Sunteți pe pagina 1din 132

UNIVERSITATEA DE MEDICIN I FARMACIE TRGU MURE DISCIPLINA DE HISTOLOGIE

ndrumtor de

LUCRRI PRACTICE
DE HISTOLOGIE

Prof. Dr. Angela Borda ef lucrri Dr. Flp Emke ef lucrri Dr. Camelia Gliga ef lucrri Dr. Andrada Loghin ef lucrri Dr. Marcu Simona Tnde ef lucrri Dr. Cosmin Moldovan

2012

Sub redacia: Angela Borda Autori: Angela Borda, Emke Flp, Camelia Gliga, Andrada Loghin, Simona Tnde Marcu, Cosmin Moldovan Refereni: Dr. Carmen Mihaela Mihu, Confereniar Universitar la Universitatea de Medicin i Farmacie Iuliu Haieganu Cluj-Napoca Dr. Maria Crian, Confereniar Universitar la Universitatea de Medicin i Farmacie Iuliu Haieganu Cluj-Napoca CIP nr. 21807/19.11. 2012 Descrierea CIP a Bibliotecii Naionale a Romniei ndrumtor de lucrri practice de histologie / Angela Borda, Flp Emke, Camelia Gliga, ... - Trgu Mure : University Press, 2012 Bibliogr. Index ISBN 978-973-169-204-3

I. Borda, Angela II. Flp, Emke III. Gliga, Camelia


611.018 Tehnoredactare i prelucrare imagini microscopice: Cosmin Moldovan Ilustraii schematice: Andrada Loghin, Simona Tnde Marcu, Camelia Gliga, Emke Flp Coperta: FarmaMedia-Publicaii medicale, www.farmamedia.ro
Editura Universtity Press Trgu Mure Director de editur: Prof. Dr. Marius Mruteri Adresa: Trgu Mure, Str. Gh. Marinescu, Nr: 38, cod 540142 Telefon: 0265/215551, int:. 233

CUPRINS

INTRODUCERE ............................................................................................................................................. 1 Principii de prelucrare histologic a esuturilor ........................................................................................... 1 Diagnosticul histologic ................................................................................................................................ 3 Executarea desenului ................................................................................................................................... 5 ESUTURILE EPITELIALE ......................................................................................................................... 7 EPITELIILE DE ACOPERIRE ................................................................................................................... 7 EPITELIILE GLANDULARE .................................................................................................................. 14 ESUTURILE CONJUNCTIVE .................................................................................................................. 18 Celulele esutului conjunctiv.................................................................................................................. 18 Fibrele esutului conjunctiv ................................................................................................................... 21 TIPURI DE ESUTURI CONJUNCTIVE ............................................................................................... 22 ESUTURI CONJUNCTIVE MOI ....................................................................................................... 24 ESUTURILE CARTILAGINOASE ................................................................................................... 27 ESUTUL OSOS .................................................................................................................................. 28 ESUTURILE MUSCULARE...................................................................................................................... 31 ESUTUL MUSCULAR NETED ............................................................................................................ 31 ESUTUL MUSCULAR STRIAT SCHELETAL .................................................................................... 32 ESUTUL MUSCULAR STRIAT CARDIAC ......................................................................................... 33 ORGANELE HEMATO- I LIMFOPOIETICE ........................................................................................... 35 MDUVA ROIE HEMATOGEN ........................................................................................................ 35 TIMUSUL ................................................................................................................................................. 36 NODULUL LIMFATIC ............................................................................................................................ 37 SPLINA ..................................................................................................................................................... 39 ESUTUL LIMFOID ATAAT MUCOASELOR (MALT) .................................................................... 41 Amigdala palatin .................................................................................................................................. 41 ESUTUL I SISTEMUL NERVOS ........................................................................................................... 43 NEURONUL ............................................................................................................................................. 43 CELULELE GLIALE ................................................................................................................................ 44 SISTEMUL NERVOS CENTRAL ........................................................................................................... 45 SISTEMUL NERVOS PERIFERIC .......................................................................................................... 47 APARATUL CIRCULATOR........................................................................................................................ 49 SISTEMUL CIRCULATOR ..................................................................................................................... 49 APARATUL DIGESTIV .............................................................................................................................. 55 CAVITATEA BUCAL ........................................................................................................................... 55 Mucoasa cavitii bucale........................................................................................................................ 55 Buzele .................................................................................................................................................... 56 Limba..................................................................................................................................................... 58 Dintele ................................................................................................................................................... 62 Parodoniul ............................................................................................................................................ 67 Dezvoltarea dintelui ............................................................................................................................... 69 TUBUL DIGESTIV .................................................................................................................................. 71 Esofagul ................................................................................................................................................. 72 Stomacul ................................................................................................................................................ 74 Intestinul subire .................................................................................................................................... 77 Intestinul gros ........................................................................................................................................ 81 GLANDELE ANEXE ALE TUBULUI DIGESTIV ..................................................................................... 82 GLANDELE SALIVARE MARI .............................................................................................................. 82 Glanda parotid ..................................................................................................................................... 83 Glanda submandibular ......................................................................................................................... 84 Glanda sublingual ................................................................................................................................ 85 PANCREASUL ......................................................................................................................................... 86 FICATUL .................................................................................................................................................. 87 APARATUL RESPIRATOR......................................................................................................................... 90

TRAHEEA................................................................................................................................................. 90 PLMNUL ............................................................................................................................................. 92 APARATUL URINAR .................................................................................................................................. 95 RINICHIUL ............................................................................................................................................... 95 Stuctura semimicroscopic a rinichiului ................................................................................................ 95 VEZICA URINAR.................................................................................................................................. 98 APARATUL GENITAL MASCULIN ........................................................................................................ 100 TESTICULUL ......................................................................................................................................... 100 GLANDELE ANEXE .............................................................................................................................. 102 Prostata ................................................................................................................................................ 102 APARATUL GENITAL FEMININ ............................................................................................................ 104 OVARELE............................................................................................................................................... 104 UTERUL ................................................................................................................................................. 107 VAGINUL ............................................................................................................................................... 111 PLACENTA ............................................................................................................................................ 112 GLANDA MAMAR ............................................................................................................................. 115 PIELEA ................................................................................................................................................... 118 GLANDELE ENDOCRINE ....................................................................................................................... 121 HIPOFIZA ............................................................................................................................................... 121 TIROIDA ................................................................................................................................................. 123 SUPRARENALA .................................................................................................................................... 125

INTRODUCERE
Lucrrile practice de histologie au drept scop familiarizarea studentului cu aspectele structurale ale diferitelor esuturi i organe. Ele constau n studiul individual, la microscop, a lamelor histologice ce conin esuturi i organe, observarea unor detalii microscopice pe baza crora acestea se pot recunoate i apoi desenarea acelor elemente care stabilesc de fapt diagnosticul histologic. Pentru ca un esut s poat fi studiat la microscop, deci s ajung pe lam, el trebuie supus unei tehnici complexe i laborioase de prelucrare histologic. Principii de prelucrare histologic a esuturilor Prelucrarea histologic a esuturilor presupune efectuarea cu rigurozitate a unor timpi succesivi, fiecare n parte avnd o influen decisiv asupra reuitei finale. Nerespectarea acestor timpi poate produce artefacte (distorsionri ale arhitecturii celulare sau tisulare) i greuti la elaborarea diagnosticului histologic. Cele mai importante etape ale acestei tehnici sunt: recoltarea materialului, fixarea, includerea, secionarea, montarea. 1. Recoltarea materialului. Ea const n prelevarea de mici fragmente de esuturi sau de organe. Pentru lucrrile practice de histologie, recoltarea diferitelor esuturi i organe se face preponderent de la om (cadavre sau piese rezecate chirurgical), dar i de la animale de experien. Dac recoltarea se face de la cadavre, trebuie avut n vedere c structura unor esuturi se altereaz rapid dup moarte (ca de exemplu medulara suprarenalei, mucoasa tubului digestiv). Ca urmare, recoltarea se va face de la cadavre proaspete, iar fragmentele se vor introduce imediat ntr-o soluie fixatoare. 2. Fixarea. Este ce-a de a doua etap i are rolul de a opri procesele metabolice pe de o parte i de a conserva ct mai fidel structura esutului, pe de alt parte. n practica histologic, cel mai utilizat fixator este formalina, o soluie apoas de formaldehid. Se utilizeaz n concentraii diferite, cel mai des de 10%. Formalina se poate utiliza singur sau n combinaie cu alte substane chimice (de exemplu, formalina mpreun cu o soluie saturat de acid picric i acid acetic glacial, constituie fixatorul Bouin). Durata fixrii este de aproximativ 24-48 ore, variind n funcie de dimensiunea fragmentului de esut recoltat. Dup fixare piesa este splat cu ap de robinet, pentru ndeprtarea fixatorului. 3. Includerea n parafin. Pentru ca un fragment de esut s poat fi inclus n parafin el trebuie supus urmtoarelor operaii: - deshidratarea const n ndeprtarea apei din esuturi, deoarece apa nu este miscibil cu parafina. Deshidratarea se face n alcooluri cu concentraii cresctoare (70%, 90%, 95%, 100% sau alcool absolut).

- clarificarea sau impregnarea cu un solvent al parafinei, are rolul de a ndeprta alcoolul cu care s-a deshidratat esutul, deoarece nici el nu este miscibil cu parafina. Se impune ndeprtarea lui printr-un reactiv, care face ca piesa s devin translucid. Pentru clarificare se utilizeaz xilen, toluen sau benzen. - impregnarea cu parafin este o etap ce decurge la cald, n termostatul de parafin (55-56C) i are ca scop ptrunderea fragmentelor (pieselor), pn n cele mai profunde interstiii, cu parafin. - includerea n parafin. Piesa impregnat cu parafin este aezat ntr-un recipient special peste care se toarn parafin fluid, care prin rcire se solidific. Se obine astfel un bloc de parafin care conine fragmentul de esut. Acesta este mbibat i nconjurat de un mediu care permite secionarea esutului n felii foarte fine, de 5-7 . n acelai timp, parafina acioneaz ca suport fizic pentru esut, pemind secionarea lui fr deformarea structurii sau arhitecturii celulare. 4. Secionarea se realizeaz cu un aparat special, numit microtom. Fiecare seciune obinut se fixeaz pe lama histologic cu un adeziv (ex. albumina albuului de ou). Acest adeziv mpiedic detaarea seciunii de pe lam i pierderea ei n timpul colorrii. 5. Colorarea seciunii este obligatorie pentru a putea examina esutul la microscop, deoarece celulele sunt incolore. Primul pas n colorarea preparatului este ndeprtarea parafinei. Ea se realizeaz cu xilen sau cu toluen. Apoi, deoarece coloranii sunt soluii apoase (iar esutul a fost n prealabil deshidratat pentru a putea fi inclus), preparatul de pe lam trebuie rehidratat. Aceasta se realizeaz treptat, cu alcooluri cu concentraii descresctoare, de la 100%, la 95% - 90% 70%, pn la ap. Rehidratarea treptat are rolul de a nu altera structura esutului respectiv. n aceast stare, esutul poate fi colorat. Cea mai utilizat coloraie este hematoxilina eozina. 6. Montarea const n aplicarea unei lamele deasupra preparatului. Aceast etap este obligatorie pentru a pstra integritatea esutului la manipulri succesive, pentru a conserva neschimbat cromatica coloraiei utilizate i pentru a asigura un mediu transparent necesar examinrii cu lumin transmis. Acest mediu transparent poate fi balsam de Canada sau o rin sintetic, dar care de asemenea nu sunt miscibile cu apa. n aceste condiii, preparatul trebuie din nou deshidratat cu alcooluri cu concentraii cresctoare i apoi clarificat n xilen sau toluen, material care se amestec cu mediul de montare. Dup uscarea mediului de montare, preparatul se poate examina la microscop. Examinarea unui preparat la microscop are ca scop stabilirea unui diagnostic histologic i se realizeaz n mai multe etape.

Diagnosticul histologic Un diagnostic histologic corect trebuie s cuprind: 1. Diagnosticul de coloraie n practica histologic i histopatologic se folosesc dou tipuri de coloraii: coloraii uzuale i coloraii speciale. Coloraiile uzuale coloreaz n mod diferit structurile celulare i tisulare, permind elaborarea diagnosticului histologic. Cea mai utilizat coloraie uzual este cea cu hematoxilin-eozin (HE), cu care sunt colorate majoritatea esuturilor i organelor prezentate la lucrrile practice de histologie. Coloraiile speciale sau histochimice se folosesc pentru identificarea i localizarea unor componente chimice sau enzimatice particulare ale celulelor. De exemplu, polizaharide ca glicogenul, pot fi puse n eviden prin tehnica Acidului Periodic Schiff (PAS). Acidul periodic oxideaz glicogenul n aldehide; acestea la rndul lor vor fi colorate rou-violaceu cu reactivul Schiff. Lipidele pot fi identificate prin colorani solubili n lipide: Sudan, Red Oil O. (pentru colorarea lipidelor se folosesc seciuni la ghea ). Un subgrup al coloraiilor speciale l constituie tehnicile histo-enzimatice. Aceste tehnici sunt utilizate pentru a identifica i localiza un mare numr de enzime: fosfataza alcalin i acid, dehidrogenaze i ATP-aze etc. Deoarece majoritatea enzimelor sunt foarte labile i pot fi distruse prin fixare, pentru realizarea acestor tehnici se folosesc seciuni la ghea. n ultimii ani, tehnicile histochimice au pierdut din importan n faa tehnicilor moderne de imunohistochimie, acestea putnd fi i ele considerate ca un subgrup al coloraiilor speciale. Imunohistochimia este una dintre cele mai importante inovaii n histologie i imediat dup descoperire s-a dezvoltat rapid. Principiul imunohistochimiei se bazeaz pe imunologie: se folosesc anticorpi monoclonali mpotriva unor constitueni celulari care joac rolul de antigene. Reacia antigen-anticorp se pune n eviden printr-un marcher vizibil (colorat). Numrul anticorpilor utilizai n prezent n histologie i anatomie patologic se ridic la cteva sute. Exemple de anticorpi utilizai n practica histologic i histopatologic: - anticorpi anti-citocheratin pentru esuturile epiteliale; - anticorpi anti-desmin pentru esuturile musculare; - anticorpi anti-cromogranin pentru evidenierea celulelor neuroendocrine; - anticorpi anti-tiroglobulin pentru evidenierea celulelor foliculare ale glandei tiroide; - anticorpi anti-actina muchiului neted pentru fibrele musculare netede. n continuare, vor fi prezentate rezultatele cromatice ale unor coloraii mai frecvent utilizate n histologie:

- coloraia cu hematoxilin-eozin (col. HE) coloreaz citoplasma n diferite intensiti de rou (citoplasm eozinofil sau acidofil) sau albastru (citoplasm bazofil), i nucleii n albastru-violaceu. Acetia pot fi palid colorai (nuclei hipocromi), intens colorai (nuclei hipercromi) sau pot prezenta o nuan intermediar (nuclei eucromi sau normocromi). - coloraia van Gieson coloreaz fibrele colagene n rou, fibrele musculare n galben, nucleii celulelor n negru. Ea se folosete n general pentru diferenierea fibrelor musculare de fibrele colagene. - coloraiile tricrome folosesc amestecuri de trei colorani pentru colorarea diferit a unor structuri celulare. Exist foarte multe coloraii tricrome. De exemplu, n coloraia Masson colagenul se coloreaz n verde (sau albastru, n funie de colorantul utilizat), muchiul, eritrocitele i cheratina n rou, nucleii n negru-cafeniu. n coloraia Mallory fibrele colagene se coloreaz n albastru intens, cartilajul, oseina, mucinele n diferite nuane de albastru, hematiile i tecile de mielin n galben, nucleii i citoplasma n rou. - reacia P.A.S. (Periodic-Acid-Schiff) evideniaz structurile bogate n muco-polizaharide acide (membranele bazale, glicocalixul, mucina celulelor caliciforme), colorndu-le n rou-violaceu; - coloraia albastru-alcian este folosit pentru colorarea mucinelor, acestea aprnd albastre; - impregnaia argentic Gmri coloreaz specific fibrele de reticulin n negru; - metoda cu rezorcin-fuxin (Weigert) coloreaz specific fibrele elastice n albastru nchis. 2. Diagnosticul de esut Recunoaterea unui esut pe o seciune histologic are la baz urmtoarele criterii: - arhitectura general a esutului. Un esut epitelial l vom recunoate deoarece este alctuit aproape n exclusivitate din celule de acelai tip, strns unite ntre ele, prin dispozitive joncionale. Ele acoper totdeauna un esut conjunctiv, de care sunt desprite printr-o membran bazal (care nu se coloreaz cu HE). Un esut conjunctiv l recunoatem deoarece este alctuit din celule, fibre i substan fundamental n diferite proporii. Celulele au origini diferite, sunt n numr mai mic dect n esutul epitelial i sunt izolate unele de altele prin substan fundamental i fibre (matricea extracelular). - tipul celular, pe care l stabilim analiznd forma, mrimea i aezarea celulelor. Forma celulei o vom deduce dup forma nucleului, deoarece limitele celulei sunt uneori greu vizibile. De regul, o celul cubic (sau poligonal) are un nucleu rotund, iar o celul prismatic sau fusiform are un nucleu ovalar, cu axul lung perpendicular pe membrana bazal. Vom analiza dac celulele sunt dispuse grupat (esuturi epiteliale) sau dac sunt izolate printr-o matrice extracelular (esuturi conjunctive).

Vom examina aspectul citoplasmei: de exemplu, prezena striaiilor transversale cu dispoziie ordonat ne va orienta spre o celul muscular striat. Intensitatea coloraiei nucleare ne va da informaii despre starea de activitate a celulei: nucleul intens hipercrom corespunde unei celule n repaus (de exemplu fibrocitul); nucleul hipocrom corespunde unei celule active metabolic (de exemplu fibroblastul). - matricea intercelular (fibre i substan fundamental): cantitatea i coninutul ei, varietatea i dispoziia fibrelor (colagene, elastice i/sau de reticulin) aezate ordonat sau neordonat. 3. Diagnosticul de organ Diagnosticul de organ se face pe baza caracterelor structurale specifice. De exemplu, intestinul subire se recunoate deoarece peretele su este alctuit din patru tunici: mucoasa (esut epitelial i esut conjunctiv), submucoasa (esut conjunctiv), musculara (esut muscular) i seroasa/adventiia (esut conjunctiv lax i esut adipos). Prezena la nivelul mucoasei a numeroase expansiuni digitiforme (viloziti), acoperite de un epiteliu simplu prismatic, atest diagnosticul de intestin subire. Se vor recunoate apoi diferitele segmente ale intestinului subire dup caracterele lor particulare: de exemplu, duodenul are glande n submucoas. Ficatul l putem recunoate histologic graie organizrii sale lobulare. n centrul lobulului gsim vena centrolobular, de la care pleac radiar cordoane de hepatocite i capilare sinusoide. Lobulii sunt delimitai (n ficatul de porc) de un esut conjunctivo-vascular care, la locul de confluen a 3-5 lobuli alctuiesc un spaiu triunghiular (spaiul interlobular Kiernan) n care vom gsi o arter, o ven, un canal biliar i un vas limfatic. 4. Diagnosticul diferenial Diagnosticul diferenial se face ntre esuturi sau organe care se aseamn din multe puncte de vedere. El const n evidenierea diferenelor care exist ntre dou astfel de structuri asemntoare. De exemplu se poate face diagnostic diferenial ntre diferitele tipuri de esuturi epiteliale, conjunctive sau ntre diferitele segmente ale tubului digestiv (stomac cu duoden, duoden cu ileon, etc.). Executarea desenului Un desen histologic trebuie s redea schematic toate structurile specifice (caracteristice) unui esut sau organ, n vederea stabilirii unui diagnostic pozitiv. Astfel la desenarea unui esut se vor schia: - nucleii celulelor cu forma, mrimea caracteristic, dispoziia lor n celul, aspectul cromatinei; forma nucleilor d indicaii asupra formei celulei, iar intensitatea coloraiei ne d informaii asupra activitii ei funcionale; - citoplasma cu caracterele cromatice specifice fiecrui tip de celul;
5

- limitele celulare, acolo unde sunt vizibile; - raporturile celulei cu alte structuri (membran bazal, substan intercelular etc.); - substana fundamental i fibrele. La desenarea unui organ se vor schia aspectele particulare ale fiecrui tip de esut ce intr n alctuirea organului respectiv i relaia dintre aceste esuturi. Exist unele structuri care, dei nu se evidenieaz cu coloraii uzuale, trebuie totui desenate. Astfel membrana bazal, care se coloreaz foarte slab cu HE, se deseneaz ntotdeauna la baza epiteliilor, sub forma unei linii drepte sau ondulate (n epiteliile stratificate) colorate n rou.

ESUTURILE EPITELIALE
Epiteliile sunt esuturi avasculare, care acoper suprafaa extern a corpului sau cptuesc caviti (epitelii de acoperire), formeaz partea secretorie a glandelor (epiteliile glandulare) i receptorii unor organe de sim (epitelii senzoriale). Celulele lor au forme variate, relativ geometrice: poligonale, cubice, cilindrice etc. Epiteliile au cteva caractere particulare, care le deosebesc de alte esuturi i care determin modul lor de reprezentare n desen: - toate epiteliile se sprijin pe o membran bazal, care le desparte de esutul conjunctiv subiacent. n microscopie optic (MO) aceast structur este vizibil n coloraii speciale. Dei nu este ntotdeauna vizibil n coloraia uzual cu hematoxilin eozin (HE), membrana bazal va fi desenat sub forma unei linii roii la baza oricrui epiteliu. - celulele epiteliale sunt strns unite prin jonciuni intercelulare, ntre celule neexistnd spaii libere; - celulele individuale prezint laturi sau domenii distincte: apical, lateral, bazal (excepie: unele epitelii glandulare endocrine). Domeniul apical poate prezenta diferite specializri ale membranei celulare: cili, microviloziti, stereocili; domeniul lateral este sediul jonciunilor intercelulare, iar domeniul bazal este strns legat de membrana bazal.

EPITELIILE DE ACOPERIRE
Epiteliile de acoperire se clasific prin combinarea a dou criterii: numrul de straturi celulare i forma celulelor de la suprafa. Se vor studia urmtoarele tipuri de epitelii: Epitelii simple (unistratificate): - pavimentos - cubic - prismatic (cilindric) - pseudostratificat Epitelii stratificate (pluristratificate): - pavimentos necheratinizat - uroteliul. Epiteliul simplu pavimentos este format dintr-un singur rnd de celule aplatizate. Acest tip de epiteliu are denumiri specifice n funcie de
7

localizare: mezoteliu la nivelul seroaselor (peritoneu, pleur, pericard), respectiv endoteliu cnd cptuete vasele. Epiteliul simplu pavimentos, impregnaie argentic, mezenter. Acest preparat nu este o seciune histologic ci studiaz mezenterul prin etalare pe lam. Se pot observa forma i dispoziia particular a acestor celule. - cu obiectivul mic : se observ forma neregulat, poligonal a celulelor, strns unite ntre ele, asemeni pietrelor de pavaj. - cu obiectivul mare : vom urmri limitele crenelate ale celulelor epiteliale puse n eviden prin precipitarea argintului n spaiile intercelulare. Celelalte structuri celulare (nucleu, nucleol, citoplasm) nu se coloreaz n mod normal n impregnaia argentic.

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Epiteliu simplu pavimentos: privit de sus, se observ doar limitele intercelulare.

Epiteliul simplu cubic este format dintr-un singur rnd de celule aproximativ cubice. Vom studia acest tip de epiteliu n tubii colectori din medulara rinichiului. Epiteliul simplu cubic, coloraie HE, rinichi. - cu obiectivul mic: vom examina epiteliul ce cptuete un tub colector renal. Celulele sunt aezate ntr-un singur rnd pe membrana bazal, delimitnd prin polul lor apical lumenul tubului renal. - cu obiectivul mare: se observ limitele intercelulare. Celulele au form aproximativ ptrat (laturi cu dimensiuni aproximativ egale). Citoplasma celulelor este palid eozinofil, iar nucleii sunt rotunzi, situai central, eucromi.

3 Imagine microscopic Reprezentare schematic

Epiteliu simplu cubic 1 Nucleu; 2 Limite intercelulare; 3 Membran bazal (MB).

Epiteliul simplu prismatic (cilindric) este format dintr-un singur rnd de celule cilindrice nalte. Acest tip de epiteliu se gsete, de exemplu, n mucoasa vezicii biliare. Epiteliul simplu prismatic (cilindric), coloraie HE, vezica biliar. - cu obiectivul mic: epiteliul simplu prismatic este format din celule alungite, aezate ntr-un singur rnd pe membrana bazal. Citoplasma celulelor este palid eozinofil. Nucleii iau forma celulelor, fiind i ei alungii (ovalari), aezai paralel ntre ei i perpendicular pe membrana bazal, n jumtatea inferioar a celulelor. - cu obiectivul mare: fine limite intercelulare se observ numai spre polul apical al celulelor, nu i n jumtatea inferioar, unde nucleii sunt aglomerai. Tot cu acest obiectiv se observ c polul apical al acestor celule apare ngroat i striat datorit prezenei microvilozitilor ce formeaz platoul striat.

3 2

1 4 Imagine microscopic Reprezentare schematic

Epiteliu simplu prismatic 1 Nucleu; 2 Limite intercelulare; 3 Platou striat; 4 MB.

Epiteliul pseudostratificat este un tip particular de epiteliu cilindric, alctuit dintr-un singur rnd de celule. Toate celulele se sprijin pe membrana bazal (deci e un epiteliu simplu), dar nu toate ajung la suprafaa epiteliului. n consecin celulele au nlimi diferite i de aceea nucleii sunt aezai la nlimi diferite, dnd o fals impresie de stratificare. Acest tip de epiteliu cptuete lumenul traheei. Epiteliul pseudostratificat, coloraie HE, trahee. - cu obiectivul mic: epiteliu cilindric nalt, n care nucleii ocup cele 2/3 bazale ale celulei. Ei sunt rotunzi (n apropierea membranei bazale) sau ovalari, eucromi i sunt aezai la nlimi diferite n celule. n treimea superioar a celulei este vizibil citoplasma eozinofil. - cu obiectivul mare: vom examina diferite forme nucleare: nuclei rotunzi aezai n apropierea membranei bazale, nuclei rotunzi-ovalari n zona mijlocie, nuclei n form de bastona aezai n jumtatea superioar a epiteliului. n general nucleii sunt grupai n cele dou treimi inferioare ale epiteliului, iar n treimea superioar se observ citoplasma colorat eozinofil i limitele intercelulare foarte fine. Celulele care ajung la suprafaa epiteliului prezint la polul apical cili. Se pot observa i celule nalte, care au citoplasma supranuclear cu aspect vacuolar, foarte palid colorate i fr cili (celule caliciforme).

3 4

5 1 Imagine microscopic Reprezentare schematic

Epiteliu pseudostratificat 1 Celul bazal; 2 Celule cilindrice cu nuclei la nlimi diferite; 3 Cili; 4 Celul caliciform; 5 MB.

Diagnostic diferenial al epiteliilor simple: vezi tabelul.

