Carvacrol

Carvacrol
Nume Iupac

Figura 1

5-izoproplil-2-metilfenol
2-Metil-5-(1-metiletil)-fenol
Formula chimica: C10H14O
Masa molara: 150,217 g/mol
Densitate: 0,9772 g/cm3 la 20 C
Punct de topire: 1 C (34 F; 274 K)
Punct de fierbere: 237,7 C (459.9 F; 510,8 K)
Solubilitate: Insolubil in apa;
Solubil n:etanol, dietil eter, tetraclorura de
carbon,aceton. [1]

Carvacrolul este un fenol monoterpenoid.

Fenolii sunt derivai ai fenolului, compui n care grupa funcional -OH este legat de
un atom de carbon aparinnd unui nucleu aromatic.
Terpenele sunt unele dintre cele mai rspndite produse naturale, avnd multe funcii
diferite n organismul animalelor i al plantelor, iar pentru alimente ei sunt importani ca i
componeni de arom. De exemplu, aromele de lmie, scorioar i multe alte mirodenii
sunt caracterizate de ctre terpene. Terpenele obinuite sunt limonenul i citralul (ambele n
lmi), camforul i pinenul (pin), eugenol (usturoi), anetol (chimen dulce,
anason), thimol (cimbru, oregano),carvacrolul (oregano si cimbru), geraniol (trandafiri)
i mentol.Monoterpene sunt o clas de terpene care constau din dou uniti de izopren i au
formula molecular C10H16 . Monoterpenele pot fi liniare ( aciclice ) sau sa conina inele
(ciclice).Carvacrolul este o monoterpena ciclica la fel ca limonenul,timolul, mentolul.[2]
Carvacrol este prezent n uleiul esenial de Origanum vulgare (oregano)-75%, ulei de
cimbru, ulei obinut din Lepidium Sativum i bergamot slbatica. Uleiul esential extras din
subspeciile cimbrului conine ntre 5% i 75% din carvacrol, n timp ce subspeciile Satureja
au un coninut ntre 1% i 45%. Origanum Majorana (maghiranul) i Dittany din Creta sunt
bogate n carvacrol, 50% respectiv-60-80%.De asemenea este gasit in tequila, ment si
chimion. [3]

Carvacrolul, un compus regsit n oregano, o plant aromatic mediteranean utilizat

pentru condimentarea diferitelor alimente, este eficient pentru combaterea norovirusului, care
constituie una dintre cele mai comune cauze pentru infecii gastrointestinale nsoite de grea
i vrsturi. Carvacrol inhib creterea ctorva tulpini de bacterii, de exemplu Escherichia
coli i Bacillus cereus. Toxicitatea redus, mpreun cu gustul su plcut i mirosul sugereaz
utilizarea sa ca aditiv alimentar pentru a preveni contaminarea bacterian. n Pseudomonas
aeruginosa provoaca daune asupra membranei celulelor acestor bacterii si, spre deosebire de
alte terpene, inhib proliferarea lor. Cauza proprietilor antimicrobiene este considerata a fi
perturbarea membranei bacteriilor .
Potrivit dailymail.co.uk, aceast substan chimic regsit n oregano, dar i
n cimbru, dezarmeaz virusul de nveliul su protector, o protein extern rezistent,
fcndu-l astfel mai vulnerabil i mai uor de distrus.
"Carvacrolul ar putea fi utilizat ca dezinfectant al alimentelor i, posibil, ca
dezinfectant al suprafeelor, mai ales n combinaie cu ali ageni antimicrobieni", a declarat
Kelly Bright, coordonatoarea studiului, efectuat de cercettorii americani de la Universitatea
Arizona.
Norovirusul cauzeaz toxinfecii alimentare i constituie o problem mai ales n
sanatorii, spitale, vase de croazier i coli. Dei cu simptome neplcute, cum ar fi durerile
abdominale, greaa i vrsturile, infecia trece de la sine, de obicei n cteva zile, dar se poate
dovedi periculoas pentru copii, persoane n vrst sau care au probleme de sntate.
Potrivit rezultatelor experimentelor, carvacrolul acioneaz direct asupra capsidei, nveliul
rezistent de proteine din jurul virusului, care protejeaz materialul genetic al acestuia.
Deoarece carvacrolul atac elementele externe ale norovirusului, este puin probabil c
va declana dezvoltarea rezistenei, consider oamenii de tiin.
Carvacrolul are proprieti bacteriostatice i bactericide, acionnd nu numai mpotriva
norovirusurilor, ci i a bacteriilor precum Salmonella typhimurium, Escherichia coli
i Staphylococcus aureus.

