SISTEMUL INTERTEGUMENTAR

....PIELEA

REZIDENIAT DERMATOLOGIE
MODUL ANATOMIE PATOLOGIC
2011-2012
PROF. DR. IRINA-DRAGA CRUNTU

MELANOGENEZA,
CELULE EFECTORII,
MECANISME REGLATORII

MELANOCIT
MELANOZOM
MELANIN

MELANOCITUL

origine: creste neurale

difereniere celule stem melanocitare: gena Pax3
(familie factori de transcripie
Pax3 activeaz MITF (eng. microphthalmia
transcription factor) = critic n dezvoltarea /
diferenierea melanocitelor

MELANOCITUL
LOCALIZARE
piele:
strat bazal epiderm, ocazional n derm;
matrice folicul pilos;
sistem bicompartimental: compartiment
epidermic i compartiment folicular
ochi: epiteliul pigmentat retin, tract uveal
ureche: stria vascular
mucoase
SNC: leptomeninge

MELANOCITUL
FUNCIE
producere MELANIN tirozin = organite intracelulare

delimitate de membran, nalt specializate: MELANOZOMI

descrcare melanin spre keratinocite - pigmentarea pielii i
colorarea prului i a unghiilor
esenial
contact prelungiri dendritice melanocite / keratinocitele:
posibil transferul de melanin
unitatea melanic epidermic (UME): 1 melanocit contact cu
30-40 keratinocite
unitatea melanic folicular (UMF): interaciune similar ntre
melanocitele/keratinocitele foliculului pilos

MELANOCITUL
UNITATEA
MELANIC
EPIDERMIC

MELANOGENEZA
ETAPE
I migrarea melanoblastului din crestele neurale
II diferenierea melanoblastului n melanocit; popularea
clonal a pielii de ctre melanocite
III formarea matricei melanozomului
IV inducerea genelor melanogenice pentru: tirozinaz (TYR),
proteine legate de tirozinaz i componentele matricei
melanozomice
V sinteza tirozinazei i a proteinelor melanogenice legate de
tirozinaz
VI procesarea post-translaional i glicozilarea tirozinazei

MELANOGENEZA
ETAPE
VII fuzionarea veziculelor pentru a forma
melanozomi i iniierea melanogenezei
VIII controlul activitii tirozinazei
IX controlul activitii proteinelor legate de tirozinaz
X modificri n biosintez (post-tirozinaz)
XI modificri ale melaninei
XII transferul melanozomilor la keratinocite
XIII degradarea melanozomilor
XIV ndeprtarea melaninei odat cu pierderea celulelor
cornifiate

MELANOGENEZA

Pigmentarea pielii i a prului funcie de:

densitatea i distribuia melanocitelor:

2000/mm2 : pe fa i n regiunea genital masculin:

800/mm2 : pe trunchi

mrimea, numrul i distribuia melanozomilor

natura chimic a melaninei coninute

MELANOZOMUL

format n RE al melanocitului
prezint 3 metaloenzime melanogenice asociate genetic:
tirozinaza
proteina 1 asociat tirozinazei (Trp1)
proteina 2 asociat tirozinazei (Trp2)

IMPLICATE N CONTROLUL CATALITIC AL MELANOGENEZEI

tirozinaza = rol critic

MELANOZOMUL

RASA NEAGR
melanozomi:
mai mari dect la rasa alb
mpachetare = uniti singulare, NU grupuri
efect ntrziat de degradare n melanocite nivele
crescute de pigmentare a pielii
granule melanice numeroase, predominant n stratul
bazal, prezente ns n toat grosimea epidermului,
inclusiv n stratul cornos; uneori, n poriunea
superioar a dermului, nglobate n macrofage
(melanofage)
RASA ALB
puine granule melanice, n stratul bazal

TIROZINAZA
JUCTORUL CHEIE IN MELANOGENEZA
enzim: MONOFENOL MONOOXIGENAZ catalizeaz
oxidarea fenolilor (tirozina)
glicoprotein bifuncional, cupru-dependent, format din
511 aa., G. mol. 60-75 kDa.
situs activ: 3 atomi de cupru - eseniali pentru activitatea
catalitic
ageni:
monoxidul de carbon
cianuri
salicilaldoxamina
etiltiocarbonatul
inhib indirect activitatea tirozinazei, fiind chelatori de
cupru i anulnd abilitatea de a lega oxigen

