Membrana plasmatic

Grosime - 7-10 nm. ME- structur trilaminar proteine, glucide i lipide, nu conine steroli Singer i Nicolson - modelul mozaicului fluid
structuri bidimensionale de proteine globulare i lipide, cu distribuie orientat, stabilizate de moleculele de ap legate prin puni intermoleculare de H, formnd o structur de reea.

Proteine periferice i integrate

Lipidele membranei externe

Lipidele- esteri ai acizilor grai cu glicerolul. Fosfolipidele (fosfogliceride) molecule amfipatice polare
cap polar (glicerolul) legat cu cozile nepolare ale acizilor grai

Rol- reglarea fluiditatii membranei, permeabilitate selectiva La Archaea - structur electrono-optic trilaminar, glicerol-dieteri i digliceroltetraeteri

Funciile membranei plasmatice

Membrana plasmatic este bariera major structural i de permeabilitate ntre mediul celular i cel extern.
mpiedic difuzia liber a componentelor citoplasmatice. Permeabilitatea foarte selectiv este asigurat de asimetria sa funcional: este mai permeabil pe faa intern, ceea ce asigur meninerea constanei mediului intern fa de cel extern, foarte variabil.

Membrana este sediul sinergonului respirator i al sinergonului fotosintetizant.

Membrana este implicat n sinteza i eliminarea exoenzimelor, iar la bacteriile patogene, n sinteza si eliminarea unor substane toxice (exotoxine). Membrana este sediul structural al sarcinii electrice i energetice: protonii (H+) i ionii OH- sunt distribuii separat pe cele 2 fee = for proton-motrice utilizat pentru transport, mobilitate flagelar i biosinteza ATP. Membrana este sediul proteinelor cu rol de chemoreceptori, de enzime ale sistemului ATP-azic, care asigur modelarea peretelui celular (murein-hidrolaze i murein-sintetaze), de transport, proteine enzime ce realizeaz turnover-ul lipidelor i proteinelor membranare.

Mecanismele fiziologice ale permeabilitii membranei

Difuzia pasiv
fr consum de energie; gradientul de concentraie lenta i nespecifica moleculei. moleculele de ap, O2, CO2 (molecule mai mici de 0,8 nm), moleculele liposolubile.

Mecanismele de transfer cu molecul purttor

difuzia facilitat translocaia de grup transportul activ

Aparatul fotosintetic
structur accesorie bacteriile fotosintetizante structuri membranare i particulate form tubular, vezicular sau lamelar -sinergon fotosintetic.

bacterii verzi (Chlorobiaceae) bacterii purpurii (Chromatiaceae Rhodospirillaceae) (roii) i

Cianobacterii- de saci membranaricorpi tilacoizi (tilacos, grec = pung). ficobilisomi

Mezosomul
Mezosomul - structur derivat din membran plasmalemasom asociati cu : replicarea cromosomului i cu distribuia celor doi cromosomi n celulele surori; procesul de sporulare sediul sinergonului respirator (adic la nivelul su se desfoar procese energetice celulare), mezosomul este considerat echivalentul structural i funcional al mitocondriei; echivalentul funcional al lizosomului, deoarece la nivelul su se gsesc enzime cu rol degradativ; este asociat cu funciile secretorii ale celulei. trei tipuri morfologice : tubulari, veziculari i lamelari.

Citoplasma celulei bacteriene

Sistem coloidal complex format din proteine, glucide, ap i substane minerale. Concentraia mare a substanelor dizolvate organice i anorganice. coacervare, de emulsie i de soluie- gel fluid. Moleculele de ap.
apa liber; apa legat (de hidratare).

La celulele bacteriene tinere, aflate n faza logaritmic de cretere, citoplasma este fin granular, intens bazofil, datorit coninutului ridicat de acizi nucleici, este dens i omogen. ARN citoplasmatic este reprezentat de ARNr (80%), ARNt (l0-20%) i ARNm (2%). EFTu (Elongation Factor Termo-unstable)-5% din totalul proteinelor. In citoplasma celulelor mbtrnite apar materiale de incluzie i vacuole. Aspectul devine granular neomogen, iar bazofilia diminu datorit scderii pn la 0 a ratei sintezei ARN, precum i datorit reducerii treptate a cantitii existente. Afinitatea pentru coloranii bazici este neuniform.

