CROMOSOMII

Cromosomii - structuri sub form de bastonae care apar n timpul diviziunii

celulelor (WALDEYER,1888)
Termenul cromosom (din limba greac: chroma = culoare, soma = corp) este
folosit att pentru eucariote ct i pentru procariote.
Cromosomii sunt structuri permanente ale celulelor,
Sunt vizibili la microscop doar n timpul diviziunii celulelor (mitoz, meioz)
Numrul, forma i structura - stabile de-a lungul generaiilor i specifice diverselor
tipuri de organisme - criteriu sigur de delimitare a speciilor (cariosistematic)
Diferena ntre cromosomii eucariotelor i procariotelor este mare:
- forma i structura acestora,
- cantitatea de material genetic nglobat n ei.

Cromosom (AND) viral

Cromosomul la eucariote

CROMOSOMUL LA PROCARIOTE

PROTOBIONII:
Primele forme de via aprute pe Terra;
De tip acelular, fiind reprezentate de macromolecule cu capacitate de
autoreplicare, autoansamblare i autodezvoltare;
Aveau n programul genetic un numr redus de gene;
Structura i funciile lor erau simple i puine;

Pe msura evoluiei lumii vii de la procariotele acelulare la cele celulare i apoi la

eucariotele cele mai evoluate, programul genetic a devenit tot mai complex,
structurile implicate n transmiterea informaiei genetice s-au complicat, iar
cantitatea de material genetic a crescut considerabil.

EVOLUIA ORGANISMELOR VII

Organisme cu
organizare
celular, dar
celulele nu au
nucleu

Organisme
fr
organizare
celular

(primele forme
de via
aprute pe
Terra)

Procariote
celulare
(Bacterii,
algele albastre
verzi)

Procariote
acelulare
(virui,
viroizi,
plasmide)

Protobionte

Organisme a
cror celule
prezint nuclei
bine
individualizai.

EUCATIOTE
(plante,
animale, om)

1. CROMOSOMUL LA PROCARIOTELE ACELULARE

(virusuri, viroizi, plasmide)

Virusurile i viroizii sunt cele mai simple forme de via, aflate la limita dintre neviu i viu.
Dimensiuni extrem de reduse
Plasmidele - organisme acelulare cu capacitate autoreplicativ, rspndite n lumea
bacteriilor
Particularitate de baz: nu au organizare celular , de aceea ele nu se pot nmuli

dect n celulele pe care le invadeaz.

1.1. VIRUSURILE

- dimensiuni foarte reduse, sub 1 , fiind

mult mai mici dect bacteriile

- sunt elemente genetice incluse ntr-un nveli proteic = capsid viral

- anvelop- un alt nveli extern - care are o compoziie asemntoare cu cea a membranelor
celulare.
- prezint un cromosom de form circular sau liniar
- materialul genetic al cromosomului: ADN-ul sau ARN-ul (mono- sau dublucatenar),
- conin un numr redus de gene, dispuse liniar pe cromosom:
ex. fagului T4 conine 135 gene,
fagului lambda () - 61 de gene,
virusul SV40 de maimu - 5 gene

- genele codific sinteza proteinelor virale i a enzimelor implicate n replicarea lor.

- sunt foarte rspndite n natur i pot infecta practic orice tip de celul pro - sau
eucariot.

Modul de organizare i infecie a virusurilor

Exemplu: fagul T4 care infecteaz celulele bacilului colic (Escherichia coli)

Fagul prezint: un "cap" i o "coad".

Capul (1000 lungime i 700 lime) ,
- constituit dintr-un nveli proteic,
- materialul genetic, mpachetat,
format din ADN dublu catenar (135 gene).

Coada - un cilindru de cca 1100 , gol n

interior, de natur proteic,
-la captul distal o plac terminal de care sunt
ataate 6 filamente codale de aceiai natur.
-Virusul se prinde, n momentul infectrii, cu
placa terminal i fibrele codale de suprafaa
celulei bacteriene, comportndu-se asemntor
unei seringi.

Dup invazia bacteriei el subordoneaz

metabolismul celulei gazd nevoilor proprii i sintetizeaz enzimele necesare replicrii
ADN-ului propriu i proteinele specifice.

