Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
CROMATOGRAFIA
HPLC
Industria
alimentară APLICAȚII HPLC Petrochimie
Toxicologie Biochimie
Protecția mediului
Fotografie a unui aparat HPLC. De la stânga la dreapta: Pompa de gradient, ce
asigură fluxul de solvent, coloana cromatografică, aparat de înregistrare a
absorbanței
STUDIU DE CAZ
Materiale și Metode
Aparatură
Aparatura utilizată a fost Modulul de separare Waters HPLC 2695 de
tip autoinjector și detectorul Waters PDA 2696. Coloana utilizată a fost
Thermo BDS Hypersyl – C18, mm x 4.6 mm, dimensiune particule 5 µm.
Condiții cromatografice
Separarea cromatografică s-a realizat la 25°C pe o coloană cu fază inversă prin
utilizarea unei faze mobile formată din solventul A (tetrahidroxifuran), solventul B
(acetonitril) și solventul C (apa).
Validarea Metodei
Parametrii studiați pentru validarea metodei au fost limita de detecție (LDD), limita de
cuantificare (LDC), liniaritatea, acuratețea, precizia, repetabilitatea, robustețea și
specificitatea. LDC a fost definită drept concentrația minimă care poate fi determinată cu
acuratețe și precizie acceptabile. LDD și LDC au fost realizate cu un răspuns de la semnal la
zgomot.
Studiu de caz nr.2:
Separarea clorofilelor și carotenoidelor din fitoplanctonul marin: o nouă
metodă HPLC folosind o coloană C8 cu fază inversă și faze mobile care conțin
piridină
Materiale și metode
Dezvoltarea metodei a fost realizată folosind Echipament HPLC Waters
Alliance (Sistem l), inclusiv un modul de separare 2690 (amestecare la presiune
joasă) și un detector cu matrice de diode Waters 996 (1,2 nm rezoluție optică)
interfațat cu un detector de fluorescență cu scanare Waters 474 prin intermediul
unui analog Sat/In interfata.
Pentru alte sisteme HPLC, s-au folosit și 2 instrumente suplimentare
(Sistemele 2 și 3). HPLC System 2 a fost un Beckman System Gold, inclusiv un
modul de solvenți programabil model 126 (sistem de amestecare de înaltă
presiune), un detector cu matrice de diode model 168 (rezoluție optică de 2 nm)
și o supapă de injecție Rheodyne 77251 prevăzută cu o buclă de 200 p1.
Sistemul HPLC 3 a fost un sistem modular Waters (volum mare de locuire)
inclusiv un controler Waters 600 S, o pompă Waters 616 (sistem de amestecare la
presiune joasă), un Waters 717 Plus autosampler (200 p1 buclă) și un detector
Waters 996 diodearray (rezoluție optică de 1,2 nm).
Rezultate și discuții
1.0 g de probă măcinată de semințe de soia sunt plasate într-un balon cu
fund rotund de 100 ml,se adaugă 50 ml metanol 70% și se extrage cu
ultrasunet timp de 10 minute. Extractul este filtrat printr-un filtru de
celuloză cu dimensiunea porilor de 0,45 μcm într-un balon cotat de 100
ml, aducând cu metanol 70% până la cotă; Se prepară soluția standard
de izoflavone – genisteină.
În urma determinărilor cromatografice s-a calculat conținutul de
izoflavone în recalcul la genisteină - 0,36%.
BIBLIOGRAFIE
Manuel Zapata, Francisco Rodríguez , José L. Garrido -Separarea clorofilelor
și carotenoidelor din fitoplanctonul marin: o nouă metodă HPLC folosind o
coloană C8 cu fază inversă și faze mobile care conțin piridină, Centro de
Investigacións Mariñas, Consellería de Pesca, Xunta de Galicia, Apdo.13, 36620
Vilanova de Arousa, Spania, 31 martie 2000.
Maria Neagu, Georgiana Soceanu, Ana Caterina Bucur - Validation of a High-
Performance Liquid Chromatography method for the determination of vitamin A,
vitamin D3, vitamin E and benzyl alcohol in a veterinary oily injectable solution ,
Departamentul de Dezvoltare și Cercetare, SC Pasteur Filipesti, Calea Giulesti, nr.
333, sector 6, București, Romania
N METODA HPLC Roman Zinaida, Suvorchina Olga, Mazur Ecaterina
Universitatea de Stat de Medicina si Farmacie „Nicolae Testemiţanu” Conducător
științific: Livia Uncu conf. univ., DETERMINAREA IZOFLAVONELOR ÎN
SEMINȚE DE SOIA PRIN METODA HPLC
Maria Poroch, Note de curs, 2022
https://www.scritub.com/stiinta/chimie/Notiuni-generaleCromatografia32596.php
https://ro.wikipedia.org/wiki/Cromatografie_de_lichide_de_%C3%AEnalt
%C4%83_performan%C8%9B%C4%83
VĂ MULȚUMESC!