10

Diagnosticul diferenial al epiteliilor simple


E. s. pavimentos Localizare endoteliu, mezoteliu cptuire, schimburi Aplatizat E. s. cubic tubi colectori renali, foliculi tiroidieni, etc absorbie, secreie, cptuire ptrat E. s. prismatic vezic biliar, stomac, intestin subire, colon etc. absorbie, secreie dreptunghiular abundent, mai ales n jumatatea sup.a celulei ovalar, n 1/3 inf. a celulei, perpendicular pe MB platou striat, cili HE E. pseudostratificat trahee, bronhii, epididim cptuire, secreie, absorbie polimorf: cubice, cilindrice, caliciforme abundent, mai ales n jumatatea sup.a celulei polimorfi: rotunzi, ovalari cili HE

Funcii

Forma celulei

Citoplasma

puin, mai ales distribuit n n jurul mod egal n jurul nucleului nucleului ovalar, paralel cu MB fr specializri impregnaie argentic rotund, n centrul celulei fr specializri HE

Nucleul Polul apical Coloraie

Epiteliile stratificate pavimentoase sunt alctuite din mai multe rnduri de celule dispuse n straturi suprapuse. Celulele acestui epiteliu sufer modificri morfologice i funcionale de la stratul bazal spre suprafa. Epiteliul stratificat pavimentos necheratinizat, coloraie HE, esofag. - cu obiectivul mic: vom recunoate un esut epitelial alctuit din mai multe rnduri suprapuse de celule, aezate pe o membran bazal cu aspect sinuos, care desparte epiteliul de esutul conjunctiv subiacent; - cu obiectivul mare: vom observa trei zone sau straturi celulare: stratul bazal sau germinativ format dintr-un singur rnd de celule cubo-cilindrice cu citoplasma bazofil, nucleii hipercromi, rotunzi-ovalari; stratul mijlociu sau spinocelular format din mai multe rnduri de celule poligonale, strns unite ntre ele, cu citoplasm eozinofil, cu limite celulare bine vizibile i nucleu eucrom, rotund, situat n centrul celulei; stratul superficial format din mai multe rnduri de celule poligonale turtite, cu axul lung paralel cu membrana bazal. Celulele din stratul superficial devin din ce n ce mai turtite, i pe msur ce ne ndreptm spre suprafa, citoplasma lor devine din ce n ce mai palid, iar nucleul din ce n ce mai mic i mai hipercrom (picnotic), situat excentric n celul.

11

2 1

4 Imagine microscopic Reprezentare schematic

Epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat 1 Strat bazal; 2 Strat spinocelular; 3 Strat superficial; 4 MB.

Uroteliul este un epiteliu stratificat cu un aspect morfologic particular, care cptuete numai cile urinare. Epiteliul tranziional (uroteliul), coloraie HE, vezica urinar. - cu obiectivul mic: vom urmri aspectul stratificat al acestui epiteliu, aezat pe o membran bazal invizibil n aceast coloraie; - cu obiectivul mare: vom urmri aspectul celulelor din cele trei straturi: stratul bazal, stratul mijlociu i superficial.

1 4 Imagine microscopic Reprezentare schematic

Uroteliu 1 Stratul bazal; 2 Stratul celulelor n rachet; 3 Stratul celulelor umbreliforme; 4 MB.

12

Stratul bazal sau germinativ este format dintr-un singur rnd de celule cubo-cilindrice. Stratul mijlociu sau al celulelor n rachet este alctuit din mai multe rnduri de celule cu o parte superioar rotunjit ce conine nucleul rotund, eucrom, situat central, i o parte inferioar mult ngustat, sub forma unei expansiuni citoplasmatice subiri ce se insinueaz printre celulele din stratul subiacent (aspect de rachet de tenis). Stratul superficial sau al celulelor umbreliforme este format dintr-un singur rnd de celule de talie mare, ce acoper 2-3 celule n rachet, ntre care trimit scurte prelungiri. Celulele umbreliforme au axul lung paralel cu membrana bazal, citoplasma puternic eozinofil i unul, rar doi nuclei rotunzi sau alungii, hipercromi. Diagnosticul diferenial al epiteliilor stratificate E. s. pavimentos necheratinizat cavitatea bucal, faringe, esofag, anus, vagin barier, protecie celule cubo-cilindrice, citoplasm bazofil, nucleu rotund-ovalar, perpendicular pe MB celule poligonale, citoplasma eozinofil, nucleu rotund, central celule turtite, citoplasma clar, palid eozinofil, nucleu picnotic, excentric HE Uroteliu ureter, vezica urinar, uretra prostatic barier, distensie celule cubo-cilindrice, citoplasma bazofil, nucleu rotund-ovalar, perpendicular pe MB celule n rachet cu polul apical rotunjit, polul bazal efilat celule n umbrel paralele cu MB, citoplasma intens eozinofil, 1-2 nuclei HE

Localizare Funcii Stratul bazal (identic) Stratul mijlociu (mai multe rnduri de celule) Stratul superficial Coloraie

13

EPITELIILE GLANDULARE
Sunt epitelii specializate s sintetizeze i s secrete anumii produi. Ele se organizeaz sub form de glande, ce pot fi exocrine sau endocrine. Epiteliile glandulare exocrine formeaz glande care pstreaz legtura cu epiteliul de suprafa (din care provin) printr-un canal de excreie, prin care i elimin n exterior produsul secretat. Epiteliile glandulare endocrine alctuiesc glande care i-au pierdut legtura cu epiteliul din care provin i n consecin sunt lipsite de canal excretor. Aceste glande prezint n mod caracteristic o bogat reea de capilare n care este eliminat produsul de secreie, hormonii. Se vor studia urmtoarele glande exocrine: - fr canal de excreie celula caliciform (va fi descris mpreun cu glanda tubular simpl) - cu canal de excreie: - glanda tubular simpl; - glanda tubulo-acinoas compus; - glanda alveolar simpl. Epiteliile glandulare exocrine cu canal de excreie se formeaz prin invaginarea epiteliului n structurile subiacente (corionul mucoasei). Partea terminal a acestei invaginaii este format din celule secretoare (partea secretorie) numit adenomer, iar segmentul de legtur al acesteia cu suprafaa, formeaz canalul (ductul) de excreie. Glanda tubular simpl (glanda Lieberkhn), coloraie HE, colon. - cu obiectivul mic: vom observa glandele din mucoasa colonului, care se formeaz prin nfundarea epiteliului de suprafa n esutul conjunctiv subiacent. Glandele tubulare au aspect de deget de mnu sau tub i li se descriu trei segmente: fundul, corpul, respectiv gtul glandei care comunic direct cu suprafaa mucoasei. Glandele tubulare sunt delimitate de o membran bazal (glandilem) pe care se aeaz un epiteliu simplu prismatic format din celule caliciforme, al cror pol apical are aspect vacuolar (este necolorat), i celule prismatice absorbante. - cu obiectivul mare: vom studia caracterele morfologice ale celor dou tipuri de celule ce formeaz epiteliul glandular. Celulele caliciforme au un aspect asemntor unei cupe de ampanie, cu un pol bazal ngust ce conine nucleul ovalar sau turtit, hipercrom, nconjurat de o cantitate mic de citoplasm uor bazofil. Supranuclear, celula este globuloas, cu citoplasma practic necolorat sau uneori vacuolar, aspect conferit de granulele de mucus pe care le conine i care nu se coloreaz cu HE. Celule prismatice absorbante sunt nalte, au o citoplasm eozinofil, nuclei ovalari i hipercromi situai n treimea inferioar a celulei.

14

Aceste celule delimiteaz cu polul lor apical un lumen ngust n care i vars produsul de secreie celulele caliciforme.
1

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Glanda tubular simpl (glanda Lieberkhn) 1 Lumen; 2 Celule absorbante; 3 Celul caliciform; 4 MB.

Glanda alveolar simpl (glanda sebacee), coloraie HE, buza. - cu obiectivul mic: vom observa aspectul de scule al glandei sebacee, care se continu cu un canal de excreie scurt, care se deschide la rdcina firului de pr; - cu obiectivul mare: vom urmri structura celulelor n raport cu poziia lor intraglandular. Pe membrana bazal se observ un rnd de celule bazale, cubice, cu citoplasma bazofil, cu limite celulare greu vizibile, cu rol n regenerarea glandei. Spre centrul glandei vom observa celule mari, poliedrice cu limite celulare bine vizibile i cu citoplasma vacuolar datorit produsului de secreie (sebum), care se dizolv n cursul prelucrrii lamei i nu se coloreaz cu HE. Pe msur ce se apropie de canalul de excreie, celulele au citoplasma din ce n ce mai vacuolar i mai palid colorat, datorit acumulrii produsului de secreie (sebum). Nucleul celulelor, la nceput rotund, situat n centru, devine din ce n ce mai mic (picnotic), mai intens colorat (hipercrom), situat excentric. Celulele din apropierea canalului de excreie se dezintegreaz, i pierd treptat membrana celular i nucleii, constituind produsul elaborat de gland, sebumul (mecanism de secreie holocrin, adic prin dezintegrarea celulei).
15

5 4 2

3 Imagine microscopic

6 Reprezentare schematic

Gland alveolar simpl (sebacee) 1 Adenomer; 2 Canal de excreie; 3 Celule bazale; 4 Celule ncrcate cu sebum; 5 Celule pe cale de dezintegrare; 6 MB.

Glanda tubulo-acinoas, coloraie HE, glanda submandibular. - cu obiectivul mic: vom observa acini glandulari diferii ca form, mrime i aspect citologic. - cu obiectivul mare: se identific trei tipuri de acini secretori: seroi, mucoi i micti. Acinul seros, cel mai mic acin, este alctuit din 6-8 celule nalte aezate pe o membran bazal. Celulele au citoplasma subnuclear intens colorat, bazofil, iar cea supranuclear eozinofil (conine granule de zimogen). Nucleul este rotund, eucrom, aezat central. Prin polul lor apical, celulele delimiteaz un lumen foarte mic, punctiform, uneori greu vizibil pe seciunile histologice. Acinul mucos este de mrime mijlocie, cu un lumen larg, bine vizibil. Este delimitat de 4-6 celule nalte, aezate pe membrana bazal. Citoplasma este palid colorat deoarece conine mucus. Nucleii sunt hipercromi, turtii, mpini la polul bazal al celulelor i aezai paralel cu membrana bazal. Acinul mixt (sero-mucos), cel mai mare dintre cele trei tipuri de acini, este alctuit dintr-un acin mucos, care are ataat la un pol, sub form de capion, 3-5 celule seroase, ce alctuiesc semiluna lui Gianuzzi. Acinul mixt are un lumen larg, delimitat n ntregime de celulele mucoase. La toate tipurile de acini, ntre membrana bazal i polul bazal al celulelor, se gsesc celule alungite cu nucleul ovalar, hipercrom, paralel cu membrana bazal, numite celule mioepiteliale.

16

6 6

5 Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Acini secretori din glanda tubulo-acinoas compus 1 Acin seros; 2 Acin mucos; 3 Acin mixt; 4 Semiluna lui Gianuzzi; 5 Celule mioepiteliale; 6 MB.

Diagnosticul diferenial al acinilor Acinul seros mic 6-8 celule seroase Citoplasma bazofil subnuclear, eozinofil la polul apical rotund, central mic, punctiform Acinul mucos mijlociu 4-6 celule mucoase Acinul mixt cel mai mare 4-6 celule mucoase, i ataat, 3-4 celule seroase conform tipului de celul conform tipului de celul larg

Mrime Celulele

palid, discret bazofil turtit, bazal larg

Nucleul Lumenul

17

ESUTURILE CONJUNCTIVE
esuturile conjunctive sunt cele mai bine reprezentate esuturi din organism. Sunt constituite din trei componente fundamentale prezente n proporii diferite: celule, fibre i substan fundamental. esuturile conjunctive sunt foarte bine vascularizate. Celulele esutului conjunctiv n histogeneza esutului conjunctiv, elementul iniial l reprezint celula, care elaboreaz celelalte dou componente, fibrele i substana fundamental (matricea extracelular). Cele dou tipuri de celule ale esutului conjunctiv care vor fi studiate sunt: - celule proprii: fibroblastul/fibrocitul, condroblastul/condrocitul, osteoblastul/osteocitul, celula adipoas, celule care sunt ntotdeauna prezente n diferite tipuri de esut conjunctiv. - celule migrate din snge: macrofagul, plasmocitul, limfocitul, granulocitul, celule care sunt prezente inconstant n esuturile conjunctive. Celulele esutului conjunctiv, coloraie HE, esut de granulaie. esutul de granulaie se formeaz n cursul vindecrii plgilor, mai exact n faza proliferativ a acestui proces. Este de fapt un esut de reparaie, n care se gsesc fibre de colagen nou formate i toate tipurile de celule ale esutului conjunctiv, att proprii ct i migrate din snge. - cu obiectivul mic: se observ o celularitate abundent (numeroase celule), fibre de colagen dispuse izolat sau n fascicule relativ dezordonate, esut adipos i numeroase vase, vascularizaia abundent fiind caracteristic acestui tip de esut. - cu obiectivul mare: vom recunoate tipurile de celule astfel: Fibroblastul: celul alungit, de talie medie, cu citoplasm palid bazofil, pe care o recunoatem dup nucleul mare, ovalar, hipocrom, cu nucleol proeminent, situat central.

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Fibroblast
18

Fibrocitul: se recunoate dup nucleul ovalar, fusiform, intens hipercrom, situat central. Celula este i ea fusiform, cu citoplasm puin, eozinofil, greu vizibil.

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Fibrocit

Adipocitul: celul de talie mare, rotund sau poligonal, cu o vacuol unic lipidic ce mpinge citoplasma la periferie; nucleul este turtit, hipercrom.

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Adipocit

Plasmocitul: celul ovalar sau rotund, cu citoplasma intens bazofil. Caracteristic acestui tip de celul este aspectul nucleului: rotund, situat excentric n celul, cu un aspect particular al cromatinei. Granulele de heterocromatin, intens colorate, respectiv cele de eucromatin, palide, se dispun alternativ, n cmpuri radiare, realiznd un aspect asemntor spielor de roat.

19

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Plasmocit

Macrofagul: celul cu dimensiuni variabile n funcie de cantitatea materialului fagocitat, de form neregulat, cu citoplasma palid eozinofil, ce conine material fagocitat. Uneori macrofagele se pot contopi, formnd celule gigante multinucleate: celule de talie mare, cu citoplasm abundent i mai muli nuclei.
1

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Macrofagul 1 Macrofag (histiocit); 2 Celul gigant multinucleat.


20

Limfocitul: celul mic, cu nucleu rotund, hipercrom, citoplasm redus dispus la periferie sub form de semilun.

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Limfocit

Fibrele esutului conjunctiv esutul conjunctiv conine trei tipuri de fibre: fibre de colagen, fibre de reticulin (care de altfel reprezint o varietate de fibre de colagen, i anume colagen de tip III) i fibre elastice. Cu excepia fibrelor de colagen, care se coloreaz palid roz, celelalte fibre nu se coloreaz cu HE. Pentru vizualizarea lor, se folosesc coloraii speciale. Fibre de colagen, coloraia van Gieson (fucsin acid), glanda mamar. Coloraia van Gieson este coloraia de elecie utilizat pentru vizualizarea i diferenierea fibrelor colagene de alte structuri. n aceast coloraie, fibrele colagene se coloreaz n rou puternic, iar esutul epitelial i nucleii n negrucafeniu. - cu obiectivul mic: se observ fibrele de colagen, colorate n rou, cu aezare dezordonat sau ordonat; - cu obiectivul mare: se evideniaz fibrele de colagen sub forma unor linii mai mult sau mai puin sinuoase. Le putem gsi ca fibre izolate sau grupate n fascicule, fine sau grosiere. Dei fibrele de colagen din componena unui fascicul se pot desprinde i altura fibrelor din fasciculul nvecinat, ele nu se ramific i nu se anastomozeaz niciodat. Printre fibrele de colagen, se observ nucleii negriicafenii ai fibrocitelor: ovalari, turtii i intens colorai. Fibrocitele sunt strns lipite de fibrele de colagen, de aceea limitele celulare i citoplasma, care oricum e foarte redus cantitativ, nu se pot observa. Ele pot fi recunoscute numai dup nucleul lor.

21

1 Imagine microscopic Reprezentare schematic

Fibre conjunctive colagene 1 Fibre izolate i n fascicule; 2 Nucleu de fibrocit.

Fibrele de reticulin, impregnaie cu nitrat de argint, rinichi. Fibrele de reticulin sunt argirofile, deci pot fi puse n eviden prin impregnaie argentic, care le coloreaz n negru. - cu obiectivul mic: se observ o reea de fibre de reticulin colorate n negru; - cu obiectivul mare: fibrele de reticulin se prezint sub forma unor linii cu traiect neregulat. Sunt mai subiri dect fibrele de colagen. Se ramific i se anastomozeaz formnd reele cu ochiuri de mrimi i forme diferite. Nu se grupeaz n fascicule.

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Fibre de reticulin

TIPURI DE ESUTURI CONJUNCTIVE


esuturile conjunctive se mpart n 2 mari categorii: esuturi conjunctive embrionare i esuturi conjunctive adulte. esuturile conjunctive adulte, la rndul lor, se pot clasifica dup consistena substanei fundamentale n: esuturi
22

conjunctive moi, esuturi conjunctive semidure (cartilaj) i esuturi conjunctive dure (osul). esuturile conjunctive moi cuprind i ele mai multe categorii, n funcie de proporia care exist ntre cele 3 elemente componente: celule, fibre i substan fundamental. Vor fi studiate urmtoarele tipuri de esuturi conjunctive: A. esuturi conjunctive embrionare (nedifereniate): 1.esutul mezenchimatos; B. esuturi conjunctive adulte (difereniate): I. esuturi conjunctive moi 1. n care proporia celor trei elemente componente (celule, fibre, substan fundamental) este egal - esutul conjunctiv lax; 2. n care predomin celulele (esuturi specializate) - esutul conjunctiv reticular; - esutul conjunctiv adipos; 3. n care predomin fibrele (esuturi fibroase) - esutul conjunctiv tendinos; II. esutul cartilaginos -esutul cartilaginos hialin; III. esutul osos -esutul osos compact; -esutul osos spongios. esutul mezenchimatos, coloraie HE, embrion. Este un tip de esut n care predomin celulele i substana fundamental, iar fibrele, mai ales fibre de reticulin, sunt rare. - cu obiectivul mic: se vizualizeaz esutul conjunctiv tnr, mezenchimatos, caracterizat de prezena a numeroase celule stelate, celulele mezenchimatoase. Substana fundamental este abundent, palid colorat, cu tent bazofil. Fibrele de reticulin nu se evideniaz n coloraia HE; - cu obiectivul mare se observ celulele mezenchimatoase care sunt celule stelate, cu prelungiri ce vin n contact cu prelungirile celulelor nvecinate, realiznd o reea celular, n ochiurile creia se gsete substana fundamental. Celulele mezenchimatoase au citoplasm relativ redus, intens bazofil, iar nucleul este mare, rotund-ovalar, eucrom, dispus central.

23

1 Imagine microscopic Reprezentare schematic

esut conjunctiv mezenchimatos 1 Celul mezenchimatoas; 2 Substan fundamental.

ESUTURI CONJUNCTIVE MOI esuturile conjunctive moi sunt constituite din substan fundamental de consisten redus, celule i fibre n proporii variabile. esutul conjunctiv lax, coloraie HE, glanda mamar. Este un tip de esut conjunctiv n care celulele, fibrele i substana fundamental se gsesc n proporii aproximativ egale. - cu obiectivul mic: se observ dou tipuri de esut conjunctiv: un esut conjunctiv dens i un esut conjunctiv lax n care se gsesc structuri glandulare, care formeaz lobulul mamar; pe acest preparat se va studia doar aspectul esutului conjunctiv lax (din lobulul mamar). - cu obiectivul mare: se observ fibrele de colagen colorate palid roz, dispuse izolat sau n fascicule cu orientare variabil, printre care se gsesc celule conjunctive i substan fundamental. Se pot recunoate fibroblastele i fibrocitele, prin nucleii lor alungii, n form de bastona, hipo- respectiv hipercromi, dispui n vecintatea fasciculelor de fibre colagene. Acest esut fiind bine vascularizat, se observ i capilare sanguine. n seciune longitudinal, capilarul apare ca un lumen ngust n care proemin nucleii alungii i hipercromi ai celulelor endoteliale, dispui alternativ, de o parte i de cealalt a peretelui vascular, ca dinii unui fierstru i n care uneori, se pot evidenia hematii aezate n ir indian. Pe seciune transversal capilarul apare ca un spaiu mic, rotund, cu unul, maximum doi nuclei ce proemin n lumen. esutul conjunctiv lax conine i alte tipuri de fibre (fibre elastice, fibre de reticulin) dar care nu sunt vizibile n coloraia cu HE. De asemenea poate conine diferite celule migrate din snge. Acest tip de esut, n alte localizri (adventiie, capsula organelor), poate conine cantiti variabile de esut adipos.
24

8 7

6 1 2 Imagine microscopic Reprezentare schematic 5

esut conjunctiv lax 1 Fibre colagene; 2 Nucleu de fibrocit; 3 Nucleu de fibroblast; 4 Plasmocit; 5 Adipocit; 6 Limfocit; 7 Capilar secionat longitudinal; 8 Capilar secionat transversal.

esutul conjunctiv reticular, coloraie HE, nodul limfatic. Este un tip de esut conjunctiv alctuit din celule (celule reticulare), fibre de reticulin i substan fundamental. El formeaz stroma organelor limfoide (nodul limfatic, splin, mduv hematogen etc.). - cu obiectivul mic: vom cuta zona medular, profund, a nodulului limfatic, unde limfocitele sunt mai rare i unde putem observa esutul conjunctiv reticular, cu aspect de reea; - cu obiectivul mare: vom studia aspectul celulelor reticulare: celule de form stelat, cu citoplasm eozinofil i un nucleu mare, rotund i hipocrom. Prelungirile lor, lungi i puin numeroase, se anastomozeaz cu prelungirile celulelor nvecinate i realizeaz o pseudoreea ce dubleaz reeaua de fibre de reticulin. Fibrele de reticulin nu se observ n aceast coloraie. n ochiurile reelei, ce formeaz stroma nodulului limfatic, se recunosc elemente limfoide celule mici cu nucleu rotund i hipercrom i cu citoplasm redus n semilun.

1 Imagine microscopic Reprezentare schematic

esut conjunctiv reticulat 1 Celul reticular; 2 Limfocit.


25

esut conjunctiv adipos, coloraie HE, glanda mamar. Este un esut n care predomin celulele, dispuse strns una lng cealalt, substana fundamental i fibrele fiind reduse cantitativ. - cu obiectivul mic: se observ un esut conjunctiv format aproape n exclusivitate din celule adipoase mari, cu limite celulare bine vizibile i citoplasm incolor; - cu obiectivul mare: se evideniaz celulele adipoase izolate sau dispuse strns una lng cealalt, n cuiburi formnd paniculi adipoi. Sunt celule mari, rotunde, ovalare sau poligonale (cnd sunt grupate), cu membrana celular net conturat. Cea mai mare parte din celul este ocupat de o singur vacuol mare, ce nu se coloreaz n HE (celula pare goal n centru) i mpinge citoplasma i nucleul la periferie. Nucleul apare turtit, hipercrom i excentric, n timp ce citoplasma este redus la un inel subire ce nconjoar vacuola. Se realizeaz astfel aspectul de inel cu pecete. n spaiile intercelulare, foarte nguste, se gsesc rare fibre fine de reticulin i numeroase capilare.
2

2 1 Imagine microscopic Reprezentare schematic

esut adipos 1 Celule adipoase; 2 Capilare.

esutul conjunctiv tendinos, coloraie HE, tendon. Este un esut conjunctiv n care predomin fibrele de colagen, dispuse ordonat, cu celule puine i substan fundamental redus. - cu obiectivul mic: se observ un esut conjunctiv format preponderent din fibre de colagen, organizate n fascicule ordonate; printre fibre se gsesc celule conjunctive numite tenocite; - cu obiectivul mare: se evideniaz fibrele de colagen groase, palid eozinofile cu dispoziie ordonat. Au un traiect uor ondulat, pe seciune longitudinal i se dispun n fascicule dense, paralele ntre ele. ntre fascicule, respectiv ntre fibre, sunt aezate n numr mic fibrocitele (tenocitele). Sunt celule alungite, de form dreptunghiular, cu limite celulare i citoplasma slab vizibile fiind lipite de fibrele conjunctive. Nucleul este ovalar, hipercrom. Deseori nucleii
26

sunt aezai cap la cap, realiznd aspectul de nuclei gemeni, aspect caracteristic esutului tendinos.

1 Imagine microscopic Reprezentare schematic

esut conjunctiv tendinos 1 Tenocite (nuclei gemeni); 2 Fascicule de fibre de colagen.

Diagnosticul diferenial ntre diferitele tipuri de esuturi conjunctive moi se face pe baza proporiei elementelor componente i a modului de organizare al acestora. ESUTURILE CARTILAGINOASE esuturile cartilaginoase sunt esuturi conjunctive formate din substan fundamental semidur, fibre de colagen i/sau elastice i celule cartilaginoase: condroblaste, celule n activitate, care produc cartilajul, i respectiv condrocite, celule n repaus. Dup natura i arhitectura fibrelor, ct i dup cantitatea de substan fundamental, deosebim trei tipuri de esuturi cartilaginoase: hialin, elastic, fibros. esutul cartilaginos hialin, coloraie HE, trahee. Este un esut cu substan fundamental abundent, celule i puine fibre conjunctive, mascate de substana fundamental. - cu obiectivul mic: se evideniaz cartilajul hialin n tunica mijlocie a peretelui traheei. Vom observa substana fundamental omogen (palid albstruie) n care sunt cuprinse condrocitele, dispuse izolat sau n grup. La periferia cartilajului, de o parte i de cealalt se gsete pericondrul, ce nvelete cartilajul; - cu obiectivul mare: se observ pericondrul i structura cartilajului. Pericondrul are dou straturi: un strat extern, fibro-vascular i unul intern, celular. Stratul extern conine n special fibre de colagen, puine elemente celulare reprezentate de fibrocite i vase sanguine. n stratul intern se difereniaz condroblastele, celulele care sintetizeaz matricea extracelular. Acestea au aspect lenticular, dispuse cu axul lung, paralel cu suprafaa cartilajului. Au o citoplasm
27

bazofil, un nucleu ovalar alungit, eucrom. ntre pericondru i cartilaj nu exist o limit precis, trecerea fcndu-se treptat. n structura cartilajului hialin se observ substana fundamental abundent, neomogen, palid bazofil. Fibrele de colagen nu se disting din substana fundamental deoarece sunt foarte fine, de dimensiuni submicroscopice. Condrocitele sunt dispuse n lacune ale substanei fundamentale, numite condroplaste. Ele au o form rotund sau ovalar, respectiv poligonal cnd se dispun n grupuri. Au citoplasm bazofil i un nucleu rotund sau ovalar, hipercrom. Condrocitele se gsesc fie izolat, fie dispuse n grupuri izogene, formate din 3-8 celule. Deosebim grupuri izogene axiale, n care celulele sunt aezate unele peste altele, ca monedele ntr-un fiic i grupuri izogene coronare, n care celulele sunt aezate n inel (radiar) sau n coroan. n jurul condrocitelor izolate i n jurul grupurilor izogene, substana fundamental se condenseaz i se coloreaz mai intens bazofil, formnd un fel de capsul a celulei sau a grupului, numit matrice teritorial. Substana fundamental dintre grupurile izogene, colorat mai palid se numete matrice inter-teritorial.
1 3

2 Imagine microscopic

5 Reprezentare schematic

Cartilaj hialin 1 Pericondrul fibro-vascular; 2 Pericondrul celular (condroblaste); 3 Condrocite (grupe izogene coronare) cu matrice teritorial; 4 Condrocite (grupe izogene axiale) cu matrice teritorial; 5 Matrice inter-teritorial.

