Compuşşi azotaţ

Compu azotaţi în sânge

• Clasificare
• Analiză
 Compuşşi azotaţ
Compu azotaţi în sânge

Neproteici Proteici

• Uree (BUN-blood urea • Albumine

nitrogen) • Globuline
• Acid uric • Fibrinogen
• Creatină, creatinină
Hemoglobină
Bilirubină
Urobilinogeni
 Compuşi azotaţi neproteici
(analizaţi pentru monitorizarea funcţiei renale)

Compus Concentraţia aproximativă în plasmă

(% din total N neproteic)
Uree 45
Aminoacizi 20
Acid uric 20
Creatinină 5
Creatină 1-2
Amoniac 0.2
 Ureea
Generare: catabolismul proteinelor şi aminoacizilor în ficat

Proteine Aminoacizi Amoniac Uree

Proteoliză Transaminare Sinteză

enzimatică şi dezaminare enzimatică
oxidativă
 Uree-
Uree -Semnifica
Semnificaţie
ţie clinică

Interval de referinţă:

6-20 mg/dL (2.1-7.1 mmol/L)

Valorile cresc cu vârsta

Peste 60 ani:
8-23 mg/dL (2.9-8.2 mmol/L)

Valori mai ridicate la bărbaţi.

 Uree - Metode de analiză
• Metoda chimică: reacţia cu diacetilmonoximă

diacetilmonoxima + uree ser

,m. acid
→ diazina ( galben)
• Metoda enzimatică

Hidroliza ureei: Uree + 2 H 2O + H + Ureaza

→ 2 NH 4+ + HCO3−

Detecţie
Conversia ureei neionizate în NH4+ şi HCO3- ; creşte conductivitatea
conductometrică
(metodă rapidă)
Reacţia Nessler NH 4+ + 2 HgI 2 + 4 KI 
→ NH 2 Hg 2 I 3 + H 3O + + 4 KI + NaI

Reacţia Berthlot 2C 6 H 5 − OH + OCl − + NH 4+ 

→ indofenol + H 2O

R. enzimatică NH 4+ + 2 − oxoglutarat + NADH + H + glutamatde

  hidrogenaz
a → glutamat + H 2O + NAD +

Tema !
Acidul uric

C5H4N4O3
2,6,8 Trioxipurina

Proprietăţi:

cristale albe
densitate 1.87
solubilitate în apă: slabă
 Acid uric
Generare :
• La om şi primate superioare: produs final de oxidare în
catabolismul purinelor

• La multe mamifere, uricaza oxidează în continuare acidul uric

la alantoină

• Principalul compus azotat în excrementele păsărilor şi

reptilelor
 Acid uric - semnifica
semnificaţie
ţie clinică

Intervale de referinţă (metoda enzimatică):

Femei: 2.6-6.0 mg/dL (0.155-0.357 mmol/L)
Bărbaţi: 3.5-7.2 mg/dL (0.209-0.428 mmol/L)
Valorile cresc cu vârsta (10% pe an)

Guta depunerea uratului de sodiu (cristale) în urma

Guta:
precipitării în fluidul suprasaturat.
Purine
Purina – heterociclu aromatic care constă
dintr-un inel pirimidinic şi unul imidazolic.

Termenul general de purine se refera si la

compuşii substituiţi precum şi la formele
tautomere.

Purina este heterociclul cu azot cel mai

răspândit din natură.
 Acid uric – Metode de analiza

• R. cu acid fosfowolframic (H3PW12O40)

• Metoda enzimatică (uricaza)

• Metode cromatografice HPLC

 Metoda enzimatică cu uricaza

acid uric + O 2 uricaza

→ alantoina + CO 2 + H 2O 2

Reactia cromogena:

H 2O 2 + fenol + 4 aminoantip irin POD

→ chinona rosie
Creatină
Creatin ă, creatinin
creatininăă
Creatina
Acid metilguanidinoacetic C4H9N3O2
- Compus azotat organic prezent în organismul
vertebratelor; ajuta la alimentarea cu energie a
celulelor musculare
- Identificata în muşchii scheletici de către Chevreul
în 1832 şi numită astfel după grecescul Kreas
(carne)

Creatinină
– rezultă la descompunerea creatinfosfatului în
muşchi, cu viteză relativ constantă, funcţie de
masa musculară (valori mai mari la bărbaţi decât
la femei).
- Cel mai fix constituent azotat al sângelui, puţin
influenţat de alimentaţie
- Investigată alaturi de BUN (blood urea
nitrogen).
Michel Eugène Chevreul (1786-
1889)

• Chimist francez, cunoscut mai ales

pentru studiul acizilor graşi şi
aplicaţiilor acestora în artă şi ştiinţă.

• I se atribuie descoperirea acidului

margaric (1813), cu rol important în
obţinerea margarinei şi crearea
primului tip de săpun, realizat din
grăsimi animale.

• Chevreul studiază culorile şi

formulează Legea contrastului
culorilor.
 Creatinina-
Creatinina -semnifica
semnificaţie
ţie clinică

Intervale de referinţă (metoda Jaffe):

Creatinina in sange:
Femei: 0.6-1.1 mg/dL (53-97 mmol/L)
Bărbaţi: 0.9-1.3 mg/dL (80-115 mmol/L)

Excreţia de creatinină este mai mare la bărbaţi decât la

femei

Excreţia de creatinină scade cu vârsta

 Creatinina - analiza
• Reacţia Jaffee (considerată m. de referinţă)
−
creatinina + picrat OH
→ complex rosu

• Enzimatic (tinde să înlocuiască m. Jaffe)

creatinina + H 2O creatinina
  za
→ creatina
creatina + H 2O creatinaza
→ sarcozina + uree

sarcozina + O 2 + H 2 O sarcozinox
 idaza → formaldehi da + glicina + H 2 O 2

peroxidaza
indicator ( forma redusa ) + H 2 O2  → indicator ( forma oxidata ) + 2 H 2 O

• HPLC (cu fază inversă sau cu schimb de cationi) – foarte specifică;

propusă ca metodă de referinţă

Sarcozina- acid N-Me aminoacetic; Glicina: acid aminoacetic

Hemoglobina, bilirubina
Hemoglobina- metaloproteina transportoare
de oxigen, aflată în celulele roşii din sângele
vertebratelor

Structura hemoglobinei (premiu Nobel 1962):

subunităţile proteice: roşu şi albastru;
hemul cu Fe: verde

Structura tridimensională a hemului

Fe++ - sfera gri centrală;

N albastru
O roşu
C bleu
H alb
 Hemoglobina - analiza

Reacţia Drabkin:

Hb (Fe 2+)+ K3Fe(CN)6 + KCN

cianmethemoglobina
 Bilirubina
– produs al catabolismului hemului
Reducerea sa duce la formarea
urobilinogenului, excretat prin urina.

Bilirubina constă dintr-un lanţ deschis de 4

inele pirolice, rezultate din oxidarea hemului.

Bilirubina – neconjugată - insolubilă- (indirectă) BU

- conjugată - solubilă- legată de acidul glucuronic- (directa) BC

Acid β-D glucuronic Acid α-D glucuronic