METABOLISM

Dr.Antonescu Angela

Metabolismul reprezint totalitatea transformrilor de substan,

energie i informaie, care au loc ntr-un organism viu.
Metabolismul general prezint dou aspecte eseniale:
catabolismul i anabolismul.
Catabolismul reprezint totalitatea reaciilor de degradare din
organism, iar aceste reacii sunt frecvent procese de oxidoreducere, care au loc cu eliberare de energie. Energia eliberat este
conservat sub forma legturilor macroergice din ATP.
Energia nmagazinat n ATP este utilizat n procese de
biosintez a biomoleculelor, care sunt substane cu molecul mare.
Cu mare specificitate i cu nivel nalt de organizare. Totalitatea
proceselor de biosintez din organism constituie anabolismul. Spre
deosebire de procesele catabolice, procesele anabolice decurg cu
consum de energie, fiind endergonice. Energia necesar proceselor
de biosintez este asigurat de hidroliza legturii macroergice din
ATP.
Pe lng procesul cu caracter catabolic sau anabolic, n celule
mai au loc transformri ale constituenilor si, care au concomitent
att caracter catabolic ct i anabolic. Acestea se numesc procese
amfibolice. n cadrul acestor procese pot rezulta compui care pot fi
catabolizai sau care pot fi utilizai n procese de biosintez.
Totalitatea transformrilor pe care le sufer anumii compui de
la ingestia sau biosinteza lor pn eliminarea lor din organism se
numete metabolism intermediar. Degradarea constituenilor

I.Moleculele mari a acestor compui sunt

degradate cu eliberarea unitilor lor
structurale fundamentale;
II.Produii rezultai n primul stadiu sunt
transformai pe ci specifice ntr-un numr mic
de molecule simple, printre care predomin
acetil-CoA;
III.Compuii rezultai n al doilea stadiu sunt
transformai n dioxid de carbon i ap pe o
cale numit ciclul citratului;
IV.Echivalenii de hidrogen preluai de la
metaboliii din stadiile anterioare sunt oxidai
cu formare de ap prin intermediul lanului
respirator.
Stadiile I i II sunt specifice pentru fiecare
categorie de compui, iar stadiile III i IV sunt
caracteristice transformrii glucidelor, lipidelor

proteine

polizaharide

aminoaacizi

lipide

acizi grasi
glicerina

monozaharide

II
acetil-CoA

CAT

III

CO2
2H

2H
2H

2H
IV
O2

oxidare biologica

CO2

lantul respirator
H2O

Cea mai important cale de formare de dioxid de carbon n

celul este ciclul citric sau ciclul acizilor tricarboxilici sau
ciclul lui Krebs.

CICLUL ACIZILOR
TRICARBOXILICI
Respiraia este procesul prin care celula aerob obine energie n
urma oxidrii moleculelor de combustibil de ctre oxigenul molecular.
Ciclul acizilor tricarboxilici este calea metabolic central cea mai
obinuit pentru degradarea resturilor de acetil-CoA rezultate prin
catabolizarea glucidelor, acizilor grai i aminoacizilor. Ciclul acizilor
tricarboxilici este o secven ciclic, care are loc n toate celulele
aerobe. Se mai numete i ciclul acidului citric sau ciclul lui Krebs.
Aceast secven de reacii este catalizat de un sistem
multienzimatic care primete gruparea acetil de la acetil-CoA drept
combustibil i o descompune n dioxid de carbon i echivaleni
reductori. Acetia sunt apoi condui printr-un lan de proteine
transportoare de electroni la oxigen, care este redus pentru a forma
ap.

Din schema prezentat mai sus se constat c acetil-CoA rezultat

n urma procesului de catabolizare a principalelor biomolecule, intr
n ciclul acizilor tricarboxilici. n unele cazuri, ns, n urma procesului
de catabolizare a acestor biomolecule nu rezult acetil-CoA, ci
piruvat. Piruvatul ca s poat intra n ciclul acizilor tricarboxilici
trebuie s se transforme, n prealabil, n acetil-CoA.

Oxidarea piruvatului la acetil-CoA.

