FARMACIE AN II

BIOLOGIE ANIMAL
LUCRRI PRACTICE

Lect.dr. IULIAN STANA

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

REGNUL EUCARYA
Anual se descriu specii noi, se estimeaz, c n actualul ritm de lucru, ne vor trebui secole pentru a reui s inventariem n ntregime vieuitoarele de pe Terra, bineneles, dac mediul natural al acestora nu va fi profund alterat nainte de ctre om. De exemplu, anual se descriu circa 1700 de specii de fungi i circa 120 de specii de bacterii. Existena unor trsturi comune, permite gruparea organismelor de acelai tip ntr-o singur categorie, astfel familiarizndu-ne cu aceste trsturi vom putea recunoate poziia unei vieuitoare oarecare n lumea vie.

Pentru analiza vieuitoarelor, specialitii fac apel la dou ramuri ale biologiei: sistematica i taxonomia. Sistematica este ramura biologiei care are ca obiect descrierea i denumirea vieuitoarelor - diversitatea lumii vii - stabilind relaiile filogenetice dintre acestea. Taxonomia (sau taxinomia) reprezint teoria i practica clasificrii vieuitoarelor.

Termenul a fost introdus de botanistul elveian De Candolle i deriv de la cuvintele greceti taxis - aranjament i nomos - lege). Cu alte cuvinte, dac sistematica descrie i denumete vieuitoarele, taxonomia le aranjeaz n sisteme de clasificaii. Trebuie adugat ns i faptul c un mare numr de biologi nu fac o diferen prea clar ntre sistematic i taxonomie, considerndu-le noiuni sinonime. n biologie se lucreaz cu categorii sistematice sau categorii taxonomice, care nclud organismele de acelai tip. Aceste categorii sunt ierarhizate pe mai multe nivele. Cele mai des utilizate n biologie sunt urmtoarele categorii: specia, genul, familia, ordinul, clasa, ncrengtura i regnul. Taxonomia modern utilizeaz analiza secvenelor de nucleotide din componena ADN - ului, urmrind reclasificarea pe baza conceptului filogenetic de specie. Dezvoltarea tehnicilor de amprentare ADN a fcut posibil compararea genomului diverselor specii i stabilirea gradului de omologie al acestora. Tehnicile moleculare, prin stabilirea secvenelor nucleotidice ale diferitelor fragmente de ADN, permit clasificarea cu acuratee a ntregii biodivers iti. Ele intesc elucidarea 2

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

dispunerii nucleotidelor n diverse gene sau poriuni de gene. ADN-ul ribozomal este regiunea genomului fungic cea mai intens studiat deoarece ribozomii sunt prezeni n toate organismele i n plus, poriunile genice comune, existente n toat lumea vie, alterneaz cu poriunile variabile, specifice, permind evaluarea gradului de coeziune taxonomic a entitilor vii studiate. Protozoarele i metazoarele sunt cele dou grupe de animale care se ncadreaz dup clasificrile moderne, bazate pe filogenia molecular, n Regnul Eucarya.

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

SUBREGNUL PROTOZOA
Protozoarele sunt organisme heteromorfe unicelulare, dar unele grupe (de exemplu euglenele) n prezena luminii se hrnesc prin fotosintez, deci autotrof. Digestia se realizeaz cu ajutorul vacuolelor digestive. Acestea se gsesc n stare liber, sesil, simbiot, comensal sau parazit. Protozoarele libere triesc n diverse medii: marin, salmastru, dulcicol, edafic. Dimensiunile acestora sunt cuprinse ntre 1 i mii de microni. Celula acestora este nvelit de o membran cu structur conform cu modelul de mozaic fluid. Unele grupe de protozoare, peste membrana celulei prezint un schelet cu rol de aprare, care poate fi de consisten diferit: calcaroas, silicioas, spongioas. n calitate de componente ale micro- i meio faunei (nevertebrate bentonice mici, care triesc, att n medii marine i de ap proaspt), protozoare sunt o surs de hran important pentru micronevertebrate. Rolul ecologic important al protozoarelor este n transferul producie bacteriene i a algelor la niveluri superioare trofice.

SUBNCRENGTURA SARCODINA
Cuprinde protozoare unicelulare, cu corp deformabil lipsit de membran, delimitat numai de plasmalem. Triesc n toate mediile, unele fiind parazite la nevertebra te, vertebrate inclusiv la om. Sunt organisme solitare, iar ca organite de micare prezint pseudopode. Se hrnesc prin fagocitoz. Reproducerea se realizeaz asexuat prin diviziune celular i sexuat prin meioz.

Ordinul AMOEBIDA Genul ACANTHAMOEBA este un gen de amibe, unul dintre cele mai comune genuri de protozoare din sol, se gsesc frecvent n ap i alte habitate. Celulele sunt mici, de obicei ntre 15 i 35 m lungime, avnd form oval ctre triunghiular atunci cnd se deplaseaz. Pseudopodele au form de emisfer lobat pe partea anterioar, iar pe marginile corpului prezint o serie de extensii filamentoase, acestea oferindu-i un aspect spinos. Majoritatea speciilor din acest gen sunt specii libere bacterivore, dar unele dintre ele sunt oportuniste, ele producnd infecii la oameni i la animale. Bolile cauzate de Acanthamoeba sunt: encefalita amibian granulomatoas cronic, keratite amoebice i pneumonii. 4

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

Acanthamoeba keratitis: este o specie care produce o boala rar unde amiba invadeaz corneea ochiului, apare la pacieni care au suferit o traum minor la nivelul corneei. Este asociat aproape ntotdeauna cu folosirea lentilelor de contact, deoarece aceasta triete n spaiul dintre lentile i ochii. Infecia aprut, are o evoluie rapid, iar semnul clinic caracteristic este un inel cornean paracentral, care reprezint abcesul cornean. Chisturile neregulate poligonale de Acanthamoeba pot fi identificate prin raclri de la nivelul corneei sau din materialul de biopsie, iar trofozoiii pot fi cultivai pe medii speciale. Chisturile sunt rezistente la medicamentele disponibile, iar rezultatele tratamentului medicamentos sunt dezamgitoare. Din acest motiv lentilele de contact trebuie: sterilizate corect nainte de a fi purtate; date jos nainte de a practica sporturi acvatice; pstrate n locuri corespunztoare. Simptomele sunt: senzaia de-a avea ceva n ochi, lcrimarea ochilor, vederea nceoat, sensibilitate la lumin i durere mare a ochilor. Dac este detectat devreme, tratamentul poate avea efect rapid, dar se poate prelungi i pn la 12 luni.

