Sunteți pe pagina 1din 11

Universitatea de Științe Agronomice și Medicină Veterinară

CATALAZE
-Referat-

Coordonator Stiintific:Asistent Student: Burloiu Gabriel Valentin


Universitar Dr. Valentina Simion
6201

Bucuresti

2018

1
Cuprins

Introducere........................................................................................3

Capitolul 1- Prezentare generala.......................................................4

1.1- Istoria descoperirii..................................................................4

1.2- Descriere.................................................................................4

1.3- Functii.....................................................................................5

Capitolul 2- Metode de determinare a activitatii enzimatice.........6

2.1- Metoda colorimetrica.............................................................6

2.2- Metoda Bach-Zubkova..........................................................7

Capitolul 3- Utilizari.........................................................................9

3.1- Imbunatatirea sanatatii.........................................................................9

3.2- Industria alimentara…………………………….………………….…9

Concluzii..........................................................................................10

Bibiografie.......................................................................................11

2
Introducere

Enzimele sunt proteine sau proteide fara de care celulele vii nu pot infaptui reactii
complexe intr-un timp scurt, la temperatura mediului inconjurator. Ele sunt substante care
catalizeaza reactiile biochimice din organism, avand rol esential in biosinteza si degradarea
substantelor din materia vie, intalnindu-se in toate organismele animale, vegetale si in
microorganisme, mai fiind denumite din aceasta cauza biocatalizatori. Fara enzime, procesele
biochimice s-ar desfasura cu viteze foarte mici.

Fiind catalizatori de natura proteica, structura lor chimica de ansamblu reprezinta un


edificiu macromolecular complex determinat de nivelurile de organizare structurala a
proteinelor. Totodata, enzimele poseda proprietatile generale fizice si chimice ale proteinelor.
Enzimele sunt constituite dintr-o parte proteica, numita apoenzima, si una neproteica, numita
coenzima sau grupare prostetica.

Catalaza este o enzima ce descompune apa oxigenata in apa si oxigen. S-a reusit
cristalizarea ei de celulele ficatului, ale rinichilor si de la hematii. Este o proteina conjugate cu
patru molecule de protoperfirina . Masa sa moleculara este de aproximativ 250000. In plus, in
afara actiunii sale asupara apei oxigenate, ea are o activitate peroxidazica (oxideaza corpurile
prin oxigenul eliberat).

Aceasta enzima este de asemenea prezenta in toate celulele aerobe, fiind mai ales
localizate in mitocondrii si peroxizomi. Catalaza descompune𝐻2 𝑂2 actionand fie catalitic, fie
perooxidazic. Se pare ca aceasta enzima poate descompune 5x106 molecule de 𝐻2 𝑂2 pe
minut la temperatura camerei. 1

1 Andrei Gheorghe si colab. Biochimia si Fiziologia legumelor si fructelor Edit.Academiei Romane


2001 Bucuresti pag 123

3
Capitolul 1
-Prezentare generala-

1.1- Istoria descoperirii

Catalazul nu era cunoscut oamenilor de știință până în 1818,în timp ce Louis


Jacques Tenar, un chimist care a descoperit peroxidul de hidrogen în celulele vii, nu a
presupus că distrugerea sa se datorează acțiunii unei substanțe biologice necunoscute
anterior.
În 1900 chimistul german Oscar Lev a introdus pentru prima dată termenul
"catalază" pentru desemnarea unei substanțe misterioase care descompune peroxidul.
Ca rezultat al numeroaselor experimente, Oscar Lev a arătat că această enzimă este
caracteristică aproape tuturor animalelor și organismelor din plante. Într-o celulă vie,
la fel ca multe alte enzime, catalaza este conținută în peroxizomi.
A fost pentru prima dată a fost pentru prima data izolata si obtinuta in stare
cristalizata in 1937, de Summer si Douce din din tesut hepatic bovin.2 În 1938, masa
moleculară a enzimei a fost determinată a fi de 250 kDa. În 1981, oamenii de știință au
primit o imagine a unei structuri tridimensionale a catalazei bovine.

