ENZIMELE

CURSUL 6
ENZIMELE
Definiie

majoritatea lor sunt proteine, care cresc viteza de reacie

fr a schimba procesul chimic pe care n catalizeaz

enzimele controleaz aproape toate cile metabolice ce

se desfoar n organismile vii

enzimele prezint unele proprieti comune cu

catalizatorii utilizai n reaciile chimice din lumea nevie
ENZIMELE I CATALIZATORII CHIMICI
Proprietii comune
nu sunt consumate n
cursul reaciilor chimice
nu declaneaz o reacie
chimic ci accelereaz
desfurarea reaciilor care
ar avea loc ntr-un ritm mult
mai lent, n absena lor
Diferene
enzimele sunt proteine
enzimele sunt specifice pentru
reaciile pe care le catalizeaz,
ceea ce asigur ca n aceste
reacii s nu se formeze produi
secundari
enzimele prezint specificitate
fa de substrat:
ABSOLUT pentru un singur
substrat
RELATIV pentru mai multe
substraturi.
ENZIMELE I CATALIZATORII CHIMICI
Diferene
reaciile pe care le catalizeaz enzimele au loc n
condiii blnde: temperatur sub 50C, presiune
atmosferic, pH n jurul valorii 7 (Exist excepii!)
AMILAZA SALIVAR
pH = 6,6 -6,8
PEPSINA
pH = 1,5 - 3
FOSFATAZA ALCALIN
pH = 10
catalizatorii chimici acioneaz la temperaturi ridicate,
presiuni mari i valori extreme de pH
 ENZIMELE
Clasificare
conform comisiei de enzimologie a UNIUNII INTERNAIONALE
DE BIOCHIMIE I BIOLOGIE MOLECULAR, denumirea
enzimelor se bazeaz (denumirea sistematic):
fiecare enzim este ncadrat ntr-o clas, subclas i eventual
sub-subclas. Clasele, subclasele, sub-subclasele i enzimele
individuale se noteaz prin cifre desprite de precedat de
iniialele EC (Enzyme Commission). Astfel de denumiri i numere
de cod faciliteaz gsirea enzimelor n cataloage, dar ngreuneaz
comunicarea rapid ntre seciile clinice i laborator.
denumirea recomandat (denumirea uzual):
prima parte indic substratul sau substraturile asupra crora
acioneaz;
a 2-a parte indic tipul reaciei catalizate, iar la sfrit se adaug
sufixul "- az.
 ENZIMELE
Clasificare
1. OXIDOREDUCTAZE, catalizeaz reaciile de oxido-reducere
1.1. subclasa care acioneaz asupra gruprii CH OH
1.1.1. sub-subclasa ce are ca coenzim NAD+ sau NADP+
1.1.1.1. alcool: NAD+ oxidoreductaz
1.1.1.27. lactat: NAD+ oxidoreductaz
1.2.subclsa care acioneaz asupra gruprii C=O
1.2.1. sub-subclasa ce are ca coenzim NAD+ sau NADP+
1.2.1.12. gliceraldehid 3-P: NAD+ oxidoreductaz
1.2.3. sub-subclasa ce accept O2
1.2.3.2. xantin: oxigen oxidoreductaz
1.3. subclasa care acioneaz asupra legturii CH CH
1.4. subclasa care acioneaz asupra legturii CH NH
2. TRANSFERAZELE, catalizeaz transferurile de grupe ce conin C, N, P
3. HIDROLAZE, catalizeaz scindri de legturi covalente cu participarea apei ( legturi
eterice, esterice, peptidice, glicozidice).
4. LIAZE, catalizeaz ruperea legturilor C C, C S, C - S.
5. IZOMERAZE, catalizeaz diferitele tipuri de izomerizri, inclusiv racemizri.
6. LIGAZE, catalizeaz formarea de legturi ntre C i O, S, N, cuplate cu hidroliza
legturilor macroergice.
 E.C. 2.7.1.1.
2 - indic clasa transferazelor Exemplu
7 indic subclasa
transferazelor de fosfat
1 indic sub-subclasa
substratului care este un alcool Conform I.U.B.M.B
1 - se refer la hexokinaz E.C. 2.7.1.1.

