Metabolismul

Bioenergetica
Ciclul Krebs

Noiuni generale de metabolism. Catabolismui i

anabolismul. Cile metabolice centrale, ciclice i
specifice.
Metabolismul intermediar. Metode de studiere.
Noiuni de energie liber standard. Compuii macroergici
- structura chimic i rolul lor. Ciclul ATP-ului.
Caracteristica strii energetice a celulei. Indicii ce
o caracterizeaz. Reglarea metabolismului celular.
Decarboxilarea oxidativ a acidului piruvic - enzimele,
cofactorii, reglarea.
Ciclul Krebs - reaciile pariale. Esena biologic a ciclilui
Krebs, reglarea lui. Noiune de fosforilare la nivel de
substrat. Stoichiometria ciciului Krebs.
Reaciile anaplerotice (reaciile care furnizeaz produse
intermediare al ciclului acizilor
tricarboxilici).

Metabolismul

Metabolismul sistem coordonat de transformri

a substanelor i energiei sub aciunea sistemelor
multienzimatice.
Deosebim: metabolismul extern i intermediar
Metabolismul extern include procesele necesare
pentru: asimilarea substanilor nutritive ,
transportul metaboliilor intermediari ntre
celulele diferitor organe i esuturi i eliminarea
produselor finale din organism.
Metabolismul intermediar totalitatea reaciilor
chimice ce decurg ntr-o singur celul vie (i
asigur viabilitatea, creterea i reproducerea ei).

Funciile metabolismului:
1.

2.

3.
4.

aprovizionarea celulelor cu energie

chimic (ce se formeaz la scindarea
substanelor nutritive);
transformarea substanelor nutritive
n precursori necesari pentru sinteza
macromoleculelor
asamblarea macromoleculelor n
componeni celulari;
biosinteza i degradarea
biomoleculelor cu destinaie special
(h, mediatori, cofactori);

Fazele metabolismului
Evideniem

2 faze:
1. Catabolismul faza de degradare a
macromoleculelor n micromolecule.
este nsoit de eliberarea energiei (care
poate fi acumulat sub form de ATP
sau NADPH+H+
2. Anabolismul faza de sintez a
macromoleculelor din micromolecule,
necesit utilizarea ATP sau NADPH+H+

Etapele catabolismului:
I etap - decurge n TGI (fr eliminare
de E). Macromolecule alimentare se
scindeaz n monomerii si.
II etap monomerii se transform ntrun precursor comun Acetil-CoA (are loc
generare de energie).
III etap amfibolic - ciclul Krebs si
fosforilarea oxidativ (FO) H2O+ CO2
are loc generare de energie

 Proteine

Glucide

Lipide

I
monozaharid
e

AA
gluco
I
I

Ceto-

AG+glicero
l

Piruvat

II
Acetil -CoA

c. Krebs

III

CO2

L.R

H2O

FO
ADP + Pi

ATP

Deosebirile cilor
catabolice de anabolice
considerentul energetic;
succesiunea reaciilor este reglat
separat;
difer dup localizarea n celul.

CILE METABOLICE
- reprezint reaciile chimice in lant, cu o
anumit funcie.
S ==>A ==> B ==> C ==> P
DEOSEBIM CI METABOLICE:
A. a) centrale (comune pentru degradarea i
sinteza principalelor macromolecule)
b) specifice (caracteristice doar pentru
substane individuale (cofactor).
B.
a) liniare (glicoliza)
b) ciclice (ciclul Krebs)
C. a) anabolice
b) catabolice
c) amfibolice
D.
a) aerobe
b) anaerobe

Metode de studiu a cilor

metabolice

Pe organismele intact aport eliminare se

aplic att pe organismele sntoase ct i
pe organismele bolnave (infectate) i
stresate. Se efectuiaz prin marcarea
metaboliilor cu izotopi.
Studiul experimental prin perfuzarea
organelor intacte.
Studiul seciunilor tisulare.
La nivel celular.
La nivelul organitelor celulare.

REGLAREA METABOLISMULUI

Se realizeaz la diferite nivele:

1.

la nivelul proprietilor specifice enzimelor (cantitatea de

E i S, prezena Co, pH, t);
la nivelul E reglatoare alosterice;
Majoritatea reaciilor sunt reglate de starea energetic a
celulei. Indicatorul ei este sarcina energetic

2.
3.