Pe de alt parte, cercettorii nu recomand consumul de carvacrol sub form de

concentrat, deoarece cauzeaz o senzaie de arsur i amoreal a limbii.Rezultatele cercetrii
au fost publicate n cel mai recent numr al revistei Journal Of Applied Microbiology.

Datorit proprietilor sale carvacrolul este folosit ca si condiment n alimentaie;

intr n compoziia uleiului de oregano si cimbru care se folosesc in scopuri medicinale, i
mai este regasit de asemenea n compoziia anumitor insecticide.[4]
Extractia: MATERIALE I METODE
Reactivi i materiale
Probele de Origanum vulgare Linnaeus au fost colectate de la Rio de
Janeiro - Brazilia ( Rei do Mato agricole ) dupa etapa de inflorire.
Materialul vegetal a fost separat n frunze i ramuri , cernut pentru a
ndeprta murdria si uscat ntr-un cuptor pentru timp de 24 de ore apoi
depozitat n saci de plastic nchii ermetic.
Extractia uleiurilor esentiale:
Hidrodistilarea.
Hidrodistilare convenional a fost realizat cu un aparat de tip Clevenger si folosind
probe de cel puin 10 g de frunze uscate . Experimentele au fost realizate n triplicat timp de 2
ore . Uleiul esenial obinut a fost colectat n fiole ,
deshidratat cu sulfat de sodiu anhidru i pstrat la frigider .
Procedura de extracie Soxhlet
Probele de oregano uscat au fost plasate ntr -un cartu de celuloz i introdus ntr- un
ansamblu Soxhlet echipat cu baloane de 250ml. Diferite proceduri au fost realizate n triplicat
timp de 4-6 ore , folosind etanol i hexan ca solveni . S-au adugat 150 ml din solvent i
ntreg ansamblul a fost meninut intr-un continuu reflux ulterior.
Extractele au fost concentrate utiliznd un evaporator rotativ legat cu o pomp de vid
pentru a ndeprta solventul ,apoi au fost depozitate n sticle de chihlimbar i pstrate la
frigider.
Separarea
3

Separarea carvacrolului din acest amestec se realizeaz prin distilare :separarea

distilatului n fracii cu puncte de fierbere tot mai ridicate i supunerea fraciilor la redistilare
permit o separare mai riguroas a amestecului n componentele sale constituente dect s-ar fi
obinut printr-o singur distilare simpl. Cu ct procesul este repetat de mai multe ori, cu att
separarea este mai bun.
Temperaturile de fierbere:terpineol=219 C; geraniol=230oC; timol=232oC;
carvacrol=237,70C.
Carvacrolul avnd cel mai nalt punct de fierbere v-a fi ultimul extras.
Analizele uleiului esential extras
Cromatografia de gaze
Analizele GC au fost efectuate pe Shimadzu GCMS-QP 2010, cu o coloan
MS DB-5 capilar (30 mx 0,25 mm x0,25 m de reticulat fenil-metil
siloxan) i echipat cu un detector cu ionizare n flacr (FID). Temperatura
coloanei a fost programat la 60-250 C cu o vitez de 5 C / min.
Injectorului i detectorului i-au fost programate temperaturide 260 i 280
C. Heliu a fost folosit ca gaz purttor, debit 1,1 ml / min.

Identificarea componentelor
Toate componentele au fost identificate prin compararea spectrelor
lor de mas cu cele obinute din probe autentice i / sau date spectrale de
mas NIST05. Acestea au fost confirmate i prin compararea indicilor de
retenie (RI), cu date publicate; i date MS cu cele obinute de la
standardele referine autentice (timol i carvacrol, Sigma-Aldrich).

Determinarea coninutului total de fenoli.

