Metabolismul

este un sistem coordonat de transformri ale substanelor i energiei la care particip sistemele multienzimatice.

FUNCIILE METABOLISMULUI:
aprovizionarea celulelor cu energie chimic (captat din moleculele combustibil);
transformarea substanelor nutritive n precursori ai componentelor celulare macromoleculare i asamblarea
lor n componentele celulare;
biosinteza i catabolismul biomoleculelor specifice organismului.

Celulele organismului uman se refer la:

- heterotrofe (ca sursa de C folosesc glucoza, sintetizat din C02 de ctre autotrofe).
- Chemiotrofe ca surs de E folosesc reaciile de oxido-reducere, i nu lumina solar ca plantele

FAZELE METABOLISMULUI:

Catabolismul
. faza degradrii macromoleculelor (provenite din mediul nconjurtor sau rezervele proprii n timpul rennoirii) n
produi mai simpli.
. este nsoit de degajarea energiei libere, care se acumuleaz sau n mol. de ATP sau n structura NADPH+H+

Anabolismul
. faza de sintez a diverilor compui organici
. necesit utilizarea energiei libere (ATP) sau componeni reductori NADPH+H +
CILE METABOLICE
- reprezint reaciile chimice in lant, cu o anumit funcie.

S ==>A ==> B ==> C ==> P

DEOSEBIM CI METABOLICE:
a) centrale (comune pentru degradarea i sinteza principalelor macromolecule)
b) Specifice (caracteristice doar pentru substane individuale (cofactor).
a) liniare (glicoliza)
b) Ciclice (ciclul Krebs)
a) anabolice
b) catabolice
c) Amfibolice
a) aerobe
b) anaerobe
Deosebirile cilor catabolice de anabolice
considerentul energetic;
succesiunea reaciilor este reglat separat;
difer dup localizarea n celul.
ETAPELE CATABOLISMULUI

I etap:
. decurge n tractul gasto intestinal fr eliminare de E,
. se ncheie cu formarea monomerilor universali (AA, AG, Monozaharide, Glicerol)
II etap:
. toti monomerii se transform ntrun precursor comun Acetil- CoA. are loc generare de E
III etap:
. este ciclul Krebs, si fosforilarea oxidativ .
. are loc generare de E

Proteine

Glucide

Lipide

Metodele de studiu a cilor metabolice

1. pe organismele intacte
- aport-eliminare:se aplic pe:organisme sntoase, stresate,infectate,bolnave.- marcarea cu izotopi a diferitor metabolii.
2. studiul experimental prin perfuzia organelor intacte.
3. studiul seciunilor tisulare.
REGLAREA METABOLISMULUI
Se realizeaz la diferite nivele:
la nivelul proprietilor specifice enzimelor (cantitatea de E i S, prezena coenzimelor, pH, t,);
la nivelul E reglatoare alosterice. Multe E sunt inhibate de produsul final al secvenei la care ele particip.
Majoritatea reaciilor sunt reglate de starea enerzetic a celulei.
Indicii ce caracterizeaz starea energetic a celulei
Ec =
[ATP]+1/2[ADP]
[ATP]+[ADP]+[AMP]

Valoarea oscileaz de la 0 la 1 (numai ATP)

Norma 0,8-0,95
Un alt indice este potenialul de fosforilare
PF=[ATP]/[ADP]*[Pa] =500
- la nivel de inducie i represie enzimatic
- la nivelul sistemului endocrin
- SNC
Bioenergetica

Bioenergetica- tiina ce studiaz transformrile i utilizarea energiei.

n lumea vie sistemul termodinamic poate fi reprezentat de un organism ntreg; un organ; o celul; o reacie
chimic.

Organismele vii pot fi considerate sisteme termodinamice, pentru care sunt valabile legile termodinamicei:

I. Principiul conservrii energia reaciilor chimice nu dispare i nu apare din nimic, dar se transform dintr-o
form n alt (procesul conservrii). Ex.: E chimic se transform n E termic, electric, mecanic.

