DIFERENŢELE DINTRE PARODONTITA AGRESIVĂ TRATATĂ CU SUCCES

ŞI CEA PERSISTENTĂ LA NIVELUL MICROBIOMULUI PARODONTAL

DIFFERENCES IN THE PERIODONTAL MICROBIOME OF SUCCESSFULLY TREATED

AND PERSISTENT AGGRESSIVE PERIODONTITIS
&

PARODONTITA AGRESIVA

SI ABORDAREA EI MULTIDISCIPLINARA

STUDENT: ANTONIȚĂ ȘTEFAN

AN III, MD RO, SERIA B, GRUPA 12
INTRODUCERE
Boala parodontală este o boală microbiană endogenă care afectează structura dentară și
parodonțiul . Boala derivă din răspunsul celular și umoral al gazdei, modificând homeostazia
țesuturilor parodontale și provocând inflamație și distrugere prin intermediul enzimelor
bacteriene și al factorilor de virulență.
Parodontita agresivă (PA) este o boală complexă care promovează alterarea microbiană
și disfuncția celulară la pacienții sănătoși din punct de vedere sistemic. Începe la orice vârstă și
predomină la adolescenți și adulții tineri. Se caracterizează prin pierderea rapidă a aderenței și
distrugerea osoasă, inconsecventă cu cantitatea de depozite microbiene prezente pe suprafețele
dentare în formă locală sau generalizată .
Parodontita agresivă localizată (LAP) debutează la vârsta peripuberală, cu distrugere
parodontală interproximală în molar primar și în nu mai mult de doi dinți suplimentari afectați.
Prezența calcifiărilor dentare pe suprafețele dentare nu este frecventă; modelele de inflamație a
țesuturilor și pierderi osoase sunt verticale și în formă de „U” . Parodontita agresivă generalizată
(GAP) afectează mai mult de trei dinți în plus față de molarii primari și incisivii și prezintă
pierderea inserției interproximale la persoanele cu vârsta <30 de ani și distrugerea episodică a
osului alveolar .
Etiologie
Aceasta este o boală complexă care posedă patru factori de risc: microbiota
subgingivală; variații genetice individuale; stilul de viață și factori sistemici.
Microbiota subgingivală
AP este asociat cu Aggregatibacter actinomicetemcomitans, Porphyromonas gingivalis
și funcție anormală a neutrofilelor. Ambele bacterii, datorită acțiunii factorilor lor de virulență,
acționează asupra gazdei, activând mecanismul acesteia de proliferare și distrugere, dăunând
celulelor de apărare și resorbției osoase, creând burse parodontale, pierderea inserției, mobilității
și pierderea organelor dentare .
Probele au fost prelucrate pentru extragerea ADN-ului , iar pentru secvențierea analizei
s-a folosit platforma Illumina (MiSeq Desktop Sequencer; Kit reactivi v2; Illumina Inc., San
Diego, CA, SUA). Amestecurile de PCR au fost preparate așa cum s-a descris. Produsele din
PCR au fost apoi cuantificate, purificate și combinate în raporturi echimolare, pentru a crea o
bibliotecă de ADN pentru secvenţierea ARNr 16S s. Fragmentele genei 16S rARN au fost
secvențiate de NGS (MiSeq Desktop Sequencer; Reagent Kit v2; Illumina Inc., San Diego, CA,
SUA). ADN-ul a fost extras , apoi au urmat reacții PCR individuale pentru fiecare probă pentru a
amplifica regiunea hiper-variabilă V5-V7 cu cod de bare pentru primerii 785F
 Obiective: Scopul principal al acestei investigații a fost analizarea microbiomului
parodontal la pacienții cu parodontită agresivă ce urmează tratament.
Metode: Șaizeci și șase de pacienți cu parodontită agresivă s-au prezentat la aproximativ
7 ani după finalizarea tratamentului parodontal și le-au fost recoltate probe de placă subgingivală
ce au urmat a fi procesate pentru analize de secvențiere a genei ARNr 16S.
Rezultate: Din 66 de participanți, 52 au prezentat boală parodontală persistentă, în timp
ce 13 participanți au fost considerați „ tratați cu succes” (la sondajul parodontal nu au fost
depistate
adâncimi> 4 mm) , iar un pacient a fost complet edentat. Genuri asociate cu boala parodontală
persistentă sunt: Actinomyces, Alloprevotella, Capnocytophaga, Filifactor, Fretibacterium,
Fusobacterium, Leptotrichia, Mogibacterium, Saccharibacteria [G-1], Selenomonas și
Treponema. Pacienții „tratați cu succes” au avut proporții mai mari de Haemophilus, Rothia,
Lautropia, Corynebacterium, Streptococcus , dar și de genurile Peptidiphaga.
În general, pacienții cu parodontită agresivă persistentă generalizată au prezentat o diversitate
alfa mai mare comparativ cu parodontita agresivă persistentă localizată. Analizele de diversitate
beta au relevat doar diferențe semnificative între grupurile de parodontită agresivă stabilă și
persistentă (p = .004).
Concluzie: Pacienții cu parodontită agresivă persistentă au prezentat o disbioză a
biofilmului subgingival faţă de cei care au fost tratați cu succes. Rămâne de stabilit dacă astfel de
diferențe predispun la activitatea bolii sau sunt rezultatul unei disbioze asociate cu reapariția
bolii în prezența terapiei parodontale de susținere sau sunt implicaţi si alți factori legați de
pacient.