ESUTUL OSOS esutul osos este o varietate de esut conjunctiv, n care substana fundamental este dur. mpreun cu fibrele conjunctive (colagene) formeaz matricea osoas n care se dispun celulele: osteoblastele, osteocitele i osteoclastele. La lucrrile practice vom studia dou tipuri de esut osos: esutul osos compact i esutul osos spongios.

28

esut osos haversian compact, os uscat i lefuit. Preparatul se obine prin uscarea i lefuirea osului pn la o grosime de civa milimetri, n aa fel nct s poat fi aezat sub lamel. Pe osul uscat i lefuit se studiaz componenta mineral a osului. Osul compact este format din sisteme haversiene (osteoane) i interhaversiene. Un osteon este alctuit dintr-un canal central (canal Havers) nconjurat de lamele osoase dispuse concentric. - cu obiectivul mic: vom studia structura unui osteon. Pe seciunea transversal acesta este format dintr-un spaiu rotund situat central, canalul Havers, ce apare colorat n negru. El este nconjurat de 8-15 lamele osoase concentrice. Pe marginea lamelelor osoase se dispun caviti lenticulare, lacune spate n substana fundamental numite osteoplaste, ce apar colorate n negru. Din ele pornesc n toate sensurile canalicule lungi, subiri, ramificate, realiznd un aspect de pianjen. Prin aceste canalicule ostoplastele nvecinate comunic ntre ele. Se mai observ canale cu diametru mare, oblice sau transversale, canalele Volkmann (negre) ce leag ntre ele canalele haversiene i care nu sunt nconjurate de lamele osoase. ntre sistemele haversiene se gsesc sisteme interhaversiene sau intermediare, centrate sau nu de canale haversiene. Ele sunt formate din lamele osoase arcuate, cu osteoplaste, avnd rolul de a lega ntre ele osteoanele. - cu obiectivul mare: vom studia aspectul osteoplastelor.
2 3

1 Imagine microscopic

Reprezentare schematic

esut osos compact lefuit 1 Sistem Havers; 2 Sistem interhaversian; 3 Canal Havers; 4 Canal Volkmann; 5 Lamele osoase; 6 Osteoplaste.

esutul osos spongios, coloraie HE, os spongios. Este un esut osos haversian n care spaiile medulare reprezint componenta dominant, cea osoas fiind mai redus. - cu obiectivul mic: vom recunoate arhitectura osului spongios. Are un aspect buretos, spongios, determinat de existena unor spaii (caviti) numite areole, desprite de trabecule osoase. Trabeculele sau traveele osoase de lungimi variabile (de obicei scurte), cu orientare neregulat, se ntretaie i se
29

anastomozeaz delimitnd areolele. Acestea sunt de mrimi i forme variate, uneori intercomunicante i conin mduv hematogen. - cu obiectivul mare: vom recunoate celulele prezente n esutul osos: osteocitele, osteoblastele i osteoclastele. Se observ traveele formate din cteva lamele osoase paralele, ntre care se gsesc osteocitele dispuse n osteoplaste, aranjate n iruri paralele. Osteocitele au form ovalar, turtit, lenticular, cu citoplasm redus, eozinofil. Nucleul ovalar sau alungit, hipercrom, uneori ratatinat, se dispune central. Pe marginea traveelor se gsesc osteoblastele, dispuse ca iragurile de mrgele. Sunt celule active metabolic, de form cuboidal, ovalar sau mai adesea triunghiular. Au nucleu mare, ovalar, eucrom, iar citoplasma, abundent, este bazofil. Osteoclastele se gsesc n numr mic, numai n zonele n care are loc o remaniere osoas. Sunt localizate numai pe marginea areolelor, n contact cu traveea osoas. Aceast zon de contact (zon de resorbie osoas) este mai palid colorat i este numit lacun Howship. Osteoclastele sunt celule de talie mare (gigante), cu citoplasm abundent acidofil i cu un numr mare de nuclei hipocromi (celule multinucleate), dispui dezordonat n celul.
1 5

3 4

3 Imagine microscopic Reprezentare schematic

esut osos spongios 1 Lamele osoase cu osteocite; 2 Osteoblast; 3 Osteoclast; 4 Lacuna Howship; 5 Areol.

Diagnosticul diferenial al celor dou tipuri de esut osos se face pe baza organizrii arhitecturale a acestora.

30

ESUTURILE MUSCULARE
esuturile musculare sunt alctuite din celule specializate pentru contracie, celule care, datorit formei lor alungite, sunt denumite uzual fibre musculare. n jurul fibrelor musculare se gsete o cantitate mai mare sau mai mic de esut conjunctiv, vase i nervi. Pe baza caracteristicilor morfologice i funcionale ale fibrelor musculare, se disting 3 tipuri de esut muscular: - esut muscular neted (fibre cu citoplasma omogen, fr striaii) - esut muscular striat scheletal (fibre ce prezint striaii longitudinale i transversale) - esut muscular striat cardiac (o form de muchi striat diferit de muchiul striat scheletal, ce formeaz muchiul inimii)

ESUTUL MUSCULAR NETED


esutul muscular neted este format din celule (fibre) musculare alungite, cu capetele ascuite i cu poriunea central mai bombat (celule fusiforme), dispuse n fascicule. ntre fascicule se gsete o cantitate variabil de esut conjunctiv. esut muscular neted, coloraie HE, vezica urinar. Acest preparat s-a obinut prin etalarea vezicii urinare de broasc pe lam (deci nu este o seciune histologic). Prin pensulare, s-a ndeprtat mucoasa vezicii urinare i s-a ncercat disocierea parial a fibrelor musculare n aa fel nct s putem observa i fibre musculare netede izolate.

3 Imagine microscopic Reprezentare schematic

esut muscular neted 1 Fibr muscular izolat; 2 Fascicul muscular; 3 Nucleu de fibrocit.

31

- cu obiectivul mic: vom identifica fibrele musculare netede dispuse izolat sau n fascicule, cu orientare diferit, realiznd un aspect de reea, precum i unele elemente ale esutului conjuntiv, ca de exemplu fibrocitele. - cu obiectivul mare: vom examina aspectul unei fibre musculare netede izolate, precum modul n care mai multe fibre se grupeaz pentru a forma fascicule. Fibra muscular neted apare ca o celul fusiform cu extremiti mai subiri, efilate i centrul mai bombat. Citoplasma celulei este omogen, eozinofil. Nucleul este unic, dispus central, hipocrom, alungit, i cu axul lung paralel cu axul lung al celulei. Majoritatea fibrelor sunt dispuse n fascicule, n aa fel nct extremitatea unei fibre se gsete la mijlocul fibrei vecine.

ESUTUL MUSCULAR STRIAT SCHELETAL


Acest esut este format din celule alungite, cu aspect de panglic, rotunjite la capete, aezate paralel ntre ele, n fascicule i nconjurate de o cantitate mic de esut conjunctiv cu vase i nervi (10% din masa muscular). esut muscular striat scheletal, coloraie HE, limba. - cu obiectivul mic: se observ fibrele musculare striate scheletale cu form de panglic. Fibra muscular prezint nuclei multipli, alungii, avnd axul lung paralel cu axul lung al celulei. Aceti nuclei sunt hipercromi i sunt aezai la periferia celulei, sub sarcolem. - cu obiectivul mare: pe seciune longitudinal se observ fibrele musculare cu citoplasma (sarcoplasma) eozinofil i heterogen, prezentnd striaii transversale i striaii longitudinale, aezate ordonat. Striaiile longitudinale sau colonetele Leydig (care se observ n seciunile longitudinale) se ntind de la un capt la cellalt al fibrei i sunt date de aranjamentul miofibrilelor. Striaiile transversale sunt date de alternana regulat de discuri clare i ntunecate din structura miofibrilelor. Pe seciunea histologic striaiile transversale apar sub forma unor benzi colorate puternic eozinofil (n rou), corespunznd discurilor ntunecate; ele alterneaz cu benzi palid colorate, corespunztoare discurilor clare. Aceste benzi sunt perpendiculare pe axul lung al fibrei, sunt paralele ntre ele, i sunt aezate la distane egale. Pe seciune transversal, miofibrilele apar ca nite puncte fine, dispuse n grupuri i delimitate de septe fine de citoplasm (cmpurile Cohnheim).

32

Imagine microscopic 5 7 4 8 6 2 6 Reprezentare schematic 1 3

esut muscular striat 1 Seciune longitudinal; 2 Seciune transversal; 3 Striaii longitudinale; 4 Striaii transversale; 5 Nuclei periferici; 6 Sarcolem; 7 Cmpurile Cohnheim; 8 esut conjunctiv.

ESUTUL MUSCULAR STRIAT CARDIAC


Este format din fibre (celule) musculare mult mai scurte dect fibrele musculare striate scheletale. Au form dreptunghiular, capetele bifurcate i anastomozate cu fibrele nvecinate. Acest loc de anastomoz se numete stria scalariform (sau discurile intercalare). ntre fibre se gsete o cantitate abundent de esut conjunctiv i numeroase vase. esut muscular striat cardiac, coloraie HF (hematoxilin feric), muchi cardiac. Coloraia HF este o coloraie special, care pune n eviden striaiile fibrei musculare: discurile clare rmn incolore iar cele ntunecate apar sub forma unor benzi negre. Tot n negru se coloreaz i stria scalariform, nucleul i elementele componente ale esutului conjunctiv dintre fibre. -cu obiectivul mic: n seciune longitudinal, vom observa forma dreptunghiular a fibrelor musculare cardiace i dispunerea lor n fascicule, cu aspect de reele plexiforme.
33

-cu obiectivul mare: vom studia mai n detaliu structura celulei musculare cardice: celul dreptunghiular, cu capetele bi- sau trifurcate, aezate n fascicule paralele i unite cap la cap la nivelul extremitilor lor distale prin strii scalariforme sau discuri intercalare. Discurile intercalare apar sub forma unor benzi transversale groase, ce sunt dispuse n zig-zag i sunt perpendiculare n raport cu axul fibrei. De asemenea vom observa nucleul unic, dispus central, alungit, colorat n negru n coloraia HF. Sarcoplasma prezint, n seciune longitudinal, striaii transversale, aezate n registru, date de alternana discurilor clare i ntunecate din structura miofibrilelor i striaii longitudinale (colonetele Leydig) date de prezena miofibrilelor. Aceste striaii (transversale i longitudinale) sunt mai rare i mai slab structuralizate, comparativ cu fibra muscular striat scheletal. n spaiile intercelulare, se va observ prezena esutului conjunctiv n cantitate mai mare dect la muchiul scheletal, bogat n capilare sanguine.
1

3 Imagine microscopic

2 Reprezentare schematic

esut muscular cardiac 1 Stria scalariform; 2 Nucleu unic central; 3 esut conjunctiv.

Diagnosticul diferenial dintre cele trei tipuri de esut muscular se face pe baza aspectului morfologic al celulelor.

34

ORGANELE HEMATO- I LIMFOPOIETICE


Organele hemato- i limfopoietice formeaz compartimentul tisular central al esutului sanguin. Ele conin celule tinere, imature care reprezint precursorii celulelor circulante sanguine, n aceste organe desfurndu-se procesele de hemopoiez i de limfopoiez. Toate aceste organe au un plan comun de organizare histologic, ele fiind formate din capsul, strom i parenchim. Capsula este format din esut conjunctiv dens cu unele variaii de la un organ la altul. De pe faa intern a capsulei se desprind septe conjunctivo-vasculare care compartimenteaz organul. Stroma. Cu excepia timusului, a crui strom este de origine epitelial, toate celelalte organe limfoide au stroma alctuit din esut conjunctiv reticular. Acest esut (vezi esutul conjunctiv reticular), este format dintr-o reea tridimensional de fibre de reticulin, cu dou tipuri de ochiuri: unele mici care conin elementele parenchimului i unele mari, neregulate, cptuite din loc n loc de celule endoteliale, formnd capilarele sinusoide, prin care circul sngele sau limfa. Pe lng fibrele de reticulin, esutul conjunctiv stromal mai conine i celule reticulare stelate cu numeroase prelungiri care se unesc cu prelungirile celulelor nvecinate. Structura parenchimului va fi studiat la fiecare organ hemato- i limfopoietic n parte.

MDUVA ROIE HEMATOGEN


Este dispus n interiorul areolelor esutului osos spongios i este format din strom i parenchim. Mduv roie hematogen, coloraie HE, esut osos spongios. - cu obiectivul mic: vom observa un esut bogat celular, dispus n areolele osului spongios, format din insule de celule mieloide, neidentificabile morfologic n aceast coloraie i la aceast mrire, un numr variabil de adipocite, iar pe alocuri celule gigante, cu citoplasm eozinofil (megacariocite). - cu obiectivul mare: vom studia n primul rnd megacariocitul, o celul gigant, cu mult citoplasm eozinofil i cu un nucleu central, mare, nmugurit, sau sub form de inel. Prezena megacariocitului este aproape indispensabil pentru diagnosticul de mduv roie hematogen. Se mai pot recunoate adipocitele, sub forma de celule n inel cu pecete. Restul celulelor sunt elemente tinere ale seriei mieloide. Pentru identificarea lor sunt necesare coloraii speciale.

35

2 Imagine microscopic

3 Reprezentare schematic

Mduv roie hematogen 1 Megacariocit; 2 Adipocit; 3 Celule tinere ale seriei mieloide.

TIMUSUL
Timusul este un organ limfo-epitelial i endocrin cu structur lobulat. Prezint la periferie de o capsul conjunctiv din care se desprind septe conjunctive care mpart organul n lobi i lobuli. Stroma difer de cea a organelor limfoide periferice, fiind de origine epitelial. Parenchimul prezint dou zone distincte: o zon periferic mai ntunecat i o zon central mai palid. Zona periferic este lobulat iar zona central formeaz un miez comun pentru toi lobulii. n medular sunt prezente formaiuni lamelare eozinofile, corpusculii Hassall. Timus, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom urmri organizarea morfologic a timusului care este nconjurat de o capsul conjunctiv, bogat n esut adipos. Din ea se desprind septe conjunctive care nconjoar i delimiteaz lobulii timici bine individualizai. Lobulii timici, de form poligonal, prezint o zon central mai clar (medulara) i una periferic mai ntunecat (corticala). - cu obiectivul mare: vom studia structura citologic a celor dou zone ale lobulilor timici. Zona cortical conine o bogat populaie celular, alctuit preponderent din limfocite mici (timocite). Zona medular conine, pe lng timocite, n numr mai mic i mai lax dispuse, i celule stromale epitelio-reticulare mai evidente. Acestea celule sunt mai mari, au citoplasm abundent palid, eozinofil, cu un nucleu mare, central, hipocrom. Tot n medular vom gsi i cteva formaiuni rotunde sau ovoide, eozinofile, corpusculii Hassall, care sunt structuri caracteristice timusului. Corpusculii Hassall sunt alctuii din celule epiteliale stromale aplatizate, aezate n straturi concentrice, dnd corpusculilor aspect de bulb de ceap. n unele celule se mai poate observa nucleul, altele sunt
36

complet sau parial cheratinizate (mase eozinofile). Numrul corpusculilor crete cu vrsta.

Imagine microscopic 1 2 3 6

Reprezentare schematic

Timus 1 Capsul; 2 Sept incomplet; 3 Cortical; 4 Medular; 5 Celule epitelioreticulare; 6 Corpuscul Hassall.

Diagnostic diferenial: cu celelalte organe hemato- i limfopoietice, prin organizarea parenchimului timic sub form de lobuli delimitai de septuri conjunctive, cu cele dou zone, corticala i medulara i prin prezena corpusculilor Hassall n medular.

NODULUL LIMFATIC
Nodulul limfatic este un organ limfoid plasat pe traiectul cilor limfatice, nvelit de o capsul conjunctiv din care pleac septe scurte care compartimenteaz numai periferia organului. Prezint o strom format din esut
37

conjunctiv reticular (prelungirile celulelor reticulare anastomozate n reea, dublat de reeaua fibrelor de reticulin) i un parenchim organizat n 3 zone: corticala superficial, corticala profund (sau paracorticala) i medulara, crora li se adaug un sistem de sinusuri limfatice (sinusul subcapsular, paratrabecular i medular). Nodul limfatic, coloraie HE. - cu obiectivul mic: la periferie capsula conjunctiv i celule adipoase. Din ea pleac septe (trabecule) nguste i scurte, care compartimenteaz numai periferia nodulului (parial zona cortical). Sub capsul se observ cele 3 zone ale parenchimului: zona cortical alctuit din foliculi limfoizi aezai n coroan, zona cortical profund (paracorticala) sub forma unui esut limfoid dens i difuz i zona medular format din cordoane de limfocite desprite prin spaii mai mult sau mai puin nguste, neregulate, sinusuri medulare. - cu obiectivul mare: vom studia organizarea citologic a fiecrei zone din nodul i structura sinusurilor limfatice. Zona cortical superficial este format din foliculi limfatici secundari cu o zon central mai palid colorat (centrul clar sau germinativ) i o zon periferic mai intens colorat (coroana limfocitar). Centrul germinativ este format din celule mari, cu nucleu hipocrom i citoplasm bogat, acest lucru explicnd i aspectul su palid n comparaie cu cel al coroanei limfocitare. Aceste celule se numesc celule centro-foliculare (celulele centrului folicular) i sunt limfocite activate provenite din coroana limfocitar. Printre ele se gsesc i macrofage, dar pentru punerea lor n eviden este nevoie de coloraii imunohistochimice. Coroana limfocitar este format din limfocite mici cu nucleu hipercrom i citoplasm puin. Zona paracortical este format din limfocite dispuse difuz fr s formeze centri germinali. n aceast zon se gsesc venulele postcapilare ale lui Schultze care prezint un endoteliu nalt, cubic sau cilindric i nu conin strat muscular. Zona medular, situat n vecintatea hilului, este format din cordoane de limfocite separate ntre ele prin sinusurile medulare. n zona medular, n apropierea sinusurilor medulare, parenchimul este mai srac n limfocite, aici putndu-se vizualiza mai bine elementele stromei. Sinusurile nodulului. ntre capsul i zona cortical, se gsete sinusul marginal sau subcapsular, bine vizibil sub forma unui spaiu optic vid ce coafeaz nodulul i care conine rare elemente stromale. Sunt de asemenea vizibile sinusurile medulare dintre cordoanele medulare. Sinusurile paratrabeculare fac legtura dintre sinusul subcapsular i sinusurile medulare. Ele sunt situate n vecintatea trabeculelor i nu sunt ntotdeauna vizibile pe seciunile histologice datorit dispoziiei dense a limfocitelor din zona cortical i paracortical.

38

1 8 2 5 6 6 7 3

9 Imagine microscopic

11

10

Reprezentare schematic

Nodul limfatic 1 Capsul; 2 Corticala superficial; 3 Zona paracortical (corticala profund); 4 Zona medular; 5 Foliculi limfatici secundari; 6 Coroana limfocitar; 7 Centrul clar germinativ; 8 Sinus subcapsular; 9 Sinus paratrabecular (de obicei nu este vizibil); 10 Sinus medular; 11 Venule postcapilare ale lui Schultze

Diagnostic diferenial: cu celelalte organe hemato- i limfopoietice, prin prezena celor trei zone ale parenchimului i a sinusurilor limfatice.

SPLINA
Splina este un organ limfoid situat pe traiectul vaselor sanguine, ea reprezentnd locul de ntlnire ntre sngele circulant i esutul limfoid. La exterior este nvelit de o capsul conjunctiv, care conine i fibre musculare netede. Din ea se desprind septe conjunctivo-musculare, care sunt vizibile pe seciunile efectuate prin splin, dar care nu o compartimenteaz n lobuli. Stroma este format din esut conjunctiv reticular (reea de fibre de reticulin i celule reticulare stelate). Parenchimul este format din dou zone care se ntreptrund: pulpa alb i pulpa roie. Splin, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom urmri organizarea histologic a splinei. Parenchimul este format din dou zone care se ntreptrund: pulpa alb i pulpa roie. Pulpa alb reprezint aproximativ 20% din parenchimul splenic i are dou componente: corpusculii Malpighi (foliculi limfatici secundari i 1-2 arteriole centrale sau periferice) i tecile limfoide periarteriale (manon limfocitar situat n jurul unei arteriole). Pulpa roie, situat printre formaiunile limfoide ale pulpei
39

albe este format dintr-o reea vascular (sinusurile splenice) i cordoane celulare (cordoane splenice) alctuite mai ales din hematii. - cu obiectivul mare: vom urmri citoarhitectura celor dou zone ale parenchimului splenic: pulpa alb (format din corpusculul Malpighi i tecile periarteriale) i pulpa roie. Corpusculul Malpighi este o formaiune limfoid sferic sau ovalar, format dintr-un folicul limfatic secundar, cu centru clar germinativ, coroan limfocitar (structur microscopic asemntoare foliculilor limfatici din nodulul limfatic) i la exterior o zon marginal unde pulpa alb se ntreptrunde cu pulpa roie. La periferia corpusculului Malpighi se gsesc 1-2 arteriole cu structura microscopic caracteristic. Teaca periarterial apare sub forma unui manon de limfocite mici, situat n jurul unei arteriole centrale. Pulpa roie este alctuit din cordoane celulare, separate ntre ele prin sinusoide. Celulele pulpei roii sunt reprezentate n principal de hematii, macrofage i limfocite.

1 2 4

6 3

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Splina 1 Capsul; 2 Sept; 3 Corpuscul Malpighi; 4 Teac periarterial; 5 Arteriol; 6 Pulpa roie.

40

Diagnostic diferenial: cu celelalte organe hemato- i limfopoietice, prin prezena capsulei i a septelor groase cu structur conjunctivo-muscular i prin structura caracteristic a parenchimului format din ntreptrunderea a dou zone distincte: pulpa alb i pulpa roie.

ESUTUL LIMFOID ATAAT MUCOASELOR (MALT)


Organele limfoide care fac parte din sistemul MALT sunt situate n corionul mucoasei diferitelor organe ca: sistemul digestiv, sistemul respirator, etc. Spre deosebire de celelate organe limfoide, acestea nu sunt delimitate de o capsul. Amigdala palatin Amigdala palatin este un organ limfoid periferic situat n cavitatea bucal. Este acoperit la suprafa de un epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat. Pe alocuri, epiteliul se nfund n esutul conjunctiv subiacent, formnd criptele amigdaliene - invaginri profunde, uneori ramificate. Sub epiteliul de suprafa i n jurul criptelor, n corionul mucoasei, se gsesc foliculi limfoizi cu centrii germinali i infiltrat limfoid interfolicular. Amigdala palatin, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom studia organizarea histologic a amigdalei palatine, acoperit de mucoasa cavitii bucale format din epiteliul de suprafa, stratificat pavimentos necheratinizat i un corion format din esut conjunctiv. Se observ criptele amigdaliene adnci, cptuite de epiteliul de suprafa al mucoasei cavitii bucale. Corionul nu prezint papile, dar conine numeroi foliculi limfoizi secundari formai din centru clar germinativ i coroan limfocitar, dispui n jurul criptelor. ntre foliculi i n jurul lor se gsete un bogat infiltrat limfoid difuz esutul interfolicular. - cu obiectivul mare: vom studia structura epiteliului de suprafa, cu numeroase infiltraii limfoide n zona criptelor care uneori mascheaz aspectul epiteliului. Lumenul criptelor poate fi gol sau poate conine detritusuri celulare (celule epiteliale descuamate), limfocite, etc. Foliculii limfatici au structura caracteristic, similar cu cea descris la foliculii din nodulul limfatic. Diagnostic diferenial: cu celelalte organe hemato i limfopoietice, prin prezena criptelor mrginite nu de o capsul, ci de un epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat, de tip bucal, i prin prezena foliculilor limfatici secundari niruii de o parte i de alta a criptelor amigdaliene.

41

2 1

Imagine microscopic

4 Reprezentare schematic

Amigdala palatin 1 Epiteliul cavitii bucale; 2 Cript; 3 Foliculi limfoizi secundari; 4 esut limfoid dens interfolicular.

42

ESUTUL I SISTEMUL NERVOS


esutul nervos intr n componena att a sistemului nervos central (mduva spinrii, cerebelul, emisferele cerebrale) ct i a sistemului nervos periferic (ganglionii spinali i vegetativi, nervii periferici). El este constituit din neuroni, celule puternic difereniate i din celule gliale sau auxiliare. n SNC celulele gliale sunt astrocitele, oligodendocitele, celulele ependimare i microgliile, iar n sistemul nervos periferic celulele satelite i celulele Schwann.

NEURONUL
Neuronul este unitatea morfologic i funcional a esutului i sistemului nervos, i este format din corpul celular (pericarion) i un numr variabil de prelungiri citoplasmatice (dendrite i axon). Principalele caracteristici sunt: - aspect polimorf (form stelat, form piramidal etc.) cu 2 sau mai multe prelungiri evideniabile cu ajutorul impregnaiilor argentice; - pericarionul conine un nucleu mare, rotund, veziculos, cu nucleol proeminent; - citoplasma conine organite specifice ce pot fi puse n eviden prin coloraii speciale: neurofibrilele (impregnaii argentice) i granulaiile Nissl (albastru de toluidin, violet de cresil). Forma att de variat a neuronilor depinde de mrimea pericarionului i de numrul prelungirilor care pornesc din corpul celular. Astfel, exist celule nervoase de form stelat, ovalar, piramidal, piriform i rotund. Neuronul poate fi vizualizat prin coloraii uzuale, cu HE, sau impregnaii argentice (metoda Golgi, Cajal etc.), care coloreaz att celula ct i prelungirile ei n negru.

3 1

4 4 2

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Celul piramidal 1 Corp celular; 2 Axon; 3 Dendrit principal; 4 Dendrite secundare.


43

Neuronul piramidal, impregnaie argentic, scoara cerebral. - cu obiectivul mic: vom identifica celula piramidal din scoara cerebral; - cu obiectivul mare: pericarionul are form triunghiular; din vrfurile triunghiului pleac una sau mai multe dendrite, bogat ramificate (arbore dendritic), iar din mijlocul bazei, un axon. Celula este aezat n aa fel nct vrful triunghiului s fie ndreptat spre suprafaa scoarei cerebrale, iar baza spre profunzimea ei.

CELULELE GLIALE
Celulele gliale (nevrogliile) sunt celule de suport sau auxiliare ale sistemului nervos. n microscopia optic, se pun n eviden prin impregnaii cu sruri de Ag i/sau de Au (impregnaii Golgi, Cajal, Del Rio Hortega). n aceast coloraie ele apar sub forma unor celule cu un corp celular foarte mic, cu numeroase prelungiri (aspect de stea de mare). Unele celule gliale se gsesc n substana cenuie (astrocitul protoplasmatic, microglia, oligodendroglia), altele n substana alb (astrocitul fibros, oligodendroglia, microglia). Astrocitul protoplasmatic, impregnaie argentic, scoara cerebral. - cu obiectivul mic: vom cuta astrocitul protoplasmatic n jurul neuronilor piramidali din scoara cerebral. Fiind vorba de o impregnaie argentic, celulele apar colorate n negru. - cu obiectivul mare: astrocitul protoplasmatic apare ca o celul cu un corp foarte mic, cu foarte multe prelungiri scurte, groase i bogat ramificate; uneori pe suprafaa prelungirilor sunt prezente asperiti.

Imagine microscopic

Reprezentare schematic

Astrocit protoplasmatic

44

SISTEMUL NERVOS CENTRAL


Mduva spinrii, coloraie HE, mduva spinrii. - cu obiectivul mic: vom urmri organizarea mduvei spinrii, secionat transversal: canalul ependimar situat central este nconjurat de substana cenuie, de forma literei H, iar la exterior se afl substana alb, acoperit de meninge. Vom studia aspectul microscopic al substanei cenuii n care recunoatem neuroni multipolari de talie mare n coarnele anterioare, mai mici n cele posterioare, i numeroi nuclei mici, hipercromi, reprezentnd celulele gliale i neuroni de talie mic (neuroni de asociaie). Printre aceste elemente celulare se observ o mas eozinofil cu aspect fibrilar, alctuit din prelungirile celulelor nervoase.