II Principiul evoluiei toate procesele spontane decurg n direcia ce corespunde entropiei maximale pn la
stabilirea echilibrului reaciei.

Sistemele biologice sunt sisteme deschise (schimb de energie i materie cu mediul nconjurtor)

Fiecare sistem are o energie intern (E), care este constituit din energie liber (G) i energie legat (TS ).

E= G + TS
Noiune de energie liber standard.

Energie liber reprezint acea parte din energia (total) intern a sistemului, capabil s efectuieze un lucru asupra
mediului n condiii constante de T i presiune

( G kcal/mol).
Dac E (energia total a sistemului) E= G + TS

G = E - TS.

TS - energia legat - nu poate fi utilizat pentru efectuarea lucrului (T- t absolut; S variaia entropiei (gradul
de dezordine al sistemului).

Creterea entropiei mpedic revenirea la starea iniial, de aceea reaciile nsoite de creterea entropiei - sunt
ireversibile.

Energia liber standard este partea de energie total a sistemului, convertit n lucru n condiii standard (G0)
T=298K, C% iniiala 1,0 mol, pH = 7, presiunea 760 torii (1 atm).
Referitor la o singur reacie chimic

- variaia energiei libere standard este diferena dintre suma energiilor libere ale produilor i suma energiilor
libere ale reactanilor.

G pozitiv 0 cnd produii conin mai mult energie dect reactanii (substanele iniiale) endergonice
(nu pot efectua un lucru spontan, necesit energie din exterior). AB GB GA

G negativ 0 produii conin mai puin energie dect substanele iniiale exergonice (fr folosirea
energiei) stnga la dreapta pot efectua un lucru.

G = 0 nu evalueaz nici ntr-un sens.

Reaciile catabolice exergonice

Anabolice endergonice

Legtura (conexiunea) ntre ele este ATP.

Ciclul ATP
ATP- transportor universal al energiei
n forma sa activ este un complex cu ionii de Mg sau Mn
Servete ca surs de energie n:
Lucrul mecanic: micare, contracie
Transport: transportul prin membran
n transmiterea informaiei genetice
ATP 2 legturi macroergice, la pH=7 are 4 sarcini negative, care se resping mai puternic comparativ cu ADP
Ciclul ATP
n condiii standard hidroliza ATP are loc pe 2 ci:

Sinteza ATP din ADP i Pi

este posibil pe 2 ci:
1. FO
2. fosforilare la nivel de substrat reaciile n care energia necesar pentru sinteza legturii macroergice fosfat e
furnizat de un substarat supermacroergic.

Legtura macroergic. Substane macroergice

Transportul principal al energiei de la procesele catabolice spre cele anabolice i forma major de stocare a ei n
organism sunt legturile macroergice fosfat i tioesterice din diverse substane
Legtura macroergic care la hidroliza ei se elibereaz mai mult de 5,2kcal/mol (21 kJ/mol)
Compuii supramacroergici G0 (kJ/mol) kcal/mol
fosfoenolpiruvat
61,7
-14,8
1,3 difosfoglicerat
49,2
-11,8
creatinfosfat
42,5
- 10,3
Compuii macroergici
-G0 (kJ/mol)
ATP ADP +H3PO4
30,4
-7,3
ADP AMP + H3PO4
28,4
H4P2O7 2H3PO4
28,4
acetil~CoA
30,4
-7,5
Compuii submacroergici
Glucozo-1 P
-5,0
Fructozo 6 P
- 3,8
Glucozo- 6- P
- 3,3

Decarboxilarea oxidativ a piruvatului

este oxidarea piruvatului pn la Acetil CoA
se desfaoar in cteva etape (5 etape)
este catalizat de un complex enzimatic numit piruvatdehidrogenaz (PDH) reprezentat de 3 enzime i 5 coenzime
localizat n mitocondrii
1. Piruvatdehidrogenaza ( coenzima TPP)
2. Lipoat acetil transferaza sau dihidrolipoil transacetilaza (coenzima acidul lipoic)
3. Lipoamid dehidrogenaza sau dihidrolipoil dehidrogenaza (coenzima FAD), HSCoA i NAD
Complexul piruvat dehidrogenaz conine un miez de Dihidrolipoiltranacetilaz (60 lanluri polipeptidice fiecare cu
Acidul lipoic), la care sunt ataate molecule de Piruvatdehidrogenaz (20 molecule) si Dihidrolipoil dehidrogenaz (S
molecule). Aici se mai ftxeaz 5 molecule de PDH kinaz i cteva molecule de PDH fosfotaz.