Nucleoidul bacterian
Aparatul genetic bacterian = nucleoid, material nuclear, nucleoplasm, echivalent nuclear Cromosom si plasmidele. Determinanii genetici = gene eseniale (eucromosomale) i genele accesorii

Genomul E. coli K12 ~ 4400 de gene. nucleul bacterian - form primitiv de organizare, lipsit de membran, inclavat direct n citoplasm. lipsa membranei delimitante fundamental pentru organizarea celular de tip procariot. Pe micrografiile electrono-optice, contrast invers n raport cu celula eucariot, care se datoreaz att faptului ca ADN nu este asociat cu proteine, ct i densitii foarte mari a citoplasmei bacteriene. Pe seciuni ultrafine, zona materialului nuclear este ocupat de fibrile fine, cu diametrul de 2,5 nm, uneori aranjate n iruri ondulate, paralele,sensibile la hidroliza cu DN-az. Corpuscul dens i compact- starea mpachetata a cromosomului. Dup tratamentul moderat cu RN-az i proteaze, din structura compact se izoleaz molecula de ADN sub forma cromosomului circular nchis covalent (60%), ARNm , ARNt (30%) i ARN-polimeraza (l0%). Cromosomul are o lungime de l400 m i diametrul de 2,5 nm, corespunztor diametrului moleculei de ADN dublu catenar. Cromosomul bacterian este cea mai mare molecul biologic. Prin lungimea sa (l400 m), molecula de ADN cromosomal depete de circa l000 de ori lungimea celulei bacteriene. Raportat la dimensiunile mici ale unei bacterii, molecula de ADN este supus constrngerilor topologice* de supraspiralizare (suprarsucire), prin care este mpachetat pentru a forma un corp compact de l500 de ori mai mic.

Spiralizarea moleculei de ADN bacterian

Spiralizarea primar a dublului helix are sens pozitiv (de dreapta), cu 10,4 pb/tur. Spiralizarea secundar (supraspiralizarea) are sens negativ (de stnga) ADN bacterian este, n mod normal, supraspiralizat negativ, cu o spiral negativ la fiecare circa 200 pb. Cromosomul bacterian const =bucle supraspiralizate, aranjate pe o regiune central, rezultnd o structur compact i organizat - nucleoidul. Formarea suprahelicei i relaxarea ei -ADN-topoizomeraze. Topoizomerazele de tip 1 acioneaz prin recunoaterea unui segment de ADN, parial despiralizat, prin incizia unei catene. Topoizomerazele de tip II se leag covalent, simultan, de cele dou catene ale dublei helice i produc o rupere bicatenar tranzitorie Unele topoizomeraze sunt helicaze sau giraze (produc spiralizarea moleculei de ADN), iar altele sunt derulaze (produc despiralizarea prin incizia unei catene i bucla se relaxeaz). ADN-giraza (topoizomeraza II) - 4 subuniti (identice 2 cte 2), care utilizeaz energia rezultat prin hidroliza ATP. Este esenial pentru mai multe procese vitale: iniierea, alungirea i terminarea replicrii ADN, transcrierea unor operoni, repararea ADN, recombinarea i transpoziia.

Replicarea cromosomului bacterian

Transcrierea

Plasmidele
l. Plasmide conjugative (transmisibile sau infecioase)- factori de sex, confer celulei purttoare de plasmid, proprietatea de donor de material genetic (celula mascul), n raport cu o celul care nu posed o astfel de plasmid i care se comport ca receptor (celul femel). conjugoni, factori de fertilitate sau transferoni. Plasmidele de sex (F, F, Hfr), plasmidele Ent, unele plasmide Col i unele plasmide R. Plasmidele conjugative au cel puin 30 kbp. 2. Plasmidele neconjugative
nele plasmide Col i R.

Dup criteriul capacitii lor de a se integra n cromosomul celulei, se disting dou categorii de plasmide. l. Plasmidele episomale (episom = corp adugat) sau integrative
plasmidele F i Col E1..

