Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Reactii Enzimatice
Reactii Enzimatice
Tabelul 3.1: Clasificarea enzimelor n funcie de tipul reaciei pe care o catalizeaz Numele enzimei Dehidrogenaze Reacia catalizat Dehidrogenarea unui substrat cu transferul hidrogenului la o molecul diferit de oxigen Hidroxilarea unui substrat la care particip oxigen molecular ca donor Transferul unei grupe fosfat de la o trifosfatnucleotid (ATP) la un substrat Migrarea unei grupe fosfat de la o poziie la alta n aceeai molecul Oxidarea unui substrat cu oxigen molecular ca donor Incorporarea unei molecule de oxigen cu ruperea oxidativ a unei legturi C - C Hidroliza unui ester fosforic Condensarea a dou molecule simultan cu hidroliza unei trifosfonucleotide (ATP) Transferul unei grupe funcionale de la un substrat la altul
Nomenclatura enzimelor se face n mai multe moduri: a) Denumire comun Se pstreaz denumirile comune dei acestea nu precizeaz aciunea enzimei ntr-un anumit tip de reacie. Exemplu: pepsina, tripsina, ureaza, etc. b) O alt denumire puin mai precis const n folosirea numelui substratului + numele reaciei catalizate + sufixul az: Exemplu: malatdehidrogenaza
18
c) In 1961 Comisia de Enzime a Uniunii Internaionale de Biochimie i Biologie Molecular a stabilit o clasificare i o nomenclatur sistematic a enzimelor, mult mai riguroas, care cuprinde ase clase, divizate n subclase, care la rndul lor sunt mprite n sub-subclase. Fiecare enzim are un numr de cod format din patru cifre: EC a b c d, unde: a = clasa; b = subclasa; c = sub-subclasa; d = numrul de ordine al enzimei respective n sub-subclas (nr. propriu pentru fiecare enzim).
http://www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme - clasificarea enzimelor Web Version of Enzyme Nomenclature 1992 Nomenclature Committee of the International Union of Biochemistry and Molecular Biology
1. Oxido- reductaze (catalizeaz procese de oxido-reducere) 1.1 Acioneaz asupra R2CH -OH Exemplu: EC 1.1.1.1 (alcool dehidrogenaza) este enzima care catalizeaz oxidarea etanolului, acceptorul de hidrogen fiind NAD+:
CH3CH2OH + NAD
+
CH3CHO + NADH, H
Aceast enzim nu este specific pentru etanol, ea putnd oxida i ali alcooli. EC 1.1.1.27 (L-lactat-NAD-oxidoreductaza sau L-lactat dehidrogenaza) este enzima care catalizeaz transformarea Llactatului n piruvat: _ _ + CH3CHCOO + NAD CH3COCOO + NADH + H+
1.4 Acioneaz asupra grupei CH NH2 1.5 Acioneaz asupra grupei CH NH, etc.
EC 1.98 Enzymes using H2 as reductant EC 1.98.1.1 now EC 1.18.99.1 EC 1.99 Other enzymes using O2 as oxidant
CH3
2.7
Fosforiltransferaze
3.1
20
Exemplu:
- EC 3.2.1.1 (-1,4-glucan glucanohidrolaza) sau -amilaza 3.3 Actioneaza asupra legaturilor eterice 3.4 Scindeaz legturi peptidice
Exemplu:
- EC 3.4.21.4 sau tripsina EC 3.4.23 cuprinde poteinaze acide care acioneaz la pH <5: - pepsina ( EC 3.4.23.1) care acioneaz la pH = 1.5 2 -renina (EC 3.4.23.4) din stomacul ierbivorelor este implicat n coagularea laptelui.