ATP: D-hexoz 6 Conform I.U.B.N.S

fosfotransferaz ATP: D-hexoz 6
enzim care catalizeaz fosfotransferaz
transferul radicalului fosfat de la
ATP la gruparea hidroxil din
poziia 6 a glucozei.
ENZIMELE
Structura

Studiile experimentale au stabilit faptul c enzimele

dispun fiecare de un situs, la nivelul cruia se
desfoar reacia chimic denumit centru activ.

CENTRUL ACTIV este constituit din totalitatea

gruprilor funcionale (carboxil, amino, hidroxil, tiol)
aparinnd de regul aminoacizilor ndeprtai n
secvena proteinenzime
CENTRUL ACTIV confer specificitate pentru substrat
ORGANIZAREA SPAIAL A CENTRULUI ACTIV AL
ENZIMELOR, RAPORTAT LA STRUCTURA
SUBSTRATULUI EVIDENIAZ DOU MODELE

MODELUL CLASIC CHEIE -

BROASC"

MODELUL "POTRIVIRII INDUSE"

Care este criteriul de spontaneitate
pentru o reacie chimic?

Pentru a se putea rspune la acest ntrebare se

definesc urmtoarele mrimi termodinamice.
Mrimi termodinamice
ENTROPIA
DS (sistem) + DS (mediu)>0

ENTALPIA
H = E + PV
este o funcie termodinamic care s se refere numai la
sistem

ENERGIA LIBER GIBBS

G = H TS
este o funcie termodinamic care conine att termeni
entalpici ct i termeni entropici
o reacie chimic este spontan cnd G<0 (r. exergonice)
Mrimi termodinamice

desfurarea reaciilor exergonice este condiionat de

furnizarea unei anumite cantiti de energie numit
energie Gibbs de activare (G*), care are rolul de a mri
numrul de ciocniri ntre reactani, n urma crora rezult
complexe de tranziie

complexele de tranziie sunt stri prin intermediul crora

au loc transformrile substraturilor n produi de reacie
Mrimi termodinamice
Teoria strii de tranziie
fie reacia: A + B X* P + Q
v = d[P]/dt = k2 [X*]

teoria strii de tranziie presupune c X* este n echilibru

cu reactanii, adic K* = [X*]/[A][B]

aceast presupunere permite introducerea funciei

termodimanice G* care este energia liber Gibbs de
activare

ntre constanta K* i aceast energie exist relaia:

G* = RTlnK*.
ENZIMELE
Energia liber i teoria strii de tranziie

Enzimele mresc viteza

reaciilor biochimice prin
micorarea energiei libere de
activare G*.
ENZIMELE
Modaliti prin care enzimele scad G* unei
reacii neenzimatice

CATALIZA ACIDO-BAZIC mutarotaia glucozei

TENSIONAREA SUBSTRATULUI lizozimul
CATALIZA COVALENT serin-proteaze
CATALIZA ELECTROSTATIC
CATALIZA CU ION METALIC anhidraza carbonic
FACTORUL GEOMETRIC (PROXIMITATE I
ORIENTARE)
CATALIZA ACIDO-BAZIC
multe reacii enzimatice au la baz mecanisme de
cataliz acido-bazic
exemplu: mutarotaia glucozei, prin care anomerul
al glucopiranozei se transform n anomerul i
invers
 ionul hidroxil atac nucleofil hidroxilul glicozidic
deprotonndu-l, astfel se formeaz un anionul alcoxid
apare o delocalizare a sarcinii negative la oxigenul
piranozic ceea ce are ca rezultat destabilizarea legturii
C1-O i deschiderea ciclului piranozic cu formarea altui
alcoxid
H2O format iniial ionizeaz formnd HO- i H+
HO- (catalizator) este reformat, iar protonul se va ataa
alcoxidului formnd glucoza forma liniar
glucoza se poate recicliza sub forma celuilalt anomer
 H+ protoneaz oxigenul piranozic, astfel se
destabilizeaz legtura C1-O, se deciclizeaz structura
obinndu-se un cation
se elibereaz H+ (catalizator) i glucoza revine la forma
aciclic
reciclizarea glucozei permite formarea celuilalt anomer
ENZIMELE
Cataliza acido-bazic
n cazul reaciilor catalizate de enzime, acestea nu se
pot desfura n prezena unui acid sau baz tare
n aceast situaie discutm de cataliz acido-bazic
generalizat
cataliza acido-bazic concertat piridina i fenolul sunt
prezente simultan, astfel au loc simultan atacul nucleofil
al bazei i atacul electrofil al acidului asupra ciclului
glucopiranozic
cataliza acido-bazic tautomeric acidul i baza sunt
prezente n aceeai molecul (exp. 2-hidroxi-piridina)
ENZIMELE
Cataliza acido-bazic tautomeric

