METABOLISMUL

BACTERIAN
 Metabolismul bacterian
nelegera creterii i multiplicrii bacteriilor, a
metabolismului bacterian este esenial pentru
nelegerea funionrii bacteriilor, a dinamicii lor i de
asemenea pentru tratamentul infeciilor bacteriene.
La bacterii se ntlnesc sub forme asemntoare sau
identice principalele ci metabolice i cicluri de la
celulele eukariote. Multe din reaciile biochimice
privind metabolismul celular au fost descrise iniial la
bacterii.
Celulele umane prezint variaii mici n ceea ce privete
caracteristicile metabolice sau activitile biochimice.
Bacteriile triesc n condiii foarte variate, i ele
difer considerabil n capacitatea lor de a ocupa nie
ecologice.
 Caracteristicile metabolismului
bacterian
este un metabolism unicelular
este un metabolism necompartimentat (pentru
c lipsesc organitele celulare)
este un metabolism teleonomic n cursul
evoluiei unei specii bacteriene au fost
selectate acele ci metabolice i mecanisme
de reglare care s asigure eficiena maxim a
procesului metabolic.
bacteriile au o mare flexibilitate metabolic,
prin care acestea se adapteaz la condiiile
variate de mediu.
.
 Caracteristicile metabolismului
bacterian
este un metabolism de mare intensitate, care
are drept rezultat multiplicarea rapid a
celulelor bacteriene. Tg mediu=20 min.
n complexitatea metabolic a lumii
bacteriene, se vorbete despre un metabolism
cu restricie genetic, determinat de
cantitatea de informatie asigurat de
cromozomul bacterian (molecula de ADN), n
care se gsesc numeroase gene care codific
mai multe tipuri de molecule de proteine
(aprox. 3000), din care aprox. 2000 sunt
proteine-enzime codificate n ADN-ul
cromozomial.
 Metabolismul bacterian
n funcie de condiiile de mediu, se
remarc o diversitate metabolic legat
de:
temperatur,
oxigen,
pH,
osmolaritate i
substane nutritive.
 a) Temperatura
Temperatura optim este acea
temperatur la care rata de cretere
este maximal.
Temperatura minim de cretere sub
aceast valoare, creterea nu mai are
loc.
Temperatura maxim de cretere
cauzeaz denaturarea termic a
proteinelor i posibil i a membranelor.
 a) Temperatura
1. Bacterii psychrophile sau cryophile (iubitoare de
rece) temperatura optim este sub 20C.
2. Bacterii mesophile ele cresc ntre 20C - 45C,
dar temperatura optim este de 35C - 37C
majoritatea bacteriilor de importan medical.
3. Termophile temperatura optim 45C 60C
4. Stenotermophile cel mai bine cresc la aproximativ
60C.
3 i 4 sunt bacterii care cresc in izvoarele calde sau
alte medii cu temperatur nalt.
4 au structuri teriare ale proteinelor stabile la
temperatur.
 b) Oxigenul
Pe baza necesitilor de oxigen, bacteriile se
pot clasifica n bacterii
aerobe,
anaerobe i
microaerophile.
Multe bacterii sunt aerobe i cresc doar n
prezena oxigenului atmosferic. Deseori
aceste bacterii sunt patogeni ai cilor
respiratorii sau a mucoaselor, ca de ex.
Mycobacterium tuberculosis.
 b) Oxigenul
Unele bacterii sunt anaerobe, ceea ce
nseamnc ele nu folosesc oxigenul, n timp ce
unele sunt strict anaerobe, ceea ce nseamn
c pe acestea oxigenul atmosferic le omoar.
Majoritatea bacteriilor anaerobe triesc n
tractul gastrointestinal i pot cauza abcese
profunde (de ex. Bacteroides spp), iar altele
sunt prezente n mediul nconjurror sub form
de spori i pot cauza boal cnd sunt introduse
intr-un mediu care le asigur anaerobioza
(Clostridium spp).
Ar prea ciudat, dar exist anaerobi n
cavitatea bucal a omului (Bacteroides,
Fusobacterium, streptococi anaerobi n
anurile gingivale).
 b) Oxigenul
Facultativ anaerobe, (de ex. Escherichia
coli) sunt bacterii capabile s creasc
att n condiii aerobe, ct i de
anaerobioz. Multe din aceste bacterii
se gsesc la nivelul tractului digestiv i
pot cauza infecii ale plgilor, leziuni ale
tractului gastrointestinal, infecii
urinare, etc.
 b) Oxigenul
Bacterii microaerophile au nevoie de oxigen,
dar nu pot crete n aerul atmosferic, ele au
nevoie de o presiune mai redus de oxigen (de
ex. Neisseria spp, Campylobacter spp.)
Majoritatea bolilor infecioase sunt cauzate
de bacterii aerobe sau facultativ anaerobe,
dar odat cu mbuntirea tehnicilor
microbiologice de cultivare a bacteriilor,
implicarea anaerobilor i a microaerofililor n
patologia uman a devenit evident. Aceste
bacterii necesit medii de cultur i condiii
de incubare speciale.
 c) pH-ul
pH-ul necesar dezvoltrii majoritii
bacteriilor este situat n zona
neutralitii, pH 7.
Exist bacterii care necesit un pH acid
pentru dezvoltarea optim: lactobacilii
bacilii lactici de la nivelul vaginului.
Vibrio cholerae se dezvolt bine la un
pH de 9,2.
 d) Osmolaritatea
Osmolaritatea - concentraia n sruri
a mediului.
Majoritatea bacteriilor sunt
osmotolerante.
Cu toate c se dezvolt mai bine la o
concentraie fiziologic, exist i
bacterii care se dezvolt la concentraii
mari de NaCl, de ex. Staphylococcus la 9
% NaCl.
 e) Substane nutritive
n general, bacteriile necesit o surs de
carbon i azot, o surs de energie, ap i
diferii ioni pentru dezvoltare.
Cu toate c unele bacterii pot obine energia
direct prin oxidarea ionilor metalici precum
fierul, sau alte bacterii (cum sunt algele verzi)
sunt capabile de fotosintez, bacteriile
patogene (cu importan medical) obin
energia prin metabolizarea glucidelor,
grsimilor i a proteinelor.
 e) Substane nutritive
Principalele tipuri de nutriie la bacterii
sunt:
n raport cu obinerea energiei:
bacterii fototrofe, care folosesc energia
din radiaia luminoas, bacteriile
fotosintetice;
bacterii chimiotrofe: folosesc energia prin
oxidarea chimic a diferitelor substrate
(organice sau anorganice, majoritatea
bacteriilor cu importan medical)
 e) Substane nutritive
n raport cu sursa de carbon, bacteriile se
clasific:
bacterii autotrofe: capabile s se dezvolte pe
medii alctuite numai din substane
anorganice, care utilizeaz de obicei CO2
dizolvat n mediu ca surs de carbon.
bacterii mixotrofe, pot folosi att substane
organice ct i CO2 din substane anorganice
bacterii heterotrofe, folosesc ca surs de
carbon substanele organice, ele sunt
bacteriile cu imporan medical.
bacterii paratrofe, care nu se dezvolta decat
pe celule vii (Ricketsii si Chlamydii)
 e) Substane nutritive
Unele bacterii, precum E. coli, pot crete pe
medii de cultur simple, care conin doar
sruri, clorur de amoniu i glicerol.
Alte bacterii sunt extrem de pretenioase i
au un necesar nutritiv complicat.
Mai mult dect att, Treponema palllidum are
un necesar de cretere att de complex,
nct nc nu s-a reuit obinerea unui mediu
de cultur sintetic, care s-i permit
dezvoltarea.
 e) Substane nutritive
Bacterii cu dezvoltare strict intracelular
(Chlamydiae i Rickettsiae) nu au crescut niciodat
pe medii de cultur sintetice, i ele se cultiv pe
linii celulare eukariote (celule fibroblastice de
oarece sau celule de embrion de gin) sau pe ou
embrionat.
Acest fapt nu nseamn c ele sunt virusuri (ele
sunt de fapt bacterii gram negative), ci le face
extrem de greu de lucrat cu ele. Laboratoarele
clinice nu au posibilitatea cultivrii lor.
 e) Substane nutritive
Importana medical a cunoaterii
proprietilor metabolice ale bacteriilor
sunt n principal legate de cunoaterea
necesitilor nutritive ale bacteriilor
patogene, n vederea izolrii acestora
din produsele patologice ale bolnavului
cu scopul de ale identifica, de a le
cunoate proprietile patogenice i cu
scopul de a determina gradul lor de
sensibilitate la antibiotice
 METABOLISMUL
BIOENERGETIC
La bacterii, ca i la alte organisme vii se
produc procese de anabolism i catabolism.
Procesele de oxidoreducere sunt principalele
mecanisme prin care bacteriile i procur
energia mai ales din substane organice, n
urma cedrii de electroni de ctre un substrat
donator, unuia acceptor, care va fi redus.
Donarea de electroni este nsoit de
eliberare de hidrogen, reacie de
dehidrogenare.
Substanele care accept i doneaz elecronii
sunt legate de membrana celular.
 METABOLISMUL
BIOENERGETIC
n raport cu eliberarea de energie, cu
substratul donator i acceptorul final de
electroni se disting urmtoarele trei
tipuri de respiraie
Respiraie oxibiotic, aerob,
Respiraia anaerob
Fermentaia
 METABOLISMUL
BIOENERGETIC
Respiraie oxibiotic, aerob;
donatorul de electroni este o substan organic,
iar
acceptorul final este oxigenul,
transferul are loc prin lanul respirator, cu
implicarea citocromilor; se produc 38 de molecule
de ATP;
calea metabolic este
calea Embden-Mayerhof (glicoliza),
untul pentozofosfailor i
apoi ciclul acizilor tricarboxilici.
 METABOLISMUL BIOENERGETIC
Respiraia anaerob
este ntlnit la bacterii care folosesc drept donor
de electroni substane organice,
acceptorul final fiind o substan anorganic:
nitrii, nitrai, sulfai, etc., n care intervine de
asemenea lanul respirator, ns cu ali cytocromi;
calea metabolic:
ciclul Embden-Mayerhof i apoi
CAT;
se produc 16-38 (de obicei mai puin de 30) molecule ATP.
 METABOLISMUL
BIOENERGETIC
Fermentaia procese care se
realizeaz folosind cantiti mici de
oxigen, printr-o oxidare parial a
substratului, donatorul i acceptorul
final de electroni este o substan
organic.
n majoritatea cazurilor, fermentaia
are loc n absena oxigenului sau n
prezena, dar fr participarea lui.
 CRETEREA I MULTIPLICAREA
BACTERIILOR
Bacteriile se multiplic prin sciziparitate sau diviziune
binar.
Prin acest proces, bacteria se alungete, i dubleaz
volumul i formeaz un sept, care mparte bacteria n
dou segmente egale.
Cnd septul este complet, iau natere dou celule fiice
identice.
Astfel, bacteriile se multiplic logaritmic: dintr-o
celul mam iau natere dou celule fiice, din cele
dou celule, dau natere la rndul lor la patru, apoi la
opt, i aa mai departe.
Sciziparitatea este un proces asexuat.
Ciclul celular de nmulire al bacteriilor este controlat
prin replicarea moleculei de ADN, cu care ncepe
diviziunea celular i prin care este coordonat
sinteza proteic
Curba de cretere bacterian
Dac o cultur bacterian s-ar dubla o dat la fiecare 20 de
minute (majoritatea bacteriilor) i ar continua s se multiplice
neabtut 48 de ore, o bacterie (de ex. Escherishia coli) ar
produce 2144 celule bacteriene.
E. coli este o bacterie relativ mic cu o mas de aproximativ 1 x
10-12 g.
Astfel, la sfritul celor 48 de ore, ar aprea o colonie
bacterian cu greutatea de 2,2 x 10 31 g., adic de 4000 de ori
greutatea Terrei.
Din fericire, creterea bacterian este autolimitant. Chiar i n
condiii ideale, majoritatea culturilor bacteriene se multiplic
logaritmic doar pentru 3 5 ore.
Ele repede i consum nutrienii eseniali i acumuleaz produi
toxici de metabolism.
Din acest motiv, curba de cretere a bacteriilor care se
multiplic ntr-un mediu lichid are aspectul curbei din figur
Curba de crestere a bacteriilor
 Curba de crestere a bacteriilor