1.2- Descriere

CATALAZA - Peroxid de hidrogen: peroxid de hidrogen oxidoreductaza


(EC 1.11.1.6)

Sursa de obtinere: celulele ficatului, ale rinichilor si de la hematii, toate celule aerobe
Localizare : peroxizomi
Functie: protectia celulelor de efectele toxice ale peroxidului de hidrogen prin
catalizarea reactiei de descompunere a acestuia in oxigen molecular si apa, prevenind
formarea radicalilor liberi
Structura cuaternara: tetramer alcatuit din 4 holosubunitati
Masa moleculara: 220.000 – 350.000 kD
Grupare prostetica: 1 molecula hem / subunitate
Ph optim: 6,8-7,5
Cofactor: Fe si suplimentar NADH/NADP3 in cazul unor specii

2
Dana Iordachescu, I.F. Dumitru- Biochimie practica, Tipografia Universitatii din Bucuresti, pg. 133
3
NADH furnizează energie pentru reacțiile catabolice și NADPH furnizează energie pentru reacții anabolice

4
1.3 Functii

Catalaza prezinta o functie dubla deoarece catalizeaza reactiile:

1. 2𝐻2 𝑂2 2𝐻2 O + 𝑂2


-descompunerea peroxidului de hifrogen, de fapt un proces redox in care o
molecula este agent oxidant, iar cealalta este agent reducator.

2. ROOH + D𝐻2  ROH + D + 𝐻2 O


-oxidarea unor donori de hidrogen ( metanol, etanol, acid formic, fenoli )
Reactia predominanta depinde de concentratia donorului de hidrogen sau de viteza
cu care sistemul enzymatic este alimentat cu 𝐻2 𝑂2. Initial se formeaza complexul I:
catalaza · 𝐻2 𝑂2 dupa care prin reactia rapida cu a doua molecula de 𝐻2 𝑂2 – se
formeaza complexul II .4

4
Dana Iordachescu, I.F. Dumitru- Biochimie practica, Tipografia Universitatii din Bucuresti, pg. 134

5
Capitolul 2
-Metode de determinare a activitatii enzimatice-

2.1- Metoda colorimetrica de dozarea activitatii catalazei

Principiul metodei: bicromatul de potasiu in mediu acid este redus de peroxidul de


hidrogen la acetat cromic, care poate fi colorimetrat la 570 nm.

2H2O2 2H2O +O2

+K2Cr2O7(mediu acid) acetat cromic

Reactivi si solutii:
1. Reactiv bicromat-acid acetic glacial
2. Tampon fosfat de potasiu 0,01 M pH 7
3. Solutie H2O2 0,08 M (solutie stoc pentru construirea curbei etalon)

6
2.2- Determinarea activităţii catalazei sangvine - Metoda Bach-Zubkova

Principiul metodei :
Are la bază dozarea excesului de apă oxigenată rămasa nedescompusă, după
întreruperea acţiunii catalazei, prin titrare cu o soluţie de permanganat de potasiu în mediu
acid:

5 H2O2 + 2 KMnO4 + 4 H2SO4 = 2 MnSO4 + 2 KHSO4 + 8 H2O + 5 O2

Determinarea activităţii catalazice se face prin diferenţa între cantitatea de


KMnO4 utilizată înainte şi după acţiunea enzimei asupra apei oxigenate.

Reactivi
1. Soluţie H2O2 1% proaspăt preparată din perhidrol;
2. Soluţie acid sulfuric 10%;
3. Soluţie permanganat de potasiu 0,1 N.