TIROZINAZA
JUCTORUL CHEIE IN MELANOGENEZA

STRUCTUR

Cristalografie
- atomii de cupru verde, suprafa
suprafaa moleculara ro
rou
- model D,
D, E:
E: aa
aa histidin:
histidin: linie
linie albastr
- model E: fiecare atom de cupru din sitesite-ul activ este n legtur cu 3 reziduuri
reziduuri de histidin,
histidin, formand un
centru de cupru tip 3
- model C,
C, D:
D: site
site--ul activ se afl ntrntr-un pillus format pe suprafa
suprafaa molecular a moleculei

TIROZINAZA
JUCTORUL CHEIE IN MELANOGENEZA

SINTEZA
RER complexul Golgi glicozilare (legare de asparagin)
glicozilarea:
- esenial pentru structura i funcia normal a tirozinazei
- complet nainte de exportul n melanozom

TIROZINAZA
JUCTORUL CHEIE IN MELANOGENEZA

STRUCTUR

3 domenii: intern, care rmne n melanozom,

transmembranar i citoplasmatic, care se extind
n citoplasma melanocitului;
domeniul intern: conine toat activitatea catalitic care
rezult n formarea de melanin, exclusiv n melanozomi;
mai mult de 90% din site-ul care leag cuprul este localizat n
domeniul intern
domeniul transmembranar i citoplasmatic: secven scurt
de aa, cu o coad de 30 aa care rmne n citoplasma
melanocitului
domeniul citoplasmatic critic pentru funcia melanogenic i
pentru traficul celular al tirozinazei: faciliteaz transportul de la
RER, prin complexul Golgi, la melanozom

TIROZINAZA
JUCTORUL CHEIE IN MELANOGENEZA

PROTEIN-KINAZA C-BETA
enzim semnal de transducie, necesar pentru activarea
tirozinazei
activare prin fosforilarea reziduurilor de serin, n captul Cterminal al domeniului citoplasmatic

TIROZINAZA
JUCTORUL CHEIE IN MELANOGENEZA
catalizeaz primele dou etape de conversie n sinteza melaninei
L-TIROZINA hidroxilare DIHIDROXIFENILALANINA (L-DOPA)
oxidare L-DOPACHINONA (intermediar reactiv)
eumelanina
grupri tiol +

feomelanina
grupri tiol -

tioli: glutationul (GSH), cisteina sau thioredoxina

reacie cu intermediari de tip chinone, ntorcnd sinteza pigmentului melanic de
la eumelanin la feomelanin
Observaie:

Melanogeneza este un risc pentru melanocite, care pot fi expuse pericolului prin
generarea de specii reactive de chinone

TIROZINAZA
JUCTORUL CHEIE IN MELANOGENEZA
CHINONELE
compui puternic electrofili, foarte reactivi n raport cu starea
lor de reducere
reducere de un electron, prin reductaza NADPH-citocrom P450,
pentru a forma o semichinon
reducere de doi electroni, prin NAD(P)H chinono-oxid-reductaz,
pentru a forma hidrochinon, specie mai puin reactiv dect
semichinona
eumelanina conine radicali de semichinone
cicluri repetative de oxidare i reducere pot conduce la stress
oxidativ i lezare celular
potenialul de citotoxicitate a speciilor moleculare tranzitorii
generate n timpul melanogenezei este motivul biologic major de
a limita melanogeneza la melanozomul

TIPURI DE MELANINE

pigmeni biopolimerici redox (oxidare-reducere)

cromofori insolubili, GM , sintetizat din tirozin
eumelanina i feomelanina:
- difer ca dimensiune molecular i proprieti generale, dar sunt
legai biogenetic i provin dintr-o cale metabolic comun, n care
dopachinona este intermediarul cheie

TIPURI DE MELANINE
eumelanina:
- insolubil, conine azot, culoare maron-nchis spre negru
- responsabil de pigmentarea pielii, dar prezent i n pr
feomelanina:
- solubil, alcalin, culoare galben-rou
- responsabil de colorarea unghiilor i a unor nuane de pr (n
special maron-rocat sau rocat)
trichocromii B i C
feopigmeni, solubili n acid
- izolai din prul rocat

TIPURI DE MELANINE

nivelele intracelulare de cistein joac un rol n modul n care

eumelanogeneza sau feomelanogeneza vor fi stimulate
cea mai mare parte din melanin: melanin mixt (eumelanin
i feomelanin, n proporii variate)

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

controleaz proliferarea i diferenierea melanoblastelor i

melanocitelor
1.