3 6

Reprezentare schematic

C Imagini microscopice

Mduva spinrii imagine de ansamblu 1 Substana alb; 2 Corn anterior; 3 Corn posterior; 4 Comisura cenuie; 5 Canal ependimar; 6 Celule ependimare. A Cornul anterior; B Canalul ependimar; C Cornul posterior; D Substana alb.

45

- cu obiectivul mare: neuronii multipolari din coarnele anterioare sunt celule mari, stelate, cu citoplasm bogat, eozinofil i un nucleu rotund, central, veziculos i bine nucleolat. Forma stelat este dat de numrul mare de prelungiri care pornesc din celul. n comisura cenuie vom observa canalul ependimar delimitat de un rnd de celule cilindrice numite celule ependimare. Ele sunt celule nalte, prismatice, cu dispoziie pseudoepitelial (strns unite ntre ele, fr a fi dispuse pe o membran bazal). Nucleul lor este ovalar, cu cromatina grunjoas i este situat nspre substana cenuie. La polul apical al acestor celule se observ microviloziti. n substana alb se observ fibre nervoase mielinice formate din filamentul axial (prelungire neuronal sub forma unui punct central eozinofil), nconjurat de teaca de mielin (spaiu inelar, incolor) i de celulele gliale (lam subire circular de citoplasm i un nucleu hipercrom). Diagnostic diferenial: cu cerebelul pe baza dispunerii substanei cenuii i a substanei albe, i a caracterelor histologice individuale. Cerebelul, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom urmri aspectul de ansamblu al cerebelului, cu substana cenuie la exterior (scoara cerebeloas) i substana alb n interior (arborele vieii). La nivelul scoarei cerebeloase vom recunoate cele 3 straturi caracteristice: stratul molecular, situat la suprafa; stratul celulelor Purkinje; stratul granular situat adiacent substanei albe; - cu obiectivul mare: vom studia citoarhitectonica fiecrui strat al scoarei cerebeloase: - stratul molecular, aflat imediat sub meninge, are aspect fibrilar fiind alctuit preponderent din prelungirile citoplasmatice ale neuronilor din straturile subiacente. Conine celule puine, de form stelat, unele mici, situate superficial, altele ceva mai mari, localizate profund; - stratul celulelor Purkinje (stratul intermediar) este format dintr-un singur rnd de celule n form de par, cu baza situat spre stratul granular. Din vrful fiecrei celule pleac 1-3 prelungiri dendritice groase, care apoi se ramific bogat n stratul molecular al scoarei cerebeloase formnd o arborizaie; axonii lor ce pornesc din baza celulei, au un traiect descendent spre substana alb. Citoplasma celulelor Purkinje este eozinofil, iar nucleul este mare, hipocrom i situat central, n poriunea mai bombat a celulei. - stratul granular este situat adiacent substanei albe, fiind cel mai gros i cel mai bogat n celule. n coloraia cu HE se observ doar nucleii neuronilor ce formeaz acest strat i cei ai celulelor gliale. Aceste aglomerri de nuclei, mici, rotunzi, hipercromi, dau aspectul granular acestui strat. Sub scoara cerebeloas se observ substana alb, sub forma unui ax central, cu aspect fibrilar, format din fibre nervoase mielinice i amielinice.

46

2 3 4

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Scoara cerebeloas 1 Stratul molecular; 2 Stratul celulelor Purkinje; 3 Stratul granular; 4 Substana alb.

Diagnostic diferenial: cu mduva spinrii, pe baza dispunerii substanei cenuii i a substanei albe i a caracterelor histologice individuale.

SISTEMUL NERVOS PERIFERIC


SNP este format din ganglioni nervoi (spinali i vegetativi) i din nervi periferici (expansiuni ale neuronilor motori sau senzitivi). Ganglionul vegetativ, coloraie HE. - cu obiectivul mic: se urmrete arhitectura general a ganglionului; acesta prezint o capsul conjunctiv subire, neuroni dispui dezordonat n ntreg ganglionul, nconjurai de o capsul subire proprie. Printre neuroni se observ fibre nervoase amielinice. - cu obiectivul mare: se observ aspectul neuronilor: celule de form stelat, datorit numeroaselor prelungiri (neuroni multipolari) de talie mic, avnd 1-2 nuclei situai excentric n celul; fiecare neuron este nconjurat de un rnd incomplet de celule satelite i de o capsul fibroas foarte subire. Printre neuroni se pot observa fibrele nervoase amielinice sub form de fine filamente eozinofile dispuse dezordonat.

47

3 2 Imagine histologic Reprezentare schematic

Ganglion vegetativ 1 Celul nervoas; 2 Celul satelit; 3 Fibre nervoase.

48

APARATUL CIRCULATOR
Aparatul circulator este alctuit din inim, organ musculo-cavitar (organ propulsor) i din sistemul circulator, un sistem de conducte (vase) cu rol de transport al sngelui: capilare, artere i vene. SISTEMUL CIRCULATOR Capilarele sanguine sunt vase cu calibru mic (cu diametrul de 7-14 microni) care permit trecerea hematiilor numai n ir indian. Ca structur, peretele capilar este alctuit din endoteliu aezat pe o membran bazal; ntr-o dedublare a membranei bazale se mai gsete inconstant o celul nedifereniat numit pericit. Capilar sanguin, coloraia tricromic Masson-Goldner, limb. - cu obiectivul mic: vom urmri aspectul de ansamblu al seciunii transversale a limbii, studiind mucoasa de pe faa dorsal, care acoper papilele linguale. Aceast mucoas este format dintr-un epiteliu stratificat pavimentos colorat n maro, cu un strat de cheratin pe alocuri, colorat n portocaliu i corion, n care fibrele colagene sunt colorate n verde. La nivelul corionului vom localiza capilarele sanguine n diverse seciuni, cu un lumen foarte ngust, delimitat de un perete foarte subire;

Seciune transversal Imagine histologic

Seciune longitudinal 1

1 Reprezentare schematic

Capilar sanguin 1 Nucleul celulei endoteliale; 2 Nucleul pericitului; 3 Hematii.

49

- cu obiectivul mare: n seciune longitudinal se observ peretele capilar format dintr-un rnd de celule pavimentoase turtite (celulele endoteliale) aezate pe o membran bazal. Celulele endoteliale au nucleu hipercrom, colorat n negrucafeniu, ovalar, aezat paralel cu membrana bazal; el proemin n lumenul vasului cu un aspect asemntor dinilor de fierstru. Adiacent peretelui capilar se observ nucleul pericitului, cu un aspect diferit de cel al nucleului celulei endoteliale: este mai voluminos i hipocrom. n seciune transversal capilarul are un lumen foarte mic, rotund, n care proemin cel mult un nucleu (nucleul celulei endoteliale). Arterele. Arterele au peretele alctuit din trei tunici: - intima cptuete lumenul vasului i este alctuit la rndul su din: endoteliu, stratul subendotelial; - media, stratul cel mai bine dezvoltat este alctuit din fibre musculare netede i lamele elastice n proporii diferite la diferite tipuri de artere, aezate concentric n jurul lumenului; - adventiia este format preponderent din fibre de colagen i din puine fibre elastice aezate longitudinal (n lungul vasului); tot aici vom gsi i vasa vasorum i nervi vasorum. Media este delimitat de intim prin limitanta elastic intern, respectiv de adventiie prin limitanta elastic extern. Vom studia dou tipuri de artere: arterele mari, de tip elastic, i arterele mijlocii, de tip muscular. Artera de tip elastic, coloraie HE, aorta. - cu obiectivul mic: vom observa pe o seciune transversal lumenul larg, rotund sau ovalar, regulat, cu un perete gros, structuralizat n cele trei tunici: intima, care reprezint 10%, media 80% i adventiia 10% din grosimea peretelui. n coloraia cu HE, structurile elastice din peretele arterial nu se coloreaz, aprnd ca spaii mai palid colorate sau goale; - cu obiectivul mare: vom studia elementele componente ale celor trei tunici: - intima, cu un endoteliu evideniat doar prin nucleii hipercromi ce proemin n lumen; stratul subendotelial format din fibre de colagen i fibroblaste orientate circular; - limitanta elastic intern apare sub forma unui spaiu ngust, ondulat, necolorat, ce separ intima de medie; fiind alctuit din lamele elastice ea nu se coloreaz n coloraia cu HE; - media, format n cea mai mare parte din lamele elastice care nu se coloreaz cu HE i apar ca spaii groase, sinuoase, ntrerupte datorit dispoziiei discret spiralate. Printre ele vom observa fibre musculare netede (secionate longitudinal) cu morfologia lor specific, rare fibre de colagen i substan fundamental. n aceast tunic lipsesc fibroblatii, funcia lor fiind ndeplinit de fibrele musculare netede - limitanat elastic extern este dispus ntre medie i adventiie, fiind slab reprezentat i greu vizibil n aceast coloraie
50

- adventiia este alctuit din fibre de colagen, fibre elastice care nu se organizeaz n lamele i fibroblati, dispuse n lungul vasului. La periferia adventiiei se observ vase: vasa vasorum (arteriole i venule) i nervi (nervi vasorum).

2 A 3

5 C

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Artera de tip elastic, HE vedere de ansamblu A Intima; B Media; C Adventiia; 1 Celul endotelial; 2 Limitanta elastic intern; 3 Lamele elastice; 4 Fibre musculare netede; 5 Limitanta elastica extern; 6 Vasa vasorum.

Artera de tip elastic, coloraia rezorcin-fuxin Weigert, aorta. Rezorcina-fuxina este o coloraie special pentru fibrele elastice, care apar colorate n albastru-violet. Elementele elastice sunt singurele care se colorez pe acest preparat. - cu obiectivul mic: se evideniaz bogia de elemente elastice (fibre i lamele) colorate n albastru-violaceu; - cu obiectivul mare: vom studia n fiecare tunic prezena i modul de organizare al elementelor elastice. Intima prezint rare i fine fibre elastice n stratul subendotelial. Limitanta elastic intern conine lamele elastice subiri, sinuoase, suprapuse. Media prezint numeroase lamele elastice sinuoase, orientate concentric n jurul lumenului i legate ntre ele prin fine fibre elastice oblice. Limitanta elastic extern apare sub forma
51

unei condensri de lamele elastice. n adventiie se observ fibre elastice cu dispoziie longitudinal. Se mai coloreaz i elementele elastice din vasa vasorum.

3 4

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Arter de tip elastic, RF 1 Limitanta elastic intern; 2 Lamele elastice; 3 Limitanta elastic extern; 4 Adventiia.

Artera de tip muscular i vena, coloraie HE, pachet vasculo-nervos. - cu obiectivul mic: vom observa n seciune transversal artera cu un lumen circular, regulat, cu un perete gros, musculo-conjunctiv, format din intim (5-10%), medie (50%) i adventiie (40-45%); lng arter vom observa i vena cu un lumen larg, neregulat, colabat, cu un perete mai subire i mai slab structuralizat dect al arterei corespunztoare, format din cele trei tunici: intima (5%), media (15%) i adventiia (80%); - cu obiectivul mare: n peretele arterei, la nivelul intimei vom recunoate endoteliul prin nucleii ovalari hipercromi ce proemin n lumen, stratul subendotelial foarte subire i limitanta elastic intern foarte bine reprezentat, ce apare sub forma unui spaiu liniar ngust, foarte sinuos, incolor. Media este format din fibre musculare netede orientate circular n mai multe straturi, printre care apar rare fibre colagene i lame elastice. La limita dintre medie i adventiie se evideniaz limitanta elastic extern, sub forma unei condensri de fibre elastice mai greu vizibile n coloraia HE. Adventiia are o structur similar cu adventiia arterei de tip elastic. Lng arter vom observa structura peretelui venos, cu endoteliu, cu un strat subendotelial foarte fin i o limitant elastic intern foarte subire, mai puin
52

sinuoas, incolor. n media, relativ subire, vom recunoate fibrele colagene, cteva fibroblaste i puine fibre musculare netede. Adventiia este tunica cel mai bine reprezentat, alctuit din fascicule de fibre musculare netede, fibre colagene i o reea de fibre elastice (invizibile pe acest preparat), dispuse longitudinal. i adventiia venei conine vasa vasorum i nervi vasorum.

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Arter de tip muscular, HE 1 Intima; 2 Media; 3 Adventiia.

2 3

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Ven, HE 1 Intima; 2 Media; 3 Adventiia.

53

Diagnostic diferenial: al arterei de tip muscular cu artera de tip elastic (coloraie HE i RF), respectiv al venei, cu artera de tip muscular, pe baza proporiei celor trei tunici i a structurii acestora.

54

APARATUL DIGESTIV
Aparatul digestiv este format din cavitatea bucal, tubul digestiv i glandele anexe.

CAVITATEA BUCAL
Reprezint compartimentul anterior al tubului digestiv prin care acesta comunic cu exteriorul. Este format din: - mucoasa cavitii bucale - buzele - limba - organul dentar, format din dinte i aparatul su de susinere n arcada dentar, parodoniul - glandele salivare (glande anexe ale aparatului digestiv).

Mucoasa cavitii bucale


Cavitatea bucal este acoperit n ntregime de o mucoas, care n funcie de localizare i de gradul de mobilitate, este de dou tipuri: mucoasa fix i mucoasa mobil. Mucoasa fix este format numai din mucoas (epiteliu i corion) i este ferm ataat de periostul subiacent, fiind astfel imobil (gingie, palatul dur). Mucoasa mobil are un strat suplimentar, submucoasa, i este fixat pe epimisiumul muchilor subiaceni, ceea ce-i confer mobilitate (palatul moale, mucoasa obrajilor, planeul bucal etc.) Mucoasa obrajilor, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom recunoate aspectul caracteristic al unei mucoase format din epiteliul de acoperire i corion, la care se adaug un al treilea strat reprezentat de submucoas. - cu obiectivul mare: vom studia structura fiecrui strat al mucoasei n parte. La suprafa se observ epiteliul, de tip stratificat pavimentos necheratinizat (epiteliu scuamos). El se sprijin pe o membran bazal care-l separ de stratul urmtor, lamina propria sau corionul. Lamina propria este format din esut conjunctiv, vase de snge, nervi, infiltraii limfoide difuze sau sub form de foliculi. Ea prezint dou zone: - corionul papilar cu structur de esut conjunctiv lax ce ptrunde n grosimea epiteliului sub forma unor papile - corionul reticular, situat sub stratul papilar, cu structur de esut conjunctiv dens. Submucoasa este format din esut conjunctiv dens i conine glande salivare mici, vase de snge, nervi i esut adipos.
55

I II III 2

IV 1 Imagine histologic Reprezentare schematic

Mucoasa obrajilor I Epiteliu de suprafa; II Corion papilar; III Corion reticular; IV Submucoasa; 1 Glande salivare mici; 2 Vas sanguin.

Diagnostic diferenial: cu alte tipuri de mucoas din alte poriuni ale tubului digestiv.

Buzele
Buzele sunt dou pliuri musculo-cutanate care delimiteaz orificiul anterior al cavitii bucale. Pe o seciune sagital prin buz se observ c aceasta este format dintr-un schelet musculo-conjunctiv central, acoperit de: - piele pe faa extern - mucoasa vestibular pe faa intern (ce privete spre cavitatea bucal) - roul buzelor sau marginea liber, ntre cele dou fee. Buza, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom observa aspectul microscopic general al suprafeei de seciune, n centru cu un ax format din fascicule de fibre musculare striate secionate n diferite incidene, nconjurate de esut conjunctiv bogat vascularizat, acoperit de cele trei tipuri de nveliuri. - cu obiectivul mare: vom studia structura fiecrui versant n parte i a scheletului musculo-conjunctiv: - faa extern, acoperit de piele subire format din epiderm i derm, cu foliculi piloi, glande sebacee i glande sudoripare - faa intern, acoperit de mucoasa vestibular (parte a mucoasei cavitii bucale), cu aceeai structur ca i cea descris la mucoasa obrajilor - marginea liber (roul buzelor), care este o zon de tranziie ntre piele i mucoasa buzei. Epiteliul de suprafa este un epiteliu stratificat pavimentos cheratinizat cu unele particulariti: este subire, iar stratul cornos de la suprafa este foarte fin. Corionul acestei zone prezint numeroase papile care ptrund adnc
56

n grosimea epiteliului, ajungnd aproape de suprafaa lui. n papile observm numeroase capilare. Acest aspect morfologic explic culoarea roie, specific roului buzelor (prin acest epiteliu subire se vede culoarea roie a sngelui din vasele corionului). Zona roului buzelor nu prezint foliculi piloi, glande sudoripare i sebacee. Scheletul musculo-conjunctiv este format din fascicule de fibre musculare striate care aparin muchiului orbicular al buzelor, nconjurate de esut conjunctiv ce conine glande salivare mici.
II 9 2

5 I 8 4 6 1

III

7 Reprezentare schematic

Faa intern

Roul buzelor Imagini histologice

Faa extern

Buza seciune sagital I. Faa intern; II. Roul buzelor; III. Faa extern. 1 Epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat; 2 Papile adnci n zona roului buzelor; 3 Epiderm; 4 Gland sudoripar; 5 Folicul pilos; 6 Gland sebacee; 7 Fibre musculare striate; 8 Glande salivare mici; 9 Capilar.
57

Diagnostic diferenial: cu limba, pe baza absenei papilelor linguale, prezenei epidermului etc.

Limba
Limba este un organ musculo-epitelial care ocup o mare parte din cavitatea bucal. Este format dintr-un ax musculo-conjunctiv acoperit de o mucoas, care face parte din mucoasa cavitii bucale, cu aspect diferit pe cele dou fee ale limbii: neted pe faa inferioar i cu mici proeminene pe faa dorsal. Limba, coloraie HE. -cu obiectivul mic: vom urmri aspectul morfologic general al seciunii, recunoscnd: - axul central format din fascicule de fibre musculare striate dispuse n diferite direcii. Printre fascilulele musculare observm esut conjunctiv, vase de snge, nervi, esut adipos i glande salivare mici (seroase i mucoase) ale cror canale de excreie strbat corionul i se deschid la suprafaa epiteliului - mucoasa cu aspect caracteristic pe cele dou fee: Mucoasa faei inferioare a limbii este subire i cu suprafaa neted. Ea este format din: - epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat i - corion - esut conjunctiv lax, cu papile scurte i numeroase. Mucoasa feei dorsale a limbii, groas i neregulat, este format din: - epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat gros i corion. Epiteliul prezint numeroase proeminene, numite papilele linguale. Papila lingual este format dintr-un ax central conjunctivo-vascular, acoperit de un epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat. Dup form, structur i localizare, se pot deosebi patru tipuri de papile linguale: papilele filiforme, fungiforme, foliate i circumvalate. Papilele filiforme se recunosc cu obiectivul mic prin forma lor de flacr, cu vrful ascuit. Acest vrf este acoperit cu un capion de cheratin. Papilele filiforme nu au muguri gustativi. Papilele fungiforme au form de ciuperc, cu o baz mai ngust i o poriune superioar hemisferic, uor turtit i neted. Ele sunt acoperite cu un epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat ce conine civa muguri gustativi. n interiorul papilei, corionul formeaz mici papile secundare la contactul cu epiteliul. Papilele foliate sunt rudimentare la om; ele se pot observa pe feele laterale ale limbii. Au aspectul unor plici paralele ntre ele (ca filele unei cri). Sunt acoperite de epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat, ce conine civa muguri gustativi pe prile laterale.

58

I 2 1

II

5 4 6

III Reprezentare schematic

Imagine histologic

Limba I Faa dorsal; II Faa lateral; III Faa ventral 1 Papil filiform; 2 Papil fungiform; 3 Papile foliate; 4 Glande salivare mici; 5 Fibre musculare striate; 6 Epiteliul feei ventrale.

59

Papilele circumvalate se gsesc numai n partea posterioar a limbii, n faa V-ului lingual. Ele au cteva caractere particulare, care le deosebesc de restul papilelor: sunt voluminoase i de aceea nu intr n totalitate n cmpul microscopic, chiar examinate cu obiectivul mic nu proemin la suprafaa limbii, fiind inclavate n grosimea mucoasei linguale sunt nconjurate de un an, numit valum, care le separ de restul epiteliului limbii epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat care le acoper, conine la nivelul valumului foarte muli muguri gustativi axul conjunctiv al papilei prezint multe papile secundare la contactul cu epiteliul corionul din jurul papilelor conine glande salivare mici, seroase (glandele Ebner), ale cror canale de excreie se deschid la nivelul valumului.
1 2 2

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Papil circumvalat 1 Epiteliul lingual; 2 Valum; 3 Mugure gustativ; 4 Glande seroase von Ebner.

Mugurii gustativi reprezint organul receptor al analizatorului gustativ. - cu obiectivul mic: se localizeaz mugurii gustativi, care apar sub forma unor mici formaiuni ovalare sub form de butoiae, mai palid colorate, inclavate n grosimea epiteliului unor papile linguale. Ei pornesc de la nivelul membranei

60

bazale, strbat toat grosimea epiteliului i ajung la suprafaa acestuia, unde prezint un mic orificiu numit porul gustativ. - cu obiectivul mare: vom studia n detaliu structura histologic a mugurilor gustativi. Un mugure gustativ este format din 3 tipuri de celule: celulele senzoriale (gustative) celulele de susinere i celulele bazale. Celulele senzoriale i de susinere sunt celule fusiforme, ncovoiate, dispuse ca doagele unui butoi; ele se ntind de la membrana bazal pn la suprafaa epiteliului. Celulele bazale se gsesc doar n apropierea membranei bazale. Pe seciunea histologic le putem recunoate dup urmtoarele caractere: -celulele de susinere sunt celule subiri, situate att la periferia mugurelui, ct i n interiorul su, nconjurnd i separnd totodat celelalte tipuri celulare, cu citoplasma mai ntunecat i un nucleu central, ovalar, hipercrom -celulele senzoriale sunt alungite, cu citoplasma mai deschis la culoare i un nucleu ovalar, central i hipocrom. La polul apical, n dreptul porului gustativ, ele emit o prelungire citoplasmatic lung care are rol de receptor de suprafa pentru simul gustului -celulele bazale sunt aezate lng membrana bazal, sunt mai mici, cubice, cu nucleul rotund i nu ajung la suprafaa epiteliului.

1 2

3 Imagine histologic

4 Reprezentare schematic

Mugure gustativ 1 Por gustativ; 2 Celul de susinere; 3 Celul senzorial; 4 Celul bazal.

Diagnosticul diferenial al limbii se face cu buza, de care se difereniaz prin absena pielii i a zonei de tranziie caracteristic buzei (roul buzelor), prin prezena papilelor linguale i prin structura caracteristic musculo-conjunctivoglandular a axului central al limbii.

61

Dintele
Dinii sunt principalii constitueni ai cavitii bucale. Sunt structuri dure, mineralizate, fixate n nite caviti (alveole) ale osului maxilar i mandibular prin intermediul unui aparat de legtur care formeaz parodoniul (cement, ligament alveolo-dentar, os alveolar i gingie). Dintele, fiind un organ mineralizat, poate fi studiat microscopic (ca i osul) sub dou forme: dinte uscat, lefuit (nedecalcificat) i dinte decalcificat, colorat cu diferite coloraii histologice. Dinte uscat i lefuit, seciune longitudinal. Cu aceast tehnic se va studia, ca i la os, componenta mineral a dintelui. Se studiaz pe felii subiri de dinte uscat, secionate longitudinal, lefuite la o grosime de 4-5 microni, montate cu balsam ntre lam i lamel. - cu obiectivul mic: se va studia forma i structura de ansamblu a dintelui cu cele trei pri componente: coroana, de form cuboidal, colul sau coletul care leag coroana de rdcin i rdcina. Pe o seciune longitudinal prin dintele lefuit se observ urmtoarele structuri: o cavitate central (camera pulpar la nivelul coroanei i canalul pulpar la nivelul rdcinii), care n dintele uscat este goal deoarece esutul moale de aici a fost ndeprtat prin lefuire dentina (coronar i radicular) - nconjoar camera i canalul pulpar smalul - acoper dentina coronar i se ntinde pn la nivelul coletului dentar cementul - nconjoar dentina radicular, pornete de la nivelul coletului i se termin la nivelul vrfului rdcinii foramenul apical - un orificiu situat la nivelul vrfului rdcinii (apexul dentar). - cu obiectivul mare: vom studia aspectele microscopice ale esuturilor dure ale dintelui: smal, dentin i cement. Smalul are culoare brun glbuie i se ntinde de la jonciunea cu dentina (jonciunea amelodentinar) pn la suprafaa dintelui. Este format din prisme de smal i substan interprismatic, care-i confer un aspect striat longitudinal. Prismele de smal apar sub forma unor panglici subiri i lungi, paralele ntre ele, cu un traiect sinuos. Datorit traiectului lor, pe seciunile longitudinale prin dinte prismele de smal nu se vd pe toat lungimea lor, prsind rapid planul de seciune. Ele sunt mai palid colorate comparativ cu substana interprismatic din jur. Substana interprismatic apare sub forma unor linii subiri, mai intens colorate, dispuse ntre prismele de smal. n afara striaiilor longitudinale, pe suprafaa smalului se observ i striaii transversale, care reprezint structuri clasice ale smalului: liniile sau striaiile Retzius (linii sau benzi maronii dispuse paralel cu suprafaa dintelui i perpendicular pe prismele de smal) care sunt

62

rezultatul formrii ritmice a smalului, n care perioadele de depunere alterneaz cu perioade de repaus linia neonatal o striaie Retzius mai groas. Zonele de slab mineralizare ale smalului sunt poriuni n care matricea organic se gsete ntr-un procent mai ridicat dect n restul smalului. Acestea sunt: lamelele smalului care apar sub forma unor benzi subiri, mai intens colorate, care pleac de la suprafaa smalului i ajung la jonciunea amelodentinar, uneori ptrunznd i n dentin. Ele au o dispoziie longitudinal i pot fi confundate cu fisuri ale smalului smocurile (tufele), structuri asemntoare unor smocuri de iarb dispuse longitudinal. Ele pleac de la nivelul jonciunii amelodentinare i se ntind pe 2/3 din grosimea smalului jonciunea amelodentinar, ce se prezint ca o linie n zig-zag la contactul dintre smal i dentin spinii (pintenii) smalului (fusele dentinare), ce apar sub forma unor linii negre cu form de virgul, imediat deasupra jonciunii amelodentinare. Reprezint prelungiri ale odontoblastelor din canaliculele dentinare care traverseaz linia amelodentinar i rmn captive n smal. Dentina are un aspect striat longitudinal datorit prezenei canaliculelor dentinare. Pe dintele uscat i lefuit se pot identifica: - canaliculele dentinare - sub forma unor linii negre (sunt umplute cu aer dup ndeprtarea fibrelor lui Tomes prin lefuire), cu un traiect ondulat la nivelul coroanei dentare (n S) i rectiliniu la nivelul rdcinii. Se ntind de la pulpa dentar la jonciunea amelo-dentinar la nivelul coroanei, respectiv jonciunea dentin-cement la nivelul rdcinii - dentina pericanalicular - un manon mai negru n jurul canaliculelor dentinare - dentina intercanalicular - benzi mai palid colorate, situate ntre canaliculele dentinare. Ca i la smal, n afara striaiilor longitudinale, pe suprafaa dentinei se observ i striaii transversale (structuri dentinare) - liniile incrementale sau liniile de cretere von Ebner (striaii situate paralel cu camera pulpar i perpendicular pe canaliculele dentinare). Ele reflect procesul de cretere zilnic a dentinei. Zonele de slab mineralizare de la nivelul dentinei sunt reprezentate de: dentina interglobular sau spaiile interglobulare Czermack ce se gsesc n dentina coronar, sub jonciunea amelodentinar i au aspectul unor spaii globuloase negre neregulate stratul granular al lui Tomes se gsete la nivelul rdcinii dintelui, imediat sub jonciunea cement-dentin i apare sub forma unui ir granular fin, negru, dispus paralel cu cementul, a crui grosime crete progresiv de la colet la apexul dintelui.
63

13 7

10

11 12 3

Dinte uscat i lefuit vedere de ansamblu 1 Smal; 2 Dentina; 3 Cement; 4 Cement celular cu cementoplaste; 5 Cavitatea pulpar; 6 Canal radicular; 7 Striaii Retzius; 8 Spinii smalului; 9 Tufele smalului; 10 Spaii interglobulare; 11 Stratul granular al lui Tomes; 12 Cement acelular; 13 Lamel a smalului.

