Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Genetica bacteriana
▪ Ereditatea – însușirea generală biologică a tuturor
viețuitoarelor de a transmite caracterele specifice speciei la
urmași.
▪ Variabilitatea- variațiile caracteristicilor bacteriene
– apariția unor caractere diferite de cele ale genitorilor
de ex. nașterea unor tulpini bacteriene noi:
– virulente .
– rezistente la chimioterapice.
– se adaptează mai bine condițiilor de mediu.
– înlocuiesc bacteriile mai puțin adaptabile.
Genetica bacteriana
▪ Gena - unitate purtătoare a eredității în organismele
vii, parte din ADN . Un segment al moleculei de ADN
care codifică sinteza unui polipeptid distinct. Există
gene structurale şi funcţionale.
▪ Genom– suma genelor unui organism .
▪ Genotip – totalitatea informației genetice a unui
organism .
▪ Fenotip – suma caracterelor observabile, specifice unui
organism, produse de genotip în interacțiune cu mediul
ambiant.
Genetica bacteriana
▪ Funcțiile ADN
▪ – depozitarea informației genetice.
▪ – replicarea.
▪ – transcrierea și traducerea genetică .
▪ – protejarea materialului genetic propriu.
▪ – reglarea activității celulare.
▪ – controlul activității celulare.
ADN
Ereditate bacteriană:
cromozomială - asigurată de cromozomul bacterian
extracromozomială - prin: plasmide, bacteriofagi,
etc.
▪Repliconii bacterieni (cromozomul, plasmidele,
bacteriofagii) au capacitatea de a se autoreplica
(de a se transmite în copii identice la celulele
fiice).
Repliconul
ciclul litic
▪ - genomul fagic se înmulţeşte vegetativ în celula
bacteriană
▪ - virionii rezultaţi se eliberează prin liza
celulei gazda
▪ - astfel de BF sunt fagii virulenţi de la E. Coli
exemplu: BF T1 - T7.
Genomul fagic - bacteriofagii
Genomul fagic - bacteriofagii
ciclul lizogen
▪ - ADN-ul fagic se inseră în cromozom ca regiune genetic
distinctă (sub forma de profag). Celula rezultată este o
celulă “lizogenizată” de către bacteriofagul respectiv.
Celula dobândeşte noi proprietăţi toxice sau metabolice în
urma acestui proces.
- exemplu : BF de la E. Coli
- astfel de BF sunt fagii temperaţi.
BF temperaţi pot realiza:
- conversia lizogenă
- transfer de material genetic (transducţia).
Genomul fagic - bacteriofagii
▪ Secvenţe invertibile
- Sunt secvenţe care pot fi inserate în acelaşi locus
genetic, dar în ordine inversă, modificând proprietăţile
genetice ale întregii zone de nucleotide.
Exemplu: Fagul Mu infectează E. Coli sau Serratia în
funcţie de orientarea segmentului invertibil G.
Elemente genetice transpozabile
▪ Unităţile repetative
- Flanchează gene sau segmente funcţionale.
- Au proprietăţi asemănătoare elementelor
transpozabile, intervenind în rearanjarea moleculelor
de ADN (produc mutaţii, duplicări genice)
VARIABILITATEA BACTERIANĂ
• mutație
- factori chimici :
- acidul nitros dezaminează bazele azotate.
-coloranţii acridinici se intercalează între cele 2
catene ADN .
TIPURI DE MUTATII
▪ 1. Mutaţie în acelaşi sens
- Modificarea în gena respectivă da naştere la un codon
nou, dar care specifică acelaşi aminoacid (exista aminoacizi
codificaţi de către mai mulţi codoni).
2. Mutaţie nonsens
- Obţinerea de lanţuri polipeptidice incomplete, dacă se
formează unul dintre cei 3 codoni terminali: UAG, UGA, UAA.
3. Mutaţie cu schimbare de program
- prin inserţii sau deleţii, care produc decalaje de
citire ale mesajului genetic.
TIPURI DE MUTATII
4. Mutaţie silenţioasă
ACILIATE CU CILI
Exemple de mutante bacteriene
Colonii S Colonii R
Exemple de mutante bacteriene
▪ Lactozopozitive-rosu
▪ Lactozonegative -de culoarea
mediului
(Enterobacterii pe mediul Mac
Conkey)
Transferul intercelular de material genetic
▪ Transformarea
- Este un proces de transfer intercelular de material
genetic, transfer în care celula receptor primeşte tot ADN-
ul liber al celulei donator. Celula receptor trebuie să se
găsească în aşa numita stare de “competenţă”, ce se
realizează in vitro prin şoc termic şi calciu.
- Acest proces se produce mai uşor la bacteriile gram
pozitive şi în condiţii speciale la bacteriile gram
negative.
Experimentul Griffith
Experimentul Griffith
▪ Transducţia generalizată
- Părţile de cromozom de la celula donator au mărimea conca-
temerilor fagici şi sunt transferate în celula receptor.