Cantitatea de coninut total de fenoli a fost determinat prin metoda FolinCiocalteau, conform Woisky i Salatino (1998), cu unele modificri.
Extracte etanolice (1,5 ml cu dou repetri) la 0,02-0,5mg / ml au fost
introduse n eprubete ce conin 1,5 ml de reactiv Folin-Ciocalteau (SigmaAldrichGermany) diluat n ap (1:10). Dup 8 minute, s-au adugat 1,2 ml
de carbonat de sodiu 4%. Tuburile au fost amestecate i lsate s stea
timp de 2h.Absorbana a fost msurat la 740 nm ntr-un clopot 1105
spectrofotometru.Intr-o msura goal, pentru care proba a fost nlocuit cu
ap, a fost sczut din absorbana la 740 nm. Cuantificarea a fost obinut
4

dintr-o curb de calibrare utiliznd (BHT) ca fenolul etalon (R2= 0,998).

Rezultatele au fost exprimate n mg de BHT / 100 g de prob uscat.
Compoziie (% gr. / gr.) de uleiuri Origanum vulgare L. obinute prin
hidrodistilare i Soxhlet.

Tabel nr.1
Metode de extracie in concentraie (% g / g)
Numele
compusu
lui

RIa

RIb

Hidrodistil
are
(2h)

4terpineol
terpineol
geraniol
timol
carvacrol

1185

1183

1197
1260
1298
1307

8.03

Soxhle
t
Etanol
(4h)
0.40

Soxhle
t
Etanol
(6h)
0.45

Soxhle
t
Hexan
(4h)
0.34

Soxhle
t
Hexan
(6h)
0.31

1190

4.51

1.07

1.88

1.21

1.25

1256
1292
1300

0.60
39.15
0.84

5.84
17.84
0.27

4.35
21.27
0.45

5.70
23.23
0.31

7.35
20.96
0.33

Indicele de retentie Kovats pe coloan DB - 5MS .

Baza de date a indicilor de retenie Kovats pe coloan DB - 5MS . * NIST . ** Novak colab
. ( 2002 )
NIST Chemistry WebBook. National Institute of Standards and Technology
http://webbook.nist.gov/chemistry];
J. Novak, J. Langbehn, F. Panck, M. Chlodwig, C.M. Franzl, Essential oil
compounds in a historical sample of marjoram (Origanum majorana L.,
Lamiaceae), Flav. Fragr. J. 17, 175180 (2002).
b

Figura nr.2
Cromatogram total a ionilor ( obinu prin analiza GC - MS ) din ulei de oregano extras
prin hidrodistilare(2h)
12-timolul
13-carvacrolul.[5]

Sinteza chimic:

Figura nr.3
Sinteza carvacrolului din carvon

Vasul de 50 ml cu fund rotund va fi prins in suportul inelar si plasat in alt vas de 50 ml

care va fi nclzit apoi . Partea robinetului se marcheaz cu "Distilare" si toata compozitia asta
se plaseaza in nia de aerisire la nclzit pe o plita electrica sau un bec de gaz. Cu ajutorul
unei plnii se adauga 2 ml de carvon si 20 ml de H2SO4 de 6M (acid sulfuric foarte
concentrat, purtarea manusilor si cltirea minilor dupa folosire - obligatorie).Instalaia este
conectat la un refringerent cu apa si lasat sa fiarb pana incepe distilarea.Doua pahare
Erlenmeyer se noteaz:cu strat apos si respectiv strat organic.
Dupa 35 minute, sursa de ncalzire se va deconecta, iar mixtura se va rci complet la
temperatura camerei. Tubul de condensare va fi ndepartat, iar un alt tub de sticla va fi
introdus. Se adauga 10 ml de eter de petrol si se amestec, apoi tot amestecul se transfer
ntr-un vas Elenmeyer de 100 ml si se noteaz cu "reactia cruda".
Se asambleaz o palnie de separare.Robinetul separatorului se nchide, iar reactia
crud este adaugat n separator cu ajutorul unei plnii de sticla. Se lasa sedimentarea total a
amestecului. Se indeparteaz plnia de sticla si se acopera cu un dop separatorul. Se agit.
Separatorul se va plasa din nou n suportul su si se va atepta separarea straturilor din
nou, apoi straturile vor fi separate conform vaselor marcate: stratul organic in vasul marcat
"strat organic", iar stratul apos in vasul marcat "strat apos". Pentru a determina care este care,
se vor adauga civa mililitri de eter de petrol: dac acetia sunt miscibili - stratul este organic,
dac se separa - stratul este apos. Dupa separare, stratul apos va fi reintrodus in separator.
Se adauga 10 ml de eter de petrol in separator, se agit si se ateapt separarea
straturilor pentru a doua oar. Stratul organic va fi scurs in "strat organic". Stratul apos va fi
plasat in vasul su.
Straturile organice se intorc n separator, cu adugarea a 20 ml,NaHCO3-5%. Se agit i se
ateapt separarea straturilor. Se transfera straturile in alte pahare curate de 50 ml marcandule: strat organic 2 si strat apos 2. Se adaug 20-50mg de MgSO4 sau Na2SO4 ca agent de
uscare in stratul organic 2 si se amestec pana agentul se misca liber in vas. Se filtreaz
mixtura si se pune filtratul ntr-un nou vas de 50 ml. Acest filtrat conine produsul sintetizat.
Analiza TLC
Se va demara un test TLC a produsului in eter de petrol vs. solutia de inceput. Se va
folosi o placa de silicagel pentru faza stationara si se va determina sistemul de solvent
apropriat:incepand cu hexan: etil acetat-50:50. Polaritatea se va ajusta in asa fel incat valorile
Rf se vor situa intre 0,2 0,8.
7