Fazele creterii:
1. Faza de laten (Lag);
2. Faza de multiplicare logaritmic (Log);
3. Faza staionar;
4. Faza de declin (de moarte celular )
 Curba de crestere a bacteriilor
1. Faza de laten (Lag):
Cnd bacteriile sunt transferate ntr-un nou mediu
de cultur, este o perioad iniial cnd bacteriile
trebuie s se acomodeze la noile condiii.
Pot fi modificri de temperatur, nutrieni
disponibili, etc.
n aceast faz, bacteriile nu se multiplic, ele i
programeaz activitatea metabolic pentru aceste
noi condiii ale mediului de cultur respectiv.
 Curba de crestere a bacteriilor
2. Faza de multiplicare logaritmic (Log) sau
exponenial:
Odat multiplicarea nceput, numrul bacteriilor
sporete exponenial.
Timpul de generare (Tg) este timpul necesar
populaiei bacteriene pentru a-i dubla numrul (1
celul 2 celule). Tg: 20 min. pt E coli, 24 ore pt.
My. tuberculosis.
n aceast faz celulele bacteriene sunt foarte
sensibile la condiiile de mediu, deci sunt
susceptibile i la antibiotice.
 Curba de crestere a bacteriilor
3. Faza staionar.
La un moment dat, mediul de cultur va rmne
fr substanele nutritive cheie, i se vor acumula
produi de metabolism toxici.
Cnd aceasta ncepe, timpul de generaie se
prelungete simitor, iar rata de cretere a
bacteriilor se va echilibra cu numrul de bacterii
care mor.
Aceast faz staionar altereaz mult
susceptibilitatea bacteriilor la antibiotice
 Curba de crestere a bacteriilor

4. Faza de declin (de moarte celular).

n aceast faz final, lipsa substanelor
nutritive cumulat cu acumularea de produi
toxici de metabolism, duce la moartea
celulelor.
Metode de numrare a bacteriilor

Numeroase tehnici efectuate n laboratorul

clinic sau n laboratoarele de cercetare
necesit numrarea bacteriilor.
Exist dou metode principale de numrare a
bacteriilor dintr-o cultur n mediu lichid:
numrarea direct n camere de numrare (celule
vii+ celule moarte)
aprecierea numrului de celule vii prin
nsmnarea unui volum cunoscut de mediu lichid
pe mediu de cultur solid, astfel nct s se obin
pe plci Petri colonii izolate, numrabile;