Oxidarea piruvatului la acetil-CoA este un proces complex catalizat de complexul
multienzimatic piruvatdehidrogenaz.
CH3 - C - COOH + NAD+ + CoA

piruvatdehidrogenaza

CH3 - CO - CoA + NADH + H+ + CO2

Aceast reacie, care este ireversibil n esuturile animale, nu reprezint o parte din
ciclul acizilor tricarboxilici, dar este obligatorie pentru participarea tuturor hidrailor de
carbon la ciclul acizilor tricarboxilici.
Decarboxilarea oxidativ a piruvatului la acetil-CoA i dioxid de carbon necesit trei
enzime diferite i cinci coenzime organizate ntr-un complex multienzimatic. Etapele de
reacii realizate sub influena acestor enzime sunt artate mai jos.

CH3 - C - COOH + E1 - TPP

O

piruvat
dehidrogenaza

CO2

E1 - TPP - CH - CH3
OH

Aceast etap este catalizat de ctre piruvat dehidrogenaz,

enzim a crei grupare prostetic este coenzima tiaminpirofosfat.
Piruvatul sufer o decarboxilare pentru a elimina dioxidul de carbon
i derivatul -hidroxietil.

n etapa a doua, gruparea hidroxietil este dehidrogenat de piruvat

dehidrogenaz iar gruparea acetil care rezult este transferat la acidul lipoic,
care reprezint gruparea prostetic legat covalent la cea de a doua enzim,
dihidrolipoil transacilaz.
E1 - TPP - CH - CH3

+ E2

E1 - TPP + E2
S

OH

SH

O = C - CH3

Transferul unei perechi de atomi de hidrogen de la gruparea hidroxil a TPP

la legtura disulfuric a acidului lipoic face ca aceasta din urm s treac n
forma redus a acidului dihidrolipoic.
n etapa a treia, gruparea acetil este transferat pe cale enzimatic, de la
gruparea lipoil a acidului dihidrolipoic la gruparea tiolic a CoA.
E2
S

SH

+ CoA-SH

E2
SH

SH

+ CH3 - CO - SCoA

O = C - CH3

Acetil-CoA astfel format prsete complexul enzimatic sub forma sa liber.

n etapa a patra, forma ditiolic a gruprii lipoil a dehidrolipoil transacetilazei

este reoxidat la forma disulfuric prin transferul atomilor de hidrogen de la
cea de a treia enzim a complexului, cunoscut sub numele de dihidrolipoil
dehidrogenaz, la a crei grupare prostetic este strns legat FAD.

E2
SH

SH

+ E3 - FAD

E2
S

+ E3 - FADH2

FADH2, care rezult, rmne legat de enzim i este reoxidat n faza a

cincea de ctre NAD+.

E3 - FADH2 + NAD+

E3 - FAD + NADH + H+

Complexul piruvat dehidrogenaz este inhibat specific de

compuii arsenului trivalent (As+3). Activitatea complexului
piruvat dehidrogenaz este reglat la nivelul ATP-ului i a ionilor
de calciu. Acetil-CoA rezultat intr n ciclul acizilor tricarboxilici

Reaciile ciclului ac.tricarboxilici

La nceput ciclul acizilor tricarboxilici
reprezenta o simpl schem. Aceast
schem a fost completat cu detalii
privind enzimele care catalizeaz
reaciile, ct i stereochimia reaciilor
din ciclu.

aminoacizi

glucoza

acizi grasi

piruvat
CO2
2H
acetil-CoA
citrat

oxalilacetat

[cis-aconitat]

malat

izocitrat

fumarat

CO2
-cetoglutarat

succinat
succinil-CoA
2H

2H

2H

NAD

CO2
2H

flavoproteine

ADP + P
ATP

coenzima Q

citocrom b
ADP + P

transportul de e- si
fosforilarea oxidativa
din lantul respirator

ATP
citocrom c
ADP + P
citocrom a3

2H

+ 1/2O2

ATP

H2O

1. Acidul citric este primul intermediar al ciclului acizilor tricarboxilici se

formeaz prin condensarea acetil-CoA cu oxalilacetat.
CO - CoA

H2O

CH2

HO - C - COOH

HO - C - COOH

CH2

CH2

CH2

COOH

COOH

CoAS - OC - CH3 + O = C - COOH

acetil-CoA

citrat sintetaza

CH2

COOH

oxalilacetat

citroil-CoA

CoA-SH

COOH
acid citric

Aceast reacie este catalizat de citrat sintetaz, enzim ce determin

formarea intermediar a citroil-CoA, care ulterior trece n acid citric. Citrat
sintetaza are rol de enzim reglatoare, deoarece este inhibat de ATP i
(NADH + H+), produsul final al fosforilrii oxidative.