Reaciile pariale a decarboxilrii oxidative a Piruvatului

1.Decarboxilarea plruvatului la acetaldehid catalizata de PDH care conine ca coenzim TPP
2. Acetaldehida deja activat reacioneaz cu acidul lipoic oxidat. Ca rezultat primim acetil lipoat i se elibereaz

TPP

3.Formarea de AcetilCoA ca rezultat al interaciunii cu CoenzimaA-SH i eliberarea de acid lipoic redus sub
aciunea E-Dihidrolipoat DH FAD dependent

4. Reducerea FAD-ului cu oxidarea acidului lipoic

5.Reoxidarea FADH2 cu reducerea NAD la NADH+H+

Reglarea Procesului:

Reglarea Procesului:
Inhibiia :- prin retroinhibiie, unde ca inhibitori servesc acetil CoA i NADH+H+
- acizii grai macromoleculari
- prin GTP i ATP
fosforilarea PDH (de ctre kinaza PDH),
Activarea :
AMP i GMP
defosforilarea PDH (de ctre fosfataza PDH)

Fosforilarea se amplific la raportul nalt ATP/ADP; acetil CoA/HSCoA; NADH/NAD;

defosforilarea la concentraii mari de piruvat i Ca
Ciclul Krebs Rolul

Donor de protoni i electroni pentru LR

Integrativ
Amfibolic
Energetic
Ciclul Krebs (ciclul acidului tricarboxilic, citric)

1. Condensarea Acetil CoA cu OA sub influenta E-Citrat sintetazei cu formare de Citrat.

Citrat sintetaza este inhibat de:
- Succinil CoA
- ATP
NADH+H+

2. Trecerea Citratului la Izocitrat sub influena EAconitaz- ce conine Fe i glutation redus.

Enzima exist sub 2 forme izoenzimatice: a. n MC
b. Citoplasm

3. Oxidarea Izocitratului la Alfa-cetoglutarat sub aciunea IzocitratDH, care are ca coenzim NAD, necesit Mg 2+, const
din 8 subuniti (380000D)
- este activat de: ADP- inhibat de: NADH+H + ATP
4. Oxidarea alfa cetoglutaratului la succinil CoA sub actiunea complexului polienzimatic Alfa cetoglutaratDH asemntor
cu complexul Piruvat DH compus din 5 coenzime i 3 enzime. Procesul se desfoar n cinci etape.
5. Diacilarea SuccinilCoA cu formare de Succinat i GTP, ca rezultat al fosforilrii la nivel de substrat
6.Dehidrogenarea Succinatului la Fumarat E- SDH FAD dependent.

este activat: succinat,fosfat ATP

- inhibat: de OA
7. Hidratarea Fumaratului la Malat
8. Oxidarea Malatului la OA sub influenta E- MDH
Reacia sumar
LANTUL RESPIRATOR

Lanul respirator
- ultima etap a degradrii aerobe,

se defineste ca ansamblul sistemelor redox i enzimelor, care particip la transferul echivalenilor reductori
(atomi de hidrogen i electroni) de la coenzimele reduse la oxigen.
Funcia LR

este dubla:
- prin transferul hidrogenului pe oxigen, cu formarea apei, coenzimele se reoxideaz putnd astfel asigura n continuare
dehidrogenrile n cile degradative specifice i n special n ciclul acizilor tricarboxilici
- la aceast reoxidate a coenzimelor se elibereaza energie i aceasta serveste la sinteza de ATP.
Sinteza ATP
se realizeaz prin precesul numit fosforilare oxidativ' care este cuplat cu lantul respirator i care se definete
drept ansamblul compuilor i mecanismelor care asigura formarea ATP din ADP i pe seama energiei eliberate in cursul
transferului echivalenior de reducere de la coenzimele reduse la oxigen