2. Plasmidele neintegrative - persist indefinit numai n stare autonom.

Configuraii diferite ale ADN plasmidial. a. Plasmid circular cu o caten incizat. b, c. Plasmide covalent nchise superhelicale. d. Plasmide concatenate.

Replicarea plasmidelor

70 S 30 S (21 proteine S1-S21) 50 S (34 proteine L1-L34)

Ribosomii

Rolul ribosomilor in sinteza proteica

Sporul bacterian
Forma primitiv de difereniere celular Bacterii cilindrice: g. Clostridium i la actinobacterii, g. Bacillus (fig. 28), excepional la coci (Sporosarcina). Toate bacteriile sporulate sunt Gram pozitive. Sporularea este condiionat de existena unui perete mureinic gros. l0 tipuri de spori:
endospor actinobacterii : artrospori (prin segmentare), oidiospori (prin fragmentare), aleuriospori (se formeaz apical sau lateral pe sporofori scuri), zoospori (spori mobili), aplanospori se formeaz Azotobacter: chiti.

Endosporul sau sporul endogen a fost considerat ca unic tip sporal bacterian, pn la descrierea celorlalte tipuri. Are form sferic sau ovalar. Cei ovalari au dimensiuni cuprinse ntre 0,5 1 m, pentru axul scurt i 1,2 2 m pentru axul lung. Poziia sporului n celul:
terminal, subterminal sau central deformani (diametrul lor este mai mare dect al celulei) i nedeformani (diametrul este mai mic dect al celulei).

Intr-o celul bacterian sporulant, sporul este unic, cu rare excepii: n sol apar bacterii bisporulate, iar n intestinul unor vertebrate aquatice, s-au evideniat bacterii polisporulate. Sporogeneza - declanat de lipsa unui nutrient esenial n mediu (sursa de azot sau de carbon). activarea >50 de gene sporale, modificri majore ale componentelor moleculare, sinteza de proteaze care mresc turnover-ul proteic

Structura interna a endosporului

Sporul este alctuit din protoplastul sporal, care conine sporoplasma i materialul nuclear Protoplastul sporal:
un perete intern subire, originar din membrana intern a presporului. cortexul sporal, cu grosime variabil, electronoclar.
stratul extern al cortexului, derivat din membrana extern a presporului; nveliul sporal intern (intina) nveliul sporal extern (exina) exosporul, un rest al celulei vegetative, uneori adiacent de celelalte nveliuri sporale, prin intermediul filamentelor suspensoare.

nveliurile sporale - natur proteic, cu o fracie de polipeptide acide solubile n baze, n nveliul intern i o fracie rezistent la baze, datorat legturilor S-S.
structuri suplimentare - apendice sporale.

Ionii de Ca sunt legai cu o cantitate echivalent de acid dipicolinic (se formeaz din acidul diaminopimelic un precursor al peptidoglicanului) i formeaz dipicolinatul
circa l5% din greutatea uscat a sporului.

Etapele de formare a endosporului

Germinarea este procesul ireversibil n care sporul se activeaz de la starea dormind, la o stare metabolic activ, ntr-un interval scurt. Semnificaia biologic a procesului de sporogenez form primitiv de difereniere celular i este o modalitate de adaptare a celulei bacteriene la condiiile nefavorabile de mediu, prin criptobioz. Endosporul este o structur de conservare a viabilitii celulelor dotate cu aceast capacitate de difereniere. Nu este o form de multiplicare, exceptnd cazurile rare ale bacteriilor bi- sau polisporulate. Sporogeneza este asociat, la B. subtilis, cu producerea unor enzime proteolitice, iar la B. thuringiensis, cu producerea cristalelor proteice parasporale. Endosporul are o longevitate excepional: mii sau chiar sute de mii de ani. Sporii din rocile perioadei quaternare au germinat pe medii nutritive, in vitro. Formarea sporilor de multiplicare la actinobacterii
Sporularea prin fragmentare - Actinomyces, Nocardia etc. Sporularea prin segmentare - Streptomyces coelicolor. Sporii multipli ai actinomicetelor au rol n diseminarea acestor organisme n mediu. Au nveliuri sporale mai simple i sunt mai puin rezisteni, comparativ cu endosporul. Sporularea, la actinobacterii este asociat cu producerea substanelor antibiotice.

