4/4/2016

Coci gram negativi

Genul Neisseria

Coci Gram negativi

Planul cursului

Coci Gram negativi: • Caractere generale

• Neisseria gonorrheae
• Neisseria meningitidis • Infectii produse

• Factori de patogenitate

• Tratament

• Profilaxie

1
 4/4/2016

Neisseria - caractere generale

• coci Gram negativi
• dispusi in diplo
• aspect caracteristic: „ boabe de cafea” (se privesc
prin fetele plane sau usor concave)
• catalazo-pozitivi
• oxidazo-pozitivi
• Cei mai importanti coci Gram negativi care intervin
in patologia umana

Neisseria - Reprezentanti
• specii patogene, cu localizare intracelulara:
- Neisseria gonorrhoeae
- Neisseria meningitidis
• specii comensale ale tractului respirator,
genito-urinar, localizate extracelular:
- Neisseria catarhalis
- Neisseria flava
- Neisseria perflava
- Neisseria sicca.

2
 4/4/2016

Neisseria gonorrhoeae
• specie strict adaptata la specia
umana

• agentul etiologic al unei BTS =

gonoree (blenoragie)

• pilii = factor important de

patogenitate

• gonococii fara pili nu sunt patogeni,

nu se pot atasa de epitelii

Neisseria gonorrhoeae

3
 4/4/2016

Factori de patogenitate
PILI
ENDOTOXINA

1. Pilii comuni
• Formațiuni membranare
• Adezine proteice (tulpinile apiliare sunt
nepatogene)
• Efect antifagocitar
• Antigene bacteriene
• Determinism cromozomial

4
 4/4/2016

Variabilitatea antigenică a fimbriilor

• În cursul:
– Replicării
– Reparării leziunilor ADN (sistemul
SOS)
– Transformării genetice (ADN
exogenot)
• Posibilitatea modificării
secvenței genei de exprimare
fenotipică

Variabilitatea antigenică a fimbriilor

• Gonococii lizați sunt sursa

variației structurii
antigenice a pileinei

• Pileinele noi nu sunt

recunoscute de anticorpii
formați anterior

• Evoluția cronică a
gonoreei (ani de zile –
înainte de descoperirea
antibioticelor)

5
 4/4/2016

2. Endotoxina
• Lipooligozaharid (LOS)
• Lanțuri oligozaharidice scurte, ramificate, non-
repetitive (antigenul O)
– Rezistență la complement și anticorpi
– Rezistență la acțiunea fagocitelor
– Capacitatea de aderență la nivelul mucoaselor

Endotoxina
• LOS mimează structura glicosfingolipidelor membranare ale
celulelor umane
• nu este recunoscută de sistemul imun
• poate să ajungă în fluxul sanguin și să disemineze la nivelul
altor țesuturi
• Responsabilă de efectele toxice ale infecțiilor gonococice
– Ex. pierderea cililor și moartea celulelor mucoasei
trompelor uterine
• Determină apariția reacției inflamatorii

6
 4/4/2016

Factori de patogenitate
PROTEINE MEMBRANARE EXTERNE

1. Porinele

• Formează pori în membrana externă – schimb de substanțe

cu spațiul periplasmic
• PorB (subtipuri PorB1A, PorB1B)
• Diferite tulpini – structură antigenică diferită: >100 serotipuri
gonococice
• Fiecare tip antigenic induce sinteza de anticorpi specifici
• Protejează bacteria împotriva distrugerii intracelulare la
nivelul neutrofilelor – împiedică fuziunea fagosom-lizosom
• Conferă rezistență împotriva serului uman – în funcție de
capacitatea Por de a lega C3b și C4b

7
 4/4/2016

2. Proteina de opacitate (OpaP)

Adezine
•Adeziunea intercelulară a gonococilor în cadrul coloniilor
•Afinitate pentru anumiți receptori – determină tropismul
bacteriei față de celula gazdă
•Variabilitate antigenică – variație de fază VNTR (determinism
cromosomial)
•11-12 gene Opa diferite – niciuna, 1, 2 sau 3 se exprimă
simultan
•contribuie la aderența gonococilor de mucoasa uretrală –
determină tropismul față de celula gazdă (proteine diferite se
leagă de receptori diferiți ai celulelor gazdă)

3. Reduction modifiable protein (Rmp)

• În forma redusă își schimbă greutatea

moleculară aparentă
• Se asociază cu Por – formare de pori în
membrana externă
• Similară cu proteina OmpA – E. coli
• Anticorpii anti OmpA se leagă de Rmp –
blochează legarea Ac anti LOS și anti Por
(rezistență la efectul bactericid al serului
uman normal)