Diferenta de potenial de 1,14 V, (GO=-52,6kcal/mol) corespunztoare reaciei generale a lantului respirator;

transferul n trepte a echivalenilor de reducere este avantajos deoarece in mod corespunztor energia se elibereaz
n ,.pachete" a caror valoare este n jurul lui -7.3 Kcal/mol ct necesita sinteza unui mol de ATP din ADP +Pi

Lanul respirator i fosforilarea oxidativ- se desfoar n mitocondrii

Producere de Energie
Reaciile de Oxido-reducere (numite reacii redox)
sunt acele reactii n care are loc un transfer de electroni de la un donor de electroni (agentul reductor) la un acceptor
deelectroni (agent oxidant). n unele reactii de oxido-reducere transferul unuia sau al mai
multor electroni este fcut prin intermediul transferului de hidrogen:Dehidrogenarea este deci echivalent cu
oxidarea. Agenii de oxidare sau de reducere acioneaz ca perechiconjugate redox format dintr-un donor de electroni
iacceptorul sau de lectroni conjugat.
Donor de electron - electron +acceptor de electron
Agentii reductori tind spre pierderea de protoni

Aceast tendint (de a pierde sau de a ctiga electroni) este dat de potentialul standard de oxido-reducere,
definit ca fora electromotoare n v (volti) dat de o celul n care att reductorul ct i oxidantul se gsesc la o
concentraie de 1 M., la 25 *c, i pH 7,0 n echilibru cu un elecrod care poate accepta reversibil electroni de la
reductor.
Daca luam ca referint potentialul standard de O/R al reactiei la electrodul de H. Potentialul acestei reactii este
considerat 0 la presiunea de 1 atm, concentraia de 1 M, pH 0 T25 grade.Corectnd aceast valoare la pH =7 potentialul
standard de Ox/Red af electrodului de H devine -0,42V. Cu ct este mai negativ potenialul redox al perechii cu att
reductorul are tendint mai mare de a pierde electroni i din contra cu cit potentialul este mai pozitiv reductorul are o
tendint mai mic de a pierde electroni. Fluxul electronilor va fi deci ndreptat de la perechile cu potenialul mai
negativ (S) spre cele cu potenialul mai pozitiv (02).
Organizarea enzimelor de oxido-reducere din lantul respirator
- este mixt; structural - functional i functional - sau evidentiat 4 complexe structural-functionale i doi factori
care asigur legtura dintre complexe cit c i CoQ.
Complexul I- NADH-CoQ-reductaza transfer ionii de H+ i electronii de la NADH la CoQ. Cderea de potenial este de
0,42V sau (GO=-19,,4 kcal/mol, suficient pentru sinteza a 2 molecule de ATP. n procesul fosforilrii oxidative se va
sintetiza doar o molecul de ATP. Cealalt energie se degaj sub forma de caldura.

Complexul const din NAD DH, FPn i heteroproteine FeS1,FeS2, FeS3, FeS4.- Este inhibat de Rotenon (insecticid de
origine vegetal), Amital (barbituric) i Pericidin (antibiotic)
Complexul II - Succinat- CoQ-reductaza transfer echivalenii de reducere de la Succinat la CoQ. Cderea de potenial
este de 0,07V sau ( GO=-3,kcal/mol, insuficient pentru sintez de ATP. Se va degaja sub forma de caldura.Complexul const din Succinat DH, FPs i 3 heteroproteine FeS.
Complexul III - CoQ-Citocrom c reductaza transfer electronii de la CoQ la cit c. Cderea de potential este de0,18V sau
(GO=-7,75 kcal/mol, suficient pentru sintez de ATP.
Complexul const din din mai multe tipuri de citocromi b,bk,bt,c1 i o heteroprotein FeS.- Este inhibat de Antimicina A