Vacuolele cu gaz (aerosomii)

Structuri refringente cu aspect ovalar, ce se gsesc la bacteriile fotosintetzante imobile din mediile aquatice Structuri compuse, compartimentate Aspect striat (cu nervuri):
a) proteina majora (A) b)proteina minora (C)

Vacuola cu gaz este liber-permeabil pentru gaze i nu se deformeaz sub presiunea lor. Semnificaie funcional
corpi de flotaie. compartimentarea vacuolei permite eliminarea fracionat a aerului i n consecin, reglarea poziiei celulei pe vertical, n funcie de condiiile de mediu ecranarea radiaiei UV

Incluziile
Definitie structuri inerte, apar la sfritul fazei de cretere logaritmic. 3 tipuri :
polimeri organici: polizaharidici (amidon, glicogen), incluzii de poli -hidroxibutirat (PHB) conin lipide (2%) i proteine, polimeri de natur proteic (incluzia parasporal la B. thuringiensis); polimeri anorganici (polimetafosfat denumite incluzii de volutin); incluzii anorganice simple (de sulf coloidal, CaCO3).

Dupa structura:

incluzii delimitate de membrane - poli--hidroxibutirat

structur lamelar concentric,

incluzii lipsite de membrane (de glicogen, de sulf, incluzia proteic parasporal).

La microscopul optic - aspect granular cu form neregulat, refringente, cu dimensiuni de 50-100 nm

Natura chimic
incluziile de amidon (poliglucozid neramificat) se coloreaz n albastru cu soluia Lugol glicogenul (poliglucozid ramificat) se coloreaz brun incluziile de PHB se coloreaz cu negru de Sudan incluziile proteice se coloreaz cu amido-schwarz polimetafosfat sunt metacromatice, pentru c dup colorare cu albastru de metilen, dobndesc culoarea roie

Semnificaie biologic.
Depozitarea de cantiti mari de materiale de rezerv. Modalitate de pstrare a echilibrului osmotic ntre celul i mediu

Incluzii bacteriene. a. Formula structural a glicogenului (molecule de glucoz legate -1,4, cu ramificaii -1,6. b. Polifosfatul. c. Acidul poli--hidroxibutiric. d. Imaginea electrono-optica a celulei de Azotobacter cu incluzii de poli--hidroxibutirat. e. Imaginea electrono-optic a incluziei proteice parasporale la Bacillus thuringiensis (original).

Glicocalix
totalitatea structurilor polizaharidice glicocalixul comportamental extraparietale: capsula si Capsula -structur accesorie, cu o consisten gelatinoas, vscoas, care acoper complet celula bacterian microcapsula macrocapsula stratul mucos zoogleea Natura chimic a materialului capsular natur polizaharidic (D-glucoza, D-fructoza, D-galactoza). homopolizaharid dextranii si levanii. heteropolizaharid numr variat de uniti diferite: glucoz, fructoz, galactoz, manoz, acid galacturonic, derivai aminai si acetilai ai acestora. Semnificaie biologic. Capsula este o structur inert, accesorie ce nu face parte integrant din celula bacterian. Cel mai adesea nu ndeplinete o funcie esenial pentru celul. Semnificatia biologica Bacteriile patogene capsulate sunt virulente, deoarece capsula este un material chimiotactic negativ pentru fagocite. Materialul capsular este higroscopic (reine apa) i astfel protejeaz celula de desicaie. Materialul capsular ar putea avea rolul de depozit al unor nutrieni din mediu. Glicocalixul comportamental reea de filamente polizaharidice i glicoproteice, legate de LPS ale membranei externe la bacteriile Gram negative sau de mureina celor Gram pozitive. Filamentele formeaz o structur pericelular dezordonat, Glicocalixul - bacteriile care triesc n mediile naturale, avnd un caracter adaptativ= glicocalix comportamental