2. A doua reacie a ciclului acizilor tricarboxilici este reprezentat de trecerea

citratului n izocitrat, printr-un intermediar denumit acid cis-aconitic.

CH2
HO - C - COOH

H2O

CH2
C - COOH

CH2

CH

COOH

COOH

acid citric

COOH

COOH

COOH

acid cis-aconitic

H2O

CH2
CH - COOH
HO - CH
COOH
acid izocitric

Enzima care catalizeaz aceast reacie se numete aconitaz, care este

activat i stabilizat de Fe+2 i de cistein. Aceast reacie este
stereospecific, adiia apei la cis-aconitat este o trans adiie

3. Oxidarea izocitratului la -cetoglutarat este o reacie care are

loc n prezen de izocitrat dehidrogenaz care necesit prezen
de NAD+ sau NADP+.
COOH
CH2
CH - COOH

COOH
izocitrat
dehidrogenaza

CO 2

CH2
CH2

HO - CH
COOH
acid izocitric

C=O
+

NAD

NADH + H

COOH

acid -cetoglutaric

Izocitrat dehidrogenaza NAD dependent din mitocondrie

necesit prezena ionilor de magneziu, este o enzim
alosteric reglat de ADP, ca i activator specific i Mg +2.

4. A patra etap o constituie oxidarea -cetoglutaratului la succinil-CoA n

prezena -cetoglutarat dehidrogenazei.
COOH
CH2
CH2

+ NAD + CoA

C=O
COOH

acid -cetoglutaric

-cetoglutarat
dehidrogenaza

COOH
CH2
CH2

+ CO2 + NADH + H+

CO - CoA
succinil-CoA

Reacia este analoag oxidrii piruvatului la acetil-CoA i dioxid de carbon

i are loc prin acelai mecanism, cu participarea tiamin-pirofosfatului, a acidului
lipoic, a coenzimei A, FAD-ului i NAD-ului drept coenzime .

5. n etapa a cincea succinil-CoA sufer o pierdere a gruprii CoA, nu printr-o

simpl reacie de hidroliz ci printr-o reacie conservatoare de energie. Reacia
are loc n prezena succinil-CoA sintetazei, ca enzim, care provoac formarea
legturii macroergice a GTP-ului, gin GDP i fosfat anorganic, pe seama
legturii macroergice din succinil-CoA.

COOH
CH2
CH2

+ Pa + GDP

succinil-CoA
sintetaza

+ GTP + CoASH

COOH
Acid succinic

succinil-CoA

GTP

Pa

E-succ-fosfat + CoA

succinil-CoA + Pa + E

E-succ.-fosfat

CH2
CH2

CO - CoA

GDP

COOH

fosfat + GDP

fosfat + succinat

E + GTP

6. n etapa urmtoare succinatul este oxidat la fumarat de flavoproteina

succinat dehidrogenaza, care conine FAD legat covalent.

COOH
CH2
CH2

+ FAD

COOH
Acid succinic

succinat
dehidrogenaza

COOH
CH
HC

+ FADH2

COOH
Acid fumaric

Enzima este activat de succinat, fosfat, ATP i coenzima Q redus i

inhibat de concentraii mici de oxalilacetat.
Reacia este stereospecific, dehidrogenaza ndeprteaz atomii de
hidrogen din poziia trans de la atomii de carbon metilenici ai succinatului .

7. Succinatul rezultat este apoi hidratat la L-malat n prezena enzimei fumarat

dehidrogenaz sau fumaraz.
COOH
CH
HC

COOH
+ H2O

COOH
Acid fumaric

fumaraza

HO - C - H
CH2
COOH
Acid malic

Fumaraza acioneaz stereospecific, deoarece ea formeaz numai

stereoizomerul L al malatului.

8. n ultima reacie a ciclului L-malatul este oxidat la oxalilacetat n prezen de

L-malat dehidrogenaz NAD dependent.
COOH

COOH
HO - C - H
CH2
COOH
Acid malic

+ NAD

O=C
CH2

+ NADH + H+

COOH
Acid oxalilacetic

Reacie este strict stereospecific pentru stereoizomerul

L al acidului malic. Oxalilacetatul rezultat poate reintra
ntr-un nou ciclu condensndu-se cu acetil-CoA.