64

Zone de slab mineralizare ale dintelui 1 Tufele smalului i jonciunea amelo-dentinar; 2 Spinii i lamelele smalului; 3 Spaii interglobulare Czermak; 4 Stratul granular Tomes i cementoplaste.

Cementul are macroscopic o culoare glbuie i o structur asemntoare cu osul. El prezint dou regiuni: - cementul acelular, care apare ca un strat subire cu aspect striat longitudinal; el acoper dentina radicular, imediat sub colet, de obicei lipsind n treimea inferioar a rdcinii - cementul celular acoper treimea inferioar a rdcinii i este format dintro matrice mineralizat n care se gsesc nite caviti colorate n negru, cu numeroase prelungiri, avnd n felul acesta form de pianjen (cementoplaste). Dinte decalcificat, coloraie HE. - cu obiectivul mic: se observ structura n ansamblu a matricei organice a dintelui: n centru pulpa dentar, nconjurat de jur mprejur de dentin. Aceasta la rndul ei este acoperit de cement la nivelul rdcinii dintelui. Smalul, avnd o cantitate foarte mic de matrice organic, dispare practic dup decalcificare i nu apare pe aceast seciune. - cu obiectivul mare: vom studia componentele dintelui rmase dup decalcificare (elementele organice: celule, fibre, matrice organic). Dentina are aspect eozinofil i striat longitudinal. Acest aspect este dat de procesele odontoblastice (fibrele lui Tomes), situate n canaliculele dentinare, care se coloreaz sub forma unor linii eozinofile. Peretele canaliculului dentinar este format de dentina pericanalicular care, fiind puternic mineralizat, apare ca un spaiu subire, mai intens colorat. Matricea organic a dentinei intercanaliculare apare de culoare roz mai palid.

65

ntre pulpa dentar i dentina mineralizat este prezent totdeauna o zon mai palid eozinofil, striat, care reprezint stratul de dentin nou format (predentina). Pulpa dentar ocup camera pulpar i canalul radicular i este format dintr-un esut conjunctiv mezenchimatos cu urmtoarele componente: - celule mezenchimatoase nedifereniate n numr mare (fibroblaste pulpare), care sunt celule stelate, cu numeroase prelungiri lungi i subiri. Celulele au nuclei centrali, hipocromi i citoplasm puin, palid colorat bazofil. - n jurul celulelor exist substan fundamental i fibre de colagen dispuse ntr-o reea lax n pulpa tnr i mai dens n pulpa btrn. n esutul conjunctiv pulpar mai gsim i numeroase vase sanguine i celule nervoase. Pulpa dentar prezint dou regiuni: Regiunea periferic sau odontogen care circumscrie periferic pulpa i este format din 3 straturi: - stratul odontoblastelor (celulele secretante de dentin), situat la periferia pulpei dentare, lng predentin sub forma unui rnd de celule nalte, cilindrice, cu nuclei ovalari situai la baza celulei (spre pulpa dentar) i cu citoplasm palid bazofil. La nivelul polului apical celula prezint o prelungire numit proces odontoblastic sau fibr Tomes, care prsete pulpa i ptrunde n canaliculele dentinale (striaiile eozinofile din dentin). - zona acelular sau fibrilar a lui Weil este un spaiu situat imediat sub odontoblaste, format dintr-o reea de fibre de colagen, vase de snge i terminaii nervoase, srac n celule. - stratul subodontoblastic (stratul Hhl sau stratul bogat celular) situat sub stratul fibrilar Weil, format din numeroase celule mezenchimatoase, nedifereniate i fibroblaste. Regiunea central sau parenchimul pulpar propriu-zis a fost descris mai sus.

2 3 4 5

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Dinte decalcificat 1 Dentina (procese odontoblastice); 2 Predentina; 3 Odontoblaste; 4 Stratul fibrilar Weil; 5 Parenchim pulpar.
66

Parodoniul
Parodoniul are rolul de a ataa dintele de osul maxilar sau mandibular. Este format din urmtoarele structuri: osul alveolar, cementul, ligamentul periodontal i gingia. Parodoniu, coloraie HE, dinte decalcificat cu parodoniu - cu obiectivul mic: se vor studia cele patru structuri de susinere ale dintelui n alveol: gingia, care n sectiune longitudinal are forma unui triunghi cu vrful spre coroana dentar osul alveolar situat n jurul rdcinii dentare ligamentul periodontal sub forma unei structuri fibroase situat ntre osul alveolar i cement cementul dentar, ataat dentinei radiculare, descris deja la dintele lefuit. Osul alveolar este format din 2 lame de esut osos compact (corticalele), lama vestibular i lama lingual, ntre care se gsete esut osos spongios trabecular. n acest esut osos spongios exist nite caviti n care sunt nfipte rdcinile dinilor. Aceste caviti sunt tapetate de o lam fin osoas, peretele alveolei dentare, ce nconjoar rdcina i asigur inseria ligamentului periodontal. Peretele alveolei dentare este format din dou tipuri de os specializat, osul fasciculat, bogat n fibre colagene i puternic mineralizat i osul lamelar. Ligamentul periodontal (alveolo-dentar), este situat ntre cement i osul alveolar. El este un esut conjunctiv fibros, dens, bogat vascularizat i inervat. Este format din fibre, celule i substan fundamental. Pe preparat se observ fibrele de colagen din ligament, grupate n fascicule, dispuse ntre cement i osul alveolar. Aceste fibre se numesc fibrele Sharpey. Celulele sunt numeroase i se gsesc fie printre fibre: fibroblastele, macrofagele, mastocitele, grupuri de celule epiteliale reprezentnd insulele Malassez; fie spre peretele osului alveolar: osteoblastele sau spre peretele cementului: cementoblastele. ntre celule i fibre se gsete o cantitate mic de substan fundamental. Gingia, n seciune longitudinal, formeaz de fiecare parte a dintelui cte un triunghi cu vrful spre coroana dentar i cu laturile orientate astfel: - latura orientat spre smal reprezint versantul intern - latura dinspre cavitatea bucal reprezint versantul extern al gingiei. ntre versantul intern al gingiei i coroana dintelui exist un an care se termin n fund de sac, anul gingival.

67

5 4 3

Gingia 2

Ligamentul periodontal Imagini histologice Reprezentare schematic

Parodoniul 1 Dentin; 2 Cement; 3 Epiteliul versantului extern (gingia liber); 4 Epiteliul anului gingival; 5 Epiteliul joncional; 6 Ligamentul periodontal; 7 Os alveolar.

Gingia este format din mucoasa cavitii bucale (epiteliu i corion), submucoasa lipsind la nivelul gingiei. Epiteliul versantului extern este mai gros i este de tip pavimentos stratificat cheratinizat n timp ce epiteliul versantului intern este subire, de tip pavimentos stratificat necheratinizat. Corionul versantului extern este bine reprezentat i formeaz papile numeroase care ptrund adnc n epiteliu, iar corionul versantului intern este subire, fr papile i este infiltrat cu limfocite. Epiteliul situat n fundul anului gingival i care ataeaz efectiv gingia de dinte, se numete epiteliu joncional.
68

Dezvoltarea dintelui
Dezvoltarea dintelui se desfoar n urmtoarele stadii: - stadiul de mugure - stadiul de capion i - stadiul de folicul dentar. Denumirea acestor stadii este dat dup forma primordiului epitelial al dintelui. Dezvoltarea dintelui, stadiul de mugure i de folicul dentar, embrion, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom urmri diferitele stadii de dezvoltare ale dintelui i aspectele morfologice microscopice caracteristice lor. Vom observa la suprafaa cavitii bucale primitive mucoasa format din epiteliul gingival (stratificat pavimentos) i corionul format din esut conjunctiv mezenchimatos n care vom gsi primordiile dentare respective. - cu obiectivul mare: vom studia n detaliu elementele structurale caracteristice fiecrui primordiu dentar. Stadiul de mugure dentar n acest stadiu, primordiul dintelui are dou componente: - primordiul epitelial din care ia natere organul smalului. El are forma unei ciree, fiind format dintr-un pedicul subire epitelial, la a crui extremitate profund se gsete o mas globuloas format din mai multe straturi de celule epiteliale aezate pe o membran bazal. Stratul bazal este format dintr-un rnd de celule cilindrice i celelalte straturi sunt formate din celule poligonale. Acest primordiu se formeaz prin nfundarea i proliferarea epiteliului bucal primitiv n mezenchimul subiacent.
1

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Stadiul de mugure dentar 1 Epiteliul bucal; 2 Primordiu epitelial; 3 Mezenchim.


69

- primordiul mezenchimatos apare ca o condensare a esutului mezenchimatos n jurul primordiului epitelial. Din el va lua natere restul componentelor dintelui i parodoniul. ntr-o faz urmtoare acest mezenchim se invagineaz sub forma unei papile la baza primordiului epitelial. n aceast faz incipient de dezvoltare, germenul dentar este localizat superficial, n apropierea epiteliului bucal primitiv. Stadiul de folicul dentar. Foliculul dentar este mugurele dentar izolat de epiteliul cavitii bucale primitive i nconjurat de o capsul conjunctiv (sac dentar), care l separ de esutul conjunctiv n care este situat. n acest stadiu vom identifica urmtoarele trei structuri: - primordiul epitelial - primordiul mezenchimatos i - sacul dentar. Primordiul epitelial (organul adamantin sau organul smalului) are form de clopot, cuprinznd n poriunea sa concav primordiul mezenchimatos. Este format din urmtoarele structuri: - epiteliul adamantin extern care se gsete la suprafaa primordiului i este format dintr-un rnd de celule cubice sau turtite. El este tapetat la exterior de sacul dentar. - epiteliul adamantin intern este situat spre profunzimea primordiului epitelial, adiacent primordiului mezenchimatos (papila dentar) pe care l tapeteaz. Este format dintr-un rnd de celule specializate numite adamantoblaste (ameloblaste), celulele care produc smalul. Adamantoblaste sunt celule cilindrice, nalte, dispuse ntr-un singur strat, cu nucleul ovalar, situat iniial bazal dar pe msur ce smalul se elaboreaz, se deplaseaz apical. n microscopia electronic se poate observa c, de la nivelul polului bazal, pornete o prelungire citoplasmatic spre papila dentar, prelungirea lui Tomes, n jurul creia se va depune smalul. - stratul intermediar este format din 2-3 rnduri de celule turtite, situate ntre epiteliul adamantin intern i pulpa smalului. - pulpa smalului sau reticulul stelat este masa principal a organului adamantin i este situat ntre epiteliul adamantin extern i cel intermediar. Ea este format din celule stelate de origine epitelial (celule reticulo-epiteliale) aezate lax, cu prelungiri lungi care se unesc cu prelungirile celulelor vecine formnd o reea n ochiurile creia se gsete o mas de substan fundamental. Primordiul mezenchimatos (papila dentar) este coninut n concavitatea organului smalului. Este format din esut conjunctiv tnr (mezenchimatos) cu structura caracteristic. La periferie, la jonciunea cu organul smalului, n contact cu stratul de adamantoblaste, prezint un rnd de celule numite odontoblaste. Odontoblastele sunt celule cilindrice, cu nuclei ovalari dispui spre esutul mezenchimatos i cu o prelungire celular (proces odontoblastic) situat la nivelul polului apical al celulei, spre stratul adamantoblastelor. Dentina sintetizat de odontoblaste se depune n jurul procesului odontoblastic.

70

5 4 3

1 Imagine histologic

10 Reprezentare schematic

Stadiul de clopot 1 esut mezenchimatos peridentar; 2 Sac dentar; 3 Epiteliul adamantin extern; 4 Pulpa smalului; 5 Strat intermediar; 6 Ameloblaste; 7 Smal; 8 Dentin; 9 Odontoblaste; 10 Papila dentar.

Structurile mineralizate ale dintelui pe cale de formare sunt situate ntre cele dou primordii: smalul sub forma unui strat foarte fin, intens colorat, situat imediat sub adamantoblaste; dentina situat imediat sub el, colorat roz; predentina situat la polul apical al odontoblastelor. Sacul dentar se gsete dispus n jurul primordiului dentar. Este format prin condensarea esutului conjunctiv mezenchimatos peridentar i conine fibre conjunctive dispuse circular n jurul germenului dentar, celule conjunctive i substan fundamental, formnd o structur asemntoare unei capsule.

TUBUL DIGESTIV
Tubul digestiv, alctuit din mai multe segmente, cu o serie de particulariti structurale, are un plan comun de organizare, peretele su fiind format din 4 tunici: 1. Mucoasa, tunica intern, care cptuete cavitatea tubului, format din: - epiteliu de suprafa, de diferite tipuri n funcie de localizarea i funcia segmentului respectiv (stratificat pavimentos sau simplu cilindric, monomorf sau polimorf), - corion sau lamina propria, format din esut conjunctiv lax cu vase, nervi, limfocite dispuse difuz sau sub form de foliculi limfatici i, n anumite segmente, glande (stomac, intestin) i
71

- musculara mucoasei, un fin strat muscular compus din fibre musculare netede dispuse ntr-un strat intern circular i unul extern longitudinal. 2. Submucoasa, format din esut conjunctiv mai dens, cu vase sanguine mari, vase limfatice i nervi. Tot aici se gsesc mici ganglioni nervoi vegetativi care formeaz plexul submucos Meissner iar n anumite poriuni ale tubului digestiv (esofag i duoden) i glande. 3. Musculara, alctuit n cea mai mare parte din dou straturi groase de fibre musculare netede, unul intern circular i altul extern longitudinal. Excepie de la aceast organizare fac: stomacul, care prezint un al treilea strat cu dispoziie oblic dispus deasupra stratului circular i colonul, care prezint stratul longitudinal extern divizat n trei benzi longitudinale echidistante, teniile colonului. ntre straturile musculare se gsete puin esut conjunctiv lax cu vase de snge, nervi, precum i plexul nervos mienteric sau plexul Auerbach (microganglioni nervoi i fibre nervoase). Pe seciunile histologice fibrele musculare din stratul circular apar secionate longitudinal, iar cele din stratul longitudinal apar secionate transversal. 4. Tunica extern, care poate fi seroasa sau adventiia. Seroasa acoper la exterior poriunile intraperitoneal ale tubului digestiv i este format din: mezoteliu, un epiteliu simplu pavimentos i din stratul subseros, ce leag mezoteliul de tunica muscular. Stratul subseros este alctuit dintr-o cantitate mic de esut conjunctiv lax bogat n vase sanguine, limfatice i nervi. Adventiia, este prezent n segmentele tubului digestiv dispuse extraperitoneal i este format numai din esut conjunctiv lax, esut adipos, vase sanguine i nervi.

Esofagul
Esofagul este un organ tubular care face legtura dintre orofaringe i stomac. Esofagul, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom distinge cele patru tunici ale peretelui tubului digestiv, dar cu caracterele specifice esofagului: mucoasa, submucoasa, musculara i tunica extern. La acest ordin de mrire se observ c mucoasa prezint numeroase plicaturri, astfel nct, pe o seciune transversal, lumenul esofagului apare stelat. - cu obiectivul mare: vom studia caracterele specifice ale celor patru tunici. Mucoasa cu cele trei straturi: - epiteliul de suprafa este de tip stratificat pavimentos necheratinizat, desprit de corionul subiacent printr-o membran bazal puternic ondulat. - corionul (lamina propria) are structura descris n partea general i este lipsit de glande; el ptrunde n grosimea epiteliului dnd natere unor papile. - musculara mucoasei are structura caracteristic descris la partea general (strat intern circular i extern longitudinal de fibre musculare netede). Submucoasa este format din esut conjunctiv mai dens, bogat n vase de snge, nervi, limfatice, plexuri nervoase Meissner, limfocite dispuse fie difuz fie
72

sub form de foliculi limfatici mici, etc i glande tubulo-acinoase de tip mucos. Acinii mucoi i elimin produsul de secreie printr-un canal cu lumenul dilatat, tapetat de un epiteliu stratificat pavimentos subire, care strbate grosimea mucoasei i se deschide la suprafaa epiteliului. Musculara esofagului este format din dou straturi: intern circular i extern longitudinal cu o structur variabil n diferitele segmente ale esofagului. Astfel, n treimea superioar, musculara este format aproape n ntregime din fibre musculare striate, n treimea medie din fibre musculare striate i netede, iar n treimea inferioar predominant din fibre musculare netede. Tunica extern este reprezentat n cea mai mare parte de adventiie i numai pe o mic poriune, nainte de jonciunea esofagogastric, de seroas (cu structurile descrise n partea general). Diagnosticul diferenial se face cu celelalte segmente ale tubului digestiv, elementele cele mai importante de diagnostic caracteristice esofagului fiind epiteliul de suprafa de tip pavimentos stratificat necheratinizat i prezena glandelor n submucoas.

1 2 3 4 5 6

7 8 9 10

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Esofag 1 Epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat; 2 Corion; 3 Musculara mucoasei; 4 Submucoasa; 5 Acini mucoi; 6 Plexul Meissner; 7 Stratul muscular intern (circular); 8 Plexul Auerbach; 9 Stratul muscular extern (longitudinal); 10 Adventiia.
73

Stomacul
Este un organ musculo-cavitar care se ntinde de la cardie la sfincterul piloric, cu peretele format din cele 4 straturi caracteristice tubului digestiv. Din punct de vedere histologic i anatomic, stomacul prezint trei poriuni distincte: regiunea cardiei situat sub jonciunea esofago-gastric, regiunea fundic, cuprins ntre cardie i pilor i regiunea piloric, situat proximal de sfincterul piloric. Toate aceste regiuni difer ntre ele numai prin aspectul glandelor din mucoas, structura histologic a celorlalte tunici fiind identic. Stomac, zon fundic, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom observa dispoziia i structura celor patru tunici ale peretelui gastric. - cu obiectivul mare: vom studia caracterele particulare ale fiecrei tunici n parte. Mucoasa: Epiteliul de suprafa al mucoasei este un epiteliu simplu cilindric, monomorf (format dintr-un singur tip de celule). El se nfund din loc n loc n corion i formeaz criptele sau foveolele gastrice. Celulele sale sunt cilindrice, nalte, cu polul apical palid colorat i vacuolar deoarece conine mucin, produsul de secreie al celulelor. Nucleul este ovalar, perpendicular pe membrana bazal, eucrom i situat n treimea inferioar a celulelor. Epiteliul de suprafa al stomacului, n totalitatea lui, formeaz glanda membraniform, gland exocrin cu rolul de a secreta mucin. Lamina propria (corionul) conine glandele gastrice, numite glande fundice n aceast regiune, i o cantitate redus de esut conjunctiv lax. Glandele fundice sunt glande tubulare lungi, simple sau ramificate, formate din gt, corp i fund. Ele se deschid la baza criptelor gastrice i ocup ntreaga grosime a corionului stomacului. Glandele fundice sunt tapetate cu un epiteliu simplu cilindric format din mai multe tipuri de celule: - celule mucoase ale gtului glandei, localizate la nivelul deschiderii glandelor n criptele gastrice; ele au aspect asemntor cu celulele mucoase de suprafa, dar sunt mai mici i de aceea greu vizibile n coloraia cu HE - celulele principale sau bazofile sunt cele mai numeroase celule ale epiteliului glandelor fundice. Au form cilindric, iar prin polul lor apical delimiteaz lumenul glandei. Citoplasma celulelor este bazofil, iar nucleii sunt eucromi, ovalari, situai n treimea bazal a celulelor. Rolul acestor celule este de a secreta pepsinogenul - celulele parietale sau oxifile sunt mai numeroase n regiunea superioar a glandelor. Sunt celule mari, triunghiulare, care deformeaz uor spre exterior membrana bazal a glandei. Polul lor apical se subiaz, fiind comprimat de celulele principale nvecinate. Nucleii acestor celule sunt rotunzi, situai central i citoplasma este intens eozinofil. Ele secret HCl i factorul intrinsec - n afara acestor celule, n epiteliul glandular, mai exist i celule enteroendocrine i celule stem care nu se vd n coloraia HE. Ele se pot pune n eviden prin reacii imunohistochimice cu ajutorul anticorpilor monoclonali: de
74

exemplu cu anticorpi anti-cromogranin. Prin aceast metod citoplasma celulelor enteroendocrine apare colorat maroniu. Musculara mucoasei este format din cele dou straturi: intern circular i extern longitudinal.
2 1 3 4 I 5 6

7 8 9 II

10

III 11 12 IV 13 14 15

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Stomac, zon fundic I Mucoasa; II Submucoasa; III Musculara; IV Seroasa. 1 Epiteliu simplu cilindric monomorf; 2 Cripte gastrice; 3 Celule mucoase ale gtului glandei; 4 Celule principale; 5 Celule parietale; 6 Corion; 7 Glande fundice n seciune transversal; 8 Musculara mucoasei; 9 Plex Meissner; 10 Strat muscular intern (oblic); 11 Strat muscular mediu (circular); 12 Plex Auerbach; 13 Strat muscular extern (longitudinal); 14 Strat subseros; 15 Mezoteliu.
75

Submucoasa are structura descris la partea general i nu prezint glande. Musculara stomacului este groas i difer de structura standard a tubului digestiv prin prezena unui al treilea strat de fibre musculare netede dispuse oblic. Seroasa stomacului, cu structura caracteristic descris la planul general de organizare a tubului digestiv. Diagnosticul diferenial se face cu zona piloric a stomacului prin structura diferit a glandelor din corion. Stomac, zona piloric, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom studia structura i dispoziia celor patru tunici ale peretelui stomacului.
1 2

4 5 II

6 III 7 8 9 10 11

IV

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Stomac, zon piloric I Mucoasa; II Submucoasa; III Musculara; IV Seroasa. 1 Epiteliu simplu cilindric monomorf; 2 Cripte gastrice adnci; 3 Glande pilorice; 4 Musculara mucoasei; 5 Plex Meissner; 6 Strat muscular intern (oblic); 7 Strat muscular mediu (circular); 8 Plex Auerbach; 9 Strat muscular extern (longitudinal); 10 Strat subseros; 11 Mezoteliu.
76

- cu obiectivul mare: vom studia caracterele particulare ale fiecrei tunici. Structura peretelui n zona piloric a stomacului este identic cu cea a zonei fundice. Elementul de diagnostic diferenial este dat de aspectul glandelor pilorice care sunt mai scurte, se deschid n cripte gastrice mai adnci dect cele fundice. Ele sunt glande tubuloase ramificate, tortuoase i au peretele format n majoritate din celule mucoase. Lumenul glandelor este larg datorit vscozitii crescute a produsului de secreie (mucusul). Diagnosticul diferenial se face cu zona fundic a stomacului prin structura diferit a glandelor din corion.

Intestinul subire
Intestinul subire este cea mai lung poriune a tubului digestiv. El cuprinde trei segmente: duodenul, jejunul i ileonul. Lumenul intestinului nu este neted, datorit prezenei unor modificri ce au rolul de a mri suprafaa de contact cu coninutul intestinal. Aceste modificri, vizibile cu obiectivul mic, sunt plicile circulare sau valvulele conivente Kerckring i vilozitile intestinale. Valvulele conivente sunt plici permanente, formate din mucoas i submucoas, fiecare valvul ntinzndu-se pe jumtate sau pe trei sferturi din circumferina lumenului. Vilozitile intestinale sunt prelungiri sub form de deget de mnu ale mucoasei spre lumenul intestinal.

Duodenul
Duodenul este prima poriune a intestinului subire, care continu zona piloric a stomacului. Duoden, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom studia structura i dispoziia celor patru tunici ale peretelui intestinal precum i forma particular a vilozitilor intestinale, care au form de frunz - cu obiectivul mare: vom studia pe de o parte structura vilozitilor intestinale i pe de alt parte structura fiecrei tunici n parte. Vilozitile intestinale sunt acoperite de epiteliul de suprafa al mucoasei i sunt centrate de un ax conjunctiv, care este o prelungire a laminei propria. n centrul vilozitii se gsete chiliferul central (sub forma unui lumen mic, cu dispoziie longitudinal, tapetat de un rnd de celule turtite, pavimentoase din care se observ numai nucleii alungii, hipercromi, care bombeaz n lumen). n jurul chiliferului central se gsesc fibre musculare netede care sunt desprinse din musculara mucoasei. Mucoasa Epiteliul de suprafa al mucoasei acoper vilozitile intestinale i apoi se nfund n corion unde formeaz glandele Lieberkhn: glande tubulare simple care
77

ocup cea mai mare parte a laminei propria, separate ntre ele prin fine septe de esut conjunctiv. Glandele Lieberkhn se deschid la suprafaa mucoasei la nivelul bazei vilozitilor intestinale. Epiteliul de suprafa este un epiteliu simplu cilindric, polimorf, adic format din mai multe tipuri de celule: - enterocitele sunt celule nalte, cilindrice, cu nucleii ovalari, situai n treimea bazal a celulei, dispui perpendicular pe membrana bazal. La polul apical celulele prezint microviloziti (platoul striat), vizibile la obiectivul mare sub forma unei benzi eozinofile. - celulele caliciforme sunt dispuse printre celelalte celule ale epiteliului de suprafa. Sunt celule cu form de butoia sau pahar de ampanie, cu corpul i polul apical mai dilatate i necolorate n HE datorit coninutului n mucus i cu polul bazal subiat. La nivelul polului bazal prezint un nucleu turtit, hipercrom. - celulele Paneth sunt caracteristice intestinului subire. Se gsesc la baza glandelor Lieberkhn, n grupuri de 4-8 celule ntr-o gland. Ele au form trapezoidal-piramidal, cu nucleul rotund sau ovalar, hipocrom, situat bazal. Citoplasma supranuclear conine numeroase granule colorate intens eozinofil. - restul celulelor de la nivelul epiteliului de acoperire i al glandelor Lieberkhn (celule enteroendocrine, celule stem i celule M) nu se pot identifica n coloraia uzual cu HE. Lamina propria este format din esut conjunctiv bogat n vase sanguine, limfatice, limfocite, foliculi limfatici i nervi, care nconjoar glandele Lieberkhn. Musculara mucoasei este format din cele dou straturi de fibre musculare netede caracteristice. Din musculara mucoasei pornesc fibre musculare netede ce strbat lamina propria i ajung pn n axul vilozitilor. Submucoasa are structura descris n planul general de organizare al tubului digestiv. Ea conine glande mucoase tubuloacinoase ramificate, care se numesc glandele Brunner. Acinii acestor glande sunt formai din celule mucoase, iar canalele de excreie se deschid n glandele Lieberkhn. Musculara are structura descris n planul general de organizare a tubului digestiv (un strat intern circular i unul extern longitudinal). Tunica extern la nivelul duodenului este reprezentat de adventiie sau seroas, n funcie de localizarea extra- sau intraperitoneal a duodenului. Diagnosticul diferenial se face cu celelalte segmente ale intestinului subire (viloziti mai bine dezvoltate, sub form de frunz, un numr mai mic de celule caliciforme i prezena n submucoas a glandelor Brunner) i cu esofagul care conine i el glande mucoase n submucoas, dar nu are viloziti intestinale.