Fig.1. Imagine Acanthamoeba keratitis

Pacienii sunt spitalizai i tratai cu unul din urmtoarele medicamente: neomicin 1% (o pictur la fiecare 30 de minute), Propapidine isetionat/Brolene 0.1% (o pictur la 30 de minute), Polihexametil biguanid 0.02% (o pictur pe or) metformin, phenformin i 5

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

ofloxacin. Dup 48 de ore frecvena de administrare este redus. Se poate folosi adiional tratamentul sistemic cu Itraconazol 200mg /zi. Terapia durerii oculare include att utilizarea agenilor cicloplegici care diminueaz spasmul ciliar, ct i a antiinflamat oarelor nesteroidiene i antialgicelor. n iminena de perforaie transplantul cornean poate fi soluia terapeutic. Acanthamoeba encephalitis: este un protozor patogen care produce encefalit amibian granulomatoas la om, rata de supravieuire a pacienilor infectaii fiind foarte mic (2-3% din cazuri). Infecia apare de obicei la persoanele care au deficiene imunitare, diabet sau sufer de malnutriie ori alcoolism. Parazitul intr n corp prin leziunile de la nivelul pieli sau pe cale respiratoare prin ingerarea chitilor. Se rspndete prin snge, ajungnd la sistemul nervos central. Pacienii care sufer de aceast boal prezint alterarea strii mentale, dureri de cap, febr i alte simptome neurologice, n ultimul stadiu ajungndu-se la com. Pn n momentul de fa nu exist un tratament eficient pentru aceast boal, aceast fiind rareori identificat nainte de deces la pacieni.

Fig.2. Chist de Acanthamoeba encephalitis n creier.

Entamoeba histolytica: este o amib parazit patogen, anaerob care infecteaz omul i alte primate. Boala produs se numete dizenterie amibian, fiind caracterizat prin dizenterie fulminant, oboseal, dureri abdominale, abcesele hepatice i scderea n greutate. Forma vegetativ mbrac dou aspecte: forma magna sau histolitic: agresiv, foarte mobil, cu pseudopode care apar brusc pentru aglutinarea hematiilor. forma minuta: neagresiv, imobil, cu pseudopode groase, care apar lent i care se 6

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

hrnete cu flora intestinal. Chistul se formeaz numai din forma minuta, n intestin unde sub influena temperaturii i umiditii specifice, elibereaz o mas plasmoidal alctuit din 4 nuclei care, prin diviziune binar, dau natere celor dou forme vegetative de amibe.

Stadiul de trofozoit exist doar la gazd, care l elimin n exterior odat cu materile fecale, ei se transform n chiti, care ajung n corpul uman prin intermediul apei, minilor murdare i de pe alimentele nesplate sau incorect preparate. Se mai poate transmite i pe cale sexual. Principalul rezervor de infecie este reprezentat de bolnavii cu dizenterie amibian cronic sau de purttorii asimptomatici care elimin n mediul extern circa 60 chisturi/mg de materii fecale, de unde acestea pot fi preluate de indivizii s ntoi fie prin contact direct, prin ingestia de apa i alimente contaminate, fie prin contact indirect, prin intermediul mu telor care contribuie la rspndirea lor n natur.

Fig.3. Ciclul de dezvoltare al parazitului Entamoeba histolytica

n orice form de manifestare a sa, amibiaza se trateaz eficient prin administrarea de medicamente amibicide i adoptarea unei diete hrnitoare, bogat n proteine i vitamine, n condiiile unui repaus total la pat. Se poate preveni totui mbolnvirea prin pstrarea unor riguroase norme de igien sanitar care reduc mult pericolul contaminrii apei de but, alimentelor, obiectelor personale. 7

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

Blastocystis hominis: un organism unicelular care infecteaz tractul gastrointestinal la om i animale provocnd dureri abdominale, constipaie, diaree. Triete n zonele tropicale, subtropicale i temperate. Se gsete sub patru forme: vacuolar, granular, amoboidal i chistic.

Fig.4. Cele patru forme ale parazitului Blastocystis hominis.

Ciclul de via al parazitului ncepe cu ingerarea de ctre om a chistului, acesta o dat ajuns n intestin trece prin restul formelor i ajunge din nou n mediu, aici fiind transmis oamenilor i animalelor. Astfel ntreg ciclul repetndu-se.

Fig.5. Ciclul de via al parazitului B. hominis dup Tan, modificat

Entamoeba gingivalis: este o amib parazit nepatogen, este gsit doar n cavitatea bucal ntre gingii i baza dinilor. Parazitul se gsete la 95% dintre persoanele cu probleme 8

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

gingivale i la 50% dintre cei fr astfel de probleme. Se gsete cu o frecventa mai mare la persoane suferind de afeciuni bucale, spre exemplu, n cazuri de pioree alveolara, n puroiul care se formeaz n jurul rdcinii dinilor respectivi, n carii dentare i n unele ulceraii bucale, precum i n unele amigdalite. Faptul ca s-a observat o ameliorare a pioreei alveolare dup un tratament cu emetina, medicament la care E. gingivalis e foarte sensibila, pledeaz pentru rolul activ pe care l-a jucat n producerea i ntreinerea acestei boli i deci pentru rolul ei patogen. E. gingivalis ar putea fi considerata ca o amiba "oportunista", capabila sa triasc n cavitatea bucal dar i s profite de anumite modificri care se pot produce n mediul ei nconjurtor prin slbirea rezistentei organismului gazda i s devin atunci patogen, lund parte la producerea i ntreinerea unor leziuni ntre care i pioreea alveolara, precum i unele amigdalite purulente. Ea poate fi implicata i n favorizarea sau chiar producerea unor carii dentare. Transmiterea se face direct prin saliv sau folosirea n comun a tacmurilor. Ordinul SCHIZOPIRENIA Naegleria fowleri: triete ca form liber, flagelat n ape dulci, calde, poluate la o temperatur cuprins ntre 25-350 C . N. fowleri poate ataca sistemul nervos central, dei rareori se ntmpl acest lucru, infecia duce la moartea persoanei infectate. Parazitul intr n corp prin mucoasa olfactiv, producnd necroz i sngerri ale bulbului olfactiv. De aici amiba urc de-a lungul fibrelor nervoase pn n creier, cauznd mengioencefalit purulent primar. Cei mai afectai sunt copii i adulii tineri care noat frecvent n bazine nclzite.

