Curs de Biofizic

V rugm: gnditi!

7
Disciplina de Biofizic
i Fizic medical
Prof. dr. Cipriana Stefnescu
Sef lucr. dr. Irena Grierosu

Liofilizarea

Istoric
Procedeul de liofilizare a fost inventat n
1906 de biofizicianul francez Arsne
Arsonval i
F. Bords - asistentul lui - n laboratorul de
biofizic de la College de France din Paris.

Istoric
Metoda a fost folosit de americanul Shackwell

(1851-1940), St Louis (Missouri) n 1909.

Primele aplicaii ale metodei au fost n

medicin.

n 1946-1947, americanul Flosdorff EW a artat

c procedeul de liofilizare ar putea fi aplicat n

condiii bune i la produsele alimentare.

n 1955, liofilizarea a fost utilizat pentru prima

dat n industria alimentar, pentru prelucrarea

de crevei (Texas) i crabi (Maryland).

Liofilizare deshidratare la rece,

uscare la rece, criodesicare.
Se ndeprteaz apa
dintr-un aliment sau
produs pentru a-l face
stabil la temperatura
camerei i a facilita
astfel conservarea
acestuia.

Definiie

Principiul liofilizrii
Liofilizarea foloseste un principiu fizic
simplu denumit sublimare.
Sublimarea este tranziia unei substane
din faz solid n faz gazoas direct,
fr a trece prin starea lichid.
Se produce la presiune foarte joas vid
parial.
Vaporii de ap (sau de alt solvent) sunt
recuperai i nlturai prin congelare.

Etape ale liofilizrii:

1.

Produsul biologic este

mai nti congelat (n
azot lichid la -194,5 C,
de obicei) pentru ca apa
pe care o conine, s fie
sub form de ghea.

2.

Produsul este apoi

supus unui vid parial,
care va sublima gheaa
direct n vapori de ap,
prin reducerea presiunii
(10-20 mm col Hg).
Vaporii de ap sunt
nlturai.

La sfritul ciclului,
produsul nu mai conine
mai mult de 1 % la 5 %
ap.

Aplicaii: Medicin i
Procedeu de conservare a produselor biologice
industria
farmaceutic
fragile (fragmente de esut
sau organe,
hormoni, vaccinuri, enzime, sau a
componentelor sanguine, plasm, ser,
gamaglobuline, anticorpi, hormoni ...
antibiotice, medicamente etc).
n stadiul actual al cunotinelor, liofilizarea
sngelui integral nu este posibil, deoarece
pentru a nu distruge celulele roii din snge,
nghearea trebuie s fie efectuat la o
temperatur foarte sczut (n caz contrar,
cristalele de ghea distrug celulele), care ar
obliga o sublimare la un nivel de vid sub 1
bar. Cercetrile continu pentru a derula
procesul de liofilizare n aceste niveluri de vid
si temperatur.

Exemplele cele mai

cunoscute n
alimentaie sunt:
cafeaua instant
(Nescafe) i supele
instant (Knorr)
Prnz liofilizat
pentru alpiniti,
expediii,
cosmonaui

Aplicaii:
Industria
alimentar:
cafea instant,
ciuperci, cereale
etc.

Aplicaii:
Pentru conservarea documentelor vechi

deteriorate de ap, pentru a pstra vestigiilor

arheologice gsite n zone umede sau pentru a
pstra animalele mici sau plante.

O companie canadian este, de asemenea,

cunoscut pentru buchete de flori liofilizate.

Avantaje:
Conservarea proprietilor biologice
Produsele se pot pstra la temperatura

camerei, nu necesit refrigerare (foarte util

n cazul bacteriilor lactice, foarte sensibile la
cldur).

Produsele i pstreaz forma, culoarea,

gustul, aroma.

Scade greutatea (transport uor - cost mai

mic) dar volumul nu se modific semnificativ.