78

3 4 II

5 6 III 7 8 IV

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Duoden I Mucoasa; II Submucoasa; III Musculara; IV Adventiia. 1 Vilozitate; 2 Gland Lieberkhn; 3 Musculara mucoasei; 4 Glande Brunner; 5 Plex Meissner; 6 Strat muscular intern (circular); 7 Plex Auerbach; 8 Strat muscular extern (longitudinal).

Ileonul
Este ultimul segment al intestinului subire, care se continu cu intestinul gros la nivelul valvulei ileo-cecale. Ileon, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom studia structura i dispoziia celor patru tunici ale peretelui intestinal. i aici se observ prezena valvulelor conivente i a vilozitilor intestinale care sunt mai scurte i mai subiri (n form de deget).
79

- cu obiectivul mare: vom studia structura fiecrei tunici n parte. Structura general a ileonului este asemntoare cu cea a duodenului, diferena constnd n: - structura i forma vilozitilor intestinale - creterea numrului de celule caliciforme - prezena la nivelul laminei propria i a submucoasei ileonului a unor mari agregate de esut limfoid (de tip MALT) format din agregate de foliculi limfatici i esut limfoid difuz, interfolicular. Aceast structur se numete placa Peyer. Plcile Peyer sunt dispuse n poriunea de intestin opus locului de inserie a mezenterului. n zona unde se gsesc plcile Peyer, vilozitile intestinale sunt infiltrate cu limfocite, sunt atrofice, sau uneori chiar lipsesc.

II

3 4 5

III IV

6 7 8 9 10

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Ileon I Mucoasa; II Submucoasa; III Musculara; IV Seroasa. 1 Vilozitate; 2 Gland Lieberkhn; 3 Musculara mucoasei; 4 Placa Peyer; 5 Plex Meissner; 6 Strat muscular intern (circular); 7 Plex Auerbach; 8 Strat muscular extern (longitudinal); 9 Strat subseros; 10 Mezoteliu.

Diagnosticul diferenial se face cu celelalte segmente ale intestinului subire (prin forma vilozitilor, lipsa glandelor n submucoas i prezena plcilor Peyer).

80

Intestinul gros
Intestinul gros este segmentul terminal al tubului digestiv i este format din urmtoarele segmente: cec, apendice, colon (ascendent, transvers, descendent i sigmoid), rect i canal anal. Colon, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom studia structura i dispoziia celor patru tunici ale peretelui intestinal. Este de remarcat faptul c lumenul intestinului gros este neted, deoarece la acest nivel dispar vilozitile intestinale. - cu obiectivul mare: vom studia structura fiecrei tunici n parte. Mucoasa are aspect neted, fr valvule conivente i viloziti. Epiteliul de suprafa al mucoasei este un epiteliu simplu cilindric polimorf. El se nfund n corion, formnd glandele sau criptele Lieberkhn. Acestea sunt glande tubuloase simple, care se ntind pe toat grosimea laminei propria i se deschid la suprafaa mucoasei. Ele prezint un gt, un corp i un fund aezat n aproprierea muscularei mucoasei. Peretele glandelor este tapetat de acelai tip de epiteliu ca i cel de suprafa i este format din urmtoarele tipuri de celule: enterocitele, celulele caliciforme, al cror numr crete cu ct ne apropiem de partea terminal a intestinului gros, celulele stem, celulele enteroendocrine i celulele M, ultimele trei tipuri fiind vizibile doar prin examinri complementare (imunohistochimie, microscopie electronic). Lamina propria are n general aceeai structur ca a ntregului tub digestiv, dar prezint o mai mare dezvoltare a esutului limfoid asociat mucoaselor (MALT) sub form de foliculi izolai i esut interfolicular. Musculara mucoasei este format din cele dou straturi caracteristice de fibre musculare netede. Submucoasa are structura descris n planul general de organizare al tubului digestiv. n submucoasa intestinului gros nu gsim glande, iar esutul limfoid este mai abundent. Musculara are o structur caracteristic la nivelul colonului. Este format tot din dou straturi de fibre musculare netede (intern circular i extern longitudinal) dar stratul longitudinal extern este desprit n trei benzi longitudinale, numite teniile colonului (teniae coli). Tunica extern este reprezentat de seroas cu structura caracteristic descris mai sus. Diagnosticul diferenial se face cu intestinul subire (absena vilozitilor intestinale, aspectul epiteliului de suprafa).

81

2 II 3

4 III 5 IV 6

Colon I Mucoasa; II Submucoasa; III Musculara; IV Seroasa. 1 Glande Lieberkhn; 2 Musculara mucoasei; 3 Plex Meissner; 4 Strat muscular intern (circular); 5 Plex Auerbach; 6 Strat muscular extern (longitudinal).

GLANDELE ANEXE ALE TUBULUI DIGESTIV


Glandele anexe pe care le vom studia sunt: glandele salivare mari (parotida, submaxilara, sublinguala), pancreasul cu dubla component, exocrin i endocrin i ficatul.

GLANDELE SALIVARE MARI


Glandele salivare mari sau principale sunt: glandele parotide, submaxilare i sublinguale. Ele au rolul de a secreta saliva. Toate glandele salivare mari au acelai plan general de organizare: - la exterior sunt nvelite de o capsul conjunctiv, alctuit din fibre conjunctive, vase de snge, nervi, esut adipos. Aceast capsul trimite septe n parenchim, cu aceeai structur ca i a capsulei, compartimentnd glandele n lobuli. - parenchimul este alctuit din acini secretori (de tip seros, mucos i mixt) i dintr-un sistem de canale intralobulare (canalele intercalare sau pasaje Boll i canalele striate). - stroma glandelor salivare este alctuit din totalitatea septelor conjunctive care compartimenteaz glanda n lobuli, precum i din stroma intralobular
82

(periacinoas) care cuprinde: esut conjunctiv, vase, nervi, un numr variabil de celule adipoase care crete odat cu vrsta, infiltrate limfoide. n septele conjunctive se gsesc canale de excreie extralobulare.

Glanda parotid
Respect planul general de organizare al glandelor salivare, descris mai sus. Recunoatem cu uurin glanda parotid deoarece parenchimul ei este constituit n exclusivitate din acini seroi. Glanda parotid, coloraie HE - cu obiectivul mic: vom urmri arhitectura general a glandei. La periferie se gsete capsula conjunctivo-vascular, bogat n adipocite, ce trimite n interior septe ce mpart glanda n lobuli. n aceste septe, recunoatem vase de snge i canalele excretoare mari, interlobulare. Intralobular, parenchimul este constituit numai din acini seroi i din canalele de excreie intralobulare, canalele intercalare sau pasajele Boll i canalele striate. - cu obiectivul mare: vom studia aspectul acinilor seroi i a canalelor de excreie intra- i extralobulare ale glandei parotide. Acinii seroi au dimensiuni mici, sunt alctuii fiecare din 6-8 celule prismatice aezate pe o membran bazal. Celulele au citoplasma subnuclear intens colorat, bazofil, iar cea supranuclear eozinofil (conine granule de zimogen). Nucleul este rotund, eucrom, aezat central. Prin polul lor apical, celulele delimiteaz un lumen foarte ngust, punctiform, uneori greu vizibil pe seciunile histologice. ntre membrana bazal i polul bazal al celulelor se gsesc din loc n loc celule mioepiteliale, celule alungite cu nucleu ovalar, hipercrom, aezat paralel cu membrana bazal, care au rolul de a ajuta la eliminarea produsului de secreie din celule n lumen. Canalul intercalar sau pasajul Boll continu lumenul acinului seros i n consecin are un diametru foarte mic. El este tapetat cu un epiteliu simplu cubic i un rnd discontinuu de celule mioepiteliale. Canalul striat continu canalul intercalar, se gsete n plin parenchim glandular (este nconjurat de acini seroi) i este format dintr-un singur rnd de celule nalte, prismatice, cu nucleu rotund, situat central, cu citoplasma eozinofil cu aspect striat subnuclear. Lumenul acestui canal este mult mai larg n comparaie cu cel al canalului intercalar i cel al acinilor. Canalele excretoare interlobulare se afl n septele interlobulare, sunt nconjurate de esut conjunctiv i au lumenul larg. Peretele lor este format iniial dintr-un epiteliu prismatic nalt, apoi dintr-un epiteliu bistratificat pe msur ce lumenul devine din ce n ce mai larg.

83

3 6 7 4

2 8 Imagine histologic Reprezentare schematic

Glanda parotid 1 Capsul; 2 Sept interlobular; 3 Acin seros; 4 Canal intercalar (Boll); 5 Canal striat; 6 Canal interlobular; 7 Adipocite; 8 Capilar.

Diagnosticul diferenial al canalelor de excreie Canal intercalar Mrime Localizare Epiteliul Lumenul foarte mic Canalul striat intermediar Canale extralobulare mare extralobular, nconjurat de esut conjunctiv bistratificat larg, neregulat

intralobular, nconjurat intralobular, nconjurat de acini de acini cubic foarte mic cilindric nalt regulat, mai mare dect al acinilor

Glanda submandibular
Respect organizarea general a glandelor salivare mari. Capsula glandei este foarte subire. Caracteristic este structura parenchimului, care este alctuit din acini seroi, mucoi i micti, glanda submaxilar fiind o gland cu secreie mixt, sero-mucoas. Glanda submandibular, coloraie HE - cu obiectivul mic: vom observa capsula i septele ce compartimenteaz glanda n lobuli. Parenchimul glandei submaxilare este alctuit din trei tipuri de acini (seroi, mucoi i micti) diferii ntre ei prin form, mrime i colorabilitate.
84

9 10 8

1 3 4 7

6 2 5 Reprezentare schematic

Imagine histologic

Glanda submandibular 1 Capsul; 2 Sept interlobular; 3 Acin seros; 4 Acin mucos; 5 Acin mixt; 6 Canal intercalar (Boll); 7 Canal striat; 8 Canal interlobular; 9 Adipocite; 10 Capilar.

- cu obiectivul mare: vom studia aspectul histologic al celor trei tipuri de acini. Acinii seroi sunt mai mici i mai intens colorai, acinii mucoi sunt mai mari i mai palid colorai, iar acinii micti i recunoatem prin prezena la un pol a semilunei lui Gianuzzi (alte detalii vezi la capitolul Epitelii glandulare). La toate tipurile de acini, ntre membrana bazal i celulele secretorii sunt prezente celulele mioepiteliale. Canalul striat este lung i de aceea bine vizibil pe seciunile histologice. Canalele excretorii intra i extralobulare au aceeai dispoziie i structur ca i la glanda parotid.

Glanda sublingual
Respect organizarea general a glandelor salivare. Se caracterizeaz prin faptul c parenchimul este format preponderent din acini mucoi i civa acini micti precum i prin canalele intralobulare mai scurte, i de aceea aparent mai puin numeroase. Glanda sublingual, coloraie HE - cu obiectivul mic: vom remarca culoarea mai deschis a seciunii prin glanda sublingual, datorat predominenei acinilor mucoi, care se coloreaz mai palid cu HE. De asemenea vom remarca n parenchim, numrul mai redus de canale intercalare (Boll) i striate. Canalul Boll este foarte scurt i de aceea se vede cu dificultate. - cu obiectivul mare: vom studia aceleai elemente componente ale glandei ca i n cazul parotidei i submaxilarei.
85

6 8

4 7

3 5 9 Imagine histologic 10 Reprezentare schematic

Gland sublingual 1 Capsul; 2 Sept interlobular; 3 Acin mucos; 4 Acin mixt; 5 Acin seros; 6 Canal intercalar (Boll); 7 Canal striat; 8 Canal interlobular; 9 Adipocite; 10 Capilar.

Diagnostic diferenial: se vor diferenia ntre ele cele trei glande salivare, dup aspectul microscopic.

PANCREASUL
Este un organ parenchimatos formnd o gland voluminoas, exocrin i endocrin n acelai timp. Componenta exocrin a pancreasului formeaz cea mai mare parte a parenchimului glandei i este alctuit din acini de tip seros i canale de excreie. Ea este responsabil de elaborarea unui lichid alcalin, bogat n enzime pe care-l vars n duoden prin intermediul canalului pancreatic i care are rol important n digestie. Componenta endocrin reprezint un procent mic din parenchimul pancreasului i este constituit din totalitatea insulelor Langerhans. Este responsabil de elaborarea unor hormoni ce au ca rol principal reglarea metabolismului glucidic. Pancreas, coloraie HE. - cu obiectivul mic: pancreasul prezint la periferie o capsul conjunctiv foarte subire ce trimite n interior fine septe, compartimentnd incomplet glanda n lobuli. Pancreasul exocrin seamn din punct de vedere histologic cu parotida, fiind format n totalitate din acini seroi i canale de excreie. Spre deosebire de glanda parotid, pancreasul conine insule Langerhans ce apar sub forma unor insule rotunde sau ovalare, mai palid colorate, dispuse printre acinii pancreatici.
86

- cu obiectivul mare: vom studia aspectul caracteristic al acinilor pancreatici: formai din 6-8 celule prismatice nalte aezate pe o membran bazal. Citoplasma celulelor prezint o dubl tinctorialitate: este bazofil subnuclear i eozinofil supranuclear. Supranuclear citoplasma are un aspect granular datorit prezenei granulelor de zimogen secretate de celul. n centrul acinilor se pot observa 1-2 nuclei rotunzi sau ovalari, palid colorai ce aparin celulelor centroacinoase. Aceste celule reprezint celulele bordante ale celor mai mici canale intercalare care iau natere n lumenul acinului; ele nu sunt prezente n nici o alt gland acinoas. Canalele intercalare se continu cu canalele intralobulare situate n parenchimul pancreatic, iar acestea cu canalele interlobulare, delimitate de un epiteliu bistratificat i nconjurate de stroma conjunctiv din septe. Canalele striate i celulele mioepiteliale lipsesc din structura pancrasului exocrin. Insulele Langerhans sunt delimitate la periferie de o foarte fin capsul conjunctiv. Celulele lor sunt aezate n cuiburi, ntre care se remarc o fin reea capilar. Aceste celule secretorii sunt mici (n raport cu celulele acinilor seroi), au citoplasma granular i palid colorat. La nivelul insulei Langerhans se descriu patru tipuri principale de celule, denumite , , i F sau PP. Diferenierea lor n coloraia cu HE este dificil i nesigur. Identificarea lor se face n prezent cu ajutorul anticorpilor monoclonali. Diagnosticul diferenial: se face cu glanda parotid.

1 4

2 Imagine histologic Reprezentare schematic

Pancreas 1 Acini seroi; 2 Canal intralobular; 3 Canal interlobular; 4 Insul Langerhans.

FICATUL
Este un organ parenchimatos, lobulat. Lobulii au form hexagonal i sunt alctuii din cordoane de celule dispuse radiar dinspre un vas situat n centrul
87

lobulului, vena centrolobular. La convergena a 3-4 lobuli hepatici, se observ nite spaii triunghiulare, numite spaiile porte Kiernan, care conin elemente vasculare i canale biliare ntr-o cantitate variabil de esut conjunctiv. Pentru exemplificare vom prezenta seciuni din ficatul de porc, unde lobulii hepatici sunt mult mai bine vizibili dect n cel uman datorita faptului c ei sunt mai bine delimitai printr-o strom perilobular mai abundent. Ficat de porc, coloraie HE. - cu obiectivul mic: se va analiza organizarea n lobuli a ficatului de porc. Aceti lobuli au form poligonal i sunt formai din cordoane de hepatocite ce converg spre o structur vascular, situat n centrul lobulului, vena centrolobular (VCL). ntre lobulii hepatici se vor identifica spaiile porte Kiernan. - cu obiectivul mare: vom studia aspectul hepatocitelor: celule poligonale cu citoplasma granular, nucleul rotund situat central. Printre cordoanele de hepatocite remarcm spaii nguste, sinuoase, numite capilarele sinusoide. Peretele lor este format din celule endoteliale i celule Kupffer, identificabile doar prin nucleii lor. n spaiul Kiernan, ntr-un esut conjunctiv relativ abundent vom remarca 4 structuri: o arter, o ven, 1-2 canale biliare, vase limfatice. - vena o recunoatem dup lumenul colabat, peretele subire i slab structuralizat - artera are lumenul circular, regulat, un perete cu structura bine vizibil, corespunztoare unei artere de tip muscular de talie mic (arteriol) - vasele limfatice au un lumen ngust delimitat de endoteliu, fr hematii - canalul biliar apare ca un lumen circular, delimitat de un epiteliu simplu cubic, cu nuclei rotunzi, avnd aspectul unui irag de mrgele.

1 7 5 4

2 6 3 Imagine histologic Reprezentare schematic

Ficat 1 Vena centrolobular; 2 Cordoane de hepatocite; 3 Capilare sinusoide; 4 Arteriol; 5 Venul; 6 Canalicul biliar; 7 Capilar limfatic.

88

Ficat injectat cu tu de China i colorat cu HE. Aceasta coloraie se folosete pentru vizualizarea celulelor Kupffer din peretele capilarelor sinusoide. n citoplasma acestora se pot observa granule negre n cantiti diferite i de dimensiuni diferite. Aceste granule reprezint de fapt tuul de China cu care a fost injectat animalul de experien nainte de sacrificare i care a fost fagocitat de celulele Kupffer.

1 2

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Parenchim hepatic 1 Celule Kupffer; 2 Capilare sinusoide; 3 Hepatocite.

89

APARATUL RESPIRATOR
Aparatul respirator este format din dou segmente: unul de conducere, reprezentat prin totalitatea structurilor care conduc aerul la alveole, i altul respirator, alctuit din totalitatea structurilor care particip la schimburile de gaze. Segmentul de conducere are dou componente: extrapulmonar i intrapulmonar. Componenta extrapulmonar conine: - cavitile nazale - nazofaringele i orofaringele - laringele - traheea - bronhiile principale (primare) Componenta intrapulmonar este format din: - bronhii lobare (secundare) - bronhii segmentare (teriare) - bronhiole - bronhiole terminale. Segmentul respirator este poriunea n care are loc schimbul de gaze i include: - bronhiolele respiratorii - ductele alveolare - sacii alveolari - alveolele pulmonare. Cile respiratorii intra- i extrapulmonare sunt structuri tubulare adaptate morfologic pentru realizarea respiraiei. Ca atare ele vor avea un plan general de organizare, cu modificri structurale la nivelul diferitelor segmente, legate strict de specificul funcional al segmentului respectiv.

TRAHEEA
Este o structur tubular pe care o vom studia ntr-o seciune transversal. Traheea, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom identifica cele 4 straturi ale peretelui traheal: mucoasa, submucoasa, stratul fibro-cartilaginos i adventiia. Stratul cartilaginos are form de potcoav, fiind incomplet n partea posterioar, unde cele dou capete sunt unite prin muchiul traheal. Deoarece

90

seciunea trece prin cartilaj, stratul fibros, situat ntre inelele cartilaginoase, nu se observ. - cu obiectivul mare: vom studia n detaliu structura celor 4 straturi ale peretelui traheal. Mucoasa este compus, ca orice mucoas, din epiteliu de suprafa i corion. Epiteliul este pseudostratificat cilindric ciliat de tip respirator, format din 5 tipuri de celule. n coloraia cu HE, se pot identifica doar 3: celulele bazale, cu nucleu rotund, situate n apropierea membranei bazale, celulele cilindrice ciliate i celulele caliciforme, cu structura cunoscut. Corionul este format din esut conjunctiv lax, care poate conine infiltrat limfoid difuz sau dispus sub form de foliculi i aparinnd esutului limfoid asociat mucoaselor (MALT). Submucoasa este un strat de esut conjunctiv lax, cu glande traheale formate din acini micti care i vars produsul de secreie la suprafaa epiteliului prin intermediul unui canal tapetat de un epiteliu simplu cubic. Cartilajul traheal este de tip hialin. Capetele libere ale cartilajului sunt unite prin fascicule de fibre musculare netede, ce formeaz muchiul traheal. Ele sunt secionate longitudinal i au structura tipic a fibrelor musculare netede. La acest nivel, epiteliul este mai plicaturat. Adventiia este alctuit din esut conjunctiv lax, celule adipoase, vase i nervi.
4 3 6

5 Imagine histologic Reprezentare schematic

Traheea 1 Epiteliu de tip respirator; 2 Corion; 3 Submucoas cu glande traheale; 4 Cartilaj hialin; 5 Muchiul traheal; 6 Adventiia.
91

PLMNUL
Organizarea structural a plmnului este determinat de distribuia arborelui bronic i a sistemului vascular intrapulmonar. Plmnul este nvelit la exterior de foia visceral a pleurei, care se insinueaz la nivelul scizurilor, individualiznd lobii pulmonari. Septe conjunctive mpart parenchimul lobilor n segmente, iar segmentele n lobuli. La nivelul lobulilor pulmonari aceste septe sunt foarte fine i greu vizibile pe seciunile histologice. Lobulii pulmonari sunt formai, la rndul lor, din acini pulmonari, cele mai mici uniti structurale ale plmnului. Plmnul, coloraie HE. Pe o seciune transversal prin plmn vom studia structura diferitelor segmente ale arborelui bronic intrapulmonar (bronhia intrapulmonar, bronhiola, bronhiola respiratorie, ductul alveolar, sacul alveolar i alveola pulmonar) i a stromei pulmonare. - cu obiectivul mic: vom observa aspectul dantelat al plmnului, dat de alveolele pulmonare i vom urmri diferitele segmente intrapulmonare ale arborelui bronic i anume bronhia intrapulmonar, bronhiola, bronhiola respiratorie, ductele alveolare, sacii alveolari i alveolele pulmonare. - cu obiectivul mare: n primul rnd vom identifica fiecare segment al arborelui bronic n funcie de structura histologic specific. Apoi vom face diagnosticul diferenial ntre aceste diferite componente: Bronhiile intrapulmonare au un lumen larg, cu un peretele format din cinci straturi: - mucoasa plisat, cuprinde un epiteliu de tip respirator (pseudostratificat ciliat) i un corion care se reduce treptat n grosime pe msur ce scade diametrul bronhiilor. n structura epiteliului putem recunoate aceleai celule ca n epiteliul traheal: celule cilindrice ciliate, celule caliciforme, celule bazale; - musculara format din fascicule de fibre musculare netede, dispuse circular - submucoasa, format din esut conjunctiv lax i acini glandulari cu secreie mixt - stratul cartilaginos este reprezentat de insule de cartilaj hialin care sunt din ce n ce mai mici, pe msur ce ne apropiem de bronhiol - adventiia ce se continu cu adventiia structurilor adiacente (ramificaii arteriale, esutul interstiial al parenchimului pulmonar) este constituit dintr-un strat foarte fin de esut conjunctiv lax. Bronhiolele sunt ci respiratorii cu un diametru mai mic de 1 mm. Iniial sunt cptuite cu un epiteliu pseudostratificat cilindric ciliat ce se transform treptat n epiteliu simplu cilindric ciliat, pe msura scderii diametrului. Celulele caliciforme, nc prezente n partea iniial a bronhiolelor, lipsesc n poriunea distal. De asemenea lipsesc glandele submucoase i insulele de esut cartilaginos hialin. Stratul muscular (muchiul Reisseissen) este foarte bine dezvoltat, cu fibre musculare dispuse circular i spiralat.
92

4 5

6 7 A

4 Imagine histologic Reprezentare schematic

Bronhia i bronhiola A Bronhia; 1 Epiteliu de tip respirator; 2 Corion; 3 Musculara; 4 Insule de cartilaj; 5 Acini glandulari; 6 Adventiie; 7 Parenchim pulmonar. B. Bronhiola; 1 Epiteliu simplu cilindric ciliat; 2 Corion; 3 Muchiul Reisseissen; 4 Adventiie.

Bronhiolele respiratorii au un lumen ngust, neplisat, tapetat cu un epiteliu cubic care prezint nc n poriunea iniial cteva celule ciliate. Peretele bronhiolei respiratorii este discontinuu, aspect caracteristic acestui segment; n lumen se deschid din loc n loc alveole, direct sau prin intermediul ductelor alveolare. n peretele bronhiolei respiratorii fibrele musculare sunt nc prezente. Ductele alveolare sunt structuri tubulare alungite, cu un perete puternic discontinuu, datorit numeroaselor orificii de deschidere ale sacilor alveolari sau ale alveolelor. Singurul segment vizibil al ductelor alveolare este poriunea continu a peretelui, care este foarte scurt. n aceast poriune, ele sunt tapetate cu un epiteliu simplu turtit, de tip alveolar sub care se gsesc cteva fibre musculare

93

netede, formnd un inel n jurul orificiilor de deschidere ale sacilor alveolari sau ale alveolelor. Sacii alveolari sunt structuri cavitare cu lumen neregulat, formate din mai multe alveole pulmonare care se deschid ntr-un spaiu comun nainte de deschiderea lor n ductele alveolare. Alveolele pulmonare apar ca spaii mai mici, cu form poliedric. Fiecare alveol este delimitat de un perete propriu, foarte subire, format din epiteliul alveolar, un epiteliu simplu pavimentos. Alveolele pulmonare sunt separate unele de altele prin septe alveolare, ce conin un strat subire de esut conjunctiv lax foarte bine vascularizat i macrofage pulmonare (celule cu praf).

Imagine histologic

A SA DA BR

BR

BT DA SA A Reprezentare schematic

Plmn BT Bronhiol terminal; BR Bronhiol respiratorie; DA Ducte alveolare; SA Saci alveolari; A Alveole.
94

APARATUL URINAR
Aparatul urinar este alctuit din rinichi (organ pereche), uretere, vezica urinar i uretr. Urina produs n rinichi este condus prin uretere la vezica urinar, unde este depozitat pn n momentul eliminrii prin uretr. Structura lor histologic este foarte diferit, reflectnd funciile diferite pe care le ndeplinesc.

RINICHIUL
Rinichiul este un organ parenchimatos acoperit de o capsul subire conjunctiv. Pe marginea medial, concav, prezint hilul renal, prin care ptrund n rinichi vasele sanguine i iese ureterul. Este alctuit din strom i parenchim. Parenchimul renal are dou zone distincte, vizibile cu ochiul liber pe o seciune sagital prin rinichi: - zona cortical cu aspect granular - zona medular cu un aspect striat longitudinal. Structural, parenchimul renal este alctuit din nefroni i tubi colectori. Nefronul reprezint unitatea structural i funcional a rinichiului i are rolul de a filtra sngele i de a asigura controlul concentraiei i compoziiei urinii. Nefronul este alctuit din dou componente, corpusculul renal Malpighi i tubul urinifer (renal). Stroma renal, numit i interstiiu renal, nconjoar corpusculii renali, tubii renali i vasele sanguine. Ea este foarte redus, i greu vizibil, cu excepia prii profunde a zonei medulare unde este mai abundent. Este format din esut conjunctiv: fibroblaste, fibre de colagen i de reticulin. Pentru a putea recunoate i descrie microscopic componentele rinichiului, este necesar o scurt descriere a structurii semimicroscopice a rinichiului, structur pe care o putem vedea i cu ochiul liber pe o seciune sagital prin rinichi. Stuctura semimicroscopic a rinichiului Medulara este alctuit din piramidele Malpighi i piramidele Ferrein. Piramidele Malpighi sunt formaiuni triunghiulare, aezate cu baza spre capsula renal i vrful spre hilul renal, formnd papila renal. Piramidele Ferrein sunt fascicule paralele de substan medular, care pornesc de la baza piramidelor Malpighi i se ntind n cortical, fr a ajunge ns la suprafaa rinichiului. Corticala este format din trei zone: cortex corticis, labirintul cortical i coloanele Bertin.

