Sunteți pe pagina 1din 18

UNIVERSITATEA DE MEDICIN I FARMACIE GRIGORE T.

POPA, IAI
FACULTATEA DE BIOINGINERIE MEDICAL
MASTER BIOMATERIALE SI BIOTEHNOLOGII MEDICALE AVANSATE
ANUL I

Dozarea glucozei din


sange
MASTERAND
Diaconescu ionut
Gabriel

GLUCOZA:
furnizor indispensabil de
energie care sustine activitatea
celulara.
cea mai importanta zaharida
din organismul uman

Valori normaleale glucozei din sange:65-110 mg la 100 ml sange.

Generalitati GLUCOZA
In conditii fiziologice, dupa ingestia alimentara, nivelul
glicemiei incepe sa creasca in aproximativ 15 minute,atinge un
maxim al concentratiei in 30-45 minute, iar in aproximativ 1-2 ore
revine la nivelul bazal si ramane stabil pana la urmatoarea masa.

Determinarea glicemiei

din sangele capilar cu ajutorul


testelor rapide(glucometre) nu este utilizata pentru stabilirea unui
diagnostic (ex.diabet zaharat), ci pentru urmarirea evolutiei bolii
(monitorizarea si automonitorizarea echilibrului glicemic).

Insulina si glucagonul
cei mai importanti
hormoni in reglarea
glucozei din sange

Dozare: metode de dozare


Metode
colorim
etrice
Valori
apropiate
de cele
normale

Rapiditate

Metode
enzimatic
e

Metoda
titrimetrica

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu O-toluidina

Reactivi

solutie de
acid
tricloracetic
20%
solutie de
acid
tricloracetic
5%
solutie de
acid
tricloracetic
5%

Metode de dozare
Glucoza

Antrona
Substanta cromogena
Ortotoluidina

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu O-toluidina

80ml o-toluidina
920ml acid acetic glacial
2,5g tiouree
Conservare in sticle brune max. 1 luna
Se dizolva 100mg glucoza in 80ml solutie saturata de acid benzoic
dupa dizolvare se completeaza cu aceeasi solutie pana la 100ml .

Solutia se poate conserva foarte bine cateva luni.

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu O-toluidina
Se pregatesc 2 eprubete de centrifuga, una pentru proba de analizat si una
pentru proba standard

Proba de analizat
(ml)

Proba standard
(ml)

Sange total, ser sau


plasma

0,2

Solutie standard de
glucoza

0,2

Apa distilata

1,5

1,5

Acid tricloracetic
20%

0,5

0,5

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu O-toluidina

Repa
us 5
minu
te
Agitare

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu O-toluidina
Din supernatantul rezultat in fiecare eprubeta
se pregatesc:
Proba de
analizat

Proba
standard

Proba in alb

SN de la proba
cu sange

0,5

SN de la proba
standard

0,5

Solutie de acid
tricloracetic %

0,5

Solutie Otoluidina

0,5

2,5

2,5

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu O-toluidina

Agitar
e

Se
masoara
extinctiile
PS si PA in
raport cu
Palb

Baia de
apa 8
ninute

Racire sub
jet de apa

Citire
la
635n
m

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu O-toluidina

ceto-sau aldopentozele dau


coloratie cu o-toluidina dar de
intensitate foarte slaba,
neglijabila pentru concentratia
acestor substante in sange

daca determinarea glucozei se


face in mai putin de 3 ore de la
recoltarea probei, atunci nu este
obligatorie recoltarea pe
substante anticoagulante.

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu Antrona
Reactivi

solutie de
acid
tricloracetic
5%

Reactiv cu
Antrona

Principiu:
Glucoza este deshidratata cu acid sulfuric =>hidroximetilfurfurol +
antrona =>compus de condensare galben-rosiatic.
Extinctia se citeste la 620nm.

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu Antrona

280 ml apa distilata


720 ml acid sulfuric concentrat
500 mg antrona
10 g tiouree
Incalzire 80C pe baia de apa pana la dizolvare completa

Reactivul se pastreaza la 4C timp de cateva saptamani

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu Antrona
MOD DE LUCRU:

Se pipeteaza in 3 eprubete de centrifuga solutie


standard de glucoza 200mg% pentru PA, Ps si PAlb

Proba de
analizat (ml)

Proba
standard
(ml)

Proba in alb
(ml)

Solutie acid
tricloracetic 5%

0,9

0,9

0,9

Sange total, ser


sau plasma

0,1

Solutie standard
de glucoza

0,1

Apa distilata

0,1

Continutul fiecarei probe se amesteca prin agitare,dupacare se


centrifugheaza numai eprubeta cu proba de analizat.

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu Antrona
MOD DE LUCRU:

Din supernatantul rezultat in fiecare eprubeta


se pregatesc:
Proba de
analizat

Proba
standard

Proba in alb

SN de la proba
de analizat

0,5

SN de la proba
standard

0,5

SN din
amestecul cu
proba in alb

0,5

Reactiv cu
Antrona

5,0

5,0

5,0

Metode de dozare
Dozarea glucozei prin metoda colorimetrica cu Antrona
MOD DE LUCRU:

Racire sub jet


de apa

Incalzire pe
baia de apa
15 minute

Citire la 620 nm

Calculul rezultatelor:
mg glucoza/100mlsange(ser sau plasma)=PA/PS x 100

Bibliografie
Internet
www.wikipedia.com

Va multumesc