Se rehidrateaz uor, prin adugarea unui

lichid (ap sau alt lichid fiziologic).

Metode optice

Metode optice:

Fotocolorimetrie
Turbidimetrie
Nefelometrie
Fluorimetrie
Polarimetrie
Refractometrie
Flam-fotometrie

L.P.!

L.P.!
L.P.!
L.P.!

urbidimetria

Principiul fizic al
metodei

Msurarea turbiditii unei soluii

prin msurarea cantitii de lumin
care trece prin soluie.
Solutia = particule in suspensie

Nefelometria: fenomenul
Msurarea luminii difuzate de particulele
Tyndall
n suspensie (uneori complexe antigenanticorp) solutii coloidale.

Densitatea particulelor este n relaie cu

lumina difuzat (reflectat).

Implica difuzia luminii

avand la baza fenomenul

Tyndall (cand ordinul de
marime al radiatiei
utilizate este acelasi cu
dimensiunea particulei,
radiatia incidenta va fi
deviata de la directia
initiala pastrand
lungimea de unda initiala.

Turbidimetru
(Spectrofotometru
UV)

Turbidimetrie

Nefelometrie

Nefelometru
(Spectrofluorimetru)

http://chemwiki.ucdavis.edu/Analytical_Chemistry/Analytical_Chemistry_2.0/10_S
pectroscopic_Methods/10H%3A_Spectroscopy_Based_on_Scattering

Fotocolorimetria:
Msurarea luminii absorbite la trecerea
printr-o soluie colorat.
Polarimetria:
Determinarea concentraiei unei substane
optic active folosind lumin polarizat.
Refractometria:
Determinarea concentraiei unei substane
ntr-o soluie optic clar prin msurarea
unghiului limit.
Fluorimetria:
Msurarea fluorescenei emise de molecule
intr-un mediu.
Flam-fotometria:
Determinarea concentraiei unui element
chimic prin excitare n flacr i
determinarea spectrului de emisie.

Bibliografie selectiv
Aurengo A., Grmy F., Petitclerc T. - Biophysique, Mdecine-Sciences Flammarion,

Paris, 1998.
Dimoftache C., Herman S. Principii de Biofizic uman, Ed. Universitar Carol
Davila, Bucureti, 2003.
Duncan G, Physics in the Life Sciences, Blackwell Scientific Publications, The Alden
Press, Oxford, 1990.
Durand A., Escany J-M., Naoun A. La biophysique en 1001 QCM, Ed. Ellipses, 2004.
Goldfarb D. Biophysics DeMYSTiFieD. McGraw-Hill Companies, 2011.
Herman S. Aparatura medical. Principiile fizice ale aparaturii medicale
moderne,Ed.Teora,Bucureti, 2000.
Nlting, Bengt. Methods in Modern Biophysics. Springer. 2003.
Pascu M., Rusu V., Vasile C., Spectrometria in IR in medicina si farmacie, Editura BIT,
2003.
Popescu A., Bazele Opticii, Ed. Universitii Al. I. Cuza, Iai, 1988.
Rusu V., Baran T., Brniteanu D. D. - Biomembrane i patologie, vol. I, Ed. Medical,
Bucureti, 1988, 63-92, 286-292.
Rusu V. Note de curs. 2010.
Rusu V. Nobel Retrospectiv 1905 1995 Laureaii premiului pentru fiziologie i
medicin, Ed. Omnia, Iai, 1996.
Rusu V si colab. Lucrri practice i demonstraii de Biofizic i Fizic Medical, Ed.
Gr. T. Popa Iai, 2003.
Rusu V. Dicionar medical, Ed. Medical, Bucureti, ed. IV, 2011.
Skoog D. A., Holler F. J., Nieman T. A., Principes danalyse instrumentale, De Boeck
Universit, Paris, 2003.
tefnescu C, Rusu V. Biophysics and Medical Physics: An Introduction, Ed.
Tehnopress, 2008.