SE =

[ATP]+1/2[ADP]
[ATP]+[ADP]+[AMP]

SE= 0,8-0,95

PF =
[ATP]/[ADP]*[Pa] = 500
Se = 0 ( AMP); Se=1 (ATP). Atkinson cile metabolice,
responsabile de sinteza ATP sunt inhibate de Se nalt; dar
cile de utilizare ale ATP sunt stimulate.
Cile catabolice ca regul sunt inhibate de ATP, NADH2 i
activate de AMP, ADP, NAD+. Pentru cile anabolice aciunea
acestor compui este invers.

4. reglare prin modificarea covalent a

enzimelor (fosforilare-defosforilare),
modulat de hormoni (adrenalina,
glucagon .a)
5. inducia i represia enzimatic modificarea concentraiei E la nivel de
transcripie a genelor corespunztoare sub
aciunea hormonilor steroizi.
6. Reglarea dependent de hormonii care
accelereaz activitatea E (adaptare
imediat) sau de viteza sintezei
enzimelor (adaptare de lung durat)
Exemple: adrenalina i steroizii

7. Influiena medicamentelor de
diferit origine

Bioenergetica.
Bioenergetica-

tiina ce
studiaz transformrile i
utilizarea energiei.
n lumea vie sistemul
termodinamic poate fi
reprezentat de un organism
ntreg; un organ; o celul; o
reacie chimic.

Organismele vii pot fi considerate sisteme

termodinamice, pentru care sunt valabile
legile termodinamicei:
I.

Principiul conservrii energia

reaciilor chimice nu dispare i nu apare

din nimic, dar se transform dintr-o
form n alt.
Ex.: E chimic se transform n E
termic, electric, mecanic.
II Principiul evoluiei toate procesele
asociate cu transfer de energie se
desfoar de la sine numai ntr-o
direcie i numai pn la o anumit limit
- ce corespunde entropiei maximale.

 Sistemele

biologice sunt sisteme

deschise (schimb de energie i
materie cu mediul nconjurtor)
Fiecare sistem are o energie intern
(E), care este constituit din energie
liber (G) i energie dependent de
variaiile TS (energie legat).
E= G + TS
Fora

motrice a reaciilor este tendina

sistemului att de a-i spori gradul de
dezordine, ct i de a-i reduce
coninutul de energie liber ordonat.

Noiune de energie liber

standard.

Energie liber reprezint acea parte din energia

(total) intern a sistemului, capabil s efectuieze
un lucru asupra mediului n condiii constante de T
i presiune G kcal/mol
Dac E= G + TS G = E - TS.
TS - energia legat - nu poate fi utilizat pentru
efectuarea lucrului (T- t absolut; S variaia
entropiei (gradul de dezordine al sistemului).

Creterea entropiei mpedic revenirea la starea

iniial, de aceea reaciile nsoite de creterea
entropiei - sunt ireversibile.
Energia liber standard este partea de energie
total a sistemului, convertit n lucru n condiii
standard (G0) T=298K, C% iniiala 1,0 mol, pH
= 7, presiunea 760 torii (1 atm).

Referitor la o singur reacie chimic variaia energiei libere standard este

diferena dintre suma energiilor libere ale
produilor i suma energiilor libere ale
reactanilor.
G pozitiv 0 cnd produii conin
mai mult energie dect reactanii
(substanele iniiale) endergonice (nu
pot efectua un lucru spontan, necesit
energie din exterior). AB GB GA
G negativ 0 produii conin mai
puin energie dect substanele iniiale
exergonice (fr folosirea energiei)
stnga la dreapta pot efectua un lucru.
G = 0 nu evalueaz nici ntr-un sens.
Reaciile catabolice exergonice
Anabolice endergonice
Legtura (conexiunea) ntre ele este ATP.

Ciclul ATP

1.
2.
3.
4.

ATP- transportor
universal al energiei
n forma sa activ este un
complex cu ionii de Mg
sau Mn
ATP 2 legturi
macroergice(valoare
negativ ridicat a G0),
Servete ca surs de
energie n:
Lucrul mecanic:
micare, contracie
Biosinteza moleculelor
biologice
Transport: transportul
prin membran
n transmiterea
informaiei genetice

Ciclul ATP
n

condiii standard hidroliza ATP are

loc pe 2 ci:
ATP

ADP

H3PO4

7,3
kcal/mol

AM
P

PP

2H3PO4
14,6 kcal/mol

 Sinteza

ATP din ADP i Pi este

posibil pe 2 ci:
1. FO
2. fosforilare la nivel de substrat
reaciile n care energia necesar
pentru sinteza legturii macroergice
fosfat e furnizat de un substarat
supermacroergic.