Dup sinteza acestora i ansamblarea noilor

virui are loc liza celulei bacteriene i
eliberarea noilor virui n mediu.

Ciclul de multiplicare al acestui fag dureaz

cca. 20 minute.
Celula
gazd
Bacteria
Escherichia coli

Virusurile au fost clasificate n dou mari categorii n funcie de natura materialului

lor genetic:
- dezoxiribovirusuri - care au ca material genetic ADN-ul
- ribovirusuri - la care materialul genetic e reprezentat de ARN.
a) Dezoxiribovirusurile - n funcie de starea n care se afl ADN-ul n constituia
lor au fost mprite n:
1) virusuri cu ADN dublu catenar liniar (bacteriofagi de tip T,
adenovirusurilor, virusului herpetic etc.);
2) cu ADN dublu catenar circular, (virusurile polyoma, virusul de
maimu SV40);
3) cu ADN monocatenar liniar (provirusurilor, virusului asociat cu
adenovirusurile (VAA));
4) cu ADN monocatenar circular (phi X174, M13, virusul Kilhan de
obolan etc).
n cadrul virusurilor cu ADN dublu catenar sunt difereniate, n funcie de alte
criterii, i alte tipuri de virusuri.

b) Ribovirusurile -n funcie de structura lor:

1) cu ARN monocatenar liniar de form helicoidal (virusul mozaicului
tutunului (VMT);
2) cu ARN monocatenar pliat (mpachetat) - (virui mici ca R17, MS2 i f2);
3) cu ARN monocatenar de form circular (virusului encefalomio-carditei
oarecilor);
4) cu ARN dublucatener segmentar (virusuri de plante i animale, dintre
care amintim - Reovirusul sau Mixovirusul).
5) Retrovirusurile, care provoac tumori maligne, au genomul constituit din
ARN monocatenar i se replic prin intermediul ADN-ului celulelor infectate cu
ajutorul unei enzime speciale care asigur transcripia informaiei genetice de la ARN
la ADN, denumit transcriptaz invers sau revers-transcriptaz.

Indiferent de constituia lor genomic (ADN sau ARN), virusurile devin active, deci i pot folosi
informaia lor genetic doar cnd se afl n celulele gazdelor specifice, n rest fiind inactive.

http://www.youtube.com/watch?v=eS1GODinO8w&feature=related

Replicarea retrovirusurilor

1.1.2.VIROIZII
-reprezint o form de via i mai simpl dect virusurile,
- au dimensiuni i mai reduse.
- ei sunt de fapt molecule de acizi nucleici lipsite de nveliul (capsida)
de protecie de natur proteic sau lipoproteic.
- au fost descoperii n 1971 (de ctre T. O. DIENNER, la cartof)
- pn n prezent se cunosc cca 15 viroizi, care produc o serie de boli
ca: stelarea tuberculilor de cartof, cloroza castraveilor, nanismul i
ptarea clorotic a crizantemelor etc.
- materialul genetic - molecule de ARN de dimensiuni mici, care se
localizeaz n nucleul celulelor gazd
- se replic fr ajutorul ADN, folosesc drept matri propria lor
molecul.
- Genomul viroidului de la cartof este constituit, de exemplu, dintr-un
ARN de form circular
- Mecanismul de producere a bolilor const n blocarea funciei unor
gene din organismele infectate.

1.1.3. PLASMIDELE
Organisme acelulare, care depind de celula gazd, au fost descoperite n
1952 de ctre J. LEDERBERG
Sunt foarte rspndite n lumea bacteriilor
sunt mini-cromosomi, (cca 1-2% din mrimea cromosomului bacterian), de
form circular, formai din ADN bicatenar,
existena (supravieuirea) lor n celula gazd depinde de aceast form
circular
au capacitate autoreplicativ.
Plasmidele pot fi:
- libere n citoplasm, caz n care se replic independent de
cromosomul bacteriei - dar sub controlul acestuia,
- integrate n cromosomul bacterian, situaie n care se replic odat
cu cromosomul bacterian i pot participa la fenomenele de transfer genetic (cnd
se desprind din cromosomul bacteriei gazd pot prelua 1-2 gene, pe care le
transfer altor bacterii prin fenomenul de conjugare.