POPULAŢIA DE PACIENŢI

Proiectul studiului și populația au fost descrise anterior (Dopico, Nibali, & Donos, 2016).
Pe scurt, pacienții văzuți într-o clinică dedicată parodontitei agresive au fost contactați și
solicitați să participe la studiu. Optzeci și doi de pacienți au fost selectaţi din totalul de 330 cu
parodontită agresivă și doar 66 au fost de acord să participe, exprimându-şi consimțământul
informat și finalizând vizita de studiu la Eastman Dental Hospital din Londra.

Studiul a fost realizat în conformitate cu principiile prezentate în Declarația de la

Helsinki (2008) privind experimentarea care implică participanți umani. Aprobarea etică pentru
desfășurarea studiului a fost acordată de Comitetul NRES Londra - Queen Square.
 Criteriile de incluziune au fost (a) diagnosticul anterior de parodontită și (b) vârsta între
16 și 65 ani la momentul recrutării. Criteriile de excludere erau: (a) cunoscute boli infecțioase
precum tuberculoza, HIV sau hepatita C, (b) comorbiditate , fiind periculos pentru pacient să
călătorească sau să se supună evaluării parodontale și (c) sarcina.Urmând diagnosticul iniţial,
pacienții au primit terapie parodontală activă constând în instrucțiuni de igienă orală, tratament
non-chirurgical, antibiotice adjuvante și / sau tratament chirurgical conform clinicii.

La vizita de studiu, participantii au fost intervievaţi cu privire la istoricul medical şi la

consumul de tutun.

Au fost măsurate înălțimea şi greutatea participanților și calculat indicele de masă

corporală. Pacienții au fost clasificați în ordine: „greutate normală” dacă IMC-ul lor a fost <25
kg / m2, „supraponderal” dacă IMC-ul lor a fost de 25-29 kg / m2 și „obezi” dacă IMC-ul lor a
fost ≥30 kg / m2.

Datele clinice au fost colectate din cele 6 puncte per dinte, incluzând indicele gingival,
mobilitatea dinților, pierderea dinților, implicarea furcației, adâncimea sondajului parodontal,
recesiunea gingivală și sângerarea gingivală.

PRELEVAREA PROBELOR SUBGINGIVALE

Pentru fiecare pacient, au fost prelevate probe din fiecare cadran , de pe suprafețele disto-
bucale ale tuturor primilor molari. În cazul absenței oricăruia dintre acești dinți, s-au ales dinții
vecini. Porțiunea supragingivală a suprafeței rădăcinii a fost curățată cu atenție cu ajutorul unei
chiurete. Cu zona izolată de salivă (spray cu aer delicat sau rulouri de bumbac), o chiuretă sterilă
a fost introdusă în partea de jos a pungii. După o singură intervenţie, fiecare probă
microbiologică a fost extrasă și apoi plasată imediat în 1 ml de fluid de transport și stocat la -80 °
C pentru secvențierea viitoarei analize a genei ARNr 16S.

