LIPOPROTEINELE PLASMATICE. DISLIPIDEMIILE.

INVESTIGAREA MODIFICRILOR METABOLISMULUI LIPIDIC.

PRINCIPIILE FARMACOTERAPIEI DISLIPIDEMIILOR

Principalele lipide din plasm cu importan practic sunt: acizii grai (AG),
trigliceridele (TG), fosfolipidele (FL) i colesterolul (Col).
Lipidele plasmatice pot fi analizate prin dou procedee:

a) dozarea lipidelor ca specii moleculare, prin reacii specifice sau prin

extracie cu solveni selectivi i dozarea fiecrei fraciuni; lipemia total
este de 4-8 g/l, trigliceridele 0,5 1,9 g/l, fosfolipidele totale 1,8 2,6
g/l, colesterolul total 1,5 2,5 g/l, acizii grai liberi 0,08 0,2 g/l.
b) Separarea lipoproteinelor ca entiti morfofuncionale i cercetarea
compoziiei lor proteice i lipidice.
Lipoproteinele plasmatice reprezint complexe lipoproteice cu funcie de
transport a lipidelor exo- i endogene. Componentele proteice snt denumite
apolipoproteine (apo). LP au o structur comun, lipidele nepolare, TG i esterii
colesterolului, formeaz un miez hidrofob, iar lipidele amfipatice, colesterolul i
fosfolipidele, i apolipoproteinele alctuiesc nveliul hidrofil. LP cuprind i
cantiti mici de glucide (sub form de glicoproteine). Asocierea LP se face prin
legturi necovalente. n timpul metabolismului intravascular al LP are loc schimbul
i transferul de proteine i lipide ntre clasele de lipoproteine sau ntre acestea i
esuturi.

ANALIZA LIPOPROTEINELOR PLASMATICE

LP plasmatice pot fi separate prin ultracentrifugare i prin electroforez.

Ultracentrifugarea are la baz diferenele de densitate n raport de

componena lipidic i proteic. TG pure au densiti de 0,95 g/cm3, proteinele
pure au densiti mai mari de 1,28 g/cm3. n cmpuri gravitaionale puternice LP,
dup densitatea mediului de suspensie se vor sedimenta (dac au densiti mai
mari dect ale mediului) sau vor flota, dac au densiti mai mici. Prin
centrifugare au fost obinute 4 fraciuni lipoproteice majore:

- chilomicronii
- LP cu densitate foarte mic (VLDL, de la very low density lipoproteins)
- LP cu densitate mic (LDL, de la low density lipoproteins)
 - LP cu densitate mare (HDL, de la high density lipoproteins)
LP, n principal prin componentele lor proteice superficiale, poart sarcini
electrice i pot fi separate prin electroforez. Separarea se efectueaz la pH
alcalin (8,6) pe geluri de agaroz, de poliacrilamid. Prin aceast tehnic snt
separate 4 fraciuni:

- chilomicronii care nu migreaz

- pre - - LP (corespund VLDL)
- - LP (corespund LDL)
- - LP (corespundHDL)
De notat c serul obinut din sngele normal recoltat dimineaa dup un post
de 10 12 ore (a jeun) nu cuprinde chilomicroni i VLDL snt prezeni n urme.
Acizii grai liberi, asociai cu serumalbumina, nu constituie o fraciune lipoproteic
propriu zis.

Tabelul 1: Principalele clase de lipoproteine i caracteristicile lor

Lipoproteina Chilomicroni VLDL IDL LDL HDL

(pre--LP) (-LP) ( - LP)

Densitate, g/c0m3 < 0,94 0,94-1,006 1,000 1,019- 1,063-1,21

1,063

Diametru, nm 75-600 25-75 1,019 20-25 10-20

Proteine, % 1-2 7-10 14-25 45-55

Lipide, % 98-99 90-93 75-86 45-55

Trigliceride, % 86-94 55-65 8-12 3-6

Colesterol, % 0,5-1 6-8 5-10 3-5

Colesteride, % 1-3 12-14 35-40 14-18

Fosfolipide, % 3-8 12-18 20-25 20-30

Timpul de 10-15 min 2-4 h. 2,5 zile 3-5 zile
njumtire

Surs Intestin Ficat Circulaie Ficat

Intestin
Intestin
Circulaie

Rol Transportul Transportul Transportul Transportul

TG exogene TG Col spre Col spre
endogene esuturi ficat
Rol pro-ATS
Rol pro-ATS Rol anti-
ATS

Concentraia n - 50-200 200-300 B. 170-350

plasm, mg/dl
F. 220-470

Apoproteinele B 48, E B 100, C - B 100, A I, II, D, A I, II, D,

constituente I E, C I, II, E, C I, II,
A I, II, IV C I, II, III, E
III III
C II, III, E
C I, II, III

Apoproteinele ndeplinesc urmtoarele roluri n cadrul metabolismului LP:

- asigur solubilizarea lipidelor n mediul apos al plasmei

- snt cofactori pentru enzimele eseniale ale metabolismului lipidic
- snt liani pentru diferii receptori
Apoproteinele se gsesc sub diferite variante, fiind incluse n diferite LP i
avnd funcii distincte.