Particularitile structurale ale

ATP ca donor de energie

la pH=7 are 4 sarcini

negative, care se
resping mai puternic
comparativ cu cele 3
din ADP
Leg macroergice sunt
de tip anhidrid
(unesc 2 resturi acide)
Prezena ionilor de Mg
(afinitatea ADP este
de 6 ori mai mare
hidroliza este spre
formarea ADP+Pi)

Legtura macroergic. Substane

macroergice

Transportul principal al energiei de la

procesele catabolice spre cele
anabolice i forma major de stocare
a ei n organism sunt legturile
macroergice fosfat i tioesterice din
diverse substane
Legtura macroergic care la
hidroliza ei se elibereaz mai mult de
5,2kcal/mol (21 kJ/mol)

Legtura macroergic. Substane

macroergice

Compuii supramacroergici G0 (kJ/mol) kcal/mol

1. fosfoenolpiruvat
-61,9
-14,8
2. 1,3 difosfoglicerat
-49,3
-11,8
3. creatinfosfat
-43,1
-10,3
Compuii macroergici
-G0 (kJ/mol)
1. ATP ADP +H3PO4
-30,4
-7,3 (7,6)
2. ADP AMP + H3PO4
-28,4
3. H4P2O7 2Pi+H+
-28,4
- 6,9 (-7,38)
4. acil~CoA
-31,4
-7,5
Compuii submacroergici
Glucozo-1 P
-5,0
Fructozo 6 P
- 3,8
Glucozo- 6- P
- 3,3

Decarboxilarea oxidativ a
piruvatului
DOP la eucariote e localizat n mitocondrii; la procariote citozol.

Are loc sub aciunea complexului multienzimatic PDH, alctuit

din:
1. E1 PDH Co1-TPP
2. E2 dehidrolipoiltransacetilaz
S
Co 2- AL
S
3. E3 dehidrolipoilDH
HSCoA a.pantotenic
Co3 FAD
NAD+
K kinaza specific
F fosfotaza specific, dependent de Ca2+ i Mg2+
X proteina ligand (n E3)
Caracteristica: la E.Coli compus din 48 de lanuri polipeptidice.
Nucleul l ocup E2; iar E1 i E3 se leag n exterior de nucleu.
Lanurile sunt legate prin fore necovalente.

1.
Atacul nucleofil - hidroxietiltiaminoPP,
2. gruparea hidroxiettilic se oxideaz cu gr disulfidictrece n sulfhidrilic se formeaz acetillipoamid

CH3-CO-COOH +E1-TPP

E1- TPP-CHCH3

+ CO2

OH

S
E1-TPP-CH-CH3 + E2 AL
OH

SH
E1-TPP + E2-AL

S-C-CH3

pyruvate
dehydrogenase
complex

SH
E2-AL

+ HS-CoA
C-CH3

SH
E2-AL

CH3COSCoA

SH

O
SH
E2-AL
SH

S
+

E3-FAD

E2-AL

+ E3-FADH2
S
O

E3-FADH2 +NAD

+
E3-FAD+ NADH+H

Reacia
sumar:Complexul PDH:
S

E1-TPP, E2-AL S
E3-FAD HS-CoA, NAD

CH3-CO-COOH

CH3-CO - S CoA + CO2 +NADH+

Ciclul Krebs

LR =3
ATP

Pyruvate Dehydrogenase
O
H3C

HSCoA

O
C

pyruvate

NAD

O
H3C

NADH

CoA

acetyl-CoA

+ CO2

Reglarea complexului PDH

Inhibat prin retroinhibiie: AcetilCoAE2;
NADH E3
Efectul e reversibil la aciunea NAD i HSCoA
Inhibiia alosteric este amplificat de AG
macromoleculari
Reglare nucleotidic, prin sarcina energetic:
inhibat de GTP i activat de AMP
Reglare covalent: complexul PDH este inhibat
prin fosforilare (kinaza PDH), activat prin
defosforilare (fosfataza PDH).
Fosforilarea se amplific la raportul nalt ATP/ADP;
acetil CoA/HSCoA; NADH/NAD; defosforilarea la
concentraii mari de piruvat i Ca

Ciclul Krebs Rolul

1.
2.
3.
4.