Fig.6. Naegleria fowleri dup Benjamin Cummings

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

Parazitul prezint trei stadii evolutive: chist, forma vegetativ flagelat i forma amoebial. Chistul reprezint forma de rezisten a parazitului i se poate gsi n praf, pmnt, nisip, ape murdare i reci. Forma vegetativ flagelat provine din chist i n condiii favorabile e infectant pentru om. Afecteaz sistemul nervos central, producnd simptome la nivelul gustului i mirosului, urmate de grea, febr, dureri de cap. Imediat dup aceste simptome instalndu se coma urmat la scurt timp de decesul pacientului infectat.

Fig.6. Ciclul de via al parazitului Naegleria fowleri

Ordinul LEPTOMZXIDIA Balamuthia mandrillaris este o amib liber care se ntlnete frecvent n abcesele de piele i n meningoencefalit amibian primar. Se ntlnete n zonele temperate ale globului. Ciclul de via al aceste amibe const n dou stagii, unul cistic i unul de tofozigot ambele putnd fii identificate n creier prin executarea unei biops ii la nivelul creierului. Intr n corp prin cile respiratori sau prin rnile deschise. O data ajunse n corp pot crea leziuni la nivelul pieli sau pot migra ctre creier.

10

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

Fig.7. Trofozoitul de Balamuthia mandrillaris, imagine microscop electronic

Simptomele infeciei sunt neclare deoarece doar cteva cazuri au fost descrise pn acum, unele dintre aceste simptome sunt: paralizie facial, dificultii n nghiire, vedere dubl. Se cunosc doar cteva cazuri n care sa tratat cu succes infecia provocat de acest parazit, a fost folosit un cocktail de antibiotice.

11

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

SUBNCRENGTURA MASTIGOPHORA (FLAGELLATA) Cuprinde protozoare cu unul sau mai muli flageli, iar unele specii prezint i o membran ondulat. Flagelii prezint expansiuni filamentoase numite mastigoneme . Sunt specii libere sau parazite, mono sau polienergide. Forma corpului este sferic, ovoidal, fusiform ns ntotdeauna constant la aceeai specie i individ. Hrnirea poate fi autotrof la speciile nzestrate cu cloroplaste (caracter ce genereaz nc discuii ntre zoologi i botaniti) , dar majoritatea se hrnesc heterotrof prin procese de difuziune sau fagocitoz. La exterior, flagelatele prezint o membran mai groas de 15 m, amorf i mai rezistent dect membrana plasmatic a amibelor, denumit i pelicul, motiv pentru care flagelatele i menin constant forma. Membrana este susinut de ngrori elastice, cu aspectul unor fibre oblice la suprafaa celulei, separate de anuri n c are se deschid saci mucoi (secret mucusul existent la suprafaa peliculei). n interiorul flagelatelor exist: nucleu cu nucleol mare i granule de cromatin, ribozomi, mitocondrii, reticul endoplasmatic, rizoplast (rdcina flagelilor), vacuole, granule cu paramilon (substan de rezerv asemntoare amidonului, dar care nu se coloreaz cu iod). Flagelatele pot prezenta un citoschelet reprezentat prin fibrile, sau o baghet dispus longitudinal ca un ax, numit axostil, constituit din fibrile paralele ( microtubuli). Axostilul este de origine centrozomial. Flagelii sunt formai din microtubuli (filamente) nconjurai de citoplasm. Exist fibre axiale i periferice. Fibrele periferice sunt n numr de 9 i sunt duble. Partea bazal a fibrelor periferice (care la acest nivel pot fi triple) constituie corpusculul bazai - blefaroplastul, care este separat de restul flagelului prin granula axial, pe care se sprijin fibrele axiale, n numr de 2. Poriunea intern a flagelului, de la blefaroplast la suprafa, este filamentul axial sau axonema. Flagelii pornesc de la un corpuscul mic, rotund numit corpuscul bazal sau blefaroplast.

Ordinul DIPLOMONADIDA Sunt specii prevzute cu mai muli flageli, n majoritatea cazurilor dispunnd de cel puin 4 flageli. Un flagel este recurent, direcionnd micarea parazitului. La unele flagelate, flagelul recurent poate fi lipit de corp, formnd o membran ondulant. Flagelatele pot avea mai muli nudei. La suprafa au o pelicul de nveli iar n interior prezint un ci toschelet, reprezentat de fibrile sau de o baghet longitudinal, denumit axostil, constituit din 12

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

microtubuli. Se pot hrni prin nglobarea substanelor nutritive, printr-un citostom, dispus la extremitatea anterioar a flagelatului. Giardia intestinalis este un protozoar parazit flagelat care triete n corpul omului i al altor animale regsindu-se la nivelul diferitelor segmente ale aparatului digestiv i anume: n intestin, ci biliare, colon, stomac. Giardia este un microorganism anaerob, aero-tolerant, care triete n intestinul subire, are micare sacadat, prin rotire i balans. Se hrnete de la celule prin osmoz pe ntreaga suprafa i se nmulete asexuat.

