Bioreactoare pentru cultivarea celulelor, tipuri,

modulele, dirijarea computerizata

Bioreactoare
 Termenul „bioreactor” se referă la un sistem capabil să cultive celule într-un mediu controlat.
Mai multe condiții operaționale pot fi modificate și controlate, inclusiv pH-ul, temperatura,
tensiunea oxigenului și perfuzia celulelor, precum și stimuli externi, cum ar fi forțele mecanice
etc.
Tipuri de bioreactoare

 Bioreactoarele Spinner Flask

 Bioreactor cu vas-perete rotativ. (Rotating Wall Vessel Bioreactor)
 Bioreactoare cu perfuzie directă
 Bioreactor de undă
 Bioreactoare de însămânțare celulară
Bioreactoarele Spinner Flask

Începând cu forma cea mai de bază a bioreactorului, Spinner Flask este unul dintre cele mai simple și mai des
folosite, care este optim pentru culturile de stare statică și sunt utilizate în principal pentru culturi de cartilaj și
țesut osos. Unul dintre principalele avantaje ale acestui tip de bioreactor este capacitatea sa de a permite un
mediu mixt perfect în interiorul balonului, care este creat de către o bară magnetică agitată atașată la un rotor
pentru a efectua circularea mediilor, în aşa mod, asigurându-i un flux dinamic, datorită cărui se reduce stratul
stagnat de celule, evitând astfel un mediu inegal .
Bioreactor cu vas-perete rotativ. (Rotating Wall Vessel Bioreactor)
Constă într-o cameră cilindrică în care peretele este capabil să se rotească cu o viteză unghiulară constantă.
Peretele cilindrului este rotit la o astfel de viteză, încât este capabil să realizeze un echilibru între forțele
gravitaționale, forța de tracțiune hidrodinamică și forța centrifugă, creând un mediu micro-gravitațional, care se
simte în schelă. Acest echilibru de forțe permite schelei să rămână suspendată în mediul celular, profitând din
plin de transferul de masă, reducând în același timp stresul de forfecare.
Bioreactoare cu perfuzie directă

Bioreactorii de perfuzie sunt cei care simulează mai bine mediul in vivo prin furnizarea unui flux de mediu către o
cultură celulară, furnizând oxigen și substanțe nutritive prin schelele cu semințe celulare. Aceste dispozitive sunt
utilizate în principal în abordările TE ale țesuturilor osoase și cartilaginoase, care profită de tensiunea de forfecare
generată de flux.
Aceste dispozitive sunt foarte versatile, permițând mai multe tipuri de configurație, cum ar fi buclele închise, în
care mediul recirculează asigurând factori de creștere produse în mod natural și o singură trecere, care furnizează
întotdeauna mediu proaspăt eliminând orice acumulare de deșeuri.
Bioreactor de undă

Bioreactorul de undă este un sistem compus din două părți principale, platforma de agitare și un sac de celule
care primește amestecul celular. Particularitatea acestui bioreactor constă în modul în care stimulii săi sunt
aplicați prin utilizarea undelor generate de platforma de care este atașat sacul celular. Este posibil să controlați
intensitatea mișcării undei prin agitarea înclinării motorului și a platformei. Aceste unde asigură amestecul
necesar și transferul de oxigen către cultură, rezultând un mediu perfect de creștere celulară, care poate susține
mai mult de 10 milioane de celule pe mililitru.
Bioreactoare de însămânțare celulară
Un bioreactor de însămânțare a celulelor pentru construcții tubulare combină vidul, rotația și fluxul pentru a
distribui celulele uniform într-o schelă tubulară poroasă tridimensională, creând o distribuție asemănătoare cu o
arteră nativă. Alte tehnici avansate, cum ar fi pulverizarea celulară, în care o suspensie celulară este transformată
într-un aerosol și proiectată la o suprafață, sau microintegrarea, în care polimerii sunt sintetizați într-o suspensie
celulară, pot fi de asemenea utilizate.
Stimuli mecanici și chimici
În timp ce o funcție principală a bioreactoarelor este de a asigura o nutriție suficientă pentru supraviețuirea
celulelor, ele pot fi, de asemenea, utilizate pentru a ghida structura țesutului, organizarea și, în cele din urmă,
funcționarea. Pentru a ghida celulele în acest mod, pot fi utilizate două mari categorii de stimulare: chimică și
mecanică. Stimularea chimică reprezintă o mare varietate de factori bioactivi, inclusiv factori de creștere,
hormoni și aditivi chimici, care se adaugă mediului de cultură celulară pentru a induce efecte, cum ar fi
proliferarea sau diferențierea. Stimularea mecanică, cu toate acestea, este o componentă cheie a designului
bioreactorului, care poate avea o varietate de efecte benefice asupra dezvoltării țesuturilor proiectate.
Stimularea mecanică
Stimularea mecanică simplă definită cuprinde orice tip de încărcare mecanică impusă unui țesut. De exemplu,
mușchii, tendoanele, ligamentele și țesuturile vasculare suferă întindere, dar la niveluri diferite. Celulele
endoteliale de-a lungul peretelui interior al vaselor de sânge experimentează forfecare și presiune, în timp ce
țesuturile osoase vor experimenta compresie, îndoire și torsiune în condiții fiziologice normale. Stimularea
mecanică poate ghida organizarea și structura formării țesuturilor la nivel celular prin mecanotransducție, un
proces în care celulele convertesc stimulii mecanici într-un răspuns de semnalizare celular. În timp ce un anumit
nivel inițial de stimulare mecanică este necesar pentru întreținerea multor țesuturi, transmiterea de sarcini peste
sau sub acest nivel inițial poate duce la adaptarea în țesut.

Tipuri de stimulare mecanica

A. Întindere
B. Forfecarea
C. Presiune
D. Comprimare
E. Îndoire
F. Torsiune
Stimuli chimici

Cultura celulară in vitro se bazează pe raportul de ioni și substanțe nutritive din mediul celular și din ser. Cu toate
acestea, pentru a induce expresia specifică a fenotipului și diferențierea celulară, pot fi adăugate diferite
substanțe chimice, cum ar fi citokinele, la mediul de cultură. Majoritatea acestor factori de creștere sunt produși
endogen in vivo, deși o creștere artificială a concentrației lor poate fi uneori benefică. Cu toate acestea,
majoritatea studiilor privind impactul factorilor de creștere se referă la culturile de celule bidimensionale pentru a
limita impactul altor variabile externe. Fibroblastele ar putea răspunde diferit într-un mediu tridimensional. Acești
factori de creștere joacă un rol distinct atunci când sunt utilizați în combinație cu celule stem mezenchimale
(MSC), deoarece declanșează diferențierea într-o anumită linie celulară.
Concluzie
Principiile de proiectare din spatele bioreactoarelor utilizate pentru ingineria țesuturilor pot fi clasificate ca
elemente care promovează sănătatea țesuturilor și elemente care ghidează funcția țesuturilor. O serie de modele
diferite de bioreactor de amestecare pot fi utilizate pentru a asigura o livrare suficientă de nutriție și
supraviețuirea celulelor. Structura, organizarea și funcția țesuturilor pot fi formate printr-o varietate de
bioreactoare care utilizează încărcare mecanică adecvată. Implementarea corectă a acestor principii de proiectare
a bioreactorului poate duce la produse mai bune de inginerie tisulară, cum ar fi organele artificiale pentru
transplant.