Const dintr-o secven de reacii ce se

desfoar n ciclu (realizeaz degradarea lui
Acetil Co A pn la 2 mol de CO2 i produce
energie stocat n GTP, NADH+H, FADH2
Are loc n matricea mitocondrial
Caracter aerob
Rolul:
Donor de protoni i electroni pentru LR
Integrativ
Amfibolic
energetic

1. Condensarea lui Acetil

CoA cu OA

2. Izomerizaea citratului n
izocitrat

3. DH i decarboxilarea
izocitratului

IDH NAD dependent- localizat n MC

IDH NADP dependent- att n MC ct i n
citozol

4. Decarboxilarea oxidativ a
alfa cetoglutaratului

5. Fosforilare la nivel de
substrat

6. DH succinatului

7. Hidratarea fumaratului

8. DH malatului

 Oxidarea
Diacilarea
4.
2. Trecerea
SuccinilCoA
alfa Citratului
cetoglutaratului
cu
la
6.Dehidrogenarea
la
succinil
CoA
sub actiunea
3.
Oxidarea
Izocitratului
Izocitrat
formare
de
Succinat
i la Alfacomplexului
polienzimatic
Alfa
1
cetoglutarat
.la
E-IzocitratDH,
GTP,
ca rezultat
al
Condensarea
Succinatului
Fumarat
E
Aconitazce
contine
Fe icare
cetoglutaratDH
asemntor
Acetil
OANAD,
are
caCoA
coenzim
fosforilrii
lacunivel
de necesit
E
SDH
FAD
glutation
redus.
cu
complexul
Piruvat
E-Citrat
sintetaz
a 8 DH
Mg2+,
const
din
subunitti
substrat
dependent
(380000D)compus
Enzima
din
exist
5
coenzime
sub
2
forme
i 3 de:
cu formare de
este
activat
enzime. Procesula.se
izoenzimatice:
nNADH+H+ATP
MC CoA
Acetyl
Citrat.
ADPinhibat
de:
CH
-C=
-C=O
desfoar
n cinci etape.
b.
Citoplasm
I

Ciclul acizilor
tricarboxilici (Krebs)

SCoA

OAA

NADH

MDH

NAD+

COOH
I
CH2
I
HC-OH
HC-OH
I
FR
COOH
COOH
I
CH
II
CH
FADH2
I
COOH

Mal

CS

FADH2 => LR

SDH

Suc

COOH
I
CH2
I
CH2
I
COOH

SCoAS
7. Hidratarea Fumaratului la Malat

AC

ICit

COOH
I
CH2
I
CH2
I
C=O
I
SCoA

COOH
I ICDH
CH2
I
CH2
I
CH=O
I
COOH

NAD+
NADH

-KG

KGDH

8. Oxidarea Malatului
la OA E- MDH
GTP
SCoA
GDP

COOH
I
CH2
I
H-C-COOH
I
CH- OH
I
COOH

Cit

3NADH+H+ => LR

Fum

FAD+

COOH
I
CH2
I
C=O
I
COOH

COOH
I
CH2
I
OH-C-COOH
I
CH2
I
COOH

NAD+
NADH

Reacia sumar. Bilanul

energetic

CH3COSCoA +3NAD+FAD+GDP+Pi+2H2O
+

2CO2 +3NADH+H +FADH2+GTP+2H

+HSCoA

Reglarea ciclului Krebs

Citrat

sintaza:
Inhibat - succinil CoA; AG; NADH; citrat
Activat: S- OA, Acetil CoA
IzocitratDH:
Activat: ADP, Mg, Mn
Inhibat: NADH2 i NADPH2, ATP
Alfa cetoglutaratDH
Inhibat: succinil CoA; NADH2; Se mare

Reaciile anaplerotice
Reaciile ce furnizeaz produii
intermediari ai ciclului Krebs
1. Formarea de OA
Piruvat +CO2+ATPOA+ADP+Pi
E- piruvatcarboxilaza (biotin dependent)
Asp+cetoglutarat OA+Glu
n miocard i muchi:
Fosfoenolpiruvat +CO2+GDP OA +GTP
E- fosfoenolpiruvatcarboxikinaza

Reaciile anaplerotice
2. Formarea alfa cetoglutaratului:
Glu+Piruvat Ala + cetoglutarat +
Ala
3. Formarea lui succinil CoA din
propionil CoA (1. din oxidarea AG cu
numr impar de atomi de C; 2. din
catabolismul Val, Ile, Met)
4. Formarea fumaratului (din catabolismul
Fen i Tyr)