Dac facem un bilan al ciclului se constat c

pentru fiecare grupare acetil intrat n ciclu doi
atomi de carbon formeaz dou molecule de dioxid
de carbon, iar prin reacia de dehidrogenare
enzimatic, care au loc, rezult patru perechi de
atomi de hidrogen: trei dintre ele au fost utilizate la
reducerea NAD+ i una la reducerea FAD. Aceste
patru perechi de atomi de hidrogen vor ceda
electronii, n cursul lanului respirator, oxigenului.
Ecuaia+ global se poate scrie astfel
Ac-CoA + 3 NAD + FAD + 2 H2O + GDP + Pa
+

2 CO2 + CoA-SH + 3 NADH + 3 H + FADH2 + GTP

Localizarea intracelular a
enzimelor ciclului
Cercetrile efectuate de Kennedy i Lehninger au
demonstrat c mitocondriile izolate prin
ultracentrifugare omogenatelor de esut hepatic,
asigur transformarea tuturor intermediarilor ciclului
citric, deci conin toate enzimele necesare acestui ciclu.

Pe de alt parte nucleele, fraciunea microzomal i

fraciunea solubil a citoplasmei erau inactive. Deci,
mitocondriile hepatice conin toate enzimele necesare
ciclului citric i enzimele necesare transportului de
electroni. Deci, se constat c la toate animalele i
plantele studiate pn n prezent, sediul desfurrii
ciclului Krebs ce reprezint mitocondriile.

Natura amfibolic a ciclului

Ciclul acizilor tricarboxilici este de
fapt o cale amfibolic, care
funcioneaz nu numai n catabolism,
ci i n anabolism, fiind precursor
important ntr-o serie de biosinteze.
Anumii intermediari i cu
preponderen -cetoacizi i
oxalilacetatul servesc n biosinteza
unor aminoacizi ce pot fi uor
transformai n prezena unor

Lanul respirator constituie o secven de procese biochimice a crui rezultat

este transportul electronilor la oxigenul molecular. Sistemul este format dintr-un
complex multienzimatic avnd componentele niruite ntr-o secven dictat de
valoarea crescnd a potenialului redox.
Sistemul de enzime care deservete lanul respirator este localizat n
membran mitocondrial intern.

substrat

NADH + H+

FMNH2

ADP + Pa

cit c

cit a

ADP + Pa

CoQ

cit. b

ATP ADP + Pa

cit a3 + H + O 2

ATP

cit c1

ATP

H2O

Energia eliberat n urma proceselor de oxidare din lanul respirator este

ncorporat n moleculele de ATP.

ADP + Pa + Q

ATP + H2O

Aceste procese ce cupleaz sinteza endergonic de ATP n urma unor

procese de oxidoreducere din lanul respirator reprezint punctele de
fosforilare oxidativ.
Astfel, oxidarea unei molecule de NADH + H+ din lanul respirator produce
trei molecule de ATP, iar oxidarea unei molecule de FADH 2 produce 2 ATP

Semnificaia energetic a ciclului acizilor tricarboxilici.

Procesele din ciclul Krebs i din lanul respirator au loc n
mitocondrie i constituie etapa final a oxidrii celulare care
furnizeaz o cantitate mare de energie stocat sub form de ATP.
Bilanul energetic al ciclului este urmtorul:
GTP

1 ATP

3(NADH + H+)

3 ATP

FADH2

2 ATP
12 ATP/AcCoA

Reglarea ciclului acizilor tricarboxilici.

piruvat
CO2
Ac-CoA

oxalilacetat

citrat

malat

izocitrat

fumarat

CO2
-cetoglutarat

succinat

succinil-CoA

CO2

ENZIME TRANSPORTOARE DE ELECTRONI

n transportul de electroni de la substrate organice la

oxigenul reductor particip patru tipuri de enzime:
dehidrogenaze legate de un nucleu piridinic
(piridindependente), care necesit NAD sau NADP ca
i coenzime;
dehidrogenaze legate de nucleu flavinic
(flavindependente), care conin FAD sau FMN ca i
grupare prostetic;
proteine cu fier-sulf;
citocromii, care conin inelul porfirinic cu fier ca i
grupare prostetic.
n plus, fa de aceste proteine, pentru transportul de
electroni mai particip i ubiquinona sau coenzima Q.