Fig.8. Vedere 3D a parazitului Giardia intestinalis

Agentul su patogen are dou forme vegetative: trofozoidul (forma activa) care paraziteaz duodenul, cile biliare, intestinul subire; chistul care apare numai n fecale i care reprezint forma invaziv a parazitului. Oamenii bolnavi i purttorii asimptomatici, elimin peste 300.000.000 de chisturi odat cu materiile fecale, aceste chisturi se transmit la oamenii sntoi, contaminndu-i cu predilecie prin ingestia de ap i alimente necorespunztor splate. Dup ce sunt ingerate i ajung n intestinul uman, chisturile de Giardia se divid n trofozoii, care se maturizeaz n duoden i apoi se multiplic excesiv (circa 1.000.000/cm2), ceea ce determin o puternic iritaie a mucoasei intestinale, deci tulburarea procesului digestiv prin diverse deficiene enzimatice. Boala provocat de acest parazit se numete Giardioz (Lambliaza) este endemic n 13

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

zonele tropicale i subtropicale, dar poate aprea n mici focare i n condiii precare de igiena, provocnd mici epidemii hidrice prin consumul de ap contaminat. Aceti chiti pot supravieui n ap chiar cteva luni, de aceea ei pot fii prezeni n toate tipurile de ape. Parzitul este protejat de un nveli exterior care i permite s supravieuiasc n afara corpului pentru perioade lungi de timp i i face tolerani la clor. Cazuri sporadice apar la copiii i adulii ajuni n zonele intens infestate. Rezervorul de infecie este considerat a fi n principal uman (bolnavi, convalesceni, purttori asimptomatici), acetia elimin n mod continuu sau sporadic chisturi, pentru o perioada variabil de timp (sptmni sau chiar luni). Dovezi actuale recunosc ca posibile surse de infecie dovedite n cazul unor epidemii hidrice i animalele slbatice (castori). Calea de transmitere este fecal-oral, att direct de la o persoan la alta, ct i indirect, prin apa i alimente (n special fructe i legume) contaminate, fiind favorizat de condiiile de igiena individual precare (colectiviti de copii, aziluri de btrni, spitale de psihiatrie). Nu toate infeciile sunt simptomatice n multe cazuri, persoana infectat nici nu i d seama c este purttore a acestui parazit. Parazitul, exercit mai multe genuri de aciuni asupra persoanei infectate: spoliatric, traumatic, toxic i alergic. Simptomele infectrii cu giardia sunt: durerile abdominale, diaree, vrsturi, eventual febra i pierderea poftei de mncare cu slbire n greutate, iar n cazurile severe se poate ajunge la deshidratare, prin vrsturi i diaree. Giardioza poate cauza intoleranta la zahar (mai ales lactoza, zaharul din lapte) n ceea ce privete tratamentul, mai multe medicamente pot fi folosite pentru a trata infecia cu giardia. Tratamentele eficiente includ metronidazol, tinidazol i nitazoxanid. Alternative la aceste medicamente includ paromomicina, quinacrine i furazolidon. Deparizitarea de giardia este recomandat a se face de ctre toata familia timp de minim 3 luni. Diferii factori pot modela ct de eficient este un regim medicamentos, inclusiv istoricul medical, starea de nutriie, precum i starea sistemului imunitar. De aceea, este important s se discute opiunile de tratament cu un medic specialist. Alimente benefice n lupta cu Giardia intestinalis sunt: alunele, afinele, piersicile, cpuni, morcovi, ceapa, usturoiul, prazul, varza, ptrunjelul, seminele de dovleac, propolisul, etc. Pentru prevenirea infestrii trebuie evitat consumul de ap sau alimente contaminate, dar mai ales trebuie respectate normele eseniale de igiena individual i colectiv.

14

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

Msurile generale de profilaxie vizeaz: asigurarea unui sistem de filtrare i purificare a apei potabile; protecia solului i a apei de contaminarea cu chisturile de Giardia (n special prin evitarea folosirii dejeciilor ca ngrminte naturale); identificarea persoanelor infestate sau bolnave prin executarea unor examene coproparazitologice periodice n colectiviti; tratarea corect a persoanelor infectate.

Fig.9. Ciclul de via la Giardia intestinalis

Ordinul TRICHOMONADIDA Specii ce prezint 3 - 5 flageli anteriori i o membrana ondulatore de lungime variabil. Flagelul este fuzionat la marginea membranei ondulatore, iar axostilul se ntinde pe toat lungimea organismului. Nu prezint stadiul de chist ele exist doar n stadiul trofozoit. Trichomonas tenax parazit ce este frecvent ntlnit n organism ca necrofag, n gur i se hrnete n primul rnd cu microorganisme locale, este localizat pe tartru i pe gingii, precum i regiunea nazo-faringien. Se transmite de obicei, prin contact direct sau prin apa 15

