1.

Kit detectie si diferentiere prin tehnica de real time PCR a patogenilor

implicati in Septicemie

 Kitul sa fie capabil sa detecteze: E. coli, Klebsiella pneumoniae, S. aureus,

Staphylococcus epidermidis, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Acinetobacter
baumannii, Stenotrophomonas maltophilia, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans,
Candida glabrata, Candida tropicalis, Aspergillus spp., coagulase-negative
staphylococcus (CoNS), Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Haemophilus
influenzae (type B), Listeria monocytogenes, Salmonella enterica, Streptococcus
pneumoniae
 Detectia sa se realizeze din sange total si hemocultura
 Detectia sa se realizeze pe filtrele FAM (E.coli, K. pneumonie, A. baumannii, C.
albicans, H. influenzae de tip B, Aspergillus spp. ) HEX, TexasRed (control intern) si
Cy5
Kitul trebuie sa contina:
 Apa (control negative)
 7 x PCR mix
 Control intern
 7 x Pozitiv control
 Kitul sa fie compatibil cu sistemele: CFX96 si Montania 4896
 Volumul de eluat folosit pentru amplificare sa nu depaseasca 5ul
 Volumul total de proba pentru amplificare sa nu depaseasca 25uL
 Control intern ce poate fi adaugat in extractie sa nu depaseasca 5uL per proba iar daca
este adaugat in master mix sa nu depaseasca 0.2uL
 Numarul de cicluri de amplificare sa nu depaseasca 35
 Sensibilitatea analitica sa fie de minim 100copii/reactie
 Sa nu existe cross reactivitate cu Chlamydia pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae,
Neisseria meningitidis, Haemophilus influenza, Bordetella pertussis, Legionella
pneumophila, Moraxela catarrhalis, Salmonella enterica, Pneumocystis jirovecii

2. Kit de detectie si diferentiere prin tehnica de real-time PCR a patogenilor

implicati in Gastroenteritis

• Kit-ul sa detecteze: Astrovirus, Rotavirus, Norovirus GI, Norovirus GII, Adenovirus,

Clostridium difficile, Campylobacter spp.), Salmonella spp., Escherichia coli (EIEC) si Shigella
spp., E.coli (VTEC) , Yersinia enterocolitica, Entamoeba histolytica, Cryptosporidium spp.,
Giardia duodenalis din probe biologice inclusive din materii fecale.
• Detectia sa se realizeze utilizand filtrele FAM, HEX , Texas RED si Cy5.
• Kitul trebuie sa contina:
 apa de PCR
  5 Master mix-uri
 RT Mix
 5 controle positive
 control intern.
• Kitul sa fie compatibil cu sistemele: CFX96, QuantStudio 5 si Montania 4896
• Volumul de eluat folosit pentru amplificare sa nu depaseasca 5ul
• Volumul total de proba pentru amplificare sa nu depaseasca 25uL
• Control intern ce poate fi adaugat in extractie sa nu depaseasca 5uL per proba iar daca
este adaugat in master mix sa nu depaseasca 0.2uL
• Numarul de cicluri de amplificare sa nu depaseasca 40 si sa prezinte o etapa de revers
transcriere de minim 15 minute.
• Sensibilitate de maxim 117 copii/reactive pentru Rotavirus, maxim 381 copii/reactie
pentru Astrovirus, minim 13 copii/reactie pentru Adenovirus, minim 10 copii/reactie pentru
Norovirus GI, maxim 13.5 copii/reactie pentru Norovirus GII, maxim 29 copii/reactie pentru
Clostridium difficile, maxim 19 copii/reactie pentru Salmonella spp. si maxim 11 copii/reactie
pentru Campylobacter spp.
• Impachetare flexibila 25/50 teste/kit

3. Kit detectie si diferentiere prin tehnica de real time PCR a patogenilor

implicati in CNS

 Kitul sa fie capabil sa detecteze virusul herpes simplex 1, virusul herpex simplex 2,
virusul Varicella-Zoster, Parvovirus B19, virusul herpes uman 6 (HHV-6), virusul herpes
uman 7 (HHV-7), Enterovirus, Parechovirus, CMV, EBV, Adenovirus din ser, plasma,
tesut sau LCR.
 Detectia sa se realizeze utilizand filtrele FAM (HSV-1, HHV-6, Enterovirus, CMV),
HEX , Texas RED (control intern) si Cy5.
 Kitul trebuie sa contina o cutie in care sa se afle apa de PCR, 3 Master mix-uri, 3 controle
pozitive, control intern si o alta cutie care sa prezinte master mix pentru infectiile virale,
apa de PCR, control intern si control pozitiv.
 Control intern ce poate fi adaugat in extractie sa nu depaseasca 5uL per proba iar daca
este adaugat in master mix sa nu depaseasca 0.2uL
 Volumul maxim de proba ce trebuie adaugat in reactie sa fie 10 ul iar volumul maxim
total sa fie de 25 ul.
 Programul de PCR sa prezinte o etapa initiala de reverstranscrie de minim 30 de minute
iar numarul total de cicluri sa nu depaseasca 50 de cicluri.
 Sa prezinte o sensibilitate de maxim 11 copii/reactie pentru HSV-1, 7 copii/reactive
pentru HSV-2, 17 copii/reactie pentru EBV, 53 copii/reactie pentru Parvovirus B19 si 9
copii/reactie pentru VZV.
 Sa fie validat pe CFX 96, Montania 4896, LightCycler 480, Stratagene Mx3005P,
Rotorgene 6000.
 Sa prezinte impachetare variabila 25/50/100 reactii/kit

