MEGAKARYOPOIESIS

Dr. Crisan Ana Manuela

Fundeni Clinical Institute
Hematology and Bone Marrow Transplant Department
MGK

-megakariopoieza reprezinta procesul de formare a trombocitelor;

acest proces are loc la nivelul MOH si are ca finalitate eliberarea T
in sângele periferic
-trombocitele sunt factori importanti in procesele de hemostaza
primara si secundara.
-datorita duratei scurte de viata (5-10 zile) sunt produse 35.000 4300
trombocite /ml zilnic
-trombocitele sunt unice prin compozitie si structura.
-trombocitele nu sunt celule intregi (ex lipsa nucleului).
-spre deosebire de eritrocite (al caror nucleu este eliminat in stadiu de
normoblast ortocromic), trombocitele nu au nucleu de eliminat;
acest lucru se datoreaza faptului ca trombocitele apar prin
fragmentarea citoplasmei celulei-mama adica megacariocit.
MGK

-trombocitele sunt unice datorita faptului ca precursorii sai sunt supusi

procesului de endomitoza (endo-reduplicare) prin care celulele sunt
supuse unor diviziuni succesive (mitoza) in nucleu fara diviziuni
succesive ale citoplasmei. Aceasta diviziune duce la formarea de
multi nuclei in celula.
-in mod normal, toate celulele pot avea doar doi nuclei (ploidie= 2N)
inainte de scindarea celulei ducand la formarea a doua celule
identice.
-megacariocitele se inmultesc la nivelul nucleului fara scindarea celulei
si fara inmultirea citoplasmei.
-citoplasma creste in dimensiuni dar nu se divide; astfel, apar
megakariocite cu numar ploid peste 4N sau 8N.
1. Compartimentul progenitorilor: CSP ⇢ BFU-Mk ⇢CFU-Mk

2. Compartimentul de megacariocite:
-intre celulele progenitoare si megacariocite exista un stadiu
intermediar numit promegacarioblast

Markeri fenotipici specifici liniei:

-BFU-MK: progenitori mieloizi
-CFU-Mk: gp IIb-IIIa
-Promegacarioblast :GP Ib, GP IIb- IIIa, FvW, TSP(trombospondina),
F4T, peroxidaza plachetară (POP)

- începe poliploidizarea (endomitoze)- 4,8,16,32,64 N

Celulele ce pot fi recunoscute morfologic > 8N
Secventele dezvoltarii trombocitului din megacariocit:

1.endoreplicarea nucleara si poliploidizarea:

-oprirea diviziunilor mitotice este urmata de endoreplicarea nucleara
care duce la aparitia celulelor poliploide
-endoreplicarea repetata a ADN-ului nu este asociata cu diviziunea
nucleului care creste in dimensiuni si sufera procesul de lobulatie
-concomitent cu replicarea ADN-ului creste masa citoplasmatica

2. maturarea citoplasmei se traduce morfologic prin aparitia

granitelor viitoarelor trombocite in citoplasma
-cind maturarea este completa, toata citoplasma megacariocitului este
fragmentata si apare trombopoieza.
Reglarea megacariopoiezei

1.Factori stimulatori

-IL3
-FSC-GM
-Mk-CSA (megakaryocit colony stimulating activity)

2. Factori sinergici
-IL1
-FSC-G
-TPO (trombopoietina)
- citokine : IL-6, IL11
-efect sinergic maturativ – eritropoietina

3. Factori inhibitori
-F4T
-IFN
- IL-4
ROLUL TROMBOPOIETINEI IN TROMBOPOIEZA
Distribuţia trombocitelor

- Normal -2/3 în circulaţie

-1/3 sechestrate în splină

Durata de viaţă
-8-12 zile
-utilizate zilnic pentru menţinerea integrităţii endoteliale
-Tr bătrîne – macrofage splenice, hepatice, M.O.
MGK

-in caz de stres (cerere de trombocite suplimentara), poate sa apara un

numar diploid de pana 64 N (celula poate avea 64 N)
-dpdv morfologic, este dificila evaluarea diploidiei prin microscopia
optica (in special cand exista mai mult de 8 nuclei) datorita
suprapunerii nucleilor care sunt conectati intre ei.
Secventa de maturare:
-exista 5 stadii identificabile ale celulei seriei megakariocitare in MOH
1- megacarioblast,
2- promegacariocit,
3- megacariocit granular,
4- megacariocit,
5-trombocit
MGK