Tabelul 2: Principalele tipuri de apoproteine i caracteristicile lor

Apoproteina LP n care se Locul Conc. n Funcia
gsete sintezei plasm,
predominant mg/dl

AI HDL intestin, 100-120 Constituent major al HDL.

ficat Activator al LCAT. Legarea
B 115-190
de receptorii HDL i
F 115-220 transportul invers al Col

A II HDL intestin, 30-50 Rol structural Activator al

ficat TGLH
21-53

A IV CM, HDL intestin, <50 Activator al LCAT.

ficat Transportul invers al Col
13-16

B 100 VLDL, LDL, IDL ficat 70-120 Biosinteza i secreia VLDL.

Legarea cu receptorii
B 70-160
specifici pentru LDL
F 60-150 (exercit un feedback
negativ asupra sintezei Col)

B 48 CM Intestin <50 Secreia chilomicronilor

CI CM, VLDL, HDL ficat 4-8 Activator al LCAT (in vitro)

C II CM, VLDL, HDL ficat 3-7 Activator al

lipoproteidlipazei
B 2-8

F 1-6

C III CM, VLDL, HDL ficat 12-20 Inhibitor al

lipoproteidlipazei
B 5-18

F 7-16
D HDL ficat 6-10 Transportor de Col
esterificat ntre diverse LP

E (E2, E3, E4) IDL, CM, VLDL Ficat, 3-6 Legarea cu receptorii apo E
macrofag (E3/4) din hepatocit.
B 1-6
e Legarea cu receptorii B/E
F 1-5 din esut (E4/4).
Influeneaz creterea i
repararea SN.

Apo (a) LP (a) ficat < 30 Necunoscut. Factor de risc

pentru ATS. Reglarea
activitii procoagulante

H CM 0-35

Tabelul 3: Principalele enzime specifice implicate n metabolismul

lipoproteinelor

Enzima Funcia specific

Lipoproteidlipaza endotelial (LPL) Degradarea TG din CM i VLDL, avnd drept

catalizator apo C II

Lipaza hepatic (TGLH) Completeaz activitatea LPL, hidroliznd TG i FL

din restul chilo, LDL, i HDL

Lecitin-colesterol-acil-transferaza Maturarea -LP prin esterificarea Col liber. Reacia

(LCAT) activat de apo AI

Proteina de transfer a esterilor de Catalizeaz transferul esterilor de Col de pe HDL i

Col (CEPT) LDL pe LP bogate n TG; fenomenul este
concomitent cu transferul TG pe HDL i LDL
Acil-colesterol-acil-transferaza Catalizeaz esterificarea Col la nivelul esuturilor
(ACAT) periferice, necesare stocrii Col

HMG-CoA reductaza Enzima reglatoare n sinteza endogen de Col

CHILOMICRONII

Chilomicronii sunt lipoproteine cu un coninut mare de lipide (98-99%) i

puine proteine (1-2%). Au densiti mai mici ca ale serului (1,006) i prin
pstrarea serului la rece chilomicronii se ridic la suprafa sub forma unui strat
cremos. Sunt sintetizai n celulele mucoasei intestinale i ncorporeaz lipidele
alimentare absorbite. Sunt secretai n vasele limfatice care dreneaz intestinul i
la nivelul canalului toracic trec n plasm. Particulile primare, adc chilomicronii
nscnzi, cuprind apo-B48 i apoA. n plasm are loc transferul pe chilomicroni a
apoproteinelor C i E de la -LP. Chilomicronii snt prezeni n plasm dup
ngerare de alimente bogate n grsimi. Dup 6-7 ore de la ngestia de grsimi
chilomicronii dispar din snge.