Mod de lucru
Pentru determinarea activităţii catalazice se foloseşte sânge diluat 1/1000. În două
baloane Erlenmeyer se măsoară câte 1 ml sânge diluat şi 7 ml apă distilată. Unul din baloane,
care constituie proba martor se fierbe 3-5 minute pentru inactivarea catalazei, apoi se răceşte.
În ambele probe se adaugă 2 ml H2O2 soluţie 1% agitându-se bine. Ambele probe se introduc
pentru 30 minute într-o baie de apă la 17 0C, timp în care se observă degajarea bulelor de
oxigen în proba cu enzimă datorită descompunerii apei oxigenate de către catalază, pe când în
proba martor, în care catalaza a fost inactivată prin fierbere, această degajare nu se observă.
Se adaugă în fiecare probă 5 ml soluţie H2SO4 10% în scopul blocării reacţiei de
descompunere a apei oxigenate de către catalază. Probele se titrează apoi cu o soluţie de
permanganat de potasiu 0,1 N până la apariţia culorii roz pal persistentă 30 secunde.

Calcul
Activitatea catalazică este dată de indicele catalazic, care reprezintă numărul de
miligrame H2O2 descompusă de 0,1 ml sânge în decurs de 30 minute.

Pentru calcul se utilizează următoarele notaţii:

n1 = ml soluţie KMnO4 0,1 N folosiţi la titrarea probei martor;

n2 = ml soluţie KMnO4 0,1 N folosiţi la titrarea apei oxigenate rămasă nedescompusă din
proba cu enzimă.

7
Calculul se face având în vedere că 1 ml soluţie KMnO4 0,1 N este echivalent cu 1 ml soluţie
H2O2 0,1 N. În acest caz diferenţa n1 – n2 reprezintă numărul de ml H2O2 0,1 N descompuşi de
către catalaza sangvină.

Deoarece 1 ml soluţie H2O2 0,1 N corespunde la 1,7 mg H2O2, activitatea catalazei


exprimată în mg H2O2 descompuse în 30 minute va fi egală cu :

1,7 ∙ (n1 – n2).

8
Capitolul 3
-Importanta-

3.1- Imbunatatirea sanatatii :

1. Antioxidant puternic
Catalazele sunt probabil cele mai eficiente enzime găsite în celulele corpului uman.
Studiile arată că, atunci când apar infecții, organismul produce mai mult peroxid de
hidrogen pentru a ajuta la combaterea agenților patogeni și vindeca rănile.5 Odată ce
peroxidul de hidrogen nu mai este necesar, cataliza îl rupe în compuși sigure.

2. Posibile efecte anti-îmbătrânire și anti-degenerare


Catalaza este in prezent studiata pentru aplicatiile sale privind extinderea duratei de viata
si a vitalitatii. Cercetătorii de la Universitatea din Washington din Seattle și Universitatea
din California-Irvine au efectuat un studiu de laborator pe șobolani, mărind catalazele
naturale din corpul lor. Prin suplimentarea cu catalază crescută, durata de viață a acestor
șobolani de laborator a crescut cu aproape 20%, echivalentul a aproape 25 de ani.6

3. Reducerea grăsimii
Cercetările foarte interesante din China arată o legătură între catalază și cantități reduse de
grăsime la șobolanii de laborator.7 Studiul a aratat ca, atunci cand sobolani pe o dieta
bogata in grasimi, catalaza a contribuit la normalizarea functiei cardiace. Dieta bogată în
grăsimi a determinat autofagia, care este moartea celulară, dar catalaza a ameliorat
efectele.

