Curs 6

Compui azotai n snge

Compui azotai neproteici n investigarea
funciei renale.
Determinarea ureei, acidului uric, creatinei,
creatininei.

Compui azotai n snge

Neproteici

Proteici

Uree (BUN-blood urea

Albumine

nitrogen)

Globuline

Acid uric

Fibrinogen

Creatin, creatinin
Hemoglobin
Bilirubin
Urobilinogeni

Compui azotai neproteici

(analizai pentru monitorizarea funciei renale)

Compus

Concentraia aproximativ n plasm

(% din total N neproteic)

Uree

45

Aminoacizi

20

Acid uric

20

Creatinin

Creatin

1-2

Amoniac

0.2
3

Ureea
Generare: catabolismul proteinelor i acizilor nucleici n ficat

Proteine

Aminoacizi

Proteoliz
enzimatic

NH4NCO

NH3 + HN=C=O

Amoniac

Transaminare
i dezaminare
oxidativ

Uree

Sintez
enzimatic

(H2N)2CO

Whler, 1828, sinteza in vitro a ureei

Uree-Semnificaie clinic
Interval de referin:
6-20 mg/dL (2.1-7.1 mmol/L)
Valorile cresc cu vrsta
Peste 60 ani:
8-23 mg/dL (2.9-8.2 mmol/L)
Valori mai ridicate la brbai
5

Uree - Metode de analiz

Metoda chimic: reacia cu diacetilmonoxim

. acid
diacetilmonoxima + uree ser
,m
diazina ( galben)

cccc

Uree - Metode de analiz

Metoda enzimatic

Hidroliza ureei:

Detecie
conductometric

Uree + 2 H 2O + H + Ureaza
2 NH 4+ + HCO3

Conversia ureei neionizate n NH4+ i HCO3- ; crete conductivitatea

(metod rapid)

Reacia Nessler

NH 4+ + 2 HgI 2 + 4 KI
NH 2 Hg 2 I 3 + H 3O + + 4 KI + NaI

Reacia Berthlot

2C 6 H 5 OH + OCl + NH 4+
indofenol + H 2O

R. enzimatic

Tem:

reacia oxo glutarat-glutamat

Acidul uric

C5H4N4O3
2,6,8 Trioxipurina

Proprieti:
cristale albe
densitate 1.87
solubilitate n ap: slab
9

Acid uric
Generare :

La om i primate superioare: produs final de oxidare n

catabolismul purinelor

La multe mamifere, uricaza oxideaz n continuare acidul uric

la alantoin

Principalul compus azotat n excrementele psrilor i

reptilelor

10

Acid uric - semnificaie clinic

Intervale de referin (metoda enzimatic):
Femei: 2.6-6.0 mg/dL (0.155-0.357 mmol/L)
Brbai: 3.5-7.2 mg/dL (0.209-0.428 mmol/L)
Valorile cresc cu vrsta (10% pe an)

Relativ insolubil la pH plasmei

Conc. > 6.8 mg/dl plasm saturat cristale de urat

Guta:
Guta depunerea uratului de sodiu (cristale) n urma
precipitrii n fluidul suprasaturat.
11

Purine
Purina heterociclu aromatic care const
dintr-un inel pirimidinic i unul imidazolic.
Termenul general de purine se refer i la
compuii substituii precum i la formele
tautomere.
Purina este heterociclul cu azot cel mai
rspndit din natur.

12

Acid uric Metode de analiza

R. cu acid fosfowolframic (H3PW12O40)
Metoda enzimatic (uricaza)
Metode cromatografice HPLC

13

Metoda enzimatic cu uricaza

acid uric + O 2 uricaza
alantoina + CO 2 + H 2O 2
Acidul uric absoarbe la 293 nm , alantoina nu !
Msurare cinetic: rata de descretere a absorbanei este proporional cu
conc. Acid uric

Reactia cromogena:

H 2O 2 + fenol + 4 aminoantipirin POD

chinona rosie
14

Creatin, creatinin
Creatina
Acid metilguanidinoacetic C4H9N3O2
- Compus azotat organic prezent n organismul
vertebratelor; ajuta la alimentarea cu energie a
celulelor musculare
- Identificata n muchii scheletici de ctre Chevreul
n 1832 i numit astfel dup grecescul Kreas
(carne)

Creatinin
rezult la descompunerea creatinfosfatului n
muchi, cu vitez relativ constant, funcie de
masa muscular (valori mai mari la brbai dect
la femei).
- Cel mai fix constituent azotat al sngelui, puin
influenat de alimentaie
- Investigat alaturi de BUN (blood urea
nitrogen).
15

Michel Eugne Chevreul (17861889)

Chimist francez, cunoscut mai ales
pentru studiul acizilor grai i
aplicaiilor acestora n art i tiin.
I se atribuie descoperirea acidului
margaric (1813), cu rol important n
obinerea margarinei i crearea
primului tip de spun, realizat din
grsimi animale.
Chevreul studiaz culorile i
formuleaz Legea contrastului
culorilor.
16

Creatinina-semnificaie clinic
Intervale de referin (metoda Jaffe):
Creatinina n snge:

Femei: 0.6-1.1 mg/dL (53-97 mmol/L)

Brbai: 0.9-1.3 mg/dL (80-115 mmol/L)
Excreia de creatinin este mai mare la brbai dect la femei
Excreia de creatinin scade cu vrsta

17

Creatinina
1 to 2% din creatina muscular este convertit zilnic
n mod spontan n creatinin i eliberat cu vitez
constant n fluidele biologice
Creatina endogen produs este proporional cu
masa muscular producia de creatinin depinde
de vrst i sex
Fluctuaiile cauzate de diet determin doar variaii
minore ale creatininei ale aceleiai persoane
18

Creatinina - analiza
Reacia Jaffee (considerat m. de referin)
OH

creatinina + picrat
complex rosu

Enzimatic (tinde s nlocuiasc r. Jaffe)

za
creatinina + H 2O creatinina

creatina

creatina + H 2O creatinaza
sarcozina + uree
sarcozinox idaza
sarcozina + O 2 + H 2 O
formaldehi da + glicina + H 2 O 2

peroxidaza
indicator ( forma redusa ) + H 2 O2

indicator ( forma oxidata ) + 2 H 2 O

HPLC (cu faz invers sau cu schimb de cationi) foarte specific;

propus ca metod de referin

Sarcozina- acid N-Me aminoacetic; Glicina: acid aminoacetic

19

Care sunt principalii compui azotai neproteici din snge

determinai pentru investigarea funciei renale?

Artai pe scurt cum este generat ureea n organism.

Prezentai o metod de determinare a ureei din snge.

Prezentai o metod de determinare a acidului uric din snge.

Prezentai metoda Jaffee pentru determinarea creatininei din

snge

20