catalizatorul nu poate fi orice substan acido-bazic

el trebuie s ndeplineasc cel puin 2 condiii:
direcionarea legturilor de hidrogen (figurate prin linii
punctate)
capacitatea de a pendula cu rapiditate ntre cele 2
structuri tautomere.
ENZIMELE
Cataliza acido-bazic tautomeric
ENZIMELE
Cataliza acido-bazic
nucleul imidazolic al histidinei din centrul activ al unei
enzime poate determina catalizarea reaciei de ctre
aceasta prin mecanism acido-bazic
ENZIMELE
Cataliza acido-bazic

RIBONUCLEAZA PANCREATIC BOVIN (RN-aza A)

conine n centrul activ 2 radicali His (His12 i His119) care
acioneaz asupra legturilor fosfoesterice prin
mecanism concertat:

His12 acioneaz ca o baz generalizat

His119 acioneaz ca un acid generalizat
TENSIONAREA SUBSTRATULUI
aplicat n cazul aciunii catalitice a lizozimului,
enzim capabil s produc liza unor bacterii
substratul lizozimului este un heteropolizaharid,
component al peretelui bacterian, constituit din 2
monozaharide: -NAG i -NAM
ENZIMELE
Tensionarea substratului
ENZIMELE
Tensionarea substratului

centrul activ al lizozimului se prezint sub forma unui

"an coninnd mai multe grupri de legare i grupri
catalitice, aparinnd unor resturi de aminoacizi

resturile de aminoacizi implicate n legarea substratului

la centrul activ sunt: Trp62, Trp63, Asn59, Asn46, Ser100,
Ala107, Ala110,Trp108

resturile de aa participante la cataliz: Glu35 i Asp52

ENZIMELE
Tensionarea substratului
dup ataarea heteropolizaharidului la centrul activ al
lizozimului, acesta este meninut la acest nivel prin
intermediul aminoacizilor de legare
astfel, apare o modificare n structura centrului activ al
lizozimului ceea ce determin tensionarea substratului,
urmat de trecerea glucidului 4 din forma de scaun n
semiscaun
n aceste condiii, legtura glicozidic dintre -NAM i
-NAG este mai uor de desfcut prin intervenia
aminoacizilor cu aciune catalitic din centrul activ
ENZIMELE
Tensionarea substratului
Glu este situat ntr-o zon
hidrofob, i astfel gruparea
carboxilic liber este
protonat, putnd constitui
donorul de H+ n timpul
catalizei acide generalizate
Asp este situat ntr-o zon
hidrofil, astfel gruparea
carboxilic liber este
deprotonat, contituind
acceptorul H+ n timpul
catalizei
ENZIMELE
Tensionarea substratului
NAM
H+ Glu35 este cedat
oxigenului gruprii
glicozidice, astfel se
reface gruparea hidroxil a
C4 din -NAG
simultan are loc ruperea
NAG
legturii O-C1 a -NAM,
astfel C1 devine
carbocation fiind
stabilizat de gruparea
carboxilic a Asp52
ENZIMELE
Tensionarea substratului

molecula de H2O
ionizeaz formnd HO- i
H+
HO- din ap atac
nucleofil carbocationul i
reface hidroxilul C1
H+ din ap va protona
gruparea carboxilic a
Glu
CATALIZA COVALENT REVERSIBIL
proteazele digestive (TRIPSIN, CHIMOTRIPSIN,
ELASTAZA) pot prezenta acest tip de cataliz

