LP4 - REACTII DE IDENTIFICARE A GLUCIDELOR

1. Caracterul reducator
Principiul metodei: Proprietatile reducatoare ale glucidelor sunt evidentiate prin introducerea lor in
solutiile unor saruri complexe aleunor metale tranzitionale: Cu, Ag,X1. Ionii acestor metale sunt
redusi ia vaiente inferioare. In conditiile testelor amintite, glucideG sufera oxidari complexe cu
ruperea catenei de atomi de carbon, obtinandu-se diferiti produsi de reactie (aldehide, formaldehida,
metilglioxal, acid acetic etc..;

Reactia Nvlandert ^. .:," +

y')r; rars"'oul
Ptt*rp-, t"at"dat'
;;il-:;i?i i ".tr"-u*n ce se depune pe peretii epruberei
Modul de lucru: 2-3 mlsolutie oza-t catevaL picaturi de reactiv Xytuna".{lpp negru-brun de Bi

Reactia Tollens
Principiul metodei: reducerea la cald a azolatului de argint amoniacal (Ag*) la Ag metalic ce se
depune pe peretii eprubetei sub forma de oglinda de argint.
o o
il il
C-H C-OH
(HCOHlo
l' + 2 [AgNH:)z]OH
I

(HCOH )q+ 2Ag J + 4 NHr - HzO

-
I I

CH2OH CHTOH
Glucoza acid gluconic
t0c
Modul de lucru: 2-3 ml solutie glucid + 2-3 ml solutie [Ag(1.{H:)z]OH --- peretele eprubetei se acopera
cu un strat fin de argint sau se obtine un precipitat de argint fin divizat.

citrat) --- Cu'* (CuzOJ) precipitat rosu-caramiziu de oxid cupros

o o
il il
C-H C-OH
I I

(HCOH)4 +2CuSO++4NaOH --- (HCOH)+ + CuzO J + 2Na2SOq+ 2HzO

I I

CHzOH CH2OH
Glucoza acid gluconic

Reactia Fehling
Modul de lucru
Reactivi 2
Glucoza2oh /_ mt
Lactoza2ota 2ml
 Solutie Fehling (I+il) 2ml 2ml
Se incalzesc eprubetele pe baie de apa la fierbere cateva minute

.Rezultate si interpretare: Se observa aparitia unui precipitat rosu caramiziu de oxid cupros (CuzOl).
Cantitatea precipitatului si intensitatea culorii sunt proportionale cu concentratia glucidului reducator.
Reactia este utilizata pentru identificarea glucozei in lichidele biologice.

Reactia Benedict este o modificare a testului Fehling si prezinta avantajul ca este mai sensibil.
Modul de lucru: toc
2 ml solutie glucoza zvo + 2 ml reactive Benedict---- pp rosu caramiziu de cu2o

Reactia Barfoed - face diferentierea dintre monoglucide si diglucide.

Principiul metodei: Monoglucidele reduc reactivul Barfoed (acetat de cupru in acid acetic) la oxid
cupros rosu caramiziu. Diglucidele nu reactioneaza decat daca sunt hidrolizate prin fierbere prelungita.
Modul de lucru:
Reactivi 2
Glucoza2o/o 1,00 ml
Lactoza2o/o 1,00 ml
Reactiv Barfoed 0.50 ml 0,50 ml
CHTCOONa* 0,25 ml 0,25 ml
Se incalzesc eprubetele pe baie de apa la fierbere 2-3 minute

2. Reactia glucidelor cu acizi minerali tari

Monoglucidele sunt solubile la fierbere cu acizi minerli diluati.
Solutiile acide concentrate determina deshidratarea glucidelor cu producere de furfurali, derivati
aldehidici de la furan; astfel pentozele se transforma in furfuial prin pierderea intramolecu lara a 3
molecule de H2O, iar hexozele se transforma in hidroxifurfural.
Compusii ciclici rezultati condenseaza cu diversi fenoli (rezorcina. o-naftol, orcinol), rezultand
substante diferit colorate.

Reactia Molisch
Principiul metodei: Pentozele sau hexozele tratate cu HzSOq concentrat formeaza furfural, respective
hidroxifurfural, care, condensandu-se cu o,-naftolul, conduc la compusi colorati din clasa
triarilmetanului.
Modul de lucru: 2-3 ml solutie glucoza2oh + 2 picaturi de reactive Molisch + 1-2mlH2SO4 conc. (pe
peretele eprubetei inclinate intr-un anumit unghi) astfel incat rezulta2 straturi de lichid.
Rezultate si interpretare: la limita de separare intre cele 2 straturi apare un inel rosu-vioiet a carui
culoare se intensifica in timp si care indica prezentaozei respective.

o Reactia Seliwanoff difetentiaza aldozele de cetoze. Sub actiunea HCI concentrate cetozele sunt cu
mult mai repede transformate in hidroximetilfurfural decat aldozele.
Principiul metodei: Cetozele (fructoza) in mediu acid (HCl). tratate cu rezorcina, la cald, formeaza
compusi colorati in rosu. In aceleasi conditii, aldozele dau numai o coloratie slab-roz. reatia fiind
specifi ca pentru cetoze.
Modulde lucru:
I

Reactia Bial diferentiaza pentozele de hexoze reactia find specifica

,
etapa a reactiei' pentozele sub actiunea HCI si la cald se
pentru pentoze. Intr-o prima
deshldrat"ara trnsformandu-se in furfural.
Apoi acesta se condenseaza cu orcinolul in prezenta ionilor Fe (IIf rezultand
un compus colorat in
albastru -verde.
Rezultate: In prezenta pentozei, reactia este pozitiva, rezultand
o coloratie verde. In prezenta hexozei,
reactia este negativa. Aceasta reactie este utilizata pentru dozarea
colorimetrica apentozelor "''^ J
-^ intr-un
produsbiologicsipentru dozarcapentozelor dinaciiiinucleici
sauchiar aacizilornu"t"i"l-
3. Reactii de identificare a poliglucidelor

Amidonul si glicogenul sunt insolubile in apa rece; ia cald formeaza

solutii omogene, opalescente.
Aceste poliglucide se pot identifica si diferentia prin reactia de
culoare earacteristica p" .uie o dau in
prezenta iodului.

Reactia de culoare cu iodul

Cele 2 componente ale arnidonului (amiloza si amilopectina) glicogenul
si produsii lor de hidroliza
(dextrinele) formeaza cu 12 compusli de rncluziune,
incl avand culori diferite c aracteri sti ce:
Poliglucid Culoare prin reactia cu iodul
am don albastru
am loza albastru-cenusiu
am lopectina rosu-purpuriu
am odextrine violet
eritrodextrine rosu
flavodextrine galben
acrodextrine incolor
glicogen rosu-brun
Modul de lucru:
Reactivi 2
amidon lml
giicogen lml
Solutie Lugol (izlKl) 2-3 Pic 2-3 pic

Rezultate: in eprubeta 1 apare culoarea albastra, specifica amidonului,

care dispare prin incalzire si
reapare dupa racirea solutiei; in eprubeta 2 culoareaeste rosu-brun,
,p""ifi"a gli"og.nutui.