3.5
Exemplu:
- EC 3.5.1.5 (ureo-amidohidrolaza) sau ureaza. 4. Liaze sau sintaze(catalizeaz reacii de adiie sau de eliminare) 4.1
Liaze pentru legaturi C - C
CO 2 + H2O
H2CO3
21
5. Izomeraze (catalizeaz reacii de izomerizare) 5.1 Racemaze si epimeraze (enzime care catalizeaz procese de
racemizare sau epimerizare): Exemplu: - EC 5.1.1.1 (alanin racemaza) catalizeaza transformarea L- alaninei in D-alanina - EC 5.1.2.1 (lactatracemaza) care catalizeaz reacia de transformare a L-lactatului n D-lactat si invers:
COO HO C _ COO H C _
OH
CH3
CH3
5.2
H C H C
COO
OOC C C
H _
COO
COO
CH2OH CO CH2OPO3
2_
gliceraldehid-3-fosfat
dihidroxiacetonfosfat
22
fosforice din ATP sau din alt compus macroergic din care rezult energia necesar desfurrii acestei reacii)
6.3 6.4
Aceasta clasificare functioneaza partial in practica deoarece toleranta fata de substrate nenaturale este comuna mai multor clase de enzime (fapt important pentru aplicatiile practice in sinteze organice). Utilitatea enzimelor din punct de vedere practic este prezentata in Tabelul 3.2.
3.1
kat - microkatal (10-6 kat); nkat - nanokatal (10-9 kat); pkat - picokatal
(10-12 kat), precum si nmol/min sau nmol/h.
23
636
150
4. Liaze 5. Izomeraze
255
35
120
80 6. Ligaze
Utilitatea estimata pentru folosirea enzimelor pentru transformarile substantelor nenaturale : +++ (foarte utile), ++ (utile), + (putin utile), valorile procentuale fiind observate in perioada 1987 2003. O unitate de activitate enzimatic este egal cu 16,67 nkat,
valoare care se deduce astfel: 106 mol 1 kat = 1 mol/s = -------------- = 60 x 106 U min/60 Deci, U = 1 kat/ (60 x 106) = 106 kat/ (60 x106) = 1/ 60 kat U = 1000/ 60 nkat = 16.67 nkat.
24
transformati compusi organici nenaturali sunt adesea mult mai mici decat valorile observate pentru substrate naturale.
Pentru a face o comparatie intre activitatile unei enzime trebuie folosita aceeasi cale de reactie atat pentru substratul natural, cat si pentru cele nenaturale. Puterea catalitica a (bio)catalizatorului poate fi descrisa foarte bine de frecventa turnover (TOF), care reprezinta numarul de molecule de substrat care este transformat de un singur situs catalitic intr-o secunda (pentru reactii biochimice) sau intr-un minut pentru catalizatorii chimici. Pentru reactiile biocatalizate TOFs = 10 1000s-1. Productivitatea (bio)catalizatorilor este caracterizata prin numarul
25
Acest complex se va transforma ulterior n produsul de reacie (P) punnd n libertate enzima netransformat (E). Substratul trebuie s ndeplineasc urmtoarele condiii: - s aib o conformaie bine definit care s-i permit accesul la situsul catalitic; - s aib particulariti structurale care s satisfac necesitatea de specificitate a enzimei; - s se asocieze cu enzima pe baza unei orientri strict specifice. Enzima trebuie s aib proprietile unui catalizator: - s se regseasc neschimbat la sfritul reaciei;
26
- s nu modifice natura (echilibrul sau bilanul termodinamic) reaciei pe care o catalizeaz; - s permit atingerea echilibrului ntr-un timp foarte scurt, mrind vitezele ambelor reacii care au loc simultan, dar n direcii opuse; Enzimele au i proprieti care le deosebesc de catalizatorii obinuii: - acioneaz, n general, n condiii blnde, la temperaturi de ~ 37oC i pH neutru. Exist ns i enzime care acioneaz la temperaturi ridicate (n bacteriile termofile) sau la pH-uri acide (pepsina) sau bazice (tripsina, chimotripsina). - scad mai mult energia de activare a unei reacii comparativ cu catalizatorii obinuii. Exemplu: Descompunerea apei oxigenate: