UNIVERSITATEA ,,VASILE ALECSANDRI DIN BACU

FACULTATEA DE INGINERIE
MASTER COSAMIB

Ingineria proceselor de separare

Extracia luteinei din spanac

MASTERAND
Ptracu Cristina

Bacu
- 2014 -

Cuprins
1.Introducere.............................................................................................................................2
2. Materia prim.......................................................................................................................3
3. Luteina...................................................................................................................................6
4. Producia de lutein..............................................................................................................9
5. Concluzii..............................................................................................................................10
6. Bibiografie............................................................................................................................11

1.Introducere
Spanacul, sau altfel spus, Spinacia oleracea, este o plant comestibil cu flori din
familia Amaranthaceae. Asia Central si de S-V este regiunea de origine a spanacului. Cu toii
am auzit povestea cu mnnc spanac ca s faci muschi si dup lungi analize s-a ajuns la
concluzia c exist o doz de adevr n aceste vorbe.
n Nepal se gsesc forme primitive de spanac, acest fapt conducnd la ipoteza c
Nepalul ar fi regiunea unde a fost domesticit spanacul. n afar de subcontinentul Indian,
planta aceasta a fost practic necunoscut lumii antice.
Dup cuceririle timpurii ale musulmanilor, planta a fost dus n noi locuri si a nceput
s fie cultivat. n anul 647 a ajuns n China, adus probabil de persani. n secolul al XI-lea,
spanacul era deja o plant des ntlnit n buctria musulman.
Chaterine de Medici consuma foarte mult spanac, iar acest lucru se intmpla n jurul
celui de-al XVI-lea secol. Cnd a prsit Italia pentru a se cstori cu regele Franei, ea a luat
cantiti mari spanac, precum si buctari care stiau cum s prepare felurile ei preferate de
mncare pe baz de spanac. Aceasta a locuit n Florena, si pornind de la obiceiul ei de a
consuma aceast legum sub diferite forme, orice fel de mncare pregtit pe un pat de spanac
poart denumirea de a la Florentine[1].
Carotenii sau carotenoidele sunt pigmen i neazotai (peste 700) de culoare galben,
portocalie si rosie, larg rspndite att n esuturile vegetale ct si n esuturile animale. Sunt
ntlnite dou clase de pigmeni carotenoidici: clasa hidrocarbonat (carotene) si clasa
oxigenat (xantofile).
Compusii carotenoidici prezenti n regnul vegetal se regsesc n toate organele
plantelor superioare si inferioare, att clorofile ct si neclorofile, precum si n alge, ciuperci si
bacterii.
Carotenoidele sunt recunoscute prin rolul biochimic pe care l ndeplinesc pentru
plante, cum ar fi: n procesul de fotosintez, n respiraie, n fecundaie, n protecia mpotriva
fotooxidrii distructive.
n numr relativ mare, carotenoidele au fost identificate n esuturile fotosintetizante
(frunze, tulpini, muguri etc) si n cele nefotosintetizante (fructe, flori, semine, rdcini, etc)
ale plantelor superioare.
S-a observat, n urma unor cercetri efectuate pe plante, printre care si spanacul, c n
esuturile verzi fotosintetizante se gsesc n mod constant patru carotenoide importante:
luteina (40%), -carotenul (40%), violazantina (18%), neoxantina (12%). Proprietile
chimice ale carotenoidelor sunt marcate de gradul ridicat de nesaturare dar si de gruprile
funcionale grefate pe molecule. Dau reacii de hidrogenare, halogenare, oxidare, esterificare,
deshidratare, condensare. Carotenoidele prezint un miros slab aromat, caracteistic, nu sunt
toxice nici iritante. Marea majoritate avnd punctul de topire cuprins ntre 170-200oC.
Compusii carotenoidici posed un cromofor alctuit din cel puin 8- legturi duble conjugate
C=C.
Carotenoizii i pot pierde o parte a activitii lor, n timpul depozitrii alimentelor,
datorit aciunii enzimelor i a expunerii la lumin si oxigen. Dezhidratarea legumelor si
fructelor poate reduce foarte mult activitatea biologic a carotenoidelor. Pede alt parte,
stabilitatea carotenoidelor creste la alimentele congelate[2].

2. Materia prim
Spanacul este una din legumele dietetice importante, fie consumat dup fierbere n ap
clocotit fie proaspt sau congelat. Acum caiva ani, spanacul proaspt a devenit mai popular.
Spanacul se gseste gata taiat n supermarket si pstrat n filme din polipropilen. Atmosfere
modificate cu concentraii controlate de CO2 i O2 au fost folosite pentru a menine calitatea
spanacului proaspt i retenia de acid ascorbic (AA). Apariia a cel puin 10 glicozide
flavonoidice a fost raportat n spanac. Acestea sunt glucuronide i di - i triglicozide acilate a
metilen si metilendioxiderivateor a flavonilor 6-oxigenai. Totusi, schimbrile care au loc n
aceti compui n timpul depozitrii postrecoltrii i prelucrrii (gtit) nu au mai fost testate i
cuantificate. S-a sugerat c spanacul proaspt tiat se depoziteaz la 0 C; cu toate acestea,
este adesea inut la temperaturi mai mari, mai ales n timpul comercializrii. Izumi et al.
(1997), n studiile anterioare determin efectul benefic a mediului sczut de O2 pe spanac
inut la 10 C timp de 9 zile. Pe msur ce crete consumul de spanac proaspat, este important
s se ia n considerare c prelucrarea (minim de prelucrare sau de gtit) poate afecta
antioxidanii fenolici i coninutul de vitamina C[3].
Produse naturale si pe baz de plante din medicina populara au fost utilizate de secole
n fiecare cultur n ntreaga lume. Oamenii de tiin i profesionitii din domeniul medical
au demonstrat interesul crescut n aceast sfer recunoscnd beneficiile pentru sntate ale
acestor remedii. Spanacul este o legum cu frunze verzi, care a venit iniial din Asia de SudVest i este acum cultivat n cele mai multe pri ale lumii. tiinific este cunoscut ca Spincia
oleracea Linn. Dei spanacul este cel mai adesea folosit ca un produs alimentar, are si valoare
medicinal. Spanacul conine vitamine, precum vitamina C, vitamina A si vitamina E i
minerale precum magneziu, mangan, fier, calciu si acid folic. Spanacul este, de asemenea, o
bun surs de clorofil, fiind cunoscut c ajut digestia. Spanacul este, de asemenea, bogat n
carotenoizi beta-caroten si lutein. Este o surs bun de quercetin bioflavonoidic cu multe alte
flavonoide care prezint proprieti antioxidante, antiproliferative, antiinfamatorii,
antihistaminice, protecie mpotriva radiaiei gamma, proprieti hepatoprotectoare pe lng
multe alte beneficii ale sale. Spanacul este, de asemenea, utilizat pentru prevenirea pierderii
osoase asociate cu osteoporoza si pentru proprietile sale anti-inflamatorii n ameliorarea
durerii artritei. Spanacul este bun pentru inima si sistemul circulator i are proprieti de
stimulare a energiei. Spanacul este cu adevarat unul dintre alimentele cele mai perfecte a
naturii[4].
Profilul spanacului
Spinacia oleracea
Clasificarea stiinific
Regnul: plant
Subspecia: Tracheobionta
Grupul superior: Spermatofit
Grupul: Magnoliofita
Clasa: Magnoliopsida
Subclasa: Cariofilide
Ordinul: Caryophyllales
Familia: Chenopodiaceae
Genul: Spinacia L.
Specia: Spinacia oleracea L.

Descrierea botanic
Tulpina: Se ridic la o nlime de 30-60 cm, rotund, neted, ambiental, suculent,
uneori roiatic.
Frunzele spanacului partea comestibil, hrnitoare, dar i medicinal au peiolul
lung, form de sgeat i oval-alungit, sunt crnoase i au culoarea verde nchis.
Proprietile chimice
Flavonoide: Spanacul este foarte bogat n flavonoide. Numeroase flavonoide au fost
gsite n aceast legum, printre care: quercitin, miricetin, kampeferol, apigenin, luteolin,
patuletin,
spinacetin,
jaceidin,
4-glu-curonida,
5,3,4-trihidroxi-3-metoxi-6:7metilendioxiflavona-4-glucuronid, 5,4-dihidroxi-3,3-dimetoxi-6:7-metilendioxiflavona-4glucuronid, 5,4-dihidroxi-3,3-dimetoxi-6:7-metilendioxiflavona (C18H14O8), 3,5,7, 3,4
pentahidroxi-6-metoxiflavon.
Compui fenolici: Polifenolii izolai din plant sunt acidul para-cumaric, acidul ferulic
i acidul orto-cumaric.
Carotenoide: Spanacul prezint diferii carotenoizi precum luteina, -carotenul,
violaxantina i 9- (Z)-neoxantina.
Vitamine: Spinacia oleracea conine concentrati ridicate de vitamine precum vitamina
A, E, C i K, i, deasemnea acid folic i acid oxalic.
Minerale: Pe lng celelalte componente, spanacul mai conine i minerale ca fierul,
magneziul, manganul, calciu, fosfor, zinc, potasiu i cupru[4].

Figura 1. Spinacia oleracea[4]

Utilizri tradiionale
Planta este dulce, rcoritoare, carminativ, laxativ, alexifarmic; util n bolile de
snge i creier, astm, lepr, biliousness, icter. Acesta a fost folosit n tratamentul calculilor
urinari. n experimente s-a dovedit a avea proprieti hipoglicemice. Frunzele sunt rcoritoare,
emoliente, sntoase, antipiretice, diuretice, maturante, laxative, digestibile, anthelmentice,
util n concreia urinar, n inflamaia plmnilor i intestinelor, n durerea de gt, n dureri ale
articulaiilor, sete, pentru tuse i strnut, pentru ochii inflama i, pentru leucoderm, pentru
stoparea vrsturilor, pentru icter, flatulen. Au fost utilizate n tratamentul unor afeciuni
febrile. Seminele sunt utile n febr, leucoree, boli ale creierului i ale inimii. Seminele sunt
laxative i rcoritoare. Acestea au fost folosite n tratamentul deficienei respiratorii,
inflamaia ficatului i icter. Planta verde este dat calculilor urinari.
De asemenea, spanacul este recomandat celor care se refac dup o boal grea, precum
i n stri de oboseal i epuizare. I se atribuie spanacului i rolul de activator al secreiilor
pancreatice i, mai mult dect att, de agent anticancerigen[5].
Studii recente arat c spanacul este recomandat gravidelor, contribuind la buna
dezvoltare a ftului. Potrivit acelorai studii, spanacul contribuie la fortificarea vaselor de
snge, a inimii i a ochilor.
Datorit faptului c este depurativ (cur organismul de toxine), spanacul se folosete
intens n curele de primvar. Seminele de spanac sunt utile n combaterea constipaiei.
n plus, folosit n uz extern, spanacul sub form de cataplasme sau comprese cu suc
poate ameliora afeciuni ale pielii precum acneea, arsurile, eczemele, pecinginea, plgile
atone i ulcerele de piele[5].
Precauii i contraindicaii
Nu se va consuma de ctre oamenii bolnavi de reumatism, gut, hepatit, pietre la
rinichi sau vezic, inflamaii gastrice sau intestinale sau artrit, deoarece conine acid oxalic,
contraindicat n aceste afeciuni (din cauza oxalailor de potasiu i calciu).
Dac n timpul preparrii frunzele de spanac i schimb culoarea din verde proaspt
n verde spre galben, atunci el devine duntor i nu trebuie consumat[5].
Activitate farmacologic

Protecie mpotriva radiaiilor gama

Activitate antioxidant -studiile au demonstrat pentru prima dat prezena
flavonoidelor i a derivailor acidului p-cumaric precum componentele antioxidante a
extractelor apoase ale frunzelor de spanac.
Activitatea sulfitoxidazei -cloroplastele spanacului posed o activitate de sulfit
oxidaz mpreun cu un consum de oxigen i reducerea fericianidelor. Aceast
activitate este asociat cu tilacoizi i solubilizat de detergeni biologici neionici.
Dependenele pH-ului i temperaturii ale activitii sulfit oxidazei solubilizat de
Triton X-100 din tilacoizii spancului au fost n concordan cu cele ale unei proteine
de membran intrinsec. Aceast activitate izolat a fost insensibil asupra radicalilor
necrofagi (manitol, manoz i fructoz) i catalazei, i a fost inhibat numai cu
concentraii foarte mari de superoxid dismutaz. Astfel, sulfit oxidarea nu a fost indus
prin intermediul sistemului de transport de electroni fotosintetici, dar realizat prin
intermediul unui sistem enzimatic de membran tilacoid prezentnd o activitate a sulfit
5

oxidazei. Parametrii cinetici a sulfit oxidazei tilacoid au fost msurai i comparai cu

cele ale altor sulfit oxidaze.
Activitate hepatoprotectiv
Inhibarea clastogenitii
Activitate cancerigen
Activitate antihelmitic
Inhibarea proliferrii celulelor adenocarcinomului gastric uman

3. Luteina
Luteina (din latin luteus nsemnnd "galben") este o xantofil i una din cele mai
cunoscute 600 carotenoide naturale. Luteina este sintetizat de plante i ca alte xantofile este
gsit n cantiti mari n legumele cu frunze verzi, precum spanacul, varza i morcovii
galbeni. n plantele verzi, xantofilele acioneaz pentru a modula energia luminii i servesc ca
ageni de oprire non-fotochimici pentru a face fa clorofilei triplet (o form excitat de
clorofil), care este supraprodus la niveluri foarte ridicate de lumin, pe timpul
fotosintezei[6].

Figura 2. Luteina[7]
Luteina este obinut de animale n mod direct sau indirect, din plante. Luteina este
aparent folosit de animale ca un antioxidant i pentru absorbia luminii albastre. Luteina se
gsete n glbenuul de ou i grsimi animale. Luteina determin culoarea galben a pielii i
a grsimii puilor, i este utilizat n hrana acestora pentru acest scop. Retina uman
acumuleaz lutein i zeaxantin. Poate servi ca un fotoprotector pentru retin de efectele
duntoare ale radicalilor liberi, produi de lumin albastr.
Principalul stereoizomer natural al luteinei este (3R, 3R, 6R)-beta, epsilon-caroten3,3-diol. Luteina este o molecul lipofilic i este, n general, insolubil n ap. Prezena
cromoforului lung a legturii duble conjugate (lanul polienic) ofer proprieti distinctive a
luminii de absorbie. Lanul polienic este sensibil la degradarea oxidativ de lumin sau de
cldur i este instabil chimic n acizi.
Luteina este prezent n plante ca esterii ai acizilor grai, cu unul sau doi acizi grai
legai de cele dou grupri de hidroxil.
Luteina este izomeric cu zeaxantina, fiind diferit doar locul unei duble legturi.
6

Alte denumiri ale luteinei sunt: lutein, 4-[18-(4-hidroxi-2,6,6-trimetil-1-ciclohexenil)3,7,12,16-tetrametiloctadeca-1,3,5,7,9,11,13,15,17-nonaenil]-3,5,5-trimetil-ciclohex-2-nil-1ol[6].

Cele dou inele au fost hidroxilate la poziiile 3 i 3'. Chimitii numesc cele dou inele
de lutein beta (, legtura dubl ntre C5 = C6) i epsilon (, legtura dubl ntre C4 = C5).
Luteina are un inel i un inel , zeaxantina are dou inele . Chimic luteina si
zeaxantina sunt izomeri, dei nu stereoizomeri.
Luteina are trei carboni chiralici care sunt enantiomeri (activi optic)[7].

Proprietile luteinei
Tabelul 1. Proprietile luteinei[6]

Luteina

Structur
C40H56O2
127-40-2
Proprieti
568,87 gmol-1
190 C
Insolubil
Solubil
Solid cristalin de culoare rou-glbui

Formul chimic
Nr. CAS
Masa molar
Punct de topire
Solubilitatea n ap
Solubilitatea n uleiuri
Form

Luteina hrnete i apr retina, i nu numai pe aceasta, fiind una din substanele de
origine natural, considerat a fi un scut mpotriva radiaiilor luminoase care duc n timp la
obosirea retinei mergnd pn la distrugerea ei cu consecine legate de orbire. Luteina este o
substan specific ochiului. Aceast substan nu se poate sintetiza n organism i trebuie
preluat din alimentaie pe cale nutritiv.
Luteina (, -caroten-3, 3' diol) este un derivat natural oxigenat a hidrocarburilor
carotenoidice. Este gsit ca pigment lipidic solubil n glbenuul de ou i diferite legume. Are
rol fiziologic n mbuntirea vederii i protecia ochilor de lumina UV duntoare. Ele sunt
capabile de a potoli oxigenul singlet, un radical liber, care pot deteriora ADN-ul. Luteina n
esuturile sistemului imunitar este epuizat n timpul inflamaiei i nivelul epuizrii depinde
de nivelurile luteinei dietetice.

Rolul i utilizrile luteinei

Rolul luteinei este de a filtra, mai corect de a opri componenta albastr a luminii solare
sau artificiale pe care ochiul pn la retin nu este capabil s le opreasc. Componenta
albastr din razele solare, dar i radiaiile UV n exces sunt duntoare retinei pe care o pot
distruge ireversibil. Aceast substan apr pata galben de la distrugere sub aciunea
stresului oxidativ dat de radiaiile luminoase necorespunztoare.
Luteina:
Protejeaz vederea mpotriva cataractei i a degenerescenei maculare;
Protejeaz inima-prin activitatea sa la nivel circulator avnd n vedere c se implic n
meninerea sntii vaselor de snge mpreun cu vitamina C;
Protejeaz creierul-prin efectul su antimbtrnire alturi de minerale i substane
nutritive la nivel celebral;
Protejeaz i sprijin funionarea pielii-suplimentarea cu circa 10 mg lutein duce la
creterea hidratrii pielii cu peste 30%, elasticitii pielii, dar i absorbia acizilor grai
i mpidicarea oxidrii acestora;
Protector pulmonar-ajut la refacerea esuturilor, mai ales dup lsarea de fumat;
Menine sntatea articulaiilor;
Cantitatea optim necesar de lutein este de 3 mg/zi, dar majoritatea recomandrilor
se refer la minim de 6 mg/zi care probabil este cel terapeutic. Pentru diferite afec iuni
de exemplu degenerescen macular s-au constatat efecte terapeutice de la cca 10-20
mg/zi.
Surse alimentare de lutein sunt: spanacul, oule, napul, guliile, salata verde, broccoli,
porumb, mazre, varz, varz de Bruxelles[8].
Un coninut aproximativ dup mai multe surse privind coninutul de n lutein al
alimentelor se prezint n urmtorul tabel:
Tabelul 2. Coninutul de lutein privind mai multe surse[8]
PRODUS
LUTEIN g/100 g
Nap
18000
Spanac fiert
12000
Spanac crud
1800
Mazre
2500
Dovlecel
2125
Broccoli
1100-1700
Varz de Bruxelles
1590
Salat verde
1200-1300
Nuci
1200
Morcov fiert
1100
Fasole verde
800
Ou
300
Porumb
644
Kiwi
120
Exist multe aplicaii ale luteinei, care includ pigmentarea esuturilor si produselor
animale, a medicamentelor i cosmeticelor, colorarea alimentelor, prevenirea degenerescenei
maculare legat de vrst.

4. Producia de lutein
Extracia luteinei din spanac
Materiale i metode
Reactivi
Acetona, etanol, butanol, metanol, hexan, dioxid de siliciu, nitrit de sodiu si acid sulfuric
Sursa vegetal
Spanacul
Extracia
10 grame de spanac a fost mrunit ntr-un mojar cu pistil apoi a fost amestecat cu solvent.
Trei solveni diferiti au fost folosii cum ar fi acetona, etanolul i butanolul. Soluia a fost
filtrat cu hrtie de filtru Whatman nr.1. Filtratul a fost cetrifugat la 10000 rpm timp de 10
minute. Faza apoas a fost colectat i pstrat la 4 oC.
Msurarea absorbanei
Absorbana a fost msurat cu un spectrofotometru la o lungime de und de 446 nm la
intervale de 3 ore timp de 9 ore.
Concentraia de lutein a fost calculat cu urmtoarea formul:
Concentraia luteinei (microg/g prob)=(A*V mL*factorul de diluie)/ (*Wg)
Unde A-absorbana la 446 nm, volumul extractului n mL, - coeficientul de absorbie(2589),
W-masa probei uscate.
Test pentru carotenoide
Culoarea soluiei probei cu solvent dispare dup adugarea succesiv de 5% soluie de nitrit
de sodiu i 0,5 M H2SO4. Acest test a fost efectuat pentru standard i prob, precum i pentru a
confirma prezena de carotenoide.
Metoda de detectare
Pentru a detecta coninutul de lutein din materialul de extras, a fost efectuat cromatografia
pe strat subire (TLC). Eantioanele extrase au fost concentrate sub vid folosind rotavapul.
Temperatura nalt cauzeaz denaturarea luteinei. Probele uscate la aer au fost utilizate apoi
pe CSS. Plcile de CSS au fost realizate folosind dioxid de siliciu tulbure, faza mobil folosit
a fost hexan. Probele au fost dizolvate n metanol i spotul a fost plasat pe placa de CSS cu
luteina standard. Plcile au fost pstrate n paharul de laborator care conine hexan ca faz
mobil i a permis s se ridice pn la trei-sferuri de lungime. Spoturile au fost detectate la
lumina UV.

Spanac
Splare
Etanol

Mrunire

Filtrare

Centrifugare

Colectare

Concentrare
Lutein
Figura 3. Schema tehnologic de obinere a luteinei

5. Concluzii
Spanacul este un aliment nelipsit din alimentaia omului. Preparatele din frunzele de
spanac i spanacul propriu-zis acioneaz ca un produs medicinal, contribuind la profilaxia
sau ameliorarea unor afeciuni, precum hipertensiunea arterial, tusea avitaminoza, scorbutul,
rahitismul i altele.I se atribuie spanacului i rolul de activator al secre iilor pancreatice i de agent
anticancerigen.
Luteina este o substan specific ochiului. Aceast substan nu se poate sintetiza n
organism i trebuie preluat din alimentaie pe cale nutritiv.

10

6. Bibiografie
1. http://www.ghid-culinar.ro/articole-culinare/de-ce-este-special-spanacul.html
2. www.scribd.com/doc/59731233/Carotenoide
3. Maria I. Gil, Federico Ferreres, Francisco A. Tomas-Barberan, Effect of postharvest
storage and processing on the antioxidant constituents(flavonoids and vitamin C) of
fresh-cut spinach, departamento de Ciencia y Technologia de Alimentos, CEBAS, P.O.
Box 4195, 30080 Murcia, Spain.
4. Gaikwad Priyanka Subhash, Shete Rajkumar Virbhadrappa, Otari Kishor Vasant,
Spinacia Oleracea Linn: a Pharmacognostic and pharmacological overview,
Departament of Pharmacology Rajgad Dnyanpeeth College of pharmacy, Bhor, Pune,
India, 16.09.2010
5. http://www.csid.ro/plante-medicinale-fitoterapice-si-gemoterapice/spanacul-spinaciaoleracea-11846949/
6. http://en.wikipedia.org/wiki/Lutein
7. James D. Johnson, Lutein and zeaxantin, an introduction to the chemistry of dietary
carotenoids, Alumnus, Departament of chemistry, Florida State University,
Tallahassee, Fl, USA, June 2007;
8. http://remediumplus.ro/LUTEINA/luteina-necesar.html

11