VALIDAREA METODELOR DE

ANALIZA

Biolog maria enea IASI

VALIDAREA METODEI

CE ESTE VALIDAREA METODEI?

Este o evaluare (verificare si prezentare de

dovezi) pentru a afla cit de mare este
eroarea prezent in rezultatul unei
msurtori, realizate prin metoda din
laboratorul dumneavoastr.
VALIDAREA METODEI
1.Specificarea metodei

a Denumirea analizei :
exemplu:-Hemoleucograma automata

-Determinarea GGT prin metoda SZASZ-CARBOXY

b Masurand - Numar de ERITROCITE (RBC),unitate de masura

- GGT

c. Sursa metodei
ex:- Metoda impedantei electrice dezvoltata pe principiul Coulter (metoda automata). Nu s-au
adus modificri metodei sau

- IFCC,etc
VALIDAREA METODEI

2.Responsabil de validare......... medic

primar medicina de laborator.
VALIDAREA METODEI

3.Conditii de mediu
-a. Echipament
T = 20 - 25 C;
Umiditate = 40 - 60%b.

- Proba biologic - o zi :T = 25C;

- 3 zile T = 2 - 8Cc.

- ReactiviT = 2 - 8C sau temperatura camerei

VALIDAREA METODEI
4.Echipament

- denumire, serie, nr.inventar, data punerii in functiune

- producator
- certificat de etalonare
- domeniu de msurare
- modalitati de calibrare
ex:- Se obtine utilizand calibrator Futura Systems -calibrator trasabil la
MRC Nu ofera informatii despre incertitudinea de masurare.
- nu afiseaza curba, se lucreaza cu factori de calibrare, curba de
calibrare in 2, 4...n puncte.

- inregistrri de mentenant

ex:Mentenana zilnic se execut de catre responsabilul de analiza, conform

planului de mentenanta afisat. Celelalte operaiuni periodice de ntreinere se
regsesc, de asemenea, n Planul de mentenan cod ......... 1, Rev 0. i Fia
nregistrare mentenan cod ..........
VALIDAREA METODEI

5.Reactivi utilizati

ex:Reactivii pentru efectuarea

hemoleucogramei, produsi de firma ....., sunt
adecvati echipamentului utilizat, sunt n
termen de valabilitate, conform certificatului
de calitate si stabili la 25 - 30 C pn la data
expirrii.
VALIDAREA METODEI

6.Materiale de referinta

ex:-Nu sunt disponibile materiale de referinta

(calibratori), din cauza principiului de
functionare al analizorului ... (impedanta
electrica) sau
- Multicalibrator....., denumire, producator,
lot,etc., trasabil sau nu la MRC
VALIDAREA METODEI

7. Materiale de control

Sange de control ,denumire, producator, lot

Control pe trei nivele de concentraie: - nivel LOW
lot 0903-011 -nivel normal lot 0903-012 -nivel
patologic HIGH lot 0903-013produs de Clinical
Diagnostic Solutions Laboratories, USA, valabil pana
la 4.08.2009, cu certificate de calitate si cu valori
atribuite pentru echipamentul utilizat.
VALIDAREA METODEI
8. Limita minima de detectie cea mai mica cantitate ce poate fi difereniat de blanc , nu
are relevan clinic.

9. Limita minima de cuantificare / masurare - LQLimita de cuantificare este cea mai mic
cantitate din analitul respectiv care poate fi msurat cu un nivel acceptabil de precizie.
Desi nu are relevanta clinica, aceasta limita a fost testata in laboratorul..
ex: Laboratorul a utilizat sangele de control cu valori patologice scazute: - CDS-3PD
Hematology Control, lot: 0903-011 valabil pana la data de : 04/08/2009
- calibrator a crui valoare este de .....
S-au efectuat 10 msurtori pe o diluie de ...... a sangelui de control sau a serului
calibrator incat teoretic sa ajungem la o valoare apropiata de limita de cuantificare
declarat de productor.
Rezultatele obinute au fost prelucrate statistic i s-a obtinut, media ,deviatia standard si
coeficientul de variatie.
ex: media 4,60
DS= 0,42
Cv= 5,79%

Concluzie: producatorul declara limita minima de cuantificare de 3,2 , valoarea limita

obinuta cu o precizie acceptabila este de 4,60
VALIDAREA METODEI
10.Limita maxima de masurare
- limita maxim de msurare, conform prospectului, coincide cu punctul
maxim de calibrare.