3.2- Industria alimentara

Catalaza are multe utilizări importante si în industria alimentară. De exemplu,


ambalajele alimentelor sunt adesea acoperite în interior cu catalază. Aceasta menține
alimentele din interiorul ambalajului în stare de oxidare. De asemenea, în industria
brânzeturilor, laptele utilizat este adesea îmbogățit cu catalază, care elimină peroxidul de
hidrogen l care ar putea fi dăunător(toxic) pentru noi.
În plus, catalaza este uneori utilizată alături de glucozoxidaza, o enzimă care
elimină oxigenul și glucoza din produsul pe care îl acționează. De exemplu, cataliza și
glucozoxidaza sunt utilizate împreună pentru a scăpa de oxigenul suplimentar prezent în
băuturile conservate sau îmbuteliate.
5
Niethammer P, et al. "A tissue-scale gradient of hydrogen peroxide mediates rapid wound detection
in zebrafish." Nature. 2009
6
Sinitsyna O, et al. "Age-associated changes in oxidative damage and the activity of antioxidant
enzymes in rats with inherited overgeneration of free radicals." J Cell Mol Med. 2006
7
Liang L. "Antioxidant catalase rescues against high fat diet-induced cardiac dysfunction via an IKKβ-
AMPK-dependent regulation of autophagy." Biochim Biophys Acta. 2015

9
Concluzii

In functie de sursa de provenienta, catalaza este regasita în: ficat de bovine si


microorganism, iar in funtie de domiul de utilizare, catalazele pot fii folosite pentru :
produse alimentare și băuturi, industria textilă, farmaceutice, îngrijire personală, etc.

Datorită proprietăților sale antioxidante puternice, incontestabile, dovedite științific,


catalaza este foarte benefică pentru organe și procese corporale. Pe lângă faptul că
acționează ca un antioxidant super, catalaza are, de asemenea, capacitatea de a folosi
peroxidul de hidrogen pentru a oxida toxine, inclusiv metanol, etanol, acid formic,
formaldehidă și nitrit. Acest tip de activitate dublă îl transformă într-o enzimă celulară
crucială.

10
Bibliografie

 Andrei Gheorghe si colab. Biochimia si Fiziologia legumelor si fructelor Edit.Academiei


Romane 2001 Bucuresti
 Dana Iordachescu, I.F. Dumitru- Biochimie practica, Tipografia Universitatii din Bucuresti
 https://www.globalhealingcenter.com/natural-health/catalase/
 https://prezi.com/exicggyo6vkr/enzymes-in-the-food-industry/
 https://www.scribd.com/document/364776912/Catalaza-docx
 https://www.linkedin.com/pulse/catalase-market-latest-innovations-drivers-industry-key-
hussain-shah
 https://ro.garynevillegasm.com/obrazovanie/74730-ferment-katalaza-osnovnye-
osobennosti.html
 https://www.tocilar.ro/agronomie/catalaza-57123
 https://docgo.net/philosophy-of-money.html?utm_source=determinarea-activitaii-catalazei-
sangvine
 https://www.sciencedirect.com/topics/agricultural-and-biological-sciences/catalase
 https://biology.stackexchange.com/questions/801/nadh-vs-nadph-where-is-each-one-used-
and-why-that-instead-of-the-other
 http://blossomofanewlife.blogspot.com/2012/05/enzimele-ce-sunt-ele-si-cu-ce-se.html
 http://www.doctor.info.ro/sisteme_antioxidante.html
 https://en.wikipedia.org/wiki/Hydrogen_peroxide
 https://viataverdeviu.ro/23-de-uimitoare-beneficii-si-utilizari-pentru-peroxidul-de-
hidrogenapa-oxigenata
 http://eng.ege.edu.tr/~otles/Enzymes/enzymesused/ensymes/food_industry__with_catalase_
and.htm
 Niethammer P, et al. "A tissue-scale gradient of hydrogen peroxide mediates rapid wound detection
in zebrafish." Nature. 2009
 Sinitsyna O, et al. "Age-associated changes in oxidative damage and the activity of antioxidant
enzymes in rats with inherited overgeneration of free radicals." J Cell Mol Med. 2006
 Liang L. "Antioxidant catalase rescues against high fat diet-induced cardiac dysfunction via an
IKKβ-AMPK-dependent regulation of autophagy." Biochim Biophys Acta. 2015

11