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

potabil contaminat. Nu este considerat patogen; poate fi evitat printr-o igien oral corespunztoare. Tipic T. tenax este descris ca avnd form oval, cu o lungime medie de 6 i 9 microni. Trofozoitul este echipat cu cinci flageli, toi provin din partea anterioara a parazitului. Patru dintre flageli se extind n partea anterioar i unul n cea posterioar. O membrana ondulatore, se extinde pe dou treimi din lungimea corpului su. Infecia cu T. tenax nu produce nici un simptom notabil, rare ori poate s invadeze tractul respirator, dar acest lucru pare s apar, n principal la pacienii care au abcese pulmonare toracice. Trichomonas vaginalis este un parazit flagelat care este cantonat n zonele genitale. La femei parazitul se gsete n vagin, canalele Skene, canalele glandelo r Bartolin, uretr, glande uretrale, vezic urinar, iar la brbai n glandele uretrale, prostat, vezicule seminale i vezic urinar. Perioada de incubaie a agentului patogen este cuprins ntre 2 i 38 de zile. Acest parazit produce boala numit Trichomoniaza (Trichomonas). Trichomonas vaginalis paraziteaz doar omul i se prezint sub form vegetativ, de trofozoit. Acesta este distrus imediat de uscciune, de aceea se transmite doar prin medii umede n timpul contactului sexual. Forma de chist lips ete, de aceea se transmit doar trofozoiii de la un individ bolnav la unul sntos. Ajuns n noul mediu, acesta ncepe ciclul evolutiv cu diviziuni binare. n cazul brbailor aceast afeciune rmne, de cele mai multe ori (aproximativ 70 % din cazuri) fr simptome ceea ce face, pe de o parte, depistarea dificil, iar pe de alta crete probabilitatea infectrii i reinfectrii permanente. La brbai este afectat uretra i de aceea, atunci cnd apar simptomele sunt scurgeri moderate i intermitente, fr culoare sau de culoare galben-verzuie, senzaie de arsur, durere i usturime la urinat. Infecia lsat netratat, la brbat poate duce uneori la infecia epididimului (epididimit) sau la infecia glandei prostat (prostatita) i uneori chiar la infertilitate. Brbatul este gazd rezervor dar i transmitor. i n cazul femeilor aceasta afeciune poate rmne fr simptome (n aproximativ 30 % din cazuri). La femeie poate fi afectat at t vaginul ct i uretra. Cnd este afectat vaginul simptomele sunt secreii anormale de culoare galben-verzuie, spumoas i cu un miros foarte neplcut, secreii ce provoac mncrimi vaginale i vulvare. Cnd este afectat uretra apar dureri, usturimi i arsuri n timpul urinarii. Simptomele sunt mai pronunate nainte de menstruaie sau dup actul sexual. Poate aprea i durere n timpul actului sexual (dispareunia). n cazul existenei unei sarcini, infecia crete probabilitatea unei nateri 16

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

premature sau poate fi transmis la natere dac ftul este de sex feminin. Trichomoniaza este o infecie destul de rspndit, cu o transmisibilitate foarte ridicat. Este o infecie urogenital care afecteaz numai cile genitale i urinare n principal, la brbai uretra, iar la femei uretra i vaginul. Calea de transmitere a acestei infecii este cea sexual, dar trebuie s se ia n considerare i faptul c este posibil ca infectarea s se produc i prin contactul cu obiecte de folosin intim infectate, lenjerie intim, prosoape folosite n comun. Riscul de infecie crete dac: - nu se folosete prezervativul la contacte sexuale cu un partener nou sau cu un partener care se presupune ca a fost expus unei boli cu transmitere sexual; parazitul se poate transmite chiar daca persoana infectata nu prezinta simptome; - exista parteneri sexuali multipli, care cresc riscul expunerii la boli cu transmitere sexual; adolescenii i adul ii tineri au risc mai mare de infecie cu tricomonas v. precum i pentru alte boli cu transmitere sexual, deoarece partenerii lor sexuali, adesea, au avut ali parteneri nainte, care puteau fi infectai.

Fig.10. Parazitul Trichomonas vaginalis

Femeile care sunt infectate cu tricomonas v. au risc crescut de a face alte infecii vaginale. Aproximativ 20% din aceste femei au concomitent i alt infecie vaginal. Testele de snge obinuite nu pot pune diagnosticul de Trichomoniaza. Diagnosticul se 17

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

pune pe baza unui examen microscopic a secreiilor patologice: uretrale la brbat, uretrale/vaginale la femei. Tratamentul se face cu antibiotice pe cale orala uneori asociat cu un tratament local, este de scurt durat i d rezultate foarte bune dac este urmat corespunztor n ceea ce privete doza i perioada. Din fericire Trichomoniaza se consider cea mai usor de tratat infecie vaginal: metronidazol sau tinidazol n doza unic. Rata de vindecare a bolii prin tratamentul cu metronidazol este de 90-95%. Deoarece tratamentul cu tinidazol a fost recent aprobat de ctre organizaiile internationale, s-au facut puine studii care s evalueze eficacitatea sa, nsa se presupune a fi apropiata de cea a metronidazolului. Atentie, trebuie tratat i partenerul sexual! Pe parcursul tratamentului sunt descurajate orice forme de relaii sexuale. O noua testare nu e necesara daca medicatia a fost luata corect; parazitul e foarte sensibil.

Ordinul KINETOPLASTIDA Genul LEISHMANIA este un gen numeros, de protozoare parazite cu kinetoplast, un organit provenit dintr-o mitocondrie modificat care este ataat la baza flagelului, aceste produc boli grave numite leishmanioze. Flagelul poate da natere la o membran ondulat cu rol de protecie. Leishmaniile sunt transmise la om prin neptura unor nari infectai din clasa Phlebotomus i Lutzomya, ele triesc, se multiplic n anumite celule ale sngelui i ale mduvei osoase, distrugnd celulele respective. Leishmania poate fi transmis n multe ri tropicale i subtropicale aceasta afecteaz 12 milioane de oameni din ntreaga lume, cu 1,52 milioane cazuri noi n fiecare an. Forma visceral a leishmaniozei are o inciden estimat de 500.000 de noi cazuri i decese 60.000 n fiecare an. Mai mult de 90 la sut din cazuri din lume de leishmanioz viscerale sunt n India, Bangladesh, Nepal, Sudan i Brazilia. Odat cu migratiile sociale din ultimele decenii, leishmanioza a ncetat s fie o boal strict localizat geografic; totui, n afara ariilor endemice, cazurile sunt izolate, aa numite " de import". n ciclul biologic al parazitului exist dou forme: forma leishmania: form aflagelat, cantonat de obicei intracelular la om i la gazda rezervor de infestare reprezentat de animale domestice i slbatice (vac, cine, oaie, cal, acal i vulpe) forma leptomonas: form flagelat, care triete n aparatul digestiv al unor specii de insecte din genul Phlebotomus i care o transmit prin nepare i inoculare la omul sntos. 18

