Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
CATALAZE
-Referat-
Bucuresti
2018
1
Cuprins
Introducere........................................................................................3
1.2- Descriere.................................................................................4
1.3- Functii.....................................................................................5
Capitolul 3- Utilizari.........................................................................9
Concluzii..........................................................................................10
Bibiografie.......................................................................................11
2
Introducere
Enzimele sunt proteine sau proteide fara de care celulele vii nu pot infaptui reactii
complexe intr-un timp scurt, la temperatura mediului inconjurator. Ele sunt substante care
catalizeaza reactiile biochimice din organism, avand rol esential in biosinteza si degradarea
substantelor din materia vie, intalnindu-se in toate organismele animale, vegetale si in
microorganisme, mai fiind denumite din aceasta cauza biocatalizatori. Fara enzime, procesele
biochimice s-ar desfasura cu viteze foarte mici.
Catalaza este o enzima ce descompune apa oxigenata in apa si oxigen. S-a reusit
cristalizarea ei de celulele ficatului, ale rinichilor si de la hematii. Este o proteina conjugate cu
patru molecule de protoperfirina . Masa sa moleculara este de aproximativ 250000. In plus, in
afara actiunii sale asupara apei oxigenate, ea are o activitate peroxidazica (oxideaza corpurile
prin oxigenul eliberat).
Aceasta enzima este de asemenea prezenta in toate celulele aerobe, fiind mai ales
localizate in mitocondrii si peroxizomi. Catalaza descompune𝐻2 𝑂2 actionand fie catalitic, fie
perooxidazic. Se pare ca aceasta enzima poate descompune 5x106 molecule de 𝐻2 𝑂2 pe
minut la temperatura camerei. 1
3
Capitolul 1
-Prezentare generala-
1.2- Descriere
Sursa de obtinere: celulele ficatului, ale rinichilor si de la hematii, toate celule aerobe
Localizare : peroxizomi
Functie: protectia celulelor de efectele toxice ale peroxidului de hidrogen prin
catalizarea reactiei de descompunere a acestuia in oxigen molecular si apa, prevenind
formarea radicalilor liberi
Structura cuaternara: tetramer alcatuit din 4 holosubunitati
Masa moleculara: 220.000 – 350.000 kD
Grupare prostetica: 1 molecula hem / subunitate
Ph optim: 6,8-7,5
Cofactor: Fe si suplimentar NADH/NADP3 in cazul unor specii
2
Dana Iordachescu, I.F. Dumitru- Biochimie practica, Tipografia Universitatii din Bucuresti, pg. 133
3
NADH furnizează energie pentru reacțiile catabolice și NADPH furnizează energie pentru reacții anabolice
4
1.3 Functii
4
Dana Iordachescu, I.F. Dumitru- Biochimie practica, Tipografia Universitatii din Bucuresti, pg. 134
5
Capitolul 2
-Metode de determinare a activitatii enzimatice-
Reactivi si solutii:
1. Reactiv bicromat-acid acetic glacial
2. Tampon fosfat de potasiu 0,01 M pH 7
3. Solutie H2O2 0,08 M (solutie stoc pentru construirea curbei etalon)
6
2.2- Determinarea activităţii catalazei sangvine - Metoda Bach-Zubkova
Principiul metodei :
Are la bază dozarea excesului de apă oxigenată rămasa nedescompusă, după
întreruperea acţiunii catalazei, prin titrare cu o soluţie de permanganat de potasiu în mediu
acid:
Reactivi
1. Soluţie H2O2 1% proaspăt preparată din perhidrol;
2. Soluţie acid sulfuric 10%;
3. Soluţie permanganat de potasiu 0,1 N.
Mod de lucru
Pentru determinarea activităţii catalazice se foloseşte sânge diluat 1/1000. În două
baloane Erlenmeyer se măsoară câte 1 ml sânge diluat şi 7 ml apă distilată. Unul din baloane,
care constituie proba martor se fierbe 3-5 minute pentru inactivarea catalazei, apoi se răceşte.
În ambele probe se adaugă 2 ml H2O2 soluţie 1% agitându-se bine. Ambele probe se introduc
pentru 30 minute într-o baie de apă la 17 0C, timp în care se observă degajarea bulelor de
oxigen în proba cu enzimă datorită descompunerii apei oxigenate de către catalază, pe când în
proba martor, în care catalaza a fost inactivată prin fierbere, această degajare nu se observă.
Se adaugă în fiecare probă 5 ml soluţie H2SO4 10% în scopul blocării reacţiei de
descompunere a apei oxigenate de către catalază. Probele se titrează apoi cu o soluţie de
permanganat de potasiu 0,1 N până la apariţia culorii roz pal persistentă 30 secunde.
Calcul
Activitatea catalazică este dată de indicele catalazic, care reprezintă numărul de
miligrame H2O2 descompusă de 0,1 ml sânge în decurs de 30 minute.
n2 = ml soluţie KMnO4 0,1 N folosiţi la titrarea apei oxigenate rămasă nedescompusă din
proba cu enzimă.
7
Calculul se face având în vedere că 1 ml soluţie KMnO4 0,1 N este echivalent cu 1 ml soluţie
H2O2 0,1 N. În acest caz diferenţa n1 – n2 reprezintă numărul de ml H2O2 0,1 N descompuşi de
către catalaza sangvină.
8
Capitolul 3
-Importanta-
1. Antioxidant puternic
Catalazele sunt probabil cele mai eficiente enzime găsite în celulele corpului uman.
Studiile arată că, atunci când apar infecții, organismul produce mai mult peroxid de
hidrogen pentru a ajuta la combaterea agenților patogeni și vindeca rănile.5 Odată ce
peroxidul de hidrogen nu mai este necesar, cataliza îl rupe în compuși sigure.
3. Reducerea grăsimii
Cercetările foarte interesante din China arată o legătură între catalază și cantități reduse de
grăsime la șobolanii de laborator.7 Studiul a aratat ca, atunci cand sobolani pe o dieta
bogata in grasimi, catalaza a contribuit la normalizarea functiei cardiace. Dieta bogată în
grăsimi a determinat autofagia, care este moartea celulară, dar catalaza a ameliorat
efectele.
9
Concluzii
10
Bibliografie
11