Cromosom bacterian

Bacteria nu prezint
plasmid

Cromosom bacterian

Plasmida F

Bacteria prezint
plasmid

Plasmida F

Bacterie Hfr
Prezint plasmida integrat n
cromosomul bacterian

n funcie de capacitatea lor de a media transferul de material genetic ntre

bacterii :
plasmide conjugative sau infecioase; ele mai sunt denumite i
factori de sex (ex. plasmida F)
plasmide neconjugative - lipsite de capacitatea de a transfera
material genetic (ex. plasmida R , etc)

Plasmida F (factor de fertilitate)

- reprezentat de un ADN format din cca 100 mii perechi de nucleotide
- n funcie de starea n care se afl acest factor (plasmid), celulele
bacteriene se pot gsi n 3 situaii:
celule (F-) - celule n care factorul de fertilitate lipsete
celule (F+) cu plasmida n stare liber n citoplasm
celule (Hfr) - n care plasmida este integrat n cromosomul bacterian

1 Cromosom bacterian

Celul F+

2 Plasmida F

Celul F-

Celul F+

Celul F+

Conjugarea la bacterii
Transferul unei copii a plasmidei F de la
o celul F+ la alt celul F-

F+
F

celule

a.

F+

Replicare independent a plasmidei F

diviziune

F+
b.

Celul Hfr
(plasmid
integrat)

Factorul de rezisten (R)

- format dintr-un ADN circular, care se constituie n gene ce confer
bacteriilor rezisten la o serie de antibiotice, toxine, metale grele etc. (sinteza unor
enzime de neutralizare sau blocare a toxinelor)
- transferul factorului R ntre celulele bacteriene este asigurat de
elementele genetice mobile - transpozoni (secvene scurte de ADN) - transducie

Factorul Col
- determin sinteza unor antibiotice specifice denumite bacteriocine,
substane inofensive pentru bacteriile gazd, dar letale pentru alte tipuri de bacterii.
- poate fi transferat prin conjugare i transducie.

2. CROMOSOMUL LA PROCARIOTELE CELULARE

(BACTERII)

Aparatul genetic al bacteriilor - o structur - NUCLEOID

- nu este un nucleu cu membran ca la eucariote
- este aezat n general n zona central a celulei
- nu prezint schimbrile specifice unui aparat mitotic,
- este reprezentat de un cromosom de form circular alctuit dintr-o
molecul de ADN dublu-catenar.
- Stabilitatea structurii nucleoidului, n lipsa unei membrane, este
asigurat de asocierea dintre ADN, proteine, ARN i lipide
- Cromosomul bacterian are o lungime de cca 1 mm i se afl n
celul sub form extrem de condensat (pliere i spiralizare puternic).

Modelul de "mpachetare" a cromosomului bacterian (dup PETTIJOHN i HECHT, 1974)

a) cromosom circular nepliat;

b) cromosom pliat cu 7 bucle;
c) cromosom a cror bucle au suferit
procesul de superrsucire;
d) incizii monocatenare provocate de
DN-az;
e) secionarea moleculelor de ARN
care unete dou domenii
adiacente, fr pierderea structurii
superhelicale.

REPLICAREA MATERIALULUI GENETIC

Se realizeaz n timpul diviziunii celulelor
Diviziunea

celular dublarea materialului genetic (a ADN, a

cromosomului bacterian) fiecare celul fiic motenete aceeai cantitate
de material genetic (un cromosom identic) cu celula din care au provenit.
n timpul replicrii ADN-ului, structura circular a cromosomului se

menine, punctul de replicare deplasndu-se de-a lungul macromoleculei de

ADN.
Replicarea ADN-ului la bacteria Escherichia coli
MESELSON i W. STAHL (1958) - marcarea ADN-ului bacterian cu izotopul

greu (radioactiv) al azotului (N15).

Prin ultracentrifugare difereniat acesta poate fi separat uor de azotul obinuit

(N14).

Realizarea experimentului
1. Cultivarea bacteriilor timp de cteva generaii pe un mediu nutritiv care
coninea NH4Cl (clorur de amoniu) cu N15 (radioactiv)
2. Transferul bacteriilor pe alt mediu nutritiv, n care clorura de amoniu NH4Cl
avea N14 (obinuit); pe acest mediu bacteriile au fost inute timp de 1-3 diviziuni.
Numrul diviziunilor poate fi determinat dup numrul de bacterii din colonie.