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

Fig.11. Parazitul responsabil pentru Leishmanioza, forma flagelat

Leishmanioza se prezint sub trei forme: Leishmanioza visceral: Este frecvent n regiunile tropicale i mediteraneene afectnd mai curnd copilul dect adultul. Se transmite omului prin neptura unor insecte mici, flebotomii. Acestea, dup ce au nepat un om sau un animal atins de leishmanioz sunt purttoare ale parazitului, care se dezvolt i se multiplic n organismul lor. Durata de incubaie este foarte variabil, de la cteva sptmni la cteva luni, chiar mai muli ani, n funcie de starea imunitar a purttorului. Leishmanioza visceral sau boala Kala-azar este o afectiune parazitar comun omului i anumitor animale din zonele tropicale i subtropicale, existnd cteva regiuni endemice: Asia de sud-est, Africa, America de sud, bazinul mediteraneean. Agentul patogen este reprezentat de Leishmania Donovani, un protozoar flagelat ce se dezvolt n organismul uman strict intracelular n macrofagele circulante (monocite) i tesutul reticulohistiocitar (splin , ficat, ganglioni, mduva osoas), pe care le distruge progresiv. Vectorul este reprezentat de o insect dipter nrudit tntarului denumit Phlebotomus, prezent n zonele calde i uscate. Acestea, dup ce au nepat un om sau un animal atins de leishmanioz sunt purttoare ale parazitului, care se dezvolt i se multiplic n organismul lor. Durata de incubaie este foarte variabil, de la cteva sptmni la cteva luni, chiar mai muli ani, n funcie de starea imunitar a purttorului. Simptomele sunt: slbire, oboseal, paloare, dispnee i mai ales febra neregulat

19

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

persistent cu, vrfuri de temperatur de 40 - 41C i scderi mai mult sau mai puin rapide n aceeai zi. Volumul ficatului i al splinei cresc, apar ganglioni mari la gt i axilari. Bolnavul mai sufer de diaree i n stadiul avansat al bolii, se formeaz pete ntunecate pe piele.

Leishmanioza cutanat: Parazitul infesteaz celulele pielii. Se ntlnete n Africa de Nord i Est, n America tropical, n India i bazinul mediteranean. Forma uscat (urban) produs de Leishmania tropica, const n apariia la locul inoculrii parazitului de ctre flebotom, a unui granulom dermic, la 2-3 sptmni, uneori luni i chiar ani de la inoculare. Leziunea debuteaz cu o papul inflamatorie pruriginoas, care se transform n nodul, care se ulcereaz i se acoper cu o crust uscat, iniial alb i ulterior brun, aderent. Leziunea cutanat este nedureroas, neinflamatorie, nensoit de adenopatie, nepurulent. Dup ndeprtarea crustei, din ulceraie se scurge un lichid serohemoragic. Este caracterizat prin unul sau mai multe ulcere de la civa milimetri pn la centimetri, pe pielea din prile corpului neacoperite de haine, mai ales pe mini i pe fa. Boala se vindec spontan, dar lent.

Leishmanioza cutaneo-mucoas: Este o boala de infestarea celulelor pielii i mucoaselor (n particular cele ale feei) cu protozoarele flagelate din genul Leishmania. Se ntlnesc mai ales n America Centrala i n America de Sud. Boala se manifesta prin ulceraii pe fa, care pot lsa cicatrici, chiar mutilri nsemnate. Durata de evoluie a bolii este variabil i se poate ntinde pe mai muli ani. Forma umed (rural) este produs de Leishmania major, prin contaminarea accidental uman, de la roztoarele slbatice (rezervorul Leishmaniei major). Spre deosebire de forma uscat, forma umed evolueaz cu ulceraii multiple, dureroase, care cresc repede, au contur neregulat i sunt nconjurate de o reacie inflamatorie marcat, limfangit i adenopatii. Necroza se extinde dinspre centru spre periferie i se elimin o secreie mucopurulent. Evoluia este favorabil spre vindecare n 3-5 luni, lsnd ns cicatrice semnificativ. Cicatrizarea este deformant, mutilant. Ulceraiile se pot suprainfecta bacterian, ceea ce conduce la accentuarea procesului ulcerativ i inflamator. Ca msuri de prevenire se recomand ca n perioada de timp cald i umed s se utilizeze insecticide pentru a ucide insectele i haine acoperitoare.

20

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

Fig.12. Ciclul de dezvoltare la parazii genului Leishmania

Diagnosticul se stabileste n laborator. Este un diagnost ic parazitologic ce demonstreaz prezenta protozoarului n tesuturile biopsiate (splin, mduva osoas, ganglioni limfatici, snge) sau unul serologic ce evidentiaz prezenta anticorpilor n plasma subiectului (ELISA, IFAT, DAT). n ultimii ani, diagnosticul molecular permite chiar stabilirea subtipului de Leishmania. Tratamentul este necesar i obligatoriu n toate cazurile. Terapia medicamentoas este regula, se adreseaz tuturor cazurilor i const n administrarea parenteral de stibo-gluconat de sodiu, glucantin, pentamidin, amfotericina B sau antimoniat de N-metil-glucamina n infiltraii intra i perilezionale. Acesta nu este complet neles cum aceste medicamente aciona mpotriva parazit; acestea pot perturba sale energie producia sau trypanothione metabolice. Din pcate, n multe pri ale lumii, parazit a devenit rezistente la antimoniu i pentru leishmaniasis visceral sau mucocutanate, dar nivelul de rezisten variaz n funcie de specii. Tratamentul chirurgical este excepia i se adreseaz leziunilor cutanate (chirurgie plastic), leziunilor intraabdominale i n special splenomegaliei cu sau fr hipersplenism, cu sau fr focare de suprainfecie (chirurgie general), leziunilor pleuro-pulmonare i mediastinale (chirurgie toracic). Leishmaniozele rezistente la medicamente poate rspunde la imunoterapie (inoculare cu antigeni parazit plus un adjuvant), care i propune s stimuleze sistemul imunitar al organismului s omoare parazit. 21

