine, ceea ce determin
endocitoza bacteriei cu transcitoza ulterioar de la suprafaa
apical la membrana bazolateral i invazia celulelor vecine. n
interiorul celulei salmonelele se multiplic n vacuole, traverseaz
celula i intr n lamina propria. Aici ele sunt fagocitate de
neutrofile i macrofage i induc un rspuns inflamator profund.
Persistena n lamina propria este asigurat de abilitatea
salmonelelor de a ucide macrofagele prin multiple mecanisme,
inclusiv prin inducerea apoptozei.
Invazia i transcitoza enterocitelor, asociate cu permeabilitatea
vascular crescut i rspunsul inflamator determin diareea.
Secreia de prostaglandine i factori chemotactici amplific
inflamaia i modificrile biochimice n enterocite.

Gastroenteritele pot fi urmate de bacteriemii.

 Manifestri clinice:
Perioada de incubaie 8 - 48 ore
Debut brusc i evoluie acut (3 - 5 zile) cu
diaree, vom, febr, cefalee, stare de
ru.
Evoluie sever la sugari, btrni,
imunodeprimai (n special bolnavi cu
SIDA).
 TOXIINFECII ALIMENTARE
Survin ca urmare a ingestiei unui aliment n
care s-au acumulat cantiti mari de mi/o
(105 107). n stomac, apoi n intestin
bacteriile se distrug, iar endotoxina
eliberat provoac semnele clinice de
intoxicare.

Alte forme de salmoneloze (septicemii,

meningite, infecii urinare, infecii
nosocomiale, etc) se dezvolt la persoane
cu rezistena sczut
 Diagnosticul de laborator al salmonelozelor
non-tifoide
Prelevate: n funcie de forma clinic -
mase fecale, mase vomitive, snge,
splturi gastrice, urin, puroi, resturi de
alimente suspecte.
Metode de diagnostic:
1. Examenul bacteriologic de baz
(coprocultur, hemocultur, urocultur...)
2. RIF pentru diagnostic rapid

3. Serodiagnostic - RHAI
 Profilaxia salmonelozelor nespecific

Tratamentul simptomatic,
antibioterapie la necesitate (copii mici,
btrni, imunodeprimai, forme grave de
infecie)