CATALIZA COVALENT IREVERSIBIL

activarea covalent a zimogenilor (TRIPSINOGEN,
CHIMOTRIPSINOGEN, PEPSINOGEN,
PROCARBOXIDAZA)
ENZIMELE
Cataliza covalent
prezena triadei catalitice (His57 Asp102 Ser195)
realizeaz cataliza covalent cu clivajul legturii
peptidice nvecinat anumitor aa:

Tripsina rupe legturile peptidice din vecintatea Arg,

Lys
Chimotripsina rupe legturile din vecintatea Phe, Trp,
Tyr
Elastaza rupe legturile din vecintatea aa cu radicali
mici i nepolari: Ala, Val
ENZIMELE
Cataliza covalent

rou - chimotripsina
albastru - tripsina
ENZIMELE
Cataliza covalent
n absena substratului:

nucleul imidazolic
interacioneaz prin
legturi de hidrogen cu
gruparea carboxilic a Asp,
precum i cu gruparea
hidroxil a Ser
ENZIMELE
Cataliza covalent

n prezena substratului
apar urmtoarele
interacii:
hidrogenul hidroxilului
Ser este transferat pe
azotul restului imidazolic,
protonndu-l
ENZIMELE
Cataliza covalent

O- serinei atac nucleofil

C carbonilic al gruprii
peptidice din substrat
cationul aprut la nucleul
imidazolic va interaciona
electrostatic cu anionul
gruprii carboxil a Asp
 ENZIMELE
Cataliza covalent
cationul nucleului
imidazolic atac azotul
legturii peptidice, astfel
destabiliznd i desfgnd
legatura C-N
de restul de Ser este legat
covalent fragmentul
proteic (R1), ce a participat
la formarea legturii
peptidice prin COOH
(aduct compus
intermediat caracteristic
catalizei covalente)
ENZIMELE
Cataliza covalent
restul proteic (R2) se
desprinde de nucleul
imidazolic,
deprotonndu-l
restul R1 este eliberat
n urma aciunii HO-,
provenit prin ionizarea
H2O, asupra aductului
H+ va reface gruparea
hidroxil a Ser, astfel se
reface relaia iniial
ntre aa centrului activ
 Activarea
ENZIMELE zimogenilor
Cataliza covalent ireversibil

presupune transformarea proenzimelor de tipul:

pepsinogen, chimotripsinogen, tripsinogen n enzimele
proteolitice, cu activitate metabolic: pepsina,
chimotripsina, tripsina
formele inactive (zimogenii) sunt sintetizate la nivelul
mucoasei gastrice (pepsinogen), pancreasului pentru
toate celelalte enzime proteolitice
activarea se produce la locul de aciune (stomac, intestin
subire).
ENZIMELE
Cataliza covalent ireversibil

MODALITI DE PROTECIE

enzimele sunt sintetizate ca zimogeni inactivi metabolic

acetia sunt eliberai sub form de vezicule nvelite cu
membrane proteo-lipidice
secreia pancreatic conine un inhibitor pentru tripsin,
ca o protecie suplimentar

1antitripsin (anti - elastaza) - sintetizat de ficat

ENZIMELE
Cataliza electrostatic

rezult prin distribuia de sarcin n zona centrului activ,

n aa fel nct s stabilizeze starea de tranziie a
reaciei catalizate

este similar catalizei cu ioni metalici exceptnd faptul

c legarea substratului exclude n general apa de la
centrul activ al enzimei
 tria interaciunii metal enzim determin
clasificarea enzimelor:
METALOENZIME care conine ionul metalic
strns legat: Fe2+, Fe3+, Cu2+, Zn2+, Mn2+ , Co3+
ENZIME ACTIVATE DE METALE care
asociaz slab ionii metalici: Na+, K+, Mg2+, Ca2+
ENZIMELE
Cataliza cu ion metalic

metalele particip la procesul catalitic n 3 moduri:

prin legarea la substrat pentru a-l orienta n centrul activ

al enzimei
prin medierea reaciilor redox n care i schimb
reversibil starea de oxidare
prin stabilizare electrostatic sau ecranarea sarcinii
negative
ENZIMELE
Cataliza cu ion metalic
anhidraza carbonic este
o enzim prezent n
diferite esuturi, a crei
funcie este de a accelera
reacia de hidratare a CO2
Zn2+ leag HO- provenit
din ionizarea H2O
HO- atac nucleofil CO2,
pe care n transform n
HCO-3
ENZIMELE
Factorul geometric (proximitate i orientare)
ntr-o soluie a 2 reactani, acetia pot avea diferite
orientri
posibilitatea ca ei s se ntlneasc pe direcia corect
i cu suficient energie pentru a se produce reacia
chimic este foarte mic la 37C
enzima care posed 2 centrii de legare pentru aceti
reactani este introdus n soluia lor fixnd substraturile
legarea substraturilor la centrul activ al enzimei conduce
la tensionarea acestora apropiindu-se de starea de
tranziie i astfel de a iniia reacia chimic
cinetica enzimatic studiaz viteza reaciilor
catalizate de enzime n funcie de variaia raportului
concentraiilor enzimei i substratului ( [S], [E] ) i a
influenelor unor factori fizico-chimici: temperatura,
pH-ul, inhibitorii
1. concentraia substratului
2. temperatura
3. pH-ul
FACTORII CARE INFLUENEAZ
VITEZA DE REACIE
Concentraia substratului
viteza reaciei enzimatice
crete direct proporional
cu concentraia
substratului pn n
momentul atingerii vitezei
maxime (vmax)

KM=(k-1+k2)/k1
FACTORII CARE INFLUENEAZ
VITEZA DE REACIE
Concentraia substratului

atingerea unui nivel de platou a vitezei de reacie

reflect saturarea cu substrat a tuturor situsurilor active
din structura enzimei
majoritatea enzimelor respect ecuaia Michaelis-
Menten, astfel reprezentarea grafic a vitezei de reacie
n funcie de concentraia substratului are o hiperbol
enzimele alosterice au reprezentarea grafic sigmoidal
FACTORII CARE INFLUENEAZ
VITEZA DE REACIE pentru organismul uman,
toptim este cuprins ntre
Temperatura 35-40C
viteza de reacie crete
odat cu temperatura
pn n momentul
atingerii vmax, numit
temperatur optim
creterea temperaturii
suplimentar toptim
determin scderea
vitezei datorit
denaturrii structurii
enzimatice
FACTORII CARE INFLUENEAZ
VITEZA DE REACIE
pH-ul
concentraia H+
influeneaz viteza de
reacie prin gradul de
protonare sau
deprotonare al centrului
activ al enzimei, cel care
va interaciona cu
substratul n timpul
reaciei chimice
valorile extreme de pH
determin denaturarea
enzimei
ENZIMELE
ENZIMELE
Modelul reaciei catalizate enzimatic

viteza de reacie se exprim prin cantitatea de substrat

transformat n produs de reacie (exprimat n miligrame)
ntr-o unitate de timp (secund, minut)

transformarea substratului n produs de reacie implic

obligatoriu existena complexului enzim substrat (ES):

n = k x [reactani]
 ENZIMELE
Ecuaia Michaelis-Menten
V = viteza de reacie iniial
Vmax = viteza maxim
KM = constanta Michaelis
[S] = concentraia
substratului
KM=(k-1+k2)/k1
KM cu valoare sczut
semnific o afinitate
crescut a enzimei
pentru substrat
KM cu valoare crescut
semnific o afinitate
redus a enzimei pentru
substrat
ENZIMELE
Ecuaia Lineweaver-Burk

stabilirea momentului n care viteza atinge valoarea

maxim nu este posibil datorit creterii progresive a
pantei la concentraii mari de substrat

reprezentarea grafic a 1/v n funcie de 1/[S] permite

calcularea cu mai mult precizie a KM i vmax, precum i
determinarea mecanismului de aciune al inhibitorilor
enzimatici
ENZIMELE
Ecuaia Lineweaver-Burk
1. inhibiia ireversibil
2. inhibiia reversibil
2.1. inhibitori competitivi
2.2. inhibitori necompetitivi
ENZIMELE
1. Inhibiia ireversibil