Catabolismul chilomicronilor are loc n dou etape. n prima etap TG

componente snt hidrolizate sub aciunea lipoproteidlipazei. Aceast enzim
hidrolizeaz TG din componena lipoproteinelor. Posed specificitate fa de
legturile 1 i 3 din TG, 2-monogliceridele obinute snt scindate la glicerol i acid
gras numai dup izomerizarea n 1(3)-monoglicerid. esuturile cele mai bogate n
lipoproteidlipaz snt esutul adipos, muchii scheletici, miocardul, glanda
mamar, pulmon. Aceste esuturi utilizeaz acizi grai pentru oxidare (muchi
scheletici, miocard), depozitare (esut adipos), secreie de grsimi (glanda
mamar). Enzima se afl pe suprafaa luminal a endoteliului vascular fiind
ancorat prin glicozaminoglicani. Heparina elibereaz enzima n plasm.
Lipoproteidlipaza este activat de apo C II. Lipoproteidlipaza din miocard are
afinitate mai mare pentru substrat (Km mic) dect enzima din esutul adipos, adc
cnd nivelul chilomicronilor este sczut, miocardul extrage cu vitez mai mare
trigliceridele plasmatice dect esutul adipos. Activitatea lipoproteidlipazei n
esutul adipos este reglat de factori nutriionali i hormonali. Activitatea enzimei
crete dup ingestia de grsimi i glucide. Lipoproteidlipaza din glanda mamar
este dependent de stimularea prin prolactin, are activitate ridicat numai n
perioada de lactaie. Pe msur ce hidroliza trigliceridelor avanseaz, componenii
superficiali devin supranumerari. Colesterolul liber, fosfolipidele, apo C snt
transferate pe -LP i chilomicronii devin resturi chilomicronice.

A dou etap a catabolismului chilomicronilor const n captarea resturilor

de ctre ficat, captare facilitat de apo E (interacioneaz cu E-receptorii din
hepatocit). Componenii resturilor chilomicronice snt hidrolizai i utilizai n
mod specific. Pe aceast cale ajunge la ficat o parte din colesterolul exogen i cel
intestinal

LIPOPROTEINELE CU DENSITATE FOARTE JOAS (VLDL, pre--LP)

Pre--LP snt sintetizate n ficat, au un coninut ridicat de lipide (90-93%) -

55-65% TG, 12-18% fosfolipide, colesterol esterificat 12-14% i colesterol liber 6-
8%. Particulile nscnde cuprind apo B-100 drept component major, n plasm
primesc apo C i apo E de la -LP.

Funcia principal a pre--LP este transportul trigliceridelor sintetizate n

ficat spre esuturile extrahepatice. VLDL snt prezente n plasm dup ingerare de
raii bogate n glucide. Excesul caloric de glucoz este convertit n ficat n
trigliceride i exportat sub form de pre--LP. Sngele recoltat diminea de la un
subiect normal dup un post de 8-10 ore este practic lipsit de VLDL. n foame
prelungit, n inaniie, n diabet, plasma cuprinde VLDL ca urmare a unei sinteze
crescute de trigliceride hepatice pe seama acizilor grai liberi circulani.

VLDL circulante, mbogite n apo C-II, activator al lipoproteidlipazei, snt

supuse aciunii acestei enzime care hidrolizeaz trigliceridele. Glicerolul este
eliberat n plasm, iar acizii grai snt captai n esuturi. Progresiv cu scderea
trigliceridelor are loc i pierderea de apo C-II care trece pe HDL. Particulele se
mbogesc cu colesterol, furnizat de HDL. Apo D, component a HDL,
funcioneaz ca o acil-colesterol-ester-transferaz i colesterolul esterificat este
transferat din HDL pe VLDL.
 mbogirea VLDL n colesterol mai poate avea loc cu participarea lecitin-
colestrol-acil-transferazei (LCAT) enzim plasmatic. Apo C-I, component al VLDL,
activeaz aceast enzim. LCAT catalizeaz reacia:

Lecitin + Colesterol 2-lizolecitin + Acilcolesterol

Lizolecitina mai hidrofil este eliberat n plasm, iar acilcolestrolul nepolar

migreaz n miezul particulei. Locurile superficiale eliberate vor fi ocupate cu
colesterol furnizat de HDL.

Paralel cu hidroliza trigiceridelor, mbogirea cu Col, apo C trec la HDL, astfel

VLDL snt transformate n IDL. Cca 50% sunt catabolizate n ficat prin interaciunea
cu E-receptorii, iar 50% snt transformate n LDL. n acest proces locul primordial i
revine trigliceridlipazei hepatice, care scindeaz trigliceridele IDL, astfel
transformndu-le n LDL.

LIPOPROTEINELE CU DENSITATE JOAS (LDL, -LP)

-LP au un coninut lipidic de 75-86%, componenta majoritar fiind

colesterolul, 35-40% colesterol esterificat, 3-10% colesterol liber, 20-25%
fosfolipide i 8-12% trigliceride. Apo majoritar este B-100.

LDL se formeaz n plasm din VLDL dup ndeprtarea trigliceridelor sub

aciunea LPL i TGL H i mbogire cu colesterol. LDL snt prezente n sngele
recoltat dimineaa dup un post de 8-10 ore i cuprinde aproximativ 70% din
colesterolul total plasmatic.