GENE REGLATORII DE PIGMENTARE

2. HORMONII
3. RADIAIILE UV
4. GENA c-KIT, LIGANZII

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

GENE REGLATORII DE PIGMENTARE

acioneaz la nivel subcelular, celular, tisular i de mediu

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

GENE REGLATORII DE PIGMENTARE

- exprimate specific n melanocite

- codific proteine specifice melanozonului

LOCUS
PROTEINA CODAT
Gene cu aciune la nivel subcelular
albino
tirozinaza

ASPECTUL FENOTIC DATORAT MUTAIEI

Om: albinism oculo-cutanat tip 1 (OCA1)

oarece: absena complet a pigmentrii: pr alb,
ochi roii
brown
Trp1
Om: form rar de albinism mediu, albinism
oculo-cutanat brun (OCA3)
oarece: oarece brun
pink-eyed dilution transportor
pentru Om: albinism oculo-cutanat tip 2 (OCA2), pr
melanozomi
blond-alb, piele palid, anomalii de vedere
oarece: ochi roz, pr gri/galben
slaty
Trp2
Om: defectul nu este descris
oarece: moderat diluie a pigmentului negru
silver
gp 100, Pmel 17
Om: albirea prului
Gene cu aciune la nivel celular
lethal spotting
Endotelina 3
Om: defectul nu este descris
oarece: arii de chelie
piebald spotting
Receptor
pentru Om: chelie, aganglionoz intestinal
endotelin
oarece: arii de chelie

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

GENE REGLATORII DE PIGMENTARE

LOCUS
PROTEINA CODAT
Gene cu aciune la nivel tisular
steel
factorul de cretere
pentru mastocite
white spotting
receptorul
pentru
tirozin-kinaz
codificat de c-Kit
Factori de mediu
Agouti
Proteina semnal
Agouti

extension locus
piebald spotting

ASPECTUL FENOTIC DATORAT MUTAIEI

Om: defectul nu este descris
oarece: pr alb, ochi negri
Om: chelie
oarece: pr alb, ochi negri

Om: defectul nu este descris

oarece:
pierderea
funciei:
pr
negru
(eumelanogenez); ctigarea funciei: pr galben
(feomelanogenez)
Receptor pentru MSH Om: defectul nu este descris
Receptor
pentru Om: chelie, aganglionoz intestinal
endotelin
oarece: arii de chelie

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

HORMONII
ACTH, alfa-MSH derivai din clivarea proteolitic a POMC,
produs n principal de pars intermedia a hipofizei
la om:
sursa hipofizar nu este important, cantitile produse fiind prea
mici
sintez la nivel de melanocite i keratinocite sursa local este
mult mai important pentru melanogenez
alfa-MSH: produs n melanocite i celule Langerhans
ACTH se leag de MSH-R melanocitari i induce eumelanogeneza
legarea MSH, ACTH de MSH-R determin:
- creterea proliferrii de melanocite
- melanogeneza
- formarea prelungirilor dendritice melanocitare

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

RADIAIILE UV
Observaie: diferenele n pigmentarea pielii i a prului sunt

generate de programe genetice constitutive individuale i pot fi

opional crescute prin expunere la UVR
pigmentarea opional poate fi:
- imediat, rezultnd din translocarea melanozomilor din aria
perinuclear spre dendrite; apare dup expunere de secunde la
UVA (320-400 nm) i dispare n 1-3 zile
- tardiv, rezultnd din creterea numrului de melanocite,
completat cu creterea numrului de melanozomi n melanocite
i keratinocite; apare dup 2-3 zile de expunere la UVB
(290-320 nm)