Complexul IV - Citocromoxidaza transfer electronii de la cit c la Oxigenul molecular. Cderea de potentialeste de 0,54V
sau (GO=-24,8 kcal/mol, suficient pentru sinteza de ATP.- Complexul const din mai multe tipuri de citocromi ce contin
Fe sau Cu.
- Este inhibat de Cianuri, Oxid de Carbon
Cit de fosforilare (P/O)- raportul ntre numru de moli de ATP produi i oxigenul consumat n lantul respirator. Pentru
ramura lung este - 3/1, pentru ramura scurt 2/1.
Lanul respirator
Fosforilarea oxidativ
Au fost propuse mai multe teorii, care elucideaz mecanismul, prin care energia eliberat n lantul respirator este
folosit la sinteza de ATP

1. Teoria chimic (Slater, 1953) conform creia n calitate de intermediar se formeaz o substant macroergic x,
care pe urm fosforileaz ADP-ul.

2. Conformaeional - (Bozer 1964) - modificarea membranei MC prezint fora motrice pentru sintez de ATP.

3. Teoria Chimio-osmotic (Piter Mitchell.1961 ) este cea mai acceptat. Conform acestei teorii centrele active a
Enzimelor lanului respirator sunt aranjate n aa mod ca de fiecare dat la transferul electronului s se pompeze H + din
matrice. Protonii se aranjeaz pe suprafaa extern a membranei interne formnd o diferent de potential. Fata extern
pozitiv H+ Cea intern negativ OH

Deci se creaz o diferent de potential, ce const din dou componente :

1. electrochimic
2 gradientul H+
Teoria prevedeca protonii din spatiul intermembranar revin n mitocondrie strict prin intermediul ATP sintazei,
care este un conductor pentru protoni (restul membranei find impermiabil pentru protoni), acest flux de protoni find
fora morice care determin sinteza de ATP din ADP i Pi.
Unul din postulatele teoriei chemiosmotice prevede c apa rezultat n reacia de formare a ATP din ADP i Pi se
ionizeaz spontan, ionii H+fiind dirijati spre interiorul mitocondriei (ei urmnd s creeze gradientul protonic) n timp
ce ionii OH- snt dirijati spre spapul intermembranar
:ADP+Pi ---- >ATP+H
+interior +OH-exterior
Structura ATP sintazei -const din dou pri distincte:
Fo- care penetreaz membrana intern a MC- servind ca un canal pentru protonii de H+
F1- partea catalitic a E- constituit din cinci subunitti a,,B, y,b,E, cu masa total de 370kDa
Controlul respiraiei se nfptuiete prin intermediul acceptorului - ADP.
Lipsa de ADP - inhib respiraia i stopeaz fosforilarea. La adugarea de ADP crete brusc consumul de 02, adic
activeaza lantul respirator i ADP se fosforileaz la ATP.

Decuplarea i inhibiia

Fosforilarea oxidativ este influenat de o serie de ageni clasai n 3 grupe :

- agenti de decuplare- permit transportul electronilordar blocheaz fosforilarea. Ex.2,4 dinitrofenolul faciliteaz
trecerea prin membran a H+

- inhibitorii fosforilrii oxidative Ex Oligomicina -mpedic i transportul i fosforilarea oxidativ.

- Ionoforii - formeaz complexe liposolubile cu cationi specifici trecndui prin membran.

Alcohol Metabolism
Eric Niederhoffer
SIU-SOM
Pathway Perturbations
Malate-Aspartate Shuttle
(liver, kidney, heart)
Glycerol-3-Phosphate Shuttle
(skeletal muscle, brain)
Review Questions

How is ethanol detoxified (enzymes, cofactors, products, location)?

Which metabolic pathways are affected by alcohol-derived NADH (enzymes, metabolites)?
How does the cell process NADH?
Ciclul acizilor tricarboxilici (Krebs)