11. Domeniul de liniaritate este specificat de producatorul analizorului

Din curba de calibrare obtinuta folosind calibratorul mentionat rezulta

ca reactia este liniara pe domeniul [0.0 - 1200] U/l. Domeniul de
referinta: [7 -50] este inclus in domeniul de calibrare [0.0 -1200],
pentru care relatia asborbanta concentratie este liniara. Domeniul de
calibrare este la randul su inclus in domeniul de masurare
determinat.
VALIDAREA METODEI

12. Valori biologice de referinta

diferentiate pe sexe si virsta
VALIDAREA METODEI

Parametrii de performanta

- Precizia/ Imprecizia

- Acurateea/inacurateea

- Incertitudinea de msurare
VALIDAREA METODEI

The Precision of a method is the degree of agreement among

individual test results, when the procedure is applied
repeatedly to multiple samplings of a homogeneous
sample.
- Within-day variability (repeatability)
- Between-day variability (reproducibility)

Precizia/Imprecizia de msurare este gradul de apropiere dintre

rezultatele unor msurtori repetate executate in aceleai
condiii specificate.
VALIDAREA METODEI
13. Precizia/Imprecizia(Repetabilitatea)

a.Intra day(in cadrul aceleeai zile)

S-au efectuat cate 10 masuratori pentru nivelul patologic Low, nivelul Normal si pentru nivelul patologic High,
in ziua de 23 aprilie 2009.Rezultatele au fost prelucrate statistic.

Sange de control cu valori Low:

Media valorilor obtinute Xmediu= 2.52 x 1012/L
Deviatia standard DS = 0,033 x 1012/L
CV = 1.27 %
Sange de control cu valori Normale:
Media valorilor obtinute Xmediu= 4.41 x 1012/L
Deviatia standard DS = 0.06 x 1012/L
CV = 1.19 %
Sange de control cu valori patologice High:
Media valorilor obtinute Xmediu= 5.41 x 1012/L
Deviatia standard DS = 0,05 x 1012/L
CV = 0.64 %
Se compar DS obtinut cu DS intra day din prospectul reactivului.
VALIDAREA METODEI
Precizia/Imprecizia(Repetabilitatea interday sau
Reproductibilitate interna)

b.Inter day(de-a lungul unei luni)

S-au efectuat 20 masuratori pe ser(sange ) de control nivel normal si respectiv 20 pe nivel
patologic in perioada01.02.2009 - 27.02.2009. Rezultatele au fost prelucrate statistic:
- Ser de control , nivel Normal ,Futura Systems lot:572N; data expirarii: 08/2011, - valori
atribuite : [41,00 - 55,00] U/l,Tinta 48,00U/l

valoare medie calculata:M = 49,17 U/l

SD = 1,63 U/I,
CV = 3,31%;

- Ser de control , nivel Patologic Futura Systemslot: 371P; data expirarii: 01/2011, cu valori
atribuite [150,00 - 202,00 U/I, valoarea tinta =176,00 U/l;

valoare medie calculata:M = 174,87 U/l

SD = 3,61 U/l,
CV = 2,06%;
VALIDAREA METODEI

Concluzie:
Literatura de specialitate(prospectul de reactivi,
www.westgard.com, CLIA , etc.)precizeaza
ca valoarea limita de asteptat a impreciziei
este 6,90%. Rezultatele obtinute de laborator
se situeaza sub aceasta limita pe ambele
nivele, ceea ce demonstreaza o precizie
acceptabila in utilizarea acestei metode.
VALIDAREA METODEI

Accuracy
A measurement of the exactness of an analytical
method, or the closeness of agreement between
the measured value and the true value.
Inaccuracy = systematic error
Acurateea msurrii este gradul de
concordan(apropiere) intre valoarea msurat a
unui analit i valoarea sa adevarata(valoarea
stabilit printr-o metod de referin).
VALIDAREA METODEI
14. Acuratee/Inaacuratee

Acuratetea a fost verificata prin comparari interlaboaratoare - control extern

CALILAB.

Rezultateleobtinute au fost:
1) Pentru valori normale (febr. 2008):Rezultatul obtinut =51.00U/l
Media comparare = 51,94 U/l
Bias = 0,94
Bias% = 1,81 %
2) Pentru valori patologice (mai 2008): Rezultatul obtinut =122,00 U/l
Media comparare = 132,50 U/l
Bias = 10,50
Bias% = 7,92 %

Literatura de specialitate, www.westgard.comprecizeaza ca valoarea limita de asteptat

pentru biasul relativ: 10,80 %. Rezultatele obtinute delaborator se situeaza sub
aceasta limita pe ambele nivele, ceea ce demonstreaza o precizie acceptabila.
VALIDAREA METODEI

15.Incertitudinea de msurare
- Pentru valori normale :

- Pentru valori patologice

VALIDAREA METODEI
Concluzii :
- Au fost indeplinite conditiile de mediu recomandate de producatorul
analizorului pentru o buna functionarea acestuia : temperatura = 18 32
oC; umiditate = 10 90 %, echipamentul este in buna stare
defunctionare, fiind etalonat si calibrat, reactivii, calibratorul si serurile
de control au fost adecvate lucrului siin termen de valabilitate.
- Domeniul de masurare al analizorului cuprinde domeniul de referinta al
pacientilor care se adreseaza in mod curent laboratorului.
- Metoda indeplineste criteriul de precizie, cerut pentru analizele efctuate.
- Metoda indeplineste criteriul de acuratete cerut pentru analizele
efectuate valorile pentru CV[%] sunt decat cele specificate in
literatura de specialitate.
- Incertitudinea asociata metodei de masurare este in limite normale
pentru aceasta metoda.
VALIDAREA METODEI

In concluzie,
Metoda analizata este adecvata scopului.
Acest raport de validare este valabil pentru
echipamentul si reactivii utilizati la data
intocmirii: ...............