DIAGNOSTIC CLINIC
Parametrii clinici parodontali sunt următorii: Probing Depth (Pd); Nivelul de inserție
clinică (LCI) și sângerare la sondare (BOP). Pd este spațiul care poate măsura între 1 și 3 mm în
absența inflamației clinice; o pungă parodontală este definită ca adâncimea patologică a
adâncimii șanțului parodontal, rezultată prin pierderea osoasă și inserția parodontală. Pentru
efecte clinice practice, un buzunar parodontal reprezintă unul dintre semnele cardinale ale
parodontozei, având în vedere că este produs prin pierderea inserției, putând fi considerat ca
atare de la 4mm. Centrul Național de Informatică (NIC) face referire la fibrele țesutului
conjunctiv gingival care sunt introduse în cimentul radicular/rădăcină prin fibrele Sharpey. În
domeniul clinic, NIC este utilizat pentru a se referi la magnitudinea pierderii suportului, dar
depinde de lungimea radiculară particulară a fiecărui dinte.
BOP este principalul predictor al bolii parodontale și este indusă de penetrarea sondei
parodontale. Ar trebui interpretat într-o manieră globală, deoarece prezența sa nu este un indiciu
absolut al bolii, în timp ce absența sa este într-adevăr un indicator de încredere al sănătății
parodontale.

La vizita de studiu, ar putea fi atribuite următoarele diagnostice:

 parodintita agresivă persistentă: în caz de PPD (adâncimea pungii parodontale)
interproximal și CAL (nivelul de ataşament clinic) ≥5 mm pe cel puțin doi dinți
permanenți. Subdivizat fie în parodontită agresivă localizată (cel puțin un prim molar sau
incisiv afectat și nu mai mult de trei dinți, în afară de primii molari sau de incisivi), sau
parodontita agresivă generalizată (care afectează cel puțin trei dinți permanenți, alții decât
primii molari și de incisivi).
 parodontita agresivă tratată cu succes: fără dinți cu PPD ≥5 mm.
REZULTATE
Caracteristicile demografice ale celor 66 de pacienți incluși în studiu au fost raportate
anterior. 49 de pacienți au fost diagnosticați cu parodontită agresivă generalizată,iar 17
pacienti cu parodintită agresivă localizată la prima examinare. Pe baza clasificării actuale, 42
de pacienți au fost diagnosticați cu stadiul III generalizat- gradul C, 7 pacienți cu stadiul IV-
gradul C și 17 tipar molar-incisiv stadiul III-gradul C la prima examinare. La vizita de studiu,
doi pacienți au declarat că suferă de diabet zaharat, cinci pacienţi boli cardiovasculare și doi
au raportat artrită reumatoidă - toate acestea erau diagnostice noi aparute în perioada de
urmărire. Majoritatea pacienților (58%) au fost Caucazieni. La vizita de studiu, un total de 8
participanți (12%) erau fumători actuali. O mare parte din participanți a fost supraponderală
(n = 20, 31%) sau obeză (n = 18, 28%). Douăzeci și patru la sută dintre pacienți au suferit
ceea ce am defini ca întreținere „optimă” în timpul urmăririi studiului. Jumătate dintre
pacienți (n = 33) au pierdut cel puțin un dinte în timpul perioadei de urmărire. Treisprezece
participanți (20%) au fost diagnosticați ca „tratați cu succes”, 52 (79%) au fost diagnosticați
ca având parodontita agresivă persistentă, în timp ce unul a fost edentat. Media tuturor
adâncimilor sondajului parodontal a fost de 4,06 mm (SD ± 0,86 mm) și media în cea mai
adâncă pungă eșantionată per pacient a fost de 5,26 mm (SD ± 1,75 mm).