inhibiia ireversibil, denumit i otrvire, altereaz

definitiv gruprile funcionale din centrul catalitic

exemple:
otvirea complexului pyr-DH de ctre arseniat
oxidarea Met din structura 1-antitripsinei,sub aciunea
fumului de igar, ceea ce conduce la inactivarea
acesteia
ENZIMELE
1. Inhibiia ireversibil
Patologie Emfizemul pulmonar
factorul etiologic anumii componeni ai fumului de
igar
consecina este inactivarea 1-antitripsinei, ceea ce
determin persistena ndelungat a elastazei, asupra
creia are aciune inhibitorie
elastaza are ca aciune degradarea elastinei, prezente
n cantiti ridicate la nivelul esutului pulmonar
efectele aprute sunt reprezentate de: procesul
inflamator local urmat de pierderea structurilor
anatomice normale nsoite fiind de dilataia cilor
respiratorii i o slab vascularizaie a esutului pulmonar
ENZIMELE
1. Inhibiia ireversibil
Patologie Emfizemul pulmonar
procesul inflamator repetat la nivelul bronhiilor duce la
apariia bronitei cronice
manifestarea tipic a acestei afeciuni o constituie tusea
matinal, la trezire, numit tusea fumtorilor asociat
cu expectoraie urt mirositoare

Emfizemul pulmonar este o afeciune caracterizat

prin distensia alveolelor, atrofia septurilor
alveolare i creterea coninutului aerian
pulmonar.
ENZIMELE
2.1. Inhibiia competitiv
inhibitorul intr n
competiie cu substratul
pentru centrul activ al
enzimei
efectul inhibitorului poate
fi ndeprtat prin
creterea concentraiei
substratului
KM are valoare crescut
n prezena inhibitorului
competitiv
ENZIMELE
2.1. Inhibiia competitiv

Exemple de inhibitori competitivi

statinele, ageni hipolipemianiai, sunt analogi sintetici ai

substratului natural al enzimei
statinele intr n competiie cu substratul, inhibnd
-HMG-CoA reductaza enzim cheie n biosinteza
colesterolului
ENZIMELE
2.2. Inhibiia necompetitiv
inhibitorul i substratul se
leag la nivelul unor
situsuri diferite ale
enzimei
inhibitorii necompetitivi
produc scderea vmax
KM are aceeai valoare
att n prezena ct i n
absena inhibitorului
necompetitiv
ENZIMELE
2.2. Inhibiia necompetitiv

Exemple de inhibitori necompetitivi

inhibitorii necompetitivi formeaz legturi covalente cu

grupri specifice din structura enzimelor
plumbul se leag de gruprile HS- ale cisteinei din
diferite enzime
unele insecticide
 ATENIE!!!

confuzia dintre inhibiia reversibil necompetitiv i

inhibiia ireversibil poate fi evitat efectund dializa
enzimei inhibate
n condiiile n care enzima nu revine la activitatea
normal este vorba de inhibiie ireversibil
1. REGLAREA COVALENT
2. REGLAREA ALOSTERIC
3. INDUCIE REPRESIE ENZIMATIC
REGLAREA ACTIVITII ENZIMATICE
Reglarea covalent
Reglarea covalent reversibil Reglarea covalent ireversibil

activarea covalent a
zimogenilor pancreatice

presupune transformarea
proenzimelor n enzime
metabolic active
REGLAREA ACTIVITII ENZIMATICE
Reglarea covalent reversibil

reprezint tipul de reglare a activitii enzimatice

realizat prin fosforilarea/defosforilarea unor grupri
hidroxil aparinnd Ser, mai rar Tyr sau Thr, resturi de
aminoacizi care nu fac parte din centrului activ
donorul gruprii fosfat este ATP
enzimele care catalizeaz reacia de fosforilare poart
numele de kinaze specifice
reacia invers se realizeaz hidrolitic, enzimele
numindu-se fosfataze specifice
REGLAREA ACTIVITII ENZIMATICE
Reglarea covalent reversibil

