LP 3.

BIOCHIMIE
CLINIC
EXPLORAREA
METABOLISMULUI PROTEIC

Clase de proteine
plasmatice
Plasma

= amestec coloidal
Clase de proteine plasmatice
Albumina
Globuline
Index

de disproteinemie

Raport de concentraie
A/G = 0,8 1,2

Proteinemia

concentraia proteinelor totale din plasm

Metode:
n ser sau plasm:

Metod fotometric: reacia biuretului: n mediu

alcalin legturile peptidice reacioneaz cu ionii de
Cu(II) cu formarea unui compus colorat violet, a
crei ntensitatese determin la 546 nm;

n urin sau LCR:

Metoda Coomassie: utilizarea colorantului
Coomassie Brillant Blue(prag de detecie: 1mg/L
proteine)-macrometoda
pyrogallol red ( prag de detecie: 20mgprotein/L)micrometoda

Material biologic : ser, plasm

(heparinat), urin, LCR, lichide de puncie
r.Rivalta (acid acetic glacial)

Metoda biuretului

Proteinemia
Valorinormale:

ser sau plasm:

60 -80 g/l (adult)
45-75 g/l (nou-nscui i sugari)

urin: < 150 mg/zi

LCR: 150 450 mg/l

Disproteinemia

Modificarea calitativ/cantitativ a
coninutului n proteine a plasmei;
Valori sczute (hipoproteinemie):

insuficien hepatic, sindrom nefrotic, arsuri,

enteropatii, malnutriie / malabsorbie,
insuficien pancreatic;
pseudohipoproteimemie: prin diluie (recoltare
de pe branul)

Valori crescute (hiperproteinemie):

hiperproteinemii absolute:
hiperimunoglobulinemie:cronice, gamopatii
monoclonale;
hiperproteinemii relative: hemoconcentraie,
diabet insipid, diaree.

Albumine

forma globular, dimensiune i greutate

molecular mic (60000-69000Da)
factori stabilizani ai echilibrului coloidal al plasmei
solubilitate bun
Dozare ser:
metode fotometrice (verde de bromcrezol)
procentaj relativ din proteinogram sau cantitate absolut
calculat din valoarea proteinemiei
imunodifuziune radial
nefelometrie imun
alte lichide biologice
decat serul
imunturbidimetrie

Dozare urin i LCR: nefelometrie, turbidimetrie;

Proteinuria Bence-Jones
lanurile

uoare de tip sau kappa

saulambda
apare n
plasmocitoame
macroglobulinemia Waldenstrm.
Metode

de evideniere:

imunofixare (prag de sensibilitate: 20-30

mg/l)
electroforeza urinar (prag de
sensibilitate: aprox. 100 mg/l).

Albumine

Valori normale:
ser: 55-65% din totalul proteinelor plasmatice;
34 -48 g/l.
Urin: sub 20 mg/l;
LCR: 110-350 mg/l; (in functie de locatie: cel
mai concentrat ventriculii cerebrali, lombar,
toracic, cervical)

Valori sczute: insuficien hepatic,

sindrom nefrotic, arsuri, inflamaii acute i
cronice, enteropatii, tumori maligne.
Probe biologice: ser, urin, LCR;

Electroforeza proteinelor

metod analitic de separare a particulelor

sau ansamblurilor de particule ncrcate
electric, sub aciunea unui cmp electric
extern
o particul ncrcat electric se va deplasa cu
o vitez constant determinat de aciunea
urmtoarelor fore:
fora de atracie electroforetic F1:
F1= Q E
fora de frecare Stokes F2:
F2 = 6 r v

Electroforeza proteinelor
viteza

electroforetic v:

v = Q E / 6 r

mobilitatea

electroforetic :
= v / E,
= Q / 6 r
particulele pentru care raportul Q/r
este identic vor avea mobiliti
electroforetice identice

Electroforeza proteinelor
Mediu

de migrare:agaroz,
pH: 8.6 (tampon TRIS barbital),
Colorant: amido black, red Ponceau

Electroforeza proteinelor

Se aplic 5 l de ser pe gelul de agaroz

Se ateapt 10 min. (penetrarea serului n
gel)
Se introduce gelul naparatul de
electroforez
Se aplic tamponul TRIS barbital
Se alege programul de migrare
Dup migrare i uscare se transfer gelul
n unitatea de colorare

Electroforeza proteinelor
Dup

colorare se interpreteaz

Inspecie
Interpretare densitometric

Fraciunile
electroforetice
Fraciunile proteinelor serice:
albumina
1-globuline:

1-lipoprotein (HDL),
1-glicoproteina acid,
1-antitripsin,
1-antichimotripsin,

2-globuline:
haptoglobin,
ceruloplasmin,,
2-macroglobulin,

1 i 2 globuline:

-lipoproteine,
hemopexina,
factorul C3,
transferina,
PCR,
fibrinogen.

fraciunea -globulinelor: - IgM, IgA i IgG.

Proteinograma
Valori

normale(procentual calculate
din densitograme):

albumin: 54,3-65,5%
1-globuline: 1,2-3,3 %
2-globuline: 8,3-15,0 %
-globuline: 9,0-17.7 %
-globuline: 7,1-19,5%

Interpretare
Ciroz

hepatic

Ciroz hepatic cu ascit;

Proteine totale: 71 g/l
Albumin: 32 g/l
Hipoalbuminemie;
1, 2
-globulinele
Fuziune beta-gamma;

Interpretare
Sindrom

nefrotic

Proteinurie 9,5g/24 ore;

Proteine totale: 35 g/l;
Albumin: 18 g/l;
albumine;
Alfa1-globulinemie;
alfa2-globulinemie;
beta-globulinemie;
gama-globulinele

Interpretare
Inflamaie

acut

Biat de 2 ani;
Proteine totale: 57 g/l;
Albumin: 36 g/l;
albuminemie;
alfa1-i alfa2 globulinemie;
gammaglobulinemie

Interpretare
Anemie

feripriv
Proteine totale: 73 g/l;
Albumin: 43 g/l;
beta-globulinemie
(transferina!);

Interpretare
Hipogamaglobulinemie

mieloid acut)
Proteine totale: 61 g/l;
Albumin: 44 g/l;
albuminemie;
alfa1-alfa2 globulinemie;
betaglobulinemie;
gammaglobulinemie;

(leucemie

Interpretare
Hipogamaglobulinemie

(leucemie
limfatic cronic) Proteine totale: 55 g/l;
Albumin: 49 g/l;
albuminemie;
gammaglobulinemie, domina celulele
maligne, care epuizeaza maduva,
celulele sanatoase nu mai ofera titrul
protector;

Interpretare
Mielom

multiplu

Proteine totale: 109 g/l;

Albumin: 36 g/l;
albuminemie;
Gradient M n gamma 1