LP 4

Dozarea activitii transaminazelor serice: TGO, TGP / 2 ore

Determinarea activitii TGO si TGP
Principiul metodei, interpretarea rezultatelor, valori normale, variaii
patologice.

Transaminazele sunt un grup de enzime care fac parte din clasa transferazelor.

Transaminazele catalizeaz transferul gruprii amino de pe un aminoacid pe un -

cetoacid cu formarea unui alt aminoacid.

Transaminazele cu importan clinic sunt: ALAT (alaninaminotransferaza) sau TGP

(transaminaza glutamat piruvic) i ASAT (Aspartataminotransferaza) sau TGO
(transaminaza glutamat oxalacetic). Ele catalizeaz urmtoarele reacii:

TGP
Alanina + acid alfa-cetoglutaric = acid piruvic + acid glutamic

TGO
Acid aspartic + acid alfa-cetoglutaric = acid oxalacetic + acid glutamic

Valori normale i variaii patologice

Enzima TGP (UI) TGO (UI)

Valori normale 2 16,5; copii 13 2 20; copii 28
Variatii patologice Creteri mari Creteri mari 10-100 ori
hepatit viral acut infarct, hepatit viral,
hepatopatia toxic cu necroz hepatopatii toxice
Creteri moderate Creteri moderate
hepatite cronice, ciroze, icter hepatite cronice, afeciuni
mecanic, ficat de staz acut. distrofice musculare, anemii
hemolitice severe, ictere
colestatice.

Creterea aminotransferazelor in afeciunile hepatice:

- Creterea TGP este mai important dect creterea TGO in hepatitele

infecioase datorit lezrii membranelor celulare;
- Creterea TGO este mai important dect creterea TGP in
hepatopatiile infiltrative datorit lezrii membranelor celulare i
mitocondriale
- In afeciunile musculare creterile TGO sunt mai mari dect TGP
 DETERMINAREA TGO PRIN METODA ENZIMATIC

Principiul metodei

Pentru determinarea TGO se utilizeaz ca substraturi acidul aspartic (L-aspartat) i

alfa-ceto-glutaratul din care rezult acidul oxalacetic (oxaloacetat). Acesta, in
prezena MDH (malatdehidrogenaza) reacioneaz cu NADH+H+ ducnd la formarea
NAD+ si acid malic (L-malat).

Variaia absorbanei msurat la lungimea de und de 340 nm este direct

proporional cu activitatea enzimei.

Acid aspartic + acid alfa-cetoglutaric = acid oxalacetic + acid glutamic

Oxaloacetat + NADH+H+ = acid malic + NAD+

Proba
Ser nehemolizat (hematiile conin de 10-20 de ori mai multe transaminaze dect
serul.

Tehnica de lucru
Intr-o eprubet se pipeteaz 1ml amestec reactivi R1+R2 (1/1) si 100 l prob.
Se agit i se incubeaz 1 min. la 370 C.

Se citete variaia absorbanei (EP ) la lungimea de und de 340 nm fa de ap

distilat, in cuve de 1 cm, timp de 3 min.

Calcul
Se calculeaz activitatea enzimatic a TGO exprimat prin variaia absorbanei pe
minut A/min:

Cp U/l = A/min x 1750, = 340 nm

Cp U/l = A/min x 1790, = 334 nm

Cp U/l = A/min x 3240, = 365 nm

Valori normale
Aduli: 2 20 UI
Copii: pn la 28 UI

Variaii patologice
Valori crescute (10 100 ori): infarct miocardic, hepatit viral, hepatopatii
toxice
Creteri moderate: hepatite cronice, afeciuni distrofice musculare, anemii
hemolitice severe, ictere colestatice.
DETERMINAREA ACTIVITII TGP

Determinarea TGP prin metoda enzimatic

Principiul metodei

Pentru determinarea TGP se utilizeaz ca substraturi L-alanina si alfa-ceto-glutaratul

din care rezult acidul piruvic.

Acidul piruvic in prezena LDH (lactatdehidrogenaza) va reaciona cu NADH+H+ i se

formeaz NAD+ si L-lactat.

Variaia absorbanei msurat la lungimea de und de 340nm este direct

proporional cu activitatea enzimei.

Alanina + acid alfa-cetoglutaric = acid piruvic + acid glutamic

Piruvat + NADH+H+ = L-lactat + NAD+

Proba
Ser nehemolizat (hematiile conin de 10-20 de ori mai multe transaminaze dect
serul)

Tehnica de lucru
Intr-o eprubet se pipeteaz 1ml amestec reactivi R1+R2 (1/1) si 100 l prob.
Se agit i se incubeaz 1 min la 370 C.

Se citete variaia absorbanei (EP ) la lungimea de und de 340nm fa de ap

distilat, in cuve de 1 cm, timp de 3 min.

Calcul
Se calculeaz activitatea enzimatic a TGO exprimat prin variaia absorbanei pe
minut A/min

Cp U/l = A/min x 1750, = 340 nm

Cp U/l = A/min x 1790, = 334 nm

Cp U/l = A/min x 3240, = 365 nm

Valori normale
Aduli: 2 16,5 UI
Copii pn la 5 ani: 0,2 - 13 UI

Variaii patologice
Valori crescute: hepatit viral acut, hepatopatia toxic cu necroz,
Creteri moderate: hepatite cronice, ciroze, icter mecanic, ficat de staz
acut.