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

RADIAIILE UV
UVR:
mutagen melanocitic recunoscut, cel mai puternic stimulant
pentru creterea i diferenierea melanocitelor
activarea i diferenierea melanocitelor poate fi indus direct de
UVR, sau indirect, prin interaciunea lor cu keratinocitele iradiate
MECANISME PRIN CARE INTERVIN KERATINOCITELE:
1) crete sinteza de FGFbeta - stimuleaz proliferarea i
melanogeneza melanocitelor epidermice
2) se modific reglarea produciei unor citokine
endotelina 1: stimuleaz proliferarea melanocitelor i
melanogeneza, prin calea de transducie a semnalului mediat
prin proteina G cuplat la receptorul pentru endotelin
3) produc alfa-MSH, care crete expresia MSH-R pe melanocite,
rezultnd creterea melanogenezei

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

RADIAIILE UV
Melanina garanteaz protecia pielii
determinant major al aspectului fenotipic
protector mpotriva radiaiilor, prevenind leziunile pielii induse
de soare ca i dezvoltarea cancerului de piele
component al mecanismului de aprare, pentru a minimiza
leziunea ADN-ului indus de UVR
rolul fotoprotectiv:
- capacitatea de a absorbi direct fotonii de ultraviolete i speciile
de oxigen reactiv (ROS), generate de interaciunea fotonilor cu
membrane lipide i ali cromofori celulari
- natura polichinonic: faciliteaz micarea electronilor nepereche
ntre diferite nivele de energie, contribuind astfel n absorbtia UVR
- proprietile fizice i chimice a formei polimerice

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

RADIAIILE UV
Melanina garanteaz protecia pielii
Mecanisme:
radiaia este risipit i degradat de melanin, rezultnd n
producere de cldur
radiaia este absorbit, apoi oxidat n melanin
n melanocit: abilitatea melaninei de a ndeprta (cura) ROS
generai de UVR exercit un efect citoprotector
n keratinocit: melanina tinde s fie distribuit n capioane
supranucleare, care protejeaz nucleii de injuria cauzat de
fotonii UV; inducia de fotoprodui ADN, ca dimerii de ciclobutan
pirimidin (CPD) i pirimidin (6-4) pirimidon (6-4PP), care sunt
posibili carcinogeni, este anulat de capionul supranuclear de
melanin

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

SEMNALE MITOGENE CARE REGLEAZ

PROLIFERAREA MELANOCITIC
Mitogeni puternici
radiaii ultraviolete
FGF-beta
cAMP
HGF (hepatocyte growth factor)/scatter factor
SCF (stem cell factor)/mast cell factor
endotelin
toxina holeric

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

SEMNALE MITOGENE CARE REGLEAZ
PROLIFERAREA MELANOCITIC
Mitogeni slabi (necesit prezena, adiional, a cel puin doi factori
mitogeni puternici, pentru a-i exercita efectul)
MSH
Agouti signal protein
ACTH
Gastrin releasing peptide
Inhibitori
TGF
Beta-interferon

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

GENA c-Kit I LIGANZII
c-Kit proto-oncogen activitate tirozin-kinazic intrinsec
produsul genei c-Kit joac un rol de pivot n creterea i
diferenierea normal a melanoblastelor embrionare
la oarece:
- c-Kit a fost mapat n locusul dominant white spotting (w), a
crui ligand este produsul locusului steel (sl)
- locusul steel codific SCF (stem cell factor), cunoscut i ca
factorul de cretere mastocitar, factorul steel, sau KIT-ligand
(ligandul pentru receptorul c-KIT)
- mutaii n receptorul c-KIT au fost identificate la pacienii cu
chelie, sugernd c funcionarea normal a lui c-KIT este necesar
pentru dezvoltarea melanocitic uman

FACTORI REGLATORI N MELANOGENEZ

GENA c-Kit I LIGANZII
pierderea expresiei receptorului c-KIT este asociat cu progresia
melanomului ctre fenotipul metastatic
- oareci nuzi: expresie c-KIT crescut n celulele metastatice de
melanom inhib semnificativ creterea lor, i inhib potenialul lor
metastatic
expunerea celulelor de melanom, pozitive c-KIT, in vitro i in
vivo la SCF (ligand pentru c-KIT), determin apoptoza pentru
aceste celule, dar nu i pentru melanocitele normale
celulele metastatice de melanom supraexprim MCAM, dar nu
exprim receptorul pentru c-KIT