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

Genul TRYPANOSOMA este un gen care cuprinde 13 specii de flagelate, dintre care 10 habiteaz n Africa i 3 n America de Sud. Produc la om, la mamifere domestice i slbatice boli grave numite tripanosomiaze. Pentru deplasare, tripanosomele prezint un flagel, originar n partea posterioar a celulei, care formeaz o membran ondulat pn la extremitatea anterioar a celulei, apoi devine liber. Tripanosomele sunt digene, adic au dou gazde: un mamifer i insect hematofag.
Trypanosomele au la baza flagelului o formaiune roie, granular, numit kinetoplast (reea de ADN mitocondrial), format din blefaroplast i corpuscul pa rabazal, legate prin fibrile. Kinetoplastul este o structur specific ordinului Kinetoplastida. Rdcina flagelului se gsete ntr-o structur tip plnie: poriunea ngust este citofaringele, iar partea dilatat se numete rezervor. La rdcina flagelilor exist mai multe vacuole contractile, pulsatile, care se unesc ntr -o vacuol mare, care se sparge i elimin coninutul n rezervor i de aici n citofaringe. Flagelatele prezint o singur mitocondrie, format din fibrile aliniate regulat, ADN-ul kinetoplastic i vezicule (glycosomi), care conin primele 9 enzime ale glicolizei. n cursul diviziunii, iniiat de kinetoplast, kinetoplastul se alungete i ulterior se divide. Nucleul se divide amitotic, iar dup diviziunea kinetoplastului se formeaz o nou axonem.

Trypanosoma brucei gambiense este rspndit n Africa de Vest, unde produce boala somnului, aceast boal este letal la dou luni de la infectare dac nu este tratat. n desfurarea ciclului evolutiv al acestui parazit, particip ca i gazd intermediar, musca ee (Glossina palpalis), o insect diurn care rspndete acest parazit. Oamenii sunt singurul rezervor de T. b. gambiense, iar infeciile survin n focare distribuite pe arii ntinse n pdurile tropicale ploioase din Africa Centrala i de Vest. Tripanosomiaza gambiense este n principal o problem a populaiilor din zonele rurale, turitii fiind rareori infectai. Organizaia Mondial a Sntii estimeaz c pn n anul 2015 la 80 de milioane de persoane sunt expuse riscului. Boala este de obicei cronica, de multe ori se deruleaz pe mai muli ani, cu puine semne i simptome severe pn la stadiul avansat unde apere o implicare a sistemului nervos. Musca i ia pranzul hematofag i regurgiteaz saliva coninand forme metacicli ce tripomastigote n tegument (n special n straturile profunde). Parazitul trece apoi (din piele) n tesutul limfatic i de aici va ajunge n final n torentul sangvin i astfel poate infecta n final orice organ i tesut. Ajunge n alte umori (lichid cefalorahidian, limfa) i astfel este vehiculat n ntregul organism. i continu replicarea i determin simptome de ordin general n aceast faz. Pacientul are o stare de ru general, febra intermitent, erupii cutanate nespecifice. n 22

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

final ns, parazitul ajunge s se cantoneze n sistemul nervos central, moment n care debuteaz simptomatologia nervoas. Pacientul poate dezvolt encefalit, modificri temperamentale, neurologice i chiar com. Dac boala nu este tratat prompt i agresiv, se poate instala decesul rapid al pacientului. Parazitul este capabil s scape de sistemul imun al gazdei deoarece poate s i modifice permanent antigenele de la suprafaa i astfel organismul nu il poate detecta n umori i tesuturi. Aceasta capacitate special i sporete virulena. n cadrul fazei cnd microorganismul se afl n snge, cele mai afectate sisteme sunt cel cardiac, circulator (sangvin i limfatic) i nervos central. Boala se poate manifesta oricnd, n funcie de perioada de infectare. Dac transmiterea a fost congenitala, copiii au retard psihomotor i tulburri convulsive. T. b. gambiense este sensibil la tratamentul cu pentamidin (stadiu incipient) i eflornitin (stadiul tardiv), medicamente care sunt frecvent ineficiente mpotriva acestuia, dei motivele care stau la baza biochimice pentru aceste diferene nu sunt cunoscute. Terapii combinate mpotriva bolii au efectuat ncurajator, dar puine medicamente sunt disponibile. Tratamentul pacienilor trebuie iniiat ct mai rapid dup ce diagnosticul de certitudine a fost pus i nu mai exist dubii n privina infeciei cu acest parazit. Schemele terapeutice depind de subspecia care a determinat infecia precum i de etapa n care a fost surprins pacientul. Spitalizarea este obligatorie, nu se poate face tratament ambulator. Specialistii au demonstrat ca tratamentul combinat este mult mai eficient compa rativ cu monoterapiile, astfel ncat n acest moment se prefer asocierile de medicamente.

Fig.13. Parazitul Trypanosoma brucei gambiense

23

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

Trypanosoma brucei rhodesiense este rspndit n Africa de Est unde produce boala numit tripanosomiaza african de est. Gazda intermediar i vectorului acestei boli este o alt specie de musc e-e (Glossina morsitans). Speciile de antilope care triesc n savan i n pdurile din Africa Central i de Est, tolereaz tripanosomele, astfel ele devin rezervorul principal al parazitului. Pot fi infectate i bovinele, dar n general acestea mor din cauza parazitului. Oamenii se infecteaz cu T. b. rhodesiense numai accidental, deoarece cea mai mare parte a riscului l reprezint posibilitatea contactului cu musca ee, musc care se hrnete cu sngele animalelor slbatice. Boala produs de acest parazit este un pericol de natura ocupaional pentru persoanele care lucreaz n zonele cu animale i vectori infectani, n plus, rareori apar infecii cu trypanosoma la vizitatorii din parcurile slbatice din Africa de Est. Doar n cazuri rare trasmiterea se face vertical, de la mama la ft sau prin transfuzii cu sange contaminat. Ocazional musca lasa la locul nepturii un sancru de inoculare (apare ca o zona roie, edematiata, pruriginoas ). La cteva sptmni dup ce bolnavul a fost infectat prin neptura mutei, apare febr, frisoane, edeme, inflamarea ganglionilor limfatici i mncrimi de piele, cu erupii cutanate (exantem). Faza urmtoare care apare dup cteva luni, se manifest prin tulburri nervoase, ca gre utate de orientare, pierderi de cunotin, insomnie i crampe. n faza final stare de somnolen de unde vine i numele bolii.