unele enzime interconvertibile pe aceast cale sunt

active n forma fosforilat (glicogen fosforilaza) sau
defosforilat (glicogen sintaza)

activarea unor enzime prin fosforilare defosforilare este

ultima etap ntr-o cascad de evenimente
declanat odat cu fixarea de ctre celule a unor
hormoni sau ali compui chimici cu rol reglator
 proteina Gs
hormon

receptor adenilat
membranar ciclaza
GTP
proteinkinaza A
activ
ATP AMPc
proteinkinaza A
inactiv 2
2R2C AMPc AMPc
C
enzim-kinaza
ATP ADP
enzima enzima P
REGLAREA ACTIVITII ENZIMATICE
Reglarea alosteric

este realizat prin legarea unor compui denumii efectori

sau modulatori la nivelul altui situs dect cel cu funcie
catalitic, avnd ca rezultat activarea (efector alosteric
pozitiv) sau inhibarea (efector alosteric negativ)
activitaii enzimatice
REGLAREA ACTIVITII ENZIMATICE
Reglarea alosteric
Efectorii homotropi
cnd substratul cnd efectorul este diferit de
fucioneaz ca efector
este considerat efector
homotrop
substraturile alosterice au
rol de efectori pozitivi
legarea substratului la
centrul activ are rolul de
a crete activitatea
catalitic a celorlalte
situsuri
Efectorii heterotropi
substrat este considerat
efector heterotrop
produsul final al cii
metabolice, acumulat peste
necesitile celulare de
moment, devine inhibitor al
enzimei, care catalizeaz
prima sau una din primele
reacii ale irului de reacii
chimice implicate n
biosinteza sa
REGLAREA ACTIVITII ENZIMATICE
Reglarea alosteric
INDUCIE REPRESIE
ENZIMATIC
sinteza diferitelor enzime poate fi indus sau bocat
n funcie de necesitile metabolice ale celulei
ENZIMELE
Utilitatea enzimelor n diagnosticul clinic
majoritatea enzimelor sunt active intracelular, neavnd
nici o funcie biologic n plasm
la persoanele sntoase, nivelurile plasmatice sunt
relativ constante i n direct dependena cu procesul de
lezare fiziologic al celulelor (apoptoz)
prezena concentraiilor enzimatice crescute n plasm
semnific o leziune celular suplimentar
determinarea nivelurilor plasmatice ale enzimelor este
rutin n diagnosticarea afeciunilor hepatice, musculare,
cardiace, i nu numai
gradul de cretere se coreleaz cu severitatea leziunii
ENZIMELE
Utilitatea enzimelor n diagnosticul clinic
Izoenzimele

sunt enzimele care au i structur cuaternar

din punct de vedere structural, difer prin raportul n care
sunt asociate lanurile polipeptidice de baz, care sunt
de cel puin 2 tipuri
sunt enzime care catalizeaz aceiai reacie, ns au
mobiliti electroforetice diferite
mecanismul prin care apar este existena a dou
locusuri genetice, care codific dou tipuri de protomeri
enzimatici ce urmeaz a se combina n diferite moduri
ENZIMELE
Utilitatea enzimelor n diagnosticul clinic
Izoenzimele
LDH (lactat dehidrogenaza)
cele 2 lanuri polipeptidice de baz sunt H (de origine
miocardic) i M (de origine muscular i hepatic)
rezult prin combinarea, sub form de tetramer a celor 2
subuniti
LDH1 (H4),LDH2 (H3M),LDH3 (H2M2),LDH4 (HM3),LDH5
(M4)
CK (creatinkinaza)
cele 2 lanuri polipeptidice de baz sunt B (de origine din
creier) i M (de origine muscular)
este un dimer: CK-BB, CK-MM, CK-MB
FOSFATAZA ALCALIN
FOSFATAZA ACID
- AMILAZ
 CK-MB este specific muchiului cardiac
dup instalarea infactului miocardic, la 4-8
ore de la apariia durerii precordiale, poate
fi detectat n serul pacientului atingnd o
valoare maxim la 24 ore i revenind la
valori bazale n decursul de 48-72 ore
GOT, LDH nu sunt specifice infartului
miocardic, ele pot apare n orice leziune
celular