1- Megacarioblast

-dimensiunea: 15-50 microni

-nucleu mare, ovalar, nelobat cu cromatina fina si 1-2 nucleoli.
-raport N/C =10/1
-citoplasma se coloreaza albastru difuz, prezinta protruzii (proiectii)
mici si nu contine granule.
MGK

2- Promegacariocitul (Megacariocit bazofil)

-dimensiuni: 20-80 microni si are mai multi nuclei (mai mult de 4N).
- nucleu incizat fără nucleoli
- citoplasma abundentă bazofilă

-din acest stadiu se dezvolta sistemul de demarcatie al membranei

(DMS) care este sistemul prin care citoplasma se divide in blocuri
pentru a pregati sinteza si eliberarea trombocitelor.

-ME: extensii in interiorul citoplasmei

MGK

3- Megacariocitul granular

-dimensiuni: 30-90 microni

-nucleu polilobat
-citoplasma abundentă acidofilă cu numeroase granulaţii azurofile (α)
Confuzie cu – osteoclaşti, osteoblaşti, plasmocite multinucleate, celule
S-R
Citochimie – peroxidaza negativ
- PAS +
- FAc +
- esteraze negativ

-aceste celule nu elibereaza trombocite decit in caz de cerere severa.

MGK
4- Megacariocit matur

-cel mai mare tip de celule observat in MOH cu citoplasma bogata (raport N: C scazut)

-agregatele de trombocite sunt observate din momentul separarii de DMS.

-trombocitele sunt eliberate din megacariocite si apar in sângele periferic.

Ultrastructura
În citoplasma 3 zone - perinucleară – ap. Golgi, reticul endoplasmatic
rugos, neted
- granule α
- corpi denşi
- lizozomi – arilsulfataza, catepsina
- zona intermediară – sistem membrane de demarcare
- zona periferică – filamente actină, miozină
Marcheri megacariocitari
- POP

- Gp Ib

- Proteine citoplasmatice- fvW, trombospondina, Fg

MGK

5- Trombocitele

-sunt cele mai mici fragmente de citoplasma megacariocitara cu

dimensiuni de 1-4 microni.

-contin mitocondrii si granule in citoplasma.

MGK

Compozitia si structura:

-exista 4 componente in structura trombocitului:

 membrana plasmatica
 aria de sub membrana
 citoscheletul (zona Sol-gel )
 organitele
Ultrastructură:
-Zonă periferică – glicocalix care contine gp (IIb/IIIa)cu rol de receptor pentru
Fbg sau atg
- membrana plasmatica care contine receptori pentru ADP, trombina, epinefrina
si serotonina
-Zona submembranară: filamente de actină

-Zona sol-gel (citoscheletul)- microtubului+microfilamente

-Granule – lizozomi

- corpi denşi (10/TR)- ATP,ADP, Ca 2+ ,serotonină

- α – numeroase 100/TR
- proteine adezine
-factori coagulare
-Sistemul de membrane – crează

1.sistem canalicular deschis – creşte suprafaţa de contact

2. sistem tubular închis derivat din reticulul endoplasmatic neted –loc de
depozitare a Ca 2+ şi activitate ciclooxigenază
MGK

Organitele contin lizozomi, perxizomi, mitocondrii, granulele alpha

(α) si corpii densi.

Granulele alpha contin factorii coagularii (factor V, XI, fibrinogen,

VW factor) factori de crestere si molecule de adeziune.

Corpii densi contin ADP, ATP, serotonina si calcium (necesari

procesului de coagulare).
MGK

Functiile trombocitelor
-trombocitele formeaza cheagul plachetar care blocheaza plaga
vasculara, lucru posibil prin agreagarea lor la nivelul plagii,
prevenind singerarea. Acest lucru este posibil prin urmatoarele
etape:

 Adeziune: trombocitele se lipesc la nivelul plagii

 Secretie: eliberarea continutului de factori de coagulare.

 Agregarea: numarul mare de trombocite care se unesc intre ele

formind cheagul care opreste pierderea de singe.