4. Kit detectie si diferentiere prin tehnica de real time PCR a patogenilor

Bacterieni implicati in Meningita

 Kit-ul sa capabil sa identifice si sa diferentieze: Haemophilus influenzae, Neisseria

meningitidis and Streptococcus pneumoniae, Escherichia coli K1 si Cryptococcus
gattii/Cryptococcus neoformans din ser, plasma, tesut/biopsie si LCR.
 Detectia sa se realizeze pe filtrele de FAM (Haemophilus influenzae (omp6), Escherichia
coli K1 (neuc)), HEX, Texas Red si Cy5 (control intern).
 Kit-ul trebuie sa contina: 2 master mix-uri, 2 controle pozitive, control intern si apa de
PCR
 Volumul de eluat luat in lucru sa nu depaseasca 10uL
 Volumul total de proba pentru amplificare sa nu depaseasca 25uL
 Control intern ce poate fi adaugat in extractie sa nu depaseasca 5uL per proba iar daca
este adaugat in master mix sa nu depaseasca 0.2uL
 Numarul de cicluri de amplificare sa nu depasesca 50.
 Sa prezinte sensibilitate de maxim 27 copii/reactie pentru Haemophilus influenza, maxim
13 copii/reactie pentru Neisseria meningitidis si maxim 23 copii/reactie Streptococcus
pneumoniae.
 Sa nu prezinte cross reactivitate cu M. pneumoniae, U. urealyticum, N. gonorrhea, M.
genitalium, M. hominis, T. vaginalis, K. pneumoniae, S. aureus, S. enteridis, Aspergillus
fumigatus, Candida albicans, E. coli, L. monocytogenes
 Sa fie validat pe CFX 96, Montania 4896, LightCycler 480, Quant Studio 5, Rotorgene Q
 Sa prezinte impachetare variabila 25/50/100 reactii/kit

5. Kit de detectie si diferentiere a patogenilor implicati in Infectiile

Respiratorii

 Kitul sa fie capabil sa identifica si sa diferentieze: Influenza A, Influenza B, Influenza C,

Klebsiella pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae, Parainfluenza 1, Parainfluenza 2,
Parainfluenza3 Parainfluenza 4, Enterovirus, Metapneumovirus, RSV A/B, Bocavirus,
rhinovirus, pandemic H1N1 Influenza A, H1N1 sezonier influenza A, Salmonella
enterica, adenovirus, Moraxella catarrhalis, Bordetella pertussis, Haemophilus
influenzae tip B, Parechovirus, Staphylococcus aureus, Pneumocystis jirovecii,
Streptococcus pneumoniae, Legionella pneumophila, Coronavirul 229E, Coronavirus
OC43, Coronavirus NL63 si Coronavirus HKU1.
 Detectia sa se realizeze din probe respiratorii umane.
 Detectia sa se realizeze pe filtrele de FAM, HEX, Texas Red si Cy5
 Kitul sa fie compatibil cu sistemele: Montania 4896, CFX96, ABI7500, Mx3005P,
RotorGene6000
Kitul trebuie sa contina :
 Apa (control negativ)
 11 x master mix
 Control intern
 11 x control pozitiv
 Volumul de eluat luat in lucru sa nu depaseasca 10uL
 Volumul total de proba pentru amplificare sa nu depaseasca 25uL
 Numarul de cicluri de amplificare sa nu depasesca 50 si sa prezinte o etapa de
reverstranscriere de minim 30 de minute.
 Sensibilitatea pentru B. pertussis sa fie de minim 1 copii/reactie; sensibilitatea
pentru RSV A sa fie de minim 14 copii/reactie, RSV B de minim 98 copii/reactie; K.
pneumoniae minim 20 copii/reactie; M pneumonie minim 2 copii/reactie; Parainfluenza 2
minim 18 copii/reactie; influenza B minim 22 copii/reactie.
 Sa prezinte impachetare flexibila 25/50 reactii/kit