8
 4/4/2016

4. FeBP (Ferric-binding protein)

• Receptori pentru transferină, lactoferină,

hemoglobină – asigură Fe necesar creșterii și
supraviețuirii gonococilor in vivo, în timpul
infecției (când rezerva de Fe este limitată)

Factori de patogenitate
PEPTIDOGLICANUL
PROTEAZE IgA

9
 4/4/2016

1. Peptidoglicanul
2. Proteaze IgA

• Gonococul • Scindează Ig A
eliberează secretorii
monomeri sau
fragmente de
peptidoglican, cu
efect citotoxic
• Activează sistemul
complement

Plasmide

10
 4/4/2016

Plasmide
• Plasmide R cu gene pentru penicilinaze – se
presupune că au fost dobândite de la:
– Speciile genului Haemophilus
– Alte bacterii Gram negative
• Plasmide F (5-20% din gonococi) – în aceste
plasmide s-a inserat gena tetM (rezistență la
tetraciclină) de la streptococ

Variația de fază
VNTR

11
 4/4/2016

Întrerupător molecular
• Variația reversibilă a unei gene, între stările
„PORNIT”/„OPRIT”
• Schimbarea rapidă a fenotipului – capacitate
crescută de adaptare la mediu
• Variabilitatea fenotipică a bacteriilor patogene
– asociată cu virulența tulpinii

Microsateliți
• Prezenți la nivelul promotorului, secvențelor
reglatoare, genelor structurale
• Suferă mutații în urma
– Replicării ADN – alinierea greșită între ADN
parental și progen
– Reparării leziunilor ADN
• Creșterea/descreșterea numărului de
subunități repetitive la nivelul unor secvențe
scurte repetitive (polimorfism de talie = VNTR
= secvențe repetitive de 5 pb)

12
 4/4/2016

Microsateliți
• În funcție de situsul în care apare mutația,
aceasta poate determina:
– Modificări transcripționale (ex. nivelul de
expresie)
• Mutație la nivelul promotorului, secvențelor reglatoare
– Modificări translaționale – relevante în cazul
gonococilor
• Mutație la nivelul genelor structurale
• Variabilitate antigenică

N. gonorrhoeae - Boli produse

♀ ♂
• cervicita • Uretrite  complicatii:
• uretrita stricturi uretrale
• boala inflamatorie pelvina • prostatite
(BIP) complicatii: • epididimite
sterilitate, sarcini ectopice • orhite
• vulvo-vaginita • conjunctivita purulenta
• conjunctivita purulenta • artrita gonococica.
complicatii: perforatii
corneene
• artrita gonococica

13
 4/4/2016

N. gonorrhoeae - Boli produse

N. gonorrhoeae - Boli produse

14
 4/4/2016

Etiologia uretritelor

N. gonorrhoeae - Boli produse

Nou-nascuti
• nou nascutul se poate contamina de la mama in
momentul nasterii
• conjunctivita gonococica a nou-nascutului (oftalmia
gonococica neonatala )
• netratatacomplicatii: pana la orbire
• profilaxie: instilare in sacul conjunctival cateva picaturi
de AgNO3 1% (azotat de Ag)

15
 4/4/2016

N. gonorrhoeae
Tratament si profilaxie

• Antibiograma este obligatorie, unele tulpini

secreta β- lactamaze

• Cefalosporine gen.III
• Spectinomicina
• Ciprofloxacina + Doxiciclina/Azitromicina

• prezervativ
• !!!!!!! Tratarea tuturor partenerilor

16
 4/4/2016

Neisseria meningitidis (meningococul)

Caractere generale

• Bacterie strict umana

• Poate fi izolata si din nasofaringele purtatorilor

sanatosi (5-10% adulti)

• Coc Gram negativ

• In diplo, aspect de boabe de cafea

• Capsula polizaharidica => 13 grupe antigenice

N. meningitidis – Factori de patogenitate

• Capsula polizaharidica
– principalul factor de patogenitate

• Endotoxina
• Proteaza Ig A
• Pili
– ataşare de celulele epiteliale
– colonizarea mucoasei nazofaringiane

17
 4/4/2016

N. meningitidis
Serogrupele - Serotipul

• Capsula polizaharidica => 13 grupe antigenice (serogrupe)

• A, B, C, D, H, I, K, L, X,Y, Z, W135, 29E
– cele mai frecvent implicate B (50-55%) C (20-25%), A (1-2%), W135 (15%)
şi Y (10%)
• diferenţe corelate cu producerea de epidemii în diverse zone geografice:
 în Anglia şi SUA sunt mai frecvente epidemiile produse
de grupul B: 50% şi 55% (în SUA),
 în Africa (incidence can rise to 1000 cases per 100 000
each year), China, America de Sud, epidemiile sunt
produse de grupul A şi C.
• meningococii de grup A
– epidemii de meningită la copii (între 6 şi 12 luni)