Bacteriile au fost apoi lizate i ultracentrifugate n gradient de densitate pentru

separarea ADN cu N15 de ADN cu N14.

Prin ultracentrifugarea se formeaz cte o band proprie pentru fiecare tip de

ADN (cu N15 i cu N14).

Benzile pot fi vizualizate la spectofotometru n lumin UV la o lungime de und

de 260 nm.

Rezultatele experimentului
Bacteriile cultivate pe mediul cu N15 conin n ADN-ul lor numai acest izotop

(ADN marcat radioactiv - N15).

- Transferul bacteriilor pe mediul cu N14 Bacteriile meninute o diviziune pe mediul cu N14 ADN-ul lor avea o

densitate intermediar ntre N15 i N14 - era un ADN hibrid;

Dup dou diviziuni pe mediul cu N14, 50% din ADN avea numai N14 i 50%

era ADN hibrid (cu N15 i N14);

Dup trei diviziuni pe mediul cu N14 - 75% din ADN avea N14, iar 25% era

hibrid.
Experimentul a demonstrat c replicaia ADN-ului are loc dup modelul

semiconservativ - fiecare molecul nou de ADN este alctuit dintr-o

caten veche i una nou (catena veche reprezentnd matria (modelul)
dup care se produce catena nou).

Replicarea moleculei de ADN bacterian

Cromosomul bacterian reprezint o unitate de replicare (replicon)
Replicarea ncepe ntr-o regiune numit ori C (originea replicrii cromosomului)
n aceast regiune se formeaz furca de replicare ce are conturul literei Y
Regiunea este recunoscut de proteinele de iniiere care deschid dublul helix de

ADN.
Reglarea replicrii cromosomului bacterian se realizeaz cu ajutorul

replicatorului - un element structural ataat de membrana celular n punctul de

iniiere a replicrii.
Procesul de replicare este asigurat de o serie de enzime ca: ADN-polimeraz,

ARN-polimeraz, ADN-topoizomeraze, ADN-helicaz, ADN-ligaz etc.

Replicarea celor dou catene ADN nu se face n acelai timp i sens, procesul

fiind discontinuu:
- una din catene (conductoare) se sintetizeaz mai devreme i n mod
continuu
- cea de-a doua caten (ntrziat) se sintetizeaz mai trziu, procesul
realizndu-se pe buci (fragmente Okazaki) (de cca. 1500 nucleotide la
procariote i cca 150 nucleotide la eucariote).

 So DNA replication is semi-conservative!

Replicarea cromosomului bacterian

(care este format dintr-o molecul de ADN bicatenar)

Arhebacteriile
un grup vechi de bacterii, anaerob, care triete n condiii cu totul speciale.
Din acest grup fac parte:
-bacteriile metanogene (capabile de sinteza metanului din CO2, CO i H2),
- bacteriile halofile (care vieuiesc n zone cu salinitate foarte ridicat)
- bacteriile termoacidofile (care triesc la temperaturi nalte i aciditate
ridicat).
i aceste bacterii au cromosomul circular ca i eubacteriile, dar fa de
acestea prezint unele particulariti diferite:
-prezint un ARN ribozomal diferit,
- ARN de transfer conine n loc de uracil o baz azotat modificat.
- ARN-polimeraza la aceste bacterii are o serie de modificri n
structura ei.
Aceste diferene, fa de bacteriile propriu-zise i de eucariote i-au determinat pe
unii autori s le considere a fi un grup filogenetic distinct n evoluia lumii vii.

Micoplasmele
-reprezint cele mai mici procariote celulare
- duc o via parazitar n celule vegetale i animale.
- materialul lor genetic este constituit din ADN bicatenar care formeaz
un cromosom circular, cu o lungime mai mic dect a cromosomului
bacterian i un numr mai redus de gene (ca urmare a vieii parazitare),
- ADN-ul micoplasmelor conine o cantitate mai redus a perechilor de
nucleotide GC.
- Nu se cunoate exact originea lor, dar se presupune c deriv din
protocariote, organisme ce au precedat procariotele i eucariotele
actuale.