- Materialul genetic preluat de către fag se integrează în
cromozomul celulei receptor, celulă ce va da naştere unei clone
celulare cu markeri cromozomiali transduşi.
- Transducţia a fost descoperită de către Zinder şi Lederberg
la Salmonella thyphymurium.
- În cazul transducţiei generalizate, fagul se poate insera
în oricare loc de pe cromozom (de exemplu: bacteriofagul P22 sau P1
la E. Coli).
Transductia
▪ Transducţia abortivă
- Este transducţia prin care fragmentul de cromozom
preluat de la celula donator nu se mai integrează în
cromozomul celulei receptor, ci rămâne independent în
citoplasmă şi se circularizează. Prin acest procedeu pot
fi transduse chiar şi plasmide mici în întregime.
Conversia lizogenă
▪ Conversia lizogenă
▪ - Constă în apariţia unei proprietăţi noi bacteriene, o dată cu
lizogenizarea cu un anumit bacteriofag temperat (în urma
transducţiei).
▪ - exemple de toxine bacteriene produse prin conversie lizogenă:
toxina bacilului difteric - prin BF Btox
fibrinolizina stafilococică
eritrotoxina Dick-streptococică
toxinele Clostridiilor, etc.
Conjugarea
▪ Plasmidele F
▪ - Pilii sexuali ai celulei bacteriene de tip “masculin” sunt
codificaţi de către genele operonului “TRA” (de transfer) din
plasmidele mari, conjugante.
- Apropierea întâmplătoare a doua celule F+ şi F- determină formarea
unor punţi intercitoplasmatice, reprezentate de către pilii-
sexuali.Se formează aşa-numitele “perechi eficiente”.
▪ - Concomitent, începe replicarea conjugativă a moleculei de
ADN după modelul “rolling circle” şi transferul copiei plasmidice
prin canalul de legătură.
▪ - Într-o oră, aproximativ 50 din celulele unei populaţii F-
devin celule F+.
Plasmidele R
▪ Plasmidele Col
▪ Sunt plasmide mari, conjugante, ce conţin
informaţii privitoare la sinteza bacteriocinelor.
▪ - Bacteriocinele sunt produse de către unele
bacterii, cu cert efect antibacterian.
Mecanismele antibacteriene ale
bacteriocinelor
- Mecanisme enzimatice
▪ - unele bacteriocine sunt nucleaze, enzime care
realizează degradarea ADN-ului celeilalte celule.
▪ - alte bacteriocine sunt ATP-aze, împiedicând sinteza
ADN la nivelul celeilalte celule bacteriene.
- Mecanisme anti membrana citoplasmatică
- bacteriocine ce formează microcanale membranare în
MC, cu eflux de ioni şi substanţe nutritive.
- Exemple de bacteriocine: colicine (E. Coli), piocine
(Pseudomo-nas aeruginosa), pesticine (Yersinia pestis).
Conjugarea “HFR” - “High frequency of
recombination”
▪ - Cu o frecvenţă de 10-5/generaţie bacteriană, plasmida F (de fertilitate) - se
poate integra în cromozomul bacterian în circa 8-10 situsuri posibile.
- Punând în contact celule HFR (cu plasmida F integrata în cromozom), cu
celule F- - se formează perechi eficiente în vederea transferului genetic.
▪ - De la o celulă donator HFR se transferă la celula receptor - material
cromozomial şi plasmidă. Plasmida trece ca ultim element. Celula F- devine şi ea
celula HFR.
- Transferul întregului cromozom bacterian necesită 120’ la temperatura de 37
C.
- Întreruperea mecanică a conjugării bacteriene (prin agitarea suspensiei la
anumite intervale de timp), a permis descifrarea hărţilor genetice bacteriene; s-a
stabilit ordinea de aranjare a genelor în cromozom, folosind tulpini HFR cu
diferite situsuri de integrare în cromozom la care procesul de conjugare a fost
întrerupt în mod dirijat. În anul 1984, la E. Coli au fost stabilite 1027 locusuri
genetice
Plasmidele F - like (F')
▪Relaţii cromozom-plasmide
- Comportamentul epizomal plasmidic
- Replicarea - stringentă - la plasmidele mari
- relaxată - la plasmidele mici
Relatii intre repliconi
Sistemul represibil
- Substanţa sintetizată (produsul final al căii anabolice -
activează represorul. Substanţa sintetizată este un corepresor).
- Represorul activat se leagă de operator, cu blocarea
consecutivă a genelor structurale şi cu sistarea sintezei
substanţei respective
Controlul genetic prin retele de operoni
▪ Reglonul
▪ Reprezintă o reţea de operoni care au un reglator comun,
fie stimulator, fie inhibitor.
▪ Stimulonul
Reprezintă un complex de gene poziţionate separat pe
cromozom, dar care “răspund” coordonat faţă de anumiţi stimuli din
mediul extern.
Exemplu: controlul factorilor de patogenitate la Shigella
dysenteriae (negativ la 30C, pozitiv la 37C).
Tehnologia ADN recombinant