Metode spectrofotometrice de

determinare a seleniului
I
Principiul metodei: Metoda utilizeaz albastru variamin ca agent cromogen. Metoda
se bazeaz pe reacia seleniului cu iodura de potasiu n mediu acid pentru a elibera iod, care
va oxida albastrul variamin obinndu-se un compus violet colorat cu un maxim de absorbie
la 546 nm.

Reactani:
-

Albastru variamin (0,05%). Se prepar prin dizolvarea a 50 mg de Albastru

variamin (E. Merck, Germania) n 25 ml letanol i adus la 100 ml cu ap distliat.
Se stocheaz n sticle de chihlimbar.
Urmtorii reactani au fost preparai prin dizolvarea unor cantiti adecvate de
reactant n ap distilat: idur de potasiu (2%), acid clorhidric (2 M), acetat de
sodiu trihidratat (1 M), EDTA (0,2 M i 5%), acid sulfuric (0,5 M), hidroxid de
sodiu (1 M i 10%)

Metoda a fost folosit cu succes pentru a determina seleniul n probe de ap, sold,
plante, pr uman i proble sintetice de cosmetice i preparate farmaceutice.
Procedur: Peste proba de analizat (10 ml) se adaug 1 ml 2% iodur de potasiu i 1
ml HCl. Amestecul este uor agitat pn la apariia unei culori glbui, ce indic eliberarea
idoului. Dup aceasta, se adaug 0,5 ml de VB. Coninutul a fost diluat cu ap distilat i
amestecat bine. Se va msura absorbana soluiei colorate la 546 nm, avnd ca martor
reactivul corespunztor fr prob.

II

Principiul metodei: Metoda se bazeaz pe efectul catalitic de reduce a albastrului de

metilen de ctre sulfura de sodiu. n aceast reducere culoarea albastrului de metilen (MB)
este albastr, dup ce este reduc de ctre sulfura de sodiu, albastrul de metilen se protoneaz,
obinndu-se HMB, care este incolor:
+S
2+ 2 H 2 O 2 HMB+2 H O
2 MB+ S

n prezena unui exces de sulfur, sulful se va combina cu ionii sulfur, obinnd

polisulfuri:
2
SS
2

S +S
n mod similar, cnd seleniu se combin cu ionii suflur se obin selenosulfuri:
2
SSe
2
Se+ S
Apoi selenosulfurile reacionez cu albastrul de metilen ntr-un mod foarte similar cu
cel al ionilor sulfur:
+ S+ Se

2+ 2 H 2 O 2 HMB+2 H O
SSe
2 MB+
Cu toate acestea ionul selenosulfur reacioneaz mai repede cu albastrul de metilen
dect ionul sulfur i seleniul este generat la sfritul reaciei. Maximul de absorbie este la
668 nm.
Reactani:
- Formaldehid (37%) cumprat de la BDH (Poole, Anglia).
- Soluia de albastru de metilen a fost preparat prin dizolvarea a 0,05 g de albastru de metilen
(Merck, Germania) n ap deionizat, apoi adus la 100 de ml.

- Soluia de sulfur de sodiu a fost preparat prin dizolvarea a 5,04 g de Na2S9H2O, 4,80 g
Na2SO3 i 1,60 g NaOH n ap, aduse apoi la 100 ml.
- Conditioner solution a fost preparat prin dizolvarea a 0,69 g EDTA, 0,0145 g FeCl3 i a
OH C H 2C H 2 3 N
1,25 ml trietanolamin [
] n ap deionizat. Soluia fiind diluat

ulterior la 250 ml.

Procedur: Se adaug 6,5 ml prob, 1 ml formaldehid, 2.5 ml conditioner solution i
un ml de albastru de metilen ntr-un agitator. Se nregistreaz absorbana la 668 nm versus
timp.

III

Principiul metodei: Metoda utilizeaz 3,3-diamino-benzidin hydrocloride se bazeaz pe

formarea unui compus stabil galben prin reacia cu Seleniu(IV), care este apoi extras n toluen
i msurat la 420 nm.
Reactani:
- 3,3-diamino-benzidin hydrocloride (DABH) (Sigma Chemical Co.) a fost preparat
dizolvnd 0,25 g n 50 ml aceton i pstrat ntr-un recipient de culoarea chilimbarului,
soluia nu trebuie folosit la 8 ore dup prepararea ei;
Procedur: 0,5 ml de DABH este adugat peste prob i nclzit la 70oC pentru 20 de min.
Amestecul este apo rcit, PH-ul se ajusteaz la 81 folosind soluie amoniacal concentrat.
Complexul colorat este apoi extras n Toluen. Absorbana a fost msurat la 420 nm, martorul
fiind preparat n aceeai manier doar c se folosete ap distilat n loc de prob.

IV
Principiul metodei: Metoda folosete tionin (TN), bazndu-se pe reacia Seleniului(IV) cu
iodura de potasiu n mediu acid pentru a elibera iod elementar. Iodul eliberat albete culoarea
violet a tioninei, urmnd s fie msurat la 600 nm.
Reactani:
-

Tionina (0,01%) a fost preparat prin dizolvarea Tioninei (Eastman Kodak, Cl

52000; 10 mg) n ap ce conine acid clorhidric (2 mol/L). Soluia este stabil
pentru 30 de zile

Procedur: Se adaug 1 ml soluie iodur de potasiu (2%), acid clorhidric 2 mol/L peste
prob. Se amestec i se adaug TN 0,1% (0,5 mL), proba se agitat timp de 2 minute.
Absorbana soluiei obinute se msoar la 600 nm.