95

Corticala propriu zis, numit i cortex corticis, este situat imediat sub capsula renal i conine numeroase formaiuni granulare roii, corpusculii Malpighi. Labirintul cortical reprezint substana cortical situat ntre piramidele Ferrein; conine i el corpusculi Malpighi. Coloanele Bertin sunt formate din substana cortical ce coboar n medular, desprind ntre ele piramidele Malpighi. O piramid Malpighi, cu piramidele Ferrein de la baza sa, mpreun cu substana cortical aferent (labirint cortical, coloane Bertin), formeaz un lob renal. O piramid Ferrein i substana cortical care o nconjoar (labirintul cortical) formeaz un lobul renal. Rinichi, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom recunoate corticala cu corpusculii Malpighi i medulara, reprezentat de piramidele mari Malpighi i de piramidele mici Ferrein, cu aspect striat longitudinal. - cu obiectivul mare: vom studia structura microscopic i aezarea elementelor componente ale nefronului i ale tubilor colectori. Corpusculii renali Malpighi sunt situai n cortical, au form sferic i sunt alctuii din capsula Bowman i glomerulul renal. Fiecare corpuscul renal prezint doi poli: - un pol vascular, prin care ptrunde n glomerul arteriola aferent i iese arteriola eferent, - un pol urinar, la nivelul cruia spaiul urinifer se continu cu tubul contort proximal. Capsula Bowman nvelete la exterior glomerulul renal i este alctuit din: - o foi parietal format dintr-un epiteliu turtit aezat pe o membran bazal, - o foi visceral, lipit de capilarele glomerulare, format din celule epiteliale aplatizate, numite podocite i a cror structur este greu vizibil n microscopia optic. ntre cele dou foie ale capsulei se observ spaiul urinar, care pe preparatele histologice nu se coloreaz. Glomerulul renal este alctuit dintr-o reea de capilare anastomozate i mezangiu. Capilarele le recunoatem dup nucleii celulelor endoteliale i coninutul n hematii. Mezangiul este situat ntre capilarele glomerulare i este alctuit din celule mezangiale i matrice extracelular. Identificarea celulelor mezangiale n microscopia optic i n coloraia cu HE este dificil. De fapt, n glomerulul renal sunt prezente trei tipuri diferite de celule: podocitele, celulele endoteliale ale capilarelor i celulele mezangiale. Identificarea acestor celule s-ar putea face dup aspectul nucleilor (3 tipuri de nuclei), dar i acest lucru este dificil i nesigur n rinichiul normal i n microscopia optic.

96

1 3

2 8

2 1 3 4 7

7 4

9 5 9 6 5

10 6 10 Reprezentri schematice 11

Imagini histologice

Rinichiul 1 Glomerul renal; 2 Foia parietal a capsulei Bowman; 3 Foia visceral a capsulei Bowman; 4 Poriunea ncolcit a tubului proximal; 5 Poriunea dreapt a tubului proximal; 6 Ansa Henle; 7 Poriunea dreapt a tubului distal; 8 Poriunea ncolcit a tubului distal; 9 Tub colector; 10 Tub Bellini; 11 Capilar sanguin.

Tubul urinifer (renal) continu capsula Bowman pn la jonciunea cu tubii colectori i cuprinde patru zone histologice distincte:

97

Tubul proximal (TP) are o poriune ncolcit, situat n cortical, n jurul glomerulului renal i o poriune dreapt, pars recta, ce coboar n medular i se continu cu ansa Henle. Pe seciune l recunoatem dup anumite carectere particulare: - este delimitat de un epiteliu simplu prismatic, ale crui celule au citoplasma puternic eozinofil (bogat n mitocondrii) i prezint la polul apical bordura n perie, format din microviloziti ce ocup aproape n ntregime lumenul tubului. - prezena microvilozitilor face ca lumenul TP s aib un contur neregulat, imprecis delimitat. Ansa Henle, situat n medular, continu TP sub forma unui tub drept cu perete subire cu dou ramuri, poriunea descendent i poriunea ascendent. Recunoatem peretele ansei Henle dup epiteliul simplu pavimentos care-i tapeteaz peretele. Se deosebete de vasele de snge prin faptul c lumenul nu conine hematii. Tubul distal (TD) are o poriune dreapt ce continu ramura ascendent a ansei Henle i o poriune ncolcit, situat n cortical, n jurul glomerulului renal mpreun cu poriunea similar a TP. l vom recunoate dup anumite caractere care l deosebesc de TP: - are un lumen larg i mai bine delimitat datorit lipsei marginii n perie - este cptuit cu un epiteliu simplu cubic, cu un numr mai mare de nuclei, deoarece celulele sunt mai mici dect cele ale TP - celulele sunt mai palid colorate, deoarece conin un numr mai mic de organite Canalele intercalare fac legtura ntre TD i tubii colectori. Sunt foarte scurte i din aceast cauz nu se pot identifica pe seciunile histologice. Tubii colectori coboar prin piramidele Ferrein n piramidele Malpighi. Aceti tubi sunt tapetai cu un epiteliu simplu cubic, cu limite celulare nete, citoplasma palid colorat i fr bordur n perie la polul apical. Tubii colectori fuzioneaz formnd tubii Bellini. Tubii Bellini sunt situai n medulara profund, avnd aceeai structur histologic ca i tubii colectori. n mod caracteristic, ntre tubii Bellini se gsete o strom conjunctiv mai abundent dect n restul rinichiului.

VEZICA URINAR
Este un organ cavitar cu peretele format din 3 straturi: mucoasa, acoperit de uroteliu, musculara, groas i alctuit din trei straturi suprapuse i la exterior seroasa peritoneal sau adventiia. Vezic urinar, coloraie HE - cu obiectivul mic: vom observa cele trei straturi ale peretelui vezicii urinare: mucoasa, alctuit din uroteliu i corion, stratul muscular i seroasa
98

peritoneal sau adventiia. n repaus (vezica goal), mucoasa vezical este foarte plisat i uroteliul are mai multe rnduri de celule. Vezica destins are mucoasa neted i uroteliul format din 2-3 rnduri de celule. - cu obiectivul mare: vom studia structura celor trei straturi ale peretelui vezical. Mucoasa este acoperit de uroteliu, iar corionul este format dintr-un esut conjunctiv lax cu numeroase vase i nervi. n corion pot aprea fine fascicule de fibre musculare netede. Musculara este format din trei straturi de fibre musculare netede, longitudinal intern, circular mijlociu, longitudinal extern, dar care de cele mai multe ori sunt mai greu de identificat datorit unei dispoziii spaiale complexe. La exterior, vezica este acoperit de seroasa peritoneal sau de adventiie, ambele cu structur deja cunoscut.

I 1

2 3

II 4

5 III

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Vezica urinar I Mucoasa; II Musculara; III Adventiia 1 Uroteliu; 2 Corion cu fascicule de fibre musculare netede; 3, 5 Fibre musculare netede dispuse longitudinal; 4 Fibre musculare netede dispuse circular.

99

APARATUL GENITAL MASCULIN


Aparatul genital masculin este format din: - gonadele masculine (testiculele); - cile spermatice intratesticulare i extratesticulare; - glandele anexe (veziculele seminale, prostata, glandele bulbo-uretrale ale lui Cowper); - organul copulator (penisul).

TESTICULUL
Testiculul este un organ pereche cu o dubl funcie: - reproductiv, prin producerea gameilor masculini n tubii seminiferi, - endocrin, prin secreia hormonilor sexuali masculini (testosteron) de ctre celulele Leydig din interstiiul testicular. n structura testiculului deosebim urmtoarele componente: - o capsul inextensibil, albugineea, ce nvelete organul i care la nivelul marginii postero-superioare se ngroa, constituind mediastinul testicular - stroma, alctuit din septe conjunctive ce pleac radiar din mediastin, compartimentnd parial parenchimul n lobuli testiculari, slab individualizai la om. n interiorul lobulilor, printre tubii seminiferi, se gsete esutul conjunctiv interstiial n care sunt rspndite celulele endocrine Leydig - parenchimul este reprezentat prin totalitatea tubilor seminiferi, ce conin epiteliul seminal. Testicul, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom urmri aspectul general morfologic caracteristic testiculului. Parenchimul este reprezentat de tubii seminiferi, secionai n diferite incidene, datorit traiectului ncolcit al acestora. Printre tubi recunoatem esutul interstiial, redus cantitativ. - cu obiectivul mare: vom studia cu precdere elementele epiteliului seminifer i componentele esutului interstiial. n structura unui tub seminifer se evideniaz: Tunica proprie, format din 2-4 lame conjunctive colagene, dispuse concentric, ntre care se gsesc fibrocite i celule musculare netede. Sub tunica proprie se gsete o membran bazal (care nu se observ n aceast coloraie), pe care se dispune epiteliul seminal. Epiteliul seminal, din punct de vedere structural, apare pluristratificat i polimorf, fiind constituit din variate celule suprapuse. Se deosebesc dou linii celulare, una reprezentat prin celulele Sertoli (de susinere i nutriie), iar alta de celulele germinale (implicate n spermatogenez). Celulele Sertoli le vom recunoate dup nucleul lor mare, ovoid sau triunghiular, veziculos (clar), cu 1 - 2 nucleoli evideni, situai de obicei central.
100

Aceti nuclei mari sunt dispui din loc n loc aproape de membrana bazal; prezena nucleolilor i face uor de confundat cu o celul. Membrana celular i citoplasma acestor celule este greu vizibil, datorit contactului lor strns cu celulele germinale.
1 9 2

5 8 Imagine histologic 7 Reprezentare schematic 6

Tub seminifer 1 Tunica proprie; 2 Spermatogonii; 3 Spermatocite de ordinul I; 4 Spermatocite de ordinul II; 5 Spermatide; 6 Spermatozoizi; 7 Nucleul celulei Sertoli; 8 Celule interstiiale Leydig; 9 Vas sanguin.

Celulele germinale sunt reprezentate de spermatogonii, spermatocite de ordinul I i II, spermatide i spermatozoizi. Fiecare element va fi identificat dup forma, structura i poziia sa n cadrul epiteliului seminal: - spermatogoniile sunt aezate pe un singur rnd pe membrana bazal, uor distanate ntre ele, avnd diametrul mai mic dect celulele dispuse deasupra lor (spermatocitele). Limitele celulare fiind mai greu vizibile, identificarea lor se face dup aspectul nucleilor: mici, rotunzi i cu cromatina pulverulent (spermatogoniile cu nucleu prfos) sau cu cromatina grunjoas, ntunecat (spermatogoniile cu nucleu grunjos); - spermatocitele de ordinul I sunt cele mai voluminoase, situate la o oarecare distan de peretele tubului (imediat deasupra spermatogoniilor), pe un singur rnd. Nucleii lor sunt cei mai mari, rotunzi i cu cromatina n reea, corespunztor diferitelor faze ale primei diviziuni meiotice. - spermatocitele de ordinul II se observ rar pe seciuni histologice, deoarece rmn n acest stadiu un timp foarte scurt. Se aseamn cu spermatocitele de ordinul I, dar sunt mai mici i sunt situate mai superficial. - spermatidele sunt dispuse spre lumenul tubului, n mai multe straturi, avnd o form rotund sau alungit i diametru mic. Citoplasma este slab eozinofil iar limitele celulare sunt vizibile. Celulele se recunosc dup nucleu: globulos n stadiile iniiale, apoi din ce n ce mai alungit. Cromatina este condensat i d un aspect omogen nucleului.
101

- spermatozoizii sunt uor de recunoscut dup aezare i aspectul nucleului. Reprezentnd ultima faz de maturare a celulei germinale, spermatozoidul este situat n apropierea lumenului tubului seminifer, are capul nfipt n epiteliul seminal i coada (flagelul) n lumenul tubului. Capul spermatozoidului se distinge uor dup forma nucleului: mult micorat n volum fa de nucleul spermatidei, ovalar, intens hipercrom datorit cromatinei condensate i omogene. esutul interstiial este format din esut conjunctiv lax, vase sanguine, limfatice i cuiburi de celule interstiiale Leydig ce secret testosteron. Aceste celule sunt mari, poligonale, cu nuclei rotunzi sau ovalari, eucromi, cu 1-2 nucleoli. Citoplasma eozinofil i fin granular poate s conin un pigment galben-brun (lipofuscin) i/sau nite formaiuni cristaloide, puternic eozinofile: cristalele Reinke. Printre aceste celule se gsesc numeroase capilare, deoarece sunt celule cu rol endocrin. Totalitatea celulelor Leydig formeaz glanda interstiial (diastematic).

GLANDELE ANEXE Prostata


Este compus dintr-un sistem de glande tubulo-alveolare compuse i o strom musculo-conjunctiv foarte bine reprezentat. Prostata, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom urmri organizarea morfologic a prostatei. Alveolele (glandele) i canalele de excreie au aceeai structur histologic, astfel nct pe seciunile histologice se pot deosebi cu dificultate. n unele alveole exist 1-2 concreiuni, ovalare i eozinofile, cu aspect lamelar, rezultate din precipitarea i depunerea produsului de secreie restant n straturi concentrice (simpexionii lui Robin). - cu obiectivul mare: vom studia stroma i glandele prostatice. Stroma este format din esut conjunctiv (mai palid colorat) i fascicule de fibre musculare netede cu aspectul caracteristic. Epiteliul glandelor formeaz mici pliuri ce prezint, n mod normal, un ax conjunctivo-vascular. Acest epiteliu este bistratificat (aezat pe membrana bazal), format dintr-un rnd de celule bazale turtite (cu un nucleu ovalar, hipercrom, paralel cu membrana bazal), peste care se suprapune un rnd de celule secretorii, cilindrice, nalte (cu un nucleu ovalar, situat la baza celulei).

102

2 Imagine histologic Reprezentare schematic

Prostata 1 Epiteliu glandular bistratificat; 2 Strom musculo-conjunctiv.

103

APARATUL GENITAL FEMININ


Aparatul genital feminin se compune din: - organele genitale interne: ovarele, trompele uterine, uterul, vaginul - organele genitale externe: vulva (cu labiile mari i mici) i clitorisul Vom studia structura ovarului, trompei uterine, uterului i a vaginului. Tot n acest capitol vom studia i placenta, datorit relaiei strnse dintre ea i uterul gravid, precum i glanda mamar, legat prin relaii structurale i funcionale cu tractul genital.

OVARELE
Ovarele sunt organe pereche, de form ovalar turtit. Suprafaa fiecrui ovar este acoperit de un epiteliu simplu cubic sau cilindric, care se aplatizeaz cu vrsta i sub care se gsete tunica albuginee, o structur fibroas, avascular. esutul ovarian propriu-zis se poate mpri n trei compartimente, de la suprafa spre profunzime: corticala, medulara i hilul ovarian. - corticala, situat la periferie, este o zon foarte celular i presrat cu foliculi ovarieni n diferite faze de dezvoltare i/sau corpi galbeni i/sau zone cicatriciale (corpi albicans); - medulara este situat central i conine vase i nervi cuprinse ntr-un esut conjunctiv lax - hilul este locul prin care ptrund i ies vase sanguine, limfatice i nervi; aici ntlnim celulele hilului ovarian, similare cu celulele Leydig din testicul. Ovar, coloraie HE - cu obiectivul mic: vom urmri aspectul morfologic general al ovarului. La suprafa ovarul este acoperit cu un epiteliu simplu cubic sau pavimentos (numit i epiteliu germinal) cu nuclei rotunzi colorai intens bazofil, ce se sprijin pe o membran bazal groas. Sub epiteliu se gsete albugineea ovarului, un strat avascular de esut conjunctiv dens. Sub albuginee se observ corticala, uor de recunoscut dup numeroii foliculi ovarieni, cu sau fr cavitate, delimitai de unul sau mai multe straturi celulare (celule foliculare) i eventual de teci. Tot n cortical putem gsi un corp galben i structuri cicatriciale, corpi albicans i foliculi atrezici. Printre aceste structuri se gsete stroma conjunctiv a ovarului, bogat celular: celule fusiforme, fine fibre de colagen i cteva fibre musculare netede. Medulara conine esut conjunctiv lax, vase mari cu traiect tortuos, limfatice i nervi.

104

Ovar imagine histologic

- cu obiectivul mare: vom studia mai ales zona cortical, n care vom distinge foliculi ovarieni n diferite faze de evoluie, corpul galben i corpul albicans: Foliculul primordial se gsete n corticala superficial i este format dintrun ovocit (celul mare, rotund cu citoplasma fin granular, cu un nucleu mare, situat excentric, cu cromatin fin i un nucleol proeminent), nconjurat de un rnd incomplet de celule turtite, celulele foliculare. Foliculul primar, localizat tot n corticala superficial, reprezint stadiul iniial al dezvoltrii foliculilor. Ovocitul, mrit n volum este nconjurat complet de un rnd de celule foliculare, care devin cubice sau cilindrice. ntre membrana celular a ovocitului i celulele foliculare apare o zon omogen, puternic eozinofil, numit zona pellucida. Foliculul primar activat sau n cretere, se caracterizeaz printr-un ovocit voluminos, nconjurat de zona pellucida. Celulele foliculare dispuse n mai multe straturi se mai numesc celule de granuloas. Stratul cel mai extern al celulelor de granuloas se sprijin pe o membran bazal care le desparte de esutul conjunctiv al stromei ovariene. Foliculul secundar (cavitar), localizat mai adnc n cortical, este format dintr-un ovocit mai mare, nconjurat de zona pellucida i de o granuloas mai groas. Printre celulele foliculare ncep s apar mici caviti pline cu lichid folicular. La periferie ncep s apar cele dou teci ale foliculului, intern i extern. Teaca intern, profund, este situat n jurul granuloasei, de care este desprit prin membrana bazal. Este format din celule stromale mrite n volum (celule secretorii) i o bogat reea capilar. Teaca extern, subire, este format din esut conjunctiv i fibre musculare netede.

105

4 1

6 9

10 11 2 3 12 13 14 15

16 17 7 8

Foliculi ovarieni reprezentare schematic 1 Epiteliu de suprafa; 2 Tunica albugineea; 3 Stroma ovarului; 4 Folicul primordial; 5 Folicul primar; 6 Folicul primar activat; 7 Folicul secundar; 8 Folicul teriar (de Graaf); 9 Teaca extern; 10 Teaca intern; 11 Membrana bazal folicular;; 12 Celule de granuloas; 13 Antrul folicular; 14 Corona radiata; 15 Zona pellucida; 16 Ovocit primar; 17 Cumulus oophorus.

Foliculul matur (de Graaf) reprezint stadiul de dezvoltare complet a foliculului ovarian. Ocup ntreaga cortical i proemin la suprafaa ovarului. n foliculul matur, numeroasele caviti dintre celulele de granuloas fuzioneaz i formeaz o cavitate unic, antrul, ce conine lichidul folicular. Antrul este delimitat de granuloas - mpins la periferie, format din 2-3 straturi celulare. Ea se sprijin pe membrana bazal ce separ granuloasa de celulele tecii interne. Membrana bazal nu se coloreaz cu HE, dar poate fi pus n eviden prin coloraii speciale (PAS). Ovocitul, situat excentric n folicul, este nglobat ntr-o zon ngroat a granuloasei, numit cumulus oophorus (discul proliger). Celulele cumulusului oophor imediat adiacente ovocitului sunt alungite i dispuse radiar n jurul ovocitului, constituind corona radiata. Ovocitul este voluminos, are o citoplasm eozinofil, granular, cu un nucleu mare, veziculos i excentric - vezicula germinativ - i un nucleol dens - pata germinativ. La exterior foliculul este nconjurat de tecile foliculului care n foliculul teriar sunt bine dezvoltate:

106

- teaca intern, constituit din 3-4 straturi de celule poligonale alungite, cu citoplasm abundent, eozinofil i vacuolar (conine picturi de lipide). Printre celule se gsesc numeroase capilare - teaca extern, format din fibre conjunctive colagene aezate concentric n jurul foliculului, celule conjunctive i fibre musculare netede. Corpul galben ce se formeaz dup eliminarea ovulului, este format din celule rotunde sau poligonale dispuse n cordoane neregulate, anastomozate, ntre care gsim numeroase capilare. Aceste celule se numesc celulele luteinice. Se disting dou tipuri de celule luteinice: - celule luteinice de granuloas, ce ocup cea mai mare parte a corpului galben, sunt celule mari, poligonale, cu citoplasma abundent, palid eozinofil, vacuolar datorit numeroaselor picturi fine de lipide i cu un nucleu rotund, hipocrom i nucleol evident - celule luteinice tecale, mai mici, sunt localizate la periferia corpului galben, din loc n loc, n jurul vaselor sanguine. Au citoplasma mai intens colorat, iar nucleul este mai mic i mai intens colorat dect al celulelor luteinice de granuloas.

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Corp galben 1 Celule luteinice de granuloas; 2 Celule luteinice tecale; 3 Vase sanguine.

UTERUL
Uterul, prezint din punct de vedere anatomic: o poriune superioar, dilatat (corpul i fundul), o poriune mijlocie strmt i foarte scurt (istmul uterin), o poriune inferioar de form cilindric (colul uterin). Uterul prezint o cavitate uterin i un canal cervical cu dou orificii, orificiul intern spre cavitatea uterin i orificiul extern spre vagin. Peretele uterin este format din 3 tunici, inegale ca grosime, care la uter poart denumiri specifice:

107

- perimetrul este stratul extern, format n parte din seroasa peritoneal (fundul i partea posterioar a corpului) i adventiie n rest - miometrul sau stratul muscular - endometrul sau mucoasa uterin. Uter, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom urmri aspectul general al peretelui uterin: un strat muscular gros (miometrul), tapetat spre cavitatea uterin de endometru, n contact direct cu miometrul (submucoasa lipsete) i nvelit la exterior de seroas sau adventiie. Endometrul este format din epiteliu de suprafa i corion. Epiteliul de suprafa se nfund n corion i d natere glandelor endometriale. Corionul sau stroma endometrial este esutul celular dintre aceste glande. La nivelul miometrului vom observa o puternic vascularizaie. - cu obiectivul mare: vom studia structura amnunit a peretelui uterin. Endometrul este o mucoas hormonosensibil i n consecin are aspecte diferite n cele 4 faze ale ciclului menstrual. La lucrrile practice vom prezenta doar dou: faza foliculinic sau proliferativ i faza luteinic sau secretorie. Epiteliul de suprafa este cilindric i conine dou tipuri de celule, care alterneaz: ciliate i secretorii. Glandele endometriale sunt glande tubuloase simple, rareori ramificate, tapetate cu un epiteliu cilindric cu rare celule ciliate. Printre glande se poate observa stroma endometrului, un esut conjunctiv foarte celular. Sub influene hormonale (estrogeni, progesteron) aceste structuri ale endometrului iau aspecte diferite n cele dou faze ale ciclului menstrual menionate mai sus. Faza foliculinic (proliferativ) se desfoar n primele 14 zile ale ciclului menstrual; n aceast faz endometrul se ngroa progresiv, ajungnd la 2-3 mm. Glandele, stroma i arterele din strom prolifereaz. Glandele, la nceput drepte i egal repartizate n strom, cresc n lungime i devin ondulate. Lumenul lor este ngust i fr coninut. Celulele epiteliului glandular au nucleii dispui bazal cu un nucleol proeminent. Stroma endometrial are un aspect ntunecat i este foarte celular. n stroma adiacent miometrului se pot observa arterele spiralate care, n aceast faz a ciclului menstrual, nu ajung pn la suprafaa endometrului. n faza luteinic (secretorie) endometrul se deosebete mult de cel din faza precedent. Grosimea lui atinge 5-6 mm. Glandele endometriale sunt tortuoase, deoarece cresc mult n lungime, iar spaiul pe care-l au la dispoziie este mai mic dect lungimea glandelor. Lumenul lor este din ce n ce mai larg, mai neregulat i poate conine produsul de secreie al glandelor, colorat eozinofil. La nceputul acestei faze, nucleii se gsesc la polul apical al celulelor, datorit acumulrii subnucleare a vacuolelor cu produs de secreie. Mai trziu, vacuolele se deplaseaz supranuclear, dilat polul apical al celulelor i mping nucleul la baza celulei. Stroma endometrial este mai paplid, este edemaiat (prin acumulare de lichid interstiial); celulele ei se transform decidual, adic devin celule mari cu citoplasma abundent, palid eozinofil (conin glicogen). Arterele spiralate ajung pn la suprafaa endometrului i devin foarte ncolcite.

108

3 I

II

III 7

Imagini histologice

Reprezentare schematic

Uter, faz proliferativ I Endometru; II Miometru; III - Perimetru. 1 Epiteliu de suprafa; 2 Glande endometriale; 3 Stroma endometrial; 4 Artere spiralate; 5 Fibre musculare netede; 6 Vase sanguine; 7 Mezoteliu.

Miometrul constituie cea mai mare parte a uterului i este alctuit din fascicule de fibre musculare netede lungi, dispuse n toate direciile, ntr-o arhitectur complex n care nu se pot distinge straturi. Miometrul este vascularizat printr-o bogat reea arterial i venoas. Din peretele vascular lipsete adventiia. Perimetrul este format din seroasa peritoneal care nvelete mai ales fundul uterin i adventiie n rest. Structura seroasei i a adventiiei este deja cunoscut.

109

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Uter, faza secretorie 1 Epiteliu de suprafa; 2 Glande endometriale; 3 Strom endometrial edemaiat i cu celule transformate decidual; 4 Artere spiralate.

Colul uterin, coloraie HE. Este partea inferioar a uterului, de form cilindric, prezentnd dou orificii: intern i extern. Poriunea care proemin n vagin se numete exocol sau exocervix, iar poriunea dintre cele 2 orificii este endocolul sau endocervixul. Structura sa prezint 3 straturi, dintre care doar cel muscular i mucoasa sunt diferite de ale corpului uterin. - cu obiectivul mic: vom urmri aspectul mucoasei cervicale. Epiteliul exocolului este identic cu cel al vaginului: stratificat pavimentos necheratinizat. Epiteliul endocolului este simplu cilindric cu celule muco-secretante, prezentnd numeroase invaginri n corion, cu aspect glandular. nspre marginea vaginal a colului se observ zona de tranziie dintre endocol i exocol. - cu obiectivul mare: vom observa epiteliul simplu cilindric al mucoasei endocervicale format n majoritate din celule mucoase i rare celule ciliate. Vom identifica zona de tranziie sau zona unde epiteliul exocolului, stratificat pavimentos necheratinizat, se transform n epiteliul simplu cilindric al endocolului. Aceast jonciune scuamo-cilindric are mare importan clinic, fiind sediul unei variate patologii. Glandele cervicale au epiteliul identic cu al endocolului, sunt mai puin numeroase dect cele endometriale, dar mai ramificate i conin mucus n lumen. Stratul muscular este alctuit din fibre musculare netede nglobate n fibre de colagen i fibre elastice. Spre deosebire de corpul uterin, n stratul muscular esutul conjunctiv predomin fa de esutul muscular.

110

6 Imagine histologic Reprezentare schematic

Col uterin 1 Epiteliul endocervical; 2 Zona de tranziie scuamo-cilindric; 3 Epiteliul exocolului; 4 Glande cervicale; 5 Corion; 6 Strat muscular.