Fig.14 Reprezentare schematic a parazitul Trypanosoma brucei rhodesiense

Diagnosticul se poate pune uor prin descoperirea n snge la microscop a parazitului care paraziteaz hematiile, sau se mai poate depista boala prin reacii serologice. Medicamentele utilizate n mod tradiional pentru tratamentul tripanosomiazei 24

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

africane sunt suramina, pentamidina i compusii organici cu arseniu. Recent, la aceasta list sa adaugat i eflornitina (difluorometilornitina), pentru tratamentul tripanosomiazei vest africane. Medicamentele sunt recomandate a fi adminsitrate cu precauie pacienilor cu afeciuni renale, cardiace i hepatice grave. Suramina poate determina apariia unor reacii adverse de tipul hiperesteziilor palmare i plantare, nevritei, pancitopeniei sau chiar atrofiei de nerv optic, n timp ce melarsoprolul poate cauza encefalopatie la 20% dintre pacienti. Riscul de apariie a encefalopatiei este sczut dac se administreaz anterior prednisolon. Dup ce au fost tratai de tripanosomiaza african, pacienii trebuie investigai periodic timp de 2 ani, pentru ca medicul s fie absolut sigur ca pacientul este n afara pericolului. Tratamentul tripanosomiazei africane trebuie individualizat n funcie de germenul infectant (T. b. gambiense sau T. b. rhodesiense), prezena sau absena bolii n SNC, reaciile adverse i rezistena medicamentoas.

Fig.15. Glossina morsitans, gazd vector n ciclul de via al parazitului Trypanosoma brucei rhodesiense

n prezent nu exist un vaccin sau medicaie preventi specific. Specialitii recomand turistilor s evite zonele endemice, s poarte haine mai groase i n culori neutre, deoarece musca este atras de culorile nchise i poate nepa chiar dac persoana este mbracat cu haine subiri.

25

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

Trypanosoma cruzi produce boala Chagas, boala este strns asociat cu malnutriia, tuberculoza i cu srcia. n ciclul biologic al acestei boli intr ca gazde intermediare specii de insecte din genul Triatoma, Rhodinius. Boala este mai frecvent n comunitile srace, rurale din rile Americii latine. Turitii pot s se infecteze cu acest parazit i astfel pot s apar cazuri izolate i n rile europene. Ciclul de viaa al parazitului este foarte complex i implic trecerea prin stadii succesive, pn cnd se dezvolt forma matur. Gazda vine n contact cu dejectele vecto rului ce conine forma tripomastigot, infectant. Dejectele conin i substane cu aciune

pruriginoas care stimuleaz gazda s se scarpine, producnd leziuni i astfel omul se contamineaz cu parazitul. La rndul su, vectorul se infecteaz de la om sau de la animalele contaminate. Modificrile parazitului se produc n intestinul vectorului, acesta trecnd prin stadiul de amastigot, epimastigot i n final apar tripanosome metaciclice infectante. Aceste stadii de evoluie dureaz aproximativ 10 zile.

Fig.16 Ciclul de via al parazitului Trypanosoma cruzi

Agentul etiologic al bolii Chagas, protozoarul Tripanosoma cruzi, prezint multe asemanri cu omologii si africani, dar are dimensiuni mai reduse sau flagelul sau este situat n partea anterioar a nucleului central. n plus, acesta nu se multiplic n snge, ci n esuturile diferitelor organe interne, dar pentru a ajunge acolo, el sufer o serie de 26

FARMACIE AN II - BIOLOGIE ANIMAL LUCRARI PRACTICE

transformari evolutive, determinate de ciclurile distincte de via n cele 2 gazde pe care le paraziteaz: artropodele vectoare din genul Triatoma, familia Triatomidae, care joac un rol intermediar n procesul transformrii parazi ilor din formele amastigote n cele tripomastigote infectante i omul care, dup contaminarea cutanat sau mucosala cu dejec iile insectelor vectoare Rhodnius prolixus sau Panstrongilus megistus, devin gazda sa definitiv, favorizand transformarea invers (din forme tripomastigote n cele amastigote) a parazitului care se localizeaz astfel n cord sau n organele cavitare, unde se multiplic continuu pn ce produce megalia i n final distrugerea acestora. Principalul rezervor al acestor parazii l constuie animalele slbatice dar i cele domestice, care transmit tripanosomiaza n dou forme clinice distincte: acuta i cronic. Deocamdat nu se cunoate cu exactitate care sunt particularitile ce determin evoluia simptomatic, acut fulminant sau cronic a bolii. Unii pacieni rmn toat viaa n stadiul de purttori, fr s dezvolte simptome, n timp ce alii au afeciuni grave de natur gastrointestinal, cardiac i neurologic. Pe lng infectarea direct, boala Chagas poate fi transmis prin transplant de organe, transfuzii de snge contaminat, alptare i chiar direct materno-fetal. Infecia intrauterin poate determina avorturi spontane (aproximativ 13% din avorturile din Brazilia au aceasta cauz) sau nateri premature. n prezent sunt disponibile dou medicamente pentru tratamentul bolii Chagas: benznidazol i nifurtimox. Efectul lor este totui limitat n vindecarea bolii, mai ales la pacienii cu infecie cronic. De aceea, administrarea acestor medicamente la bolnavii cronici este nc foarte intens dezbtut i rmne controversat. n Africa, tripanosomiazele reprezint probleme complexe de sntate public i epizootice. S-au realizat progrese considerabile n anumite regiuni prin intermediul programelor de control axate pe eradicarea vectorilor i tratamentul medicamentos al persoanelor infectate, dar nu exist un consens privind cele mai bune modaliti de rezolvare a problemei n ansamblu. Oamenii pot reduce riscul mbolnvirii cu tripanosomiaza prin evitarea regiunilor despre care se cunoate c adpostesc insecte infectate, prin folosirea vesmintelor protectoare i prin folosirea substanelor care alung insectele. Nu este recomandat chimioprofilaxia, iar pentru prevenirea transmiterii paraziilor nu este disponibil nici un vaccin.

27