LDL au rol de a furniza colesterol diverselor esuturi. Catabolismul LDL se

realizeaz pe dou ci:
Calea specific prin receptori reglabili caracteristic pentru ficat, suprarenale,
limfocite, fibroblati, celule musculare netede. Metabolizarea -LP pe acesta cale
include urmtoarele etape:
1. LDL plasmatice prin intermediul apo B-100 i apo E interacioneaz cu
receptorii specifici de pe suprafaa celulelor
2. Lipoproteinele fixate pe receptori snt translocate n interiorul celulei
dup care particulele lipoproteice fuzioneaz cu lizozomii (endocitoz).
3. n lizozomi componentele LDL, proteine, fosfolipide, colesterol esterificat,
trigliceride snt hidrolizate de enzime lizozomale. Colesterolul liber este
 utilizat pentru nevoile proprii ale celulei (construcia membranelor,
sinteza de hormoni steroidici, acizi biliari) iar surplusul este esterificat i
depozitat n celul. Aceast reacie este catalizat de enzima acil-CoA-
colesterolaciltransferaza (ACAT), rezultnd esteri ai colesterolului cu acizii
palmitic, palmitooleic, oleic.
Colesterolul liber furnizat celulelor de LDL:
- inhib HMG-CoA-reductaza, ca rezultat sinteza colesterolului n esuturile
extrahepatice este meninut la un nivel sczut;
- inhib sinteza receptorilor B,E, astfel determin micorarea numrului lor
pe membran i diminuarea captrii LDL
- activeaz enzima microzomial ACAT
Afinitatea receptorilor membranari pentru LDL, necesar stocrii Col, este
foarte mare, funcionnd maximal la o concentraie a colesterolului LDL de 25
mg%. La om valoarea LDL-colesterolului este de 120mg%, ceea ce explic
inciden crescut a aterosclerozei.

Calea nespecific caracteristic pentru macrofage.

Macrofagele posed mecanisme alternative de nglobare a LDL

indepenedente de receptorii clasici pentru LDL. Macrofagele ncorporeaz LDL
care prezint alterri ale componentelor proteice sau lipidice. Receptorii care
recunosc LDL modificate snt numii scavenger receptors (gunoier) sau receptori
pentru acetil-LDL. Aceti receptori nu snt reglai prin feed-back negativ (cum se
regleaz receptorul clasic LDL) i, ca urmare, prin ncrcarea macrofagelor n mod
excesiv cu Col apar celulele spumoase. Modificrile biochimice ale LDL constau
n acetilri, glicozilri ale apo (apo B-100, apo E) i /sau alterri oxidative ale
acizilor grai nesaturai.

Hepatocitele posed receptori pentru LDL (care prezint specificitate pentru

apo E) avnd capacitatea de a internaliza aceste lipoproteine.

LIPOPROTEINELE CU DENSITATE NALT (HDL, -LP)

 -LP au un coninut lipidic de 45-55%, predominnd fosfolipidele 20-30%,
colesterolul 17-23% i trigliceridele 3-6%. Componena proteic majoritar este
apo A (AI, AII) dar conin cantiti mici de apo C, D, E. Nu cuprind apo B.
HDL snt secretate i sintetizate de hepatocite i enterocite sub forma unor
particule nscnde de form discoidal, alctuite dintr-un strat dublu lipidic
(fosfolipide, colesterol) i apo A, apo E. Particulele nscnde din intestin nu conin
apo E. Prin schimburi ntre celelalte lipoproteine plasmatice i celule particulele
nscnde se transform n HDL mature. n aceste transformri un rol deosebit l
are LCAT plasmatic, activat de apo AI component al HDL nscnde. Sub aciunea
acestei enzime colesterolul este esterificat la acil-colesterol, care migreaz n
interiorul particulei. Stratul superficial al HDL este ocupat de colesterolul preluat
din esuturi i din alte LP plasmatice (chilomicroni). Reacia catalizat de LCAT
decurge i pe suprafaa HDL mature, atunci cnd ele snt suprasaturate cu
colesterol liber. Colesterolul esterificat format este transferat pe chilomicroni,
VLDL, LDL cu participarea proteinei transportor de colesterol esterificat (apo D)
din componena HDL. HDL3 srace n colesterol, devin puternici acceptori de
colesterol i fosfolipide. n acest proces un rol important i revine
lipoproteidlipazei, care catalizeaz hidroliza trigliceridelor din componena
chilomicronilor i VLDL.

HDL snt LP prezente n sngele recoltat de la un subiect normal (dup 8-10

ore de post) alturi de LDL. LDL cuprind 30% din colesterolul total din plasm.

HDL snt catabolizai la nivelul ficatului. Prin intermediul apo E particulele

interacioneaz cu receptorii de pe suprafaa hepatocitelor, snt internalizai i
componentele degradate. Rolul principal al HDL este transportul colesterolului din
celulele extrahepatice n ficat, sediul catabolismului colesterolului (transformare
n acizi biliari i excreie prin bil).