LP 3 AMG si MO

Dozarea activitii transaminazelor serice: TGO, TGP / 2 ore

Determinarea activitii TGO si TGP
Principiul metodei, interpretarea rezultatelor, valori normale, variaii
patologice.
Transaminazele sunt un grup de enzime care fac parte din clasa transferazelor.
Transaminazele catalizeaz transferul gruprii amino de pe un aminoacid pe un cetoacid cu formarea unui alt aminoacid.
Transaminazele cu importan clinic sunt: ALAT (alaninaminotransferaza) sau TGP
i ASAT (Aspartataminotransferaza) sau TGO.
TGP
Alanina + acid alfa-cetoglutaric = acid piruvic + acid glutamic
TGO
Acid aspartic + acid alfa-cetoglutaric = acid oxalacetic + acid glutamic
Valori normale si variatii patologice
Enzima
Valori normale
Variatii patologice

TGP (UI)
2 16,5; copii 13
cresteri mari
hepatita virala acuta
hepatopatia toxica cu necroza
cresteri moderate
hepatite cronice, ciroze, icter
mecanic, ficat de staz acut.

TGO (UI)
2 20; copii 28
cresteri mari 10-100 ori
infarct, hepatit viral,
hepatopatii toxice
cresteri moderate
hepatite cronice, afeciuni
distrofice musculare, anemii
hemolitice
severe,
ictere
colestatice.

Creterea aminotransferazelor in afeciunile hepatice:

-

Creterea TGP este mai important dect creterea TGO in hepatitele

infecioase datorit lezarii membranelor celulare
Creterea TGO este mai important dect creterea TGP in
hepatopatiile infiltrative datorit lezrii membranelor celulare si
mitocondriale
In afeciunile musculare creterile TGO sunt mai mari decat TGP

Determinarea TGO prin metoda enzimatica

Principiul metodei
Pentru determinarea TGO se utilizeaz ca substraturi acidul aspartic (L-aspartat) si
alfa-ceto-glutaratul din care rezult acidul oxalacetic (oxaloacetat). Acesta, in
prezenta MDH (malatdehidrogenaz) reacioneaz cu NADH+H+ ducnd la formarea
NAD+ si acid malic (L-malat).
Variatia absorbanei msurat la lungimea de und de 340nm
proporional cu activitatea enzimei.

este direct

Acid aspartic + acid alfa-cetoglutaric = acid oxalacetic + acid glutamic

Oxaloacetat + NADH+H+ = acid malic + NAD+x
Proba
Ser nehemolizat (hematiile conin de 10-20 de ori mai multe transaminaze dect
serul).
Tehnica de lucru
Intr-o eprubet se pipeteaz 1ml amestec reactivi R1+R2 (1/1) si 100 l prob.
Eprubeta se agit i se incubeaz 1 min. la 37grd. C.
Se citete variaia absorbanei (EP ) la lungimea de und de 340nm fa de ap
distilat, in cuve de 1 cm, timp de 3 min.
Calcul
Se calculeaz activitatea enzimatic a TGO exprimat prin variaia absorbanei pe
minut A/min.
Cp U/l = A/min x 1750, = 340 nm
Cp U/l = A/min x 1790, = 334 nm
Cp U/l = A/min x 3240, = 365 nm

Valori normale
Aduli: 2 20 UI
Copii: pn la 28 UI
Variaii patologice
Valori crescute (10 100 ori): infarct miocardic, hepatit viral, hepatopatii
toxice
Creteri moderate: hepatite cronice, afeciuni distrofice musculare, anemii
hemolitice severe, ictere colestatice.

Determinarea activitii TGP

Determinarea TGP prin metoda enzimatic
Principiul metodei
Pentru determinarea TGP se utilizeaz ca substraturi L-alanina si alfa-ceto-glutaratul
din care rezult acidul piruvic.
Acidul piruvic in prezena LDH (lactatdehidrogenaz) va reaciona cu NADH+H+ si se
formeaz NAD+ i L-lactat.
Variaia absorbanei msurat la lungimea de und de 340nm
proporional cu activitatea enzimei.

este direct

Alanina + acid alfa-cetoglutaric = acid piruvic + acid glutamic

Piruvat + NADH+H+ = L-lactat + NAD+
Proba
Ser nehemolizat (hematiile conin de 10-20 de ori mai multe transaminaze dect
serul)
Tehnica de lucru
Intr-o eprubet se pipeteaz 1ml amestec reactivi R1+R2 (1/1) si 100 l prob.
Se agit i se incubeaz 1 min la 37grd. C.
Se citete variaia absorbanei (EP ) la lungimea de und de 340nm fa de ap
distilat, in cuve de 1 cm, timp de 3 min.
Calcul
Se calculeaz activitatea enzimatic a TGO exprimat prin variaia absorbanei pe
minut A/min
Cp U/l = A/min x 1750, = 340 nm
Cp U/l = A/min x 1790, = 334 nm
Cp U/l = A/min x 3240, = 365 nm

Valori normale
Aduli: 2 16,5 UI
Copii pn la 5 ani: 0,2 - 13 UI
Variaii patologice
Valori crescute: hepatit viral acut, hepatopatia toxic cu necroz
Creteri moderate: hepatite cronice, ciroze, icter mecanic, ficat de staz
acut.