18
4/4/2016

19
 4/4/2016

N. meningitidis
Capsula polizaharidică

• efect antifagocitar - invazia meningococilor

• permite identificarea meningococilor (detectarea
meningococilor în LCR).
– induce anticorpi anticapsulari specifici de grup
• utilizată pentru prepararea de vaccin
• efect protector, opsonizant (corelat şi cu sistemul complement)

• persoanele cu deficienţe ale sistemului complement (deficit al

factorilor C5-C9), susceptibilitate crescută la invazie

• diseminarea hematogenă: infecţii meningococice invazive

N. meningitidis
Factori de patogenitate
Proteaza Ig A:
• clivează anticorpii de clasă IgA secretorii, favorizând ataşarea
de meningococilor mucoasa respiratorie şi iniţierea infecţiei.

• Endotoxina:
• LPZ bacteriilor Gram negative.
 febra,
 stare de şoc
 alte manifestări patofiziologice întâlnite în meningococemie

20
 4/4/2016

N.meningitidis – Boli produse

• Meningita cerebrospinala epidemica

- poarta de intrare este mucoasa respiratorie; transmitere si
prin saliva, jucarii contaminate
- contactul cu bolnavul trebuie sa fie apropiat (colectivitati)
- meningococul este putin rezistent in mediul extern
• Meningococemie (+ sepsis)
• Otita
• Laringita
• Artrita
• Sinuzita

21
 4/4/2016

Neisseria meningitidis
• a doua cauză de meningită
bacteriană in SUA,
– 20% dintre cazuri
• 3.000 – 4.000 de cazuri/ an
• Mortalitate de 10%.
• frecvenţă
– crescuta la copiii < 5 ani si
adolescenti, adulţi tineri
– scade cu vârsta
• alte infecţii meningoce invazive :
- bacteremia (20% mortalitate)
- pneumonia,
- pericardita şi artrita

N.meningitidis – Boli produse

Alte entitati clinice
• Meningococemia fulminantă,
– de obicei asociată cu reacţiile Shwartzman
• cutane (purpura) şi
• generalizate (sindromul Waterhouse-Friderichsen),
• coagularea diseminată intravasculara,
• mortalitate de peste 90%.
• leziuni tegumentare:
– maculo-papulare
– hemoragice
• mici (peteşii), a caror culoare NU dispare la presiune
• extinse - purpura fulminans (în cazurile severe)

22
 4/4/2016

Meningococemia acută fulminantă

• febră crescută,
• leziuni mucoase
• leziuni tegumentare maculo-papulare sau hemoragice mici
(peteşii), sau hemoragice extinse - purpura fulminans (în
cazurile severe),
• se poate instala şoc septic, endotoxemie,
• tulburări de coagulare, CID (coagulare intravasculară
diseminată),
• hemoragii cerebrale, hemoragii la nivelul glandelor
suprarenale (sindromul Waterhouse-Friderichsen),
• insuficienţă renală şi deces în 8-12 ore de la apariţia iniţială a
simptomelor.
• mortalitate peste 90%

Tratament si profilaxie

• Antibiograma
– Penicilina G
– Cloramfenicol
– Ampicilina
– Ceftriaxona
– Cefotaxim
• Chimioprofilaxia:
– Ciprofloxacina, Rifampicina

• Vaccin (preparat din polizaharid capsular)

23
 4/4/2016

Profilaxie
• În timpul epidemiilor, sunt indicate:

• Chimioprofilaxia (protecţie pe termen scurt)

 Rifampicina sau Ciprofloxacina
 membrii familiei
 alţi contacti apropiaţi,
 uneori şi pentru personalul medical
 Ciprofloxacina 500 mg in doza unica
 Rifampicina se recomandă pentru 2-3 zile
 se preferă deoarece se elimină prin salivă, permiţând eliminarea
meningococilor.

• Vaccinare (protecţie pe termen lung).

– preparat din polizaharid capsular
– Nu se adreseaza populatiei generale (are destul d emulte efecte
adverse), este pentru populatia la risc (ex. Pacienti care calatoresc in
zone endemice)

Vaccinul antimeningococic

• Pentru profilaxia specifică,

• aplicat cu succes în unele ţări
• preparat din polizaharidul capsular specific de grup A, C, Y si
W135.

• nu conţine polizaharidul capsular de grup B, care

– nu este imunogen (datorită similitudinii de structură cu
structuri umane cerebrale, este recunoscut ca şi “self”)
– nu induce răspuns imun
– se încearcă prepararea unui vaccin de grup B.

24