VAGINUL
Este un conduct musculo-membranos care se inser n partea superioar pe colul uterin, iar n partea inferioar comunic cu orificiul vulvar. n structura peretelui vaginal deosebim trei tunici: tunica mucoas, tunica muscular i adventiia. Vagin, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom identifica cele trei tunici ale peretelui vaginal: mucoasa cu un epiteliu stratificat pavimentos necheratinizat i un corion gros, cu papile i fr glande (cu numeroase vase sanguine); musculara are dou straturi de fibre musculare (intern circular, extern longitudinal); adventiia este format din esut conjunctiv lax, bogat n adipocite. - cu obiectivul mare: vom studia mai cu seam aspectul mucoasei vaginale, urmrind atent forma celulelor din epiteliul stratificat pavimentos.

111

2 3

4 II

III

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Vagin I Mucoasa; II Musculara; III Adventiia; 1 Epiteliu de suprafa; 2 Corion; 3 Vase sanguine; 4 Strat muscular circular; 5 Strat muscular longitudinal.

PLACENTA
Placenta este un organ tranzitoriu ce se dezvolt n uter n timpul sarcinii, cu rolul de a asigura schimburile dintre mam i ft, cu dou componente: o placent fetal i o placent matern, reprezentat prin mucoasa uterin mult ngroat i modificat histologic (decidua bazal). Placenta fetal este alctuit din placa corial i vilozitile coriale. Placa corial este o formaiune membranar, format dintr-un ax conjunctiv, tapetat spre cavitatea amniotic de un epiteliu simplu cilindric sau turtit (epiteliul amniotic), iar spre spaiul intervilos de ctre trofoblast. Din placa corial se dezvolt vilozitile coriale. Vilozitile sunt structuri puternic ramificate, scldate de sngele matern. n preparatele histologice vilozitile apar secionate n diverse incidene. Placenta matern este reprezentat de decidua bazal.
112

Placent, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom recunoate vilozitile secionate n diferite incidene (oblic, tranversal, longitudinal) , alturi de care se remarc poriuni din decidua matern. - cu obiectivul mare: vom studia structura histologic a vilozitilor i a fragmentelor din placenta matern. O vilozitate corial secionat transversal prezint un ax central conjunctivo-vascular tapetat de un epiteliu (trofoblast). Aspectul vilozitilor coriale ne permite s stabilim vrsta sarcinii: placent timpurie (pn n luna a V-a) sau placent la termen. a. Placenta fetal timpurie prezint viloziti tapetate cu un epiteliu trofoblastic bistratificat: - sinciio-trofoblastul este stratul extern, mai nchis la culoare, format dintro mas citoplasmatic cu numeroi nuclei rotunzi, hipercromi. - citotrofoblastul este situat sub sinciiotrofoblast i este constituit dintr-un rnd de celule (celulele Langhans), cubice, mai mici, cu citoplasma bazofil i un nucleu voluminos, eucrom, nucleolat. Citotrofoblastul este desprit de stroma conjunctiv din axul vilozitar printr-o membran bazal relativ groas.
1 2

5 B Imagini histologice 6 Reprezentare schematic

Placent timpurie A Vilozitate corial; B Decidua; 1 Placent fetal (vilozitate corial); 2 Sinciiotrofoblast; 3 Citotrofoblast; 4 esut mezenchimatos; 5 Placenta matern (decidua); 6 Celule deciduale.

.
113

esutul conjunctiv din axul vilozitii este de tip mezenchimatos, cu celule stelate cu numeroase prelungiri citoplasmatice ramificate, o matrice intercelular mucoid i o reea de capilare n care se pot recunoate hematii primitive fetale (nucleate). b. Placenta fetal la termen se caracterizeaz prin ramificarea n continuare a vilozitilor coriale, astfel c pe seciune ele apar mai mici. Citotrofoblastul, stratul intern al trofoblastului se atrofiaz i apoi dispare. Astfel, vilozitile sunt delimitate numai de epiteliul sinciial, n care din loc n loc vom observa insule nucleare. Axul conjunctiv se fibrozeaz i conine o bogat reea de vase anastomozate, fibroblati i o substan hialin acidofil, fibrina.
2 1

A 3

4 B Imagini histologice Reprezentare schematic

Placent la termen A Vilozitate corial; B Decidua; 1 Vilozitate corial; 2 Sinciiotrofoblast; 3 Ax conjunctivo-vascular; 4 Decidua.

Placenta matern sau decidua se formeaz din stratul funcional al endometrului. Ea este format din celule deciduale: celule mari, poligonale cu limite celulare evidente, cu nuclei mari, hipocromi, cu nucleol evident, citoplasma foarte abundent, granular i/sau vacuolar, eozinofil sau bazofil. Printre celulele deciduale se observ o reea de vase dilatate i resturi din glandele endometriale puternic modificate secretor. Pot fi prezente i celule mari, multinucleate.
114

GLANDA MAMAR
Glandele mamare sunt glande sudoripare apocrine, foarte modificate. Structural sunt glande tubulo-alveolare. Fiecare gland mamar este alctuit din 15-20 lobi mamari, fiecare individualizat i separat de cellalt printr-un esut conjunctiv i drenat prin cte un canal de excreie propriu (canalul galactofor), ce se deschide la nivelul mamelonului. La femeia adult nulipar glanda mamar este alctuit doar din canalicule excretorii i strom. Alveolele se dezvolt numai n cursul gestaiei i n perioada de lactaie. Glanda mamar n repaus, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom observa structura glandei mamare ce apare format din strom i parenchim, fiind mprit n lobi i lobuli. Lobulii mamari i recunoatem uor fiind mai deschii la culoare. Ei conin o strom format din esut conjunctiv lax (stroma funcional) i o componenta glandular, reprezentat de canale (ducte) intralobulare ramificate. Lobulii sunt separai ntre ei prin septe conjunctive groase, ce constituie stroma nefuncional a glandei mamare. n aceast strom se gsesc canalele (ductele) interlobulare, canalele de excreie mari ale glandei mamare.
2 1 4 5

3 Imagine histologic Reprezentare schematic

Gland mamar n repaus 1 Muguri n ateptare; 2 Canale (ducte) intralobulare; 3 Strom intralobular; 4 Strom interlobular; 5 Canal (duct) interlobular; 6 esut adipos.

- cu obiectivul mare: vom studia structura stromei i a parenchimului glandular. n lobulul mamar, stroma funcional este format din esut conjunctiv lax, vase i nervi. Nu conine esut adipos. Componenta glandular este reprezentat de canalele sau ductele intralobulare. Aceste canale au un lumen ngust, rotund, delimitat de un epiteliu bistratificat: celule mioepiteliale adiacente membranei bazale i celule secretorii, cubice sau prismatice mici ce delimiteaz lumenul.
115

Celulele mioepiteliale le recunoatem dup nucleul ovalar, hipercrom, paralel cu membrana bazal. Ductele intralobulare sunt ramificate i se termin fie n fund de sac fie sub forma mugurilor n ateptare. Acetia sunt mase mici, sferice, fr lumen, formate din celule epiteliale nalte cilindrice, nconjurate de celule mioepiteliale i membrana bazal. Stroma nefuncional reprezentat de septele interlobulare, este format din esut conjunctiv dens i o cantitate variabil de esut adipos. Ductele interlobulare care se gsesc n aceast strom, au un lumen mai larg, neregulat, tapetat de asemenea cu un epiteliu bistratificat, format dintr-un strat bazal de celule mioepiteliale i un strat de celule cubice sau cilindrice. n jurul membranei bazale au o tunic conjunctiv. Ele converg spre un canal galactofor, iar n profunzime se ramific dnd natere ductelor intralobulare. Glanda mamar n sarcin i lactaie, coloraie HE. - cu obiectivul mic: spre deosebire de glanda mamar n repaus, lobulii mamari cresc treptat n dimensiune n cursul sarcinii, ajungnd foarte mari n perioada de lactaie. ntr-un asemenea lobul, componenta glandular este foarte dezvoltat, iar stroma (funcional) este foarte redus cantitativ. Prin creterea lobulilor se reduce din ce n ce mai mult i stroma nefuncional.
1 3

4 2

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Gland mamar n sarcin 1 Alveole secretorii i canale (ducte) intralobulare; 2 Strom intralobular; 3 Strom interlobular; 4 Ducte interlobulare.

- cu obiectivul mare: vom studia n special aspectul componentei glandulare. Astfel, observm c la captul canalelor intralobulare apar alveole secretoare. n gestaie aceste alveole au lumenul mai ngust i spre sfritul acestei faze pot conine un material eozinofil, colostrul. Celulele secretorii ale epiteliului devin cilindrice nalte, cu citoplasma apical vacuolar (conin produs de secreie lipidic). Celulele mioepiteliale sunt dispuse din loc n loc ntre polul lor bazal i membrana bazal.

116

n lactaie, alveolele secretoare au aceeai structur, dar sunt mult mai mari, au lumenul mai larg ce conine produs de secreie. Canalele intralobulare sunt greu de difereniat de alveolele secretoare, deoarece au aceeai structur i sunt i ele dilatate. n aceast faz att stroma funcional ct i cea nefuncional sunt foarte reduse cantitativ.

117

PIELEA
Pielea este un organ care prin structura sa complex ndeplinete funcia de protecie, funcia de organ receptor i de organ excretor. Este constituit din trei straturi: epidermul, dermul i hipodermul, i din anexe: glandele, corpusculii senzitivi i fanerele cutanate. Pielea, coloraie HE, pulpa degetului. - cu obiectivul mic i obiectivul mare vom recunoate elementele componente ale celor trei straturi ale tegumentului: Epidermul este format din epiteliu stratificat pavimentos cheratinizat, n care vom deosebi cinci straturi: - stratul bazal format dintr-un rnd de celule cilindrice sau cubice, cu citoplasma redus, bazofil, mai nchis la culoare, nuclei ovalari, alungii, situai perpendicular pe membrana bazal - stratul intermediar sau spinocelular este format din 6-14 rnduri de celule mari, cu form neregulat poligonal, cu limite celulare bine vizibile; n partea profund a stratului intermediar celulele au citoplasma ntunecat, bazofil iar n partea superioar citoplasma devine palid eozinofil. Nucleii sunt rotunzi i eucromi. - stratul granulos este constituit din 2-4 straturi de celule turtite, romboidale, cu axul lung dispus paralel cu suprafaa epidermului. n citoplasm se gsesc granule mari, intens bazofile (granule de cheratohialin) pe care le putem identifica cu obiectivul mare. Nucleul acestor celule este turtit, greu vizibil, fiind mascat de prezena granulelor. - stratul lucid este subire, fiind alctuit din 2-3 rnduri de celule turtite, cu aspect strlucitor, palid colorate eozinofil. Nucleii sunt abseni n acest strat. - stratul cornos este o structur intens eozinofil, de grosime variabil, la suprafaa epidermului. n acest strat se observ umbre celulare, aplatizate, fr nuclei i cu citoplasma intens eozinofil. Eozinofilia este dat de prezena cheratinei. Celulele superficiale, pline cu cheratin, se descuameaz. Din loc n loc, n grosimea epiteliului se recunosc traiectele sudoripare, care la acest nivel nu au perete propriu; ele reprezint continuarea canalelor sudoripare din derm. Dermul, topografic i structural, se mparte n dermul superficial sau papilar i dermul profund sau reticular, ce vine n raport cu hipodermul. Dermul papilar este format din esut conjunctiv lax cu numeroase capilare sanguine i terminaii nervoase. Acest esut ptrunde n epiteliul supraiacent, formnd papilele dermice. n vrful unor papile se pot gsi corpusculi senzitivi Meissner. Aceti corpusculi au form ovoid i sunt aezai perpendicular pe suprafaa epiteliului. La exterior au o teac conjunctiv, iar n interior sunt formai din celule Schwann aplatizate dispuse sub forma unor lamele suprapuse, printre care se insinueaz un axon senzitiv cu traiect sinuos.
118

Dermul profund sau reticular este format din esut conjunctiv dens, cu fascicule groase de fibre colagene, dispuse tangenial sau perpendicular fa de membrana bazal. Conine vase, foliculi piloi cu glande sebacee ataate (n pielea proas). Este strbtut de canalele excretoare ale glandelor sudoripare. Datorit dispoziiei sinuoase, ele apar secionate n diferite incidene, au forme diferite i lumene nguste, cptuite de 1-2 rnduri de celule cubice.

1 2 3 I A 4 5

II

6 7

III

B 8 IV

C Imagini histologice Reprezentare schematic

Pielea A Epiderm, vedere de ansamblu; B Hipoderm; C Corpuscul Vater-Pacini; I Epiderm; II Derm papilar; III Derm reticular; IV Hipoderm; 1 Strat cornos; 2 Strat lucid; 3 Strat granulos; 4 Strat spinocelular; 5 Strat bazal; 6 Corpuscul Meissner; 7 Canalul excretor al glandei sudoripare; 8 Glomerulul glandei sudoripare; 9 Corpuscul Vater-Pacini.

119

Hipodermul este alctuit din esut conjunctiv lax i paniculi adipoi (grupuri de adipocite). n hipoderm se observ formaiuni ovoide, care n seciune transversal au aspect de bulb de ceap: corpusculii Vater-Pacini. Acetia sunt formai din lame celulare concentrice (celule conjunctive i celule Schwann aplatizate) i o fibr nervoas amielinic dispus n axul corpusculului. n hipodermul profund se gsete i glomerulul glandei sudoripare. Fiind un tub ncolcit, glomerulul glandei sudoripare apare pe seciune histologic sub forma unor structuri pseudo-acinoase, cptuite de celule nalte, secretorii, dublate la exterior de celule mioepiteliale.

120

GLANDELE ENDOCRINE
Glandele cu secreie intern sunt constituite din celule endocrine nconjurate de strom i de o bogat reea capilar. Glandele endocrine nu au canale de excreie. Produsul secretat, denumit hormon, se vars direct n snge i acioneaz la distan asupra unor esuturi sau organe int, determinnd modificri biochimice, funcionale i/sau structurale. Celulele endocrine se pot grupa n trei moduri: a. celule endocrine ce formeaz glande: hipofiza, epifiza, tiroida, paratiroida i suprarenala. b. insule de celule endocrine, cuprinse n stroma altor organe: glanda interstiial din testicul, corpul galben i teaca intern a foliculului matur din ovar, insulele Langerhans din pancreas i altele. Structura acestora este studiat odat cu organele care le conin. c. celule endocrine dispuse printre celulele diferitelor epitelii, formnd sistemul endocrin difuz (SED). n acest capitol vom descrie doar structura glandelor endocrine ce formeaz organe separate. Ele sunt diferite structural, dar au un plan general comun de organizare: - capsula, la exterior, are structur conjunctivo-vascular, i trimite septe (travee) ce compartimenteaz glandele n lobi i lobuli; - stroma este format din esut conjunctiv lax, numeroase capilare sanguine i limfatice, nervi. Prezent n toate glandele endocrine, stroma difer cantitativ de la o gland la alta. - parenchimul este format din cordoane de celule endocrine, din cuiburi sau vezicule (foliculi), n strns legtur cu capilarele sanguine.

HIPOFIZA
Hipofiza sau glanda pituitar are form ovoid, este situat intracranian i este legat de hipotalamus prin tija hipofizar. n raport cu originea i structura sa, hipofiza este constituit din 2 pri distincte: a. Adenohipofiza, partea cea mai voluminoas, este o structur epitelial. Ea este compus din 3 lobi: - lobul anterior (pars distalis) - lobul intermediar (pars intermedia) - lobul tuberal (pars tuberalis) b. Neurohipofiza, partea cea mai mic, are o structur fibrilar. Este format din 2 lobi: - lobul posterior sau nervos - infundibulul format din tija infundibular i din eminena cenuie sau median (tuber cinereum).
121

Hipofiza, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom urmri conformaia general a glandei, cu o capsul foarte fin. Vom identifica adenohipofiza, cu structur epitelial, ce formeaz aproximativ 75-80% din masa hipofizei i neurohipofiza cu o structur fibrilar (fibre conjunctive, nervoase), cu puine celule. - cu obiectivul mare: vom studia aspectele histologice caracteristice celor dou pri componente ale hipofizei. Adenohipofiza - lobul anterior: conine diverse tipuri de celule endocrine aranjate n cordoane i cuiburi. Pe preparatele histologice colorate n HE se observ dou populaii celulare: celulele cromofobe, a cror citoplasm nu se coloreaz sau se coloreaz foarte slab, i celulele cromofile cu o citoplasm variat colorat. Celulele cromofobe reprezint aproximativ 50% din populaia celular i se situeaz n centrul cordoanelor celulare. Ele apar sub forma unor aglomerri de nuclei veziculoi, hipocromi. Citoplasma este greu vizibil, fiind lipsit de granulaii. Celulele cromofile reprezint restul de 50% din populaia celular a lobului anterior. Sunt celule relativ mari, cu limite celulare distincte i cu citoplasma granular. n funcie de colorabilitatea acestor granule, deosebim dou tipuri de celule cromofile: acidofile i bazofile. - celulele cromofile acidofile sunt cele mai numeroase. Apar ca nite celule relativ mari, rotunde sau ovalare, cu limite nete, cu citoplasma eozinofil datorit granulaiilor mari, cu afinitate fa de coloranii acizi. Nucleii sunt rotunzi i hipocromi, dispui central. Aceste celule secret urmtorii hormoni: STH (hormonul somatotrop sau de cretere) i PRL (prolactina sau hormonul lactogen). - celulele cromofile bazofile sunt mult mai puine numeric. Sunt mai mari dect celulele acidofile, au form rotund sau ovalar, cu limite bine vizibile, cu o citoplasm bazofil, datorit granulaiilor cu afinitate pentru coloranii bazici. Nucleii sunt rotunzi, hipocromi i sunt dispui central sau excentric. Ele au rolul de a secreta urmtorii hormoni tropi hipofizari: TSH (hormonul tireotrop hipofizar), ACTH (hormonul corticotrop), hormonii gonadotropi LH i FSH (luteinizant i foliculo-stimulant). Printre celule, stroma este redus cantitativ i este format dintr-o reea de fine fibre de reticulin (care nu se vizualizeaz n coloraia HE) i numeroase capilare. - lobul intermediar este rudimentar la om, redus la o lam de celule dispus ntre lobul anterior i neurohipofiz. Este format din cordoane scurte de celule i din loc n loc vezicule cu coloid eozinofil (omogen). Celulele sunt de dou tipuri, cromofobe i bazofile, acestea din urm cu granulaii bazofile n citoplasm. Frecvent celulele i veziculele apar i n lobul posterior hipofizar. Neurohipofiza: - lobul posterior sau nervos: are o structur predominant fibrilar, fiind alctuit din fasciculele de fibre nervoase amielinice ale tractului hipotalamohipofizar, fibre conjunctive stromale, celule gliale, numite pituicite, i rare celule
122

epiteliale bazofile migrate din lobul intermediar. Printre fibre se gsesc nite mici structuri rotunde sau ovalare, ce conin un material eozinofil, denumite corpii lui Herring, i o bogat reea capilar. Aceste formaiuni reprezint depozite de material de neurosecreie, coninnd doi hormoni: ocitocina i vasopresina, elaborai de neuronii din hipotalamus, transportai de-a lungul axonilor i depozitai aici. Celulele neurohipofizei sunt reprezentate de: - pituicite, celule gliale mici, neregulate, puternic ramificate (pericapilar), cu un nucleu rotund sau ovalar, hipocrom i cu o citoplasm slab colorat, cu limite imprecise; - celule conjunctive cu nuclei alungii, hipercromi; - celule bazofile migrate din lobii epiteliali.
2 1 4 3 2 3

5 6 I II III

Hipofiza I Lob anterior; II Lob intermediar; III Neurohipofiza. 1 Celule cromofile acidofile; 2 Celule cromofile bazofile; 3 Celule cromofobe; 4 Fibre nervoase amielinice; 5 Celule cromofile bazofile migrate din lobul intermediar; 6 Capilar sanguin.

TIROIDA
Tiroida, cea mai voluminoas gland endocrin din organism, este situat n zona gtului, n faa laringelui i a traheei i este format din doi lobi (drept i stng) unii ntre ei printr-un istm. Glanda este delimitat de organele din jur i este nconjurat de o capsul fin, provenind din fascia cervical profund. Din capsul pornesc septe conjunctivo-vasculare, ce compartimenteaz glanda n lobuli neregulai.

123

Parenchimul este compus din foliculi tiroidieni iar stroma este fin i bogat vascularizat. Tiroida, coloraie HE. - cu obiectivul mic: vom urmri structura histologic general a glandei. La exterior se observ capsula conjunctiv, bogat vascularizat i septele care compartimenteaz glanda. n interior numeroi foliculi tiroidieni, n diferite stadii de activitate i de diferite mrimi.

2 4 Imagine histologic Reprezentare schematic

Tiroida 1 Epiteliu folicular; 2 Celul C; 3 Coloid; 4 Capilar.

- cu obiectivul mare: vom studia aspectul foliculilor tiroidieni. Acetia au form rotund sau ovalar, sunt tapetai la periferie de un epiteliu simplu, numit epiteliul folicular iar n centru prezint o cavitate. Cavitatea este delimitat de polul apical al celulelor epiteliului folicular i conine o mas gelatinoas, colorat eozinofil, numit coloid. n jurul foliculilor tiroidieni se gsete o reea bogat de capilare sanguine (fenestrate). Epiteliul folicular conine dou tipuri de celule, aezate pe o membran bazal: - celulele foliculare, cu aspecte diferite n funcie de starea lor funcional: celulele turtite sunt celule n repaus; celulele cubice sunt celule care secret coloidul; celulele nalte, cilindrice sunt celule care reabsorb coloidul i elibereaz hormonii activi n snge. Nucleul are forme diferite, corelat cu forma celulei. Celulele foliculare au rolul de a secreta hormonii tiroidieni: tiroxina (T4) i triiodotironina (T3). - celulele parafoliculare sau celulele C se gsesc izolate sau n mici grupuri printre celulele foliculare, adiacent membranei bazale. Ele nu ajung pn la lumenul foliculului i deci nu vin n contact cu coloidul. Sunt celule relativ mari, cu o citoplasm mai palid, nucleu mare, rotund i palid. Pe seciunile histologice colorate cu HE, ele nu pot fi deosebite de celulele foliculare; pentru identificare se

124

folosesc reacii imunohistochimice cu anticorpi anti-calcitonin i anticromogranin. Celulele C secret calcitonina.

SUPRARENALA
Suprarenalele sunt glande cu localizare retroperitoneal, la nivelul polului superior al rinichilor, incluse n esutul adipos perirenal. Pe seciune histologic, glanda suprarenal respect planul general de organizare al glandelor endocrine: - capsula conjunctiv, subire nvelete la exterior glanda. De pe faa intern pornesc septe fine care se extind n parenchim, aducnd vase sanguine i nervi. - stroma este format dintr-o reea de fibre de reticulin i numeroase capilare sanguine dispuse n jurul celulelor endocrine ale parenchimului; - parenchimul glandei este format din cordoane i cuiburi de celule. Se disting dou zone principale: - zona cortical (corticosuprarenala) dispus la periferie (sub capsul, nconjurnd medulara) i constituie cea mai mare parte a glandei; - zona medular (medulosuprarenala) dispus central, reprezint aproximativ 20% din gland. Glanda suprarenal, coloraie HE. - cu obiectivul mic vom examina arhitectura celor dou zone ale suprarenalei, iar cu obiectivul mare aspectele citologice. Astfel, la exterior observm capsula fin conjunctiv, celule adipoase, vase, nervi i uneori ganglioni vegetativi. Sub capsul, vom identifica cele dou zone ale parenchimului: Corticala, dispus imediat sub capsul, este format din cordoane celulare i capilare. Traiectul capilarelor determin dispoziia cordoanelor celulare. n funcie de aceast dispoziie, deosebim 3 zone: - zona glomerular este o band subire de esut, format din celule dispuse n cuiburi sau cordoane scurte, arcuite (arcade), care imit aspectul unui glomerul. n jurul lor se gsete o cantitate mic de strom i o bogat reea de capilare fenestrate. Celulele sunt cubice sau cilindrice, de talie mic, cu citoplasm bazofil i cu nucleu mic, hipercrom, rotund, central sau excentric, mai aproape de polul vascular. - zona fasciculat este cea mai groas zon a corticalei; este constituit din cordoane celulare lungi, ca nite coloane verticale dispuse perpendicular pe medulosuprarenal, separate ntre ele prin capilare. Celulele sunt mari (cele mai mari din cortical) rotunde sau poligonale, cu citoplasma palid, vacuolar, datorit coninutului mare n grsimi, care se dizolv n timpul prelucrrii esutului. Au unul, rar doi nuclei mari, hipocromi, cu 1-2 nucleoli evideni. Printre cordoanele de celule se observ nucleii alungii, hipercromi ai endoteliului capilar. - zona reticulat este cea mai profund zon a corticalei. Este alctuit din cordoane foarte scurte (1-3 celule), anastomozate, n contact strns cu capilare dilatate. Celulele sunt mult mai mici dect cele din zona fasciculat, intens eozinofile, cu puine lipide. Unele celule au n citoplasm un pigment galben (pigment de lipofuscin).
125

1 2

Imagine histologic

Reprezentare schematic

Suprarenala 1 Capsula; 2 Zona glomerular; 3 Zona fasciculat; 4 Zona reticulat; 5 Medulosuprarenala;

Medulara este zona central, nconjurat complet de cortical; ea este format din dou tipuri de celule: celule cromafine (deoarece reacionez cu srurile de crom) de origine neuroendocrin i celule de susinere (sustentaculare). Celulele cromafine sunt organizate n cuiburi (insule) sau cordoane scurte, anastomozate. Ele au un aspect caracteristic: sunt de talie mare, poligonale, au citoplasm abundent, bazofil, cu aspect granular. Nucleii celulelor prezint variaii importante de talie, form i localizare n celul. Celulele de susinere se gsesc la periferia cuiburilor de celule cromafine i se recunosc prin nucleii alungii hipercromi, de talie mai mare dect cei ai celulelor endoteliale. Dac n coloraia HE aceste celule se recunosc cu dificultate, ele sunt evideniabile prin IHC (anticorpi anti-proteina S-100). n jurul cuiburilor celulare se gsete o strom fin i o delicat reea capilar. n medular se mai observ vase mari, dilatate, cu perete subire (venele medulare).

126

Bibliografie selectiv

Eroschenko V: diFiore's Atlas of Histology with Functional Correlations. Lippincott Williams & Wilkins, 2008 Gartner LP, Hiatt JL: Color Textbook of Histology. Saunders, 2006 Junqueira LC, Carneiro J: Basic Histology, Text and Atlas. Mcgraw Hill, 2007 Ross MH, Pawlina W: Histology. A Text and Atlas. Williams & Wilkins, 2010 Young B, Lowe JS, Stevens A, Heath J: Wheater's Functional Histology. A Text and Colour Atlas. Churchill Livingstone Elsevier, 2007

127

Investete n oameni ! FONDUL SOCIAL EUROPEAN Programul Operaional Sectorial pentru Dezvoltarea Resurselor Umane 2007 2013 Axa prioritar 1 Educaia i formarea profesional n sprijinul creterii economice i dezvoltrii societii bazate pe cunoatere Domeniul major de intervenie 1.2 Calitate n nvmntul superior Proiect: Tehnologii avansate pentru calitate n universitatea orientat spre viitor Cod Contract: POSDRU/86/1.2/S/58609

Material editat de Universitatea de Medicin i Farmacie din Tg Mure la 26.10.2012

Coninutul acestui material nu reprezint n mod obligatoriu poziia oficial a Uniunii Europene sau a Guvernului Romniei

128