Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Transaminazele sunt enzime din clasa transferazelor mai exact “amino transferaze”, ele
transferand o grupare amino de pe un amino- acid pe un ceto-acid, favorizand formarea unui
nou amino acid necesar unei bune functionari a organismului. Transaminazele au drept
coenzimă vitamina B6 (in forma fosforilata la nivelul carbonului 5, adica piridoxal-5-fosfat sau
PLP). Dupa fosforilarea vitaminei B6 alimentare la nivelul mucoasei jejunului, coenzima va
participa activ in mecanismul de transaminare, prin legarea gruparilor amino ce vor fi
transferate (se formeaza niste compusi speciali numiti baze Schiff).
Se disting doua tipuri de transaminaze : Alanin-aminotransferaza (ALAT, ALT) numită
și GPT (TGP) cu o distribuție predominantă la nivelul ficatului și Aspartat-aminotransferaza
(ASAT, AST) numită și GOT (TGO) cu o distribuție la nivelul muschiului scheletic, dar mai
ales al cordului.
Principiul metodei:
COOH COOH
C=O COOH C NH3 COOH
ALAT
CH2 CH NH2 CH2 C=O
CH2 COOH CH2 CH3
COOH COOH
Acid
2. Deoarece reactia din pasul 1 nu genereaza nici un compus care sa poata fi masurat,
este nevoie si de o a doua reactie care este cuplata cu prima. Piruvatul format mai
sus este transformat în lactat de către NADH+H+ în reacţia catalizata de LDH (lactat
dehidrogenază) conform reacţiei:
LDH
CH3 C COOH CH3 CH COOH
O NADH+H+ NAD OH
1
ce trece în NAD+, prin scăderea absorbţiei în UV. Ea este direct proporţională cu activitatea
ALAT. Se prefera citirea in timp a absorbantei NADH+H+ (metoda cinetica) si nu o singura
citire la final (metoda end-point) deoarece s-a observat ca rezultatele obtinute in cazul
masuratorilor enzimatice sunt mult mai precise daca se folosesc metode cinetice.
Reactivi:
Calcularea rezultatelor:
Se face diferenţa între prima şi ultima citire şi se împarte la numărul de minute citite.
Se notează cu (A/min).
Observaţii: dacă valoarea (A/min) creşte mai mult de 0,08 se recomandă diluarea a
0,1 ml probă cu 0,9 ml ser şi se înmulţeşte rezultatul cu 10.
Intervale de referinţă:
2
DOZAREA ENZIMATICĂ A ACTIVITĂȚII ASPARTAT
AMINOTRANSFERAZEI (ASAT)
Principiul metodei:
COOH COOH
COOH
CH2 CH2 COOH
CH2 ASAT
CH2 CH2 CH2
CH NH2
C=O HC NH3 C=O
COOH
COOH COOH COOH
COOH COOH
C=O MDH HC OH
CH2 CH2
NADH+H+ NAD
COOH COOH
3
Amestec de reactivi 1+2 (µl) 1000
Ser (µl) 100
Se agită bine şi se citesc extincţiile la lungimea de unda de 340 nm. Citirea se face
după un minut și apoi la 3 minute la temperatura de 370 C
Calcularea rezultatelor:
Se face diferenţa între prima şi ultima citire şi se împarte la numărul de minute citite.
Se notează cu (A/min).
Intervale de referinţă:
Interpretarea rezultatelor:
Valori crescute:
4
sau etiologie alcoolica. Monitorizarea în dinamică este extrem de utilă pentru
aprecierea gradului de refacere a permeabilității membranare.
- Afecțiuni cronice: se remarcă în hepatitele cronice cu virus B sau C hepatite
alcoolice sau cauzate de medicamente, valorile pentru transaminaze în aceste
cazuri sunt moderat crescute. Este de remarcat ca hepatitele cronice inactive
(persistente) vor genera valori mult mai mici ale transaminazelor (chiar apropiate
de normal) pe cand hepatitele cronice active (agresive) vor genera valori mari ale
TGP si TGO (uneori apropiate de hepatitele acute).
- In ciroza (afectiune grava hepatica cu un grad ridicat de distrugere a hepatocitelor)
transaminazele vor fi evident crescute. In aceasta situatie, o normalizare a
transaminazelor poate sa arate terminarea rezervei functionale hepatice, indicand
practic ca pacientul se afla intr-un stadiu terminal al bolii.
B. Afecțiuni cardiace: creșterea independentă a lui ASAT fără modificarea activității
ALAT apare în infarctul de miocard (blocarea unei artere coronare cu necroza
tesutului deservit) și în unele afecțiuni ale mușchiului striat (de exemplu in
traumatisme musculare). În cazul infarctului de miocard valorile ating un maxim în
primele 48 de ore de la producerea evenimentului, revenind la normal în 3-5 zile.
Valori scăzute :
5