Izolarea produsului pur si determinarea randamentului n %.

Solventul din mixtura se va evapora ntr-o baie de aburi. Se prinde vasul care conine
carvocrol in eter de petrol ntr-un stativ. Vasul se va plasa parial in baia de apa, iar sursa de
ncalzire se va porni. Cu o bagheta se amestec soluia pn se evapora tot petrolul din
produs. Produsul se va plasa apoi pentru 15-20 minute in vacuum nalt pentru a nltura orice
urma de solvent. Se va raci la temepratura camerei. La 20OC, produsul tinde sa se cristalizeze.
Produsul se va transfera intr-o cutie pre-cntrit, apoi se re-cntrete tot coninutul si se
determin masa, respectiv randamentul in %.
Spectroscopie IR:
Folosind platouri de sare, produsul se va analiza cu scpectroscopia IR (daca produsul
s-a cristalizat, acesta poate fi nclzit puin.Pentru comparare, se vor msura si valorile IR
pentru materialul iniial.Vrfurile majore ale carvacrolului se vor considera importante pentru
a identifica ce tip de legatura cauzeaza aceste vrfuri in spectrometru. La fel se va face si
pentru vrfurile nalte de carvon. Valorile se vor nregistra ntr-un tabel, cu menionarea dac
spectrul obinut corespunde cu cel al carvacrolului.[6]
Biosinteza in planta
Terpene sunt formate din blocuri universale din cinci atomi de carbon , difosfat izopentenil
( IPP ) i izomerul su difosfat dimetilalil ( DMAPP ) , care sunt ambele sintetizate de ctre
metileritritol plastidic pe calea mevalonatului citosolic ( Gershenzon , 1999;
Sapir - Mir i colab ., 2008; Sallaud colab . , 2009 ). DMAPP i IPP sunt topite prin
depreniltransferasa pentru a forma geranil difosfat ( GPP , C10 ), precursorul obinuit al
monoterpenelor.

Figura nr.4 [7]

Figura nr.5 [8]

Bibliografie
1,3:http://en.wikipedia.org/wiki/Carvacrol -accesat la data de 13.05.15,
ora 20:00.
2:http://www.selene.ro/articole/substante_bioactive -accesat la data de 13.05.15,
ora 20:05.
3-4: http://www.descopera.ro/dnews/12077997-beneficiul-nestiut-al-unuicondiment-foarte-raspandit-protejeaza-de-infectii-gastrointestinale-atacandvirusurile-periculoase -accesat la data de 13.05.15, ora 20:15.
4-5: http://www.arpapress.com/Volumes/Vol14Issue2/IJRRAS_14_2_04.pdf
accesat la data de 13.05.15, ora 20:17.
5-6: http://www.organicchem.org/oc1web/exp/carvone/carvonepro.html accesat
la data de 13.05.15, ora 20:20.
6-7: http://www.db-thueringen.de/servlets/DerivateServlet/Derivate23478/Crocoll/Dissertation.pdf accesat la data de 13.05.15, ora 20:25.
8: http://www.mdpi.com/1420-3049/18/7/8200 accesat la data de 13.05.15, ora
20:30.

10