TEHNOLOGII INDUSTRIE 4.

Fabricare aditivă
Bioiprintare 3D

HEI Level 8 (postgraduate)

CARUS - An Innovative Higher Education Institution Training Toolbox to Effectively Address the European Industry 4.0 Skills Gap and Mismatches
This project has been funded with support from the European Commission. The content reflects the views only of the authors, and the Commission or the National Agency cannot be held responsible for any use which may
 Bine ați venit în această unitate
Acest conținut a fost produs de partenerii consorțiului ICARUS prin
finanțare KA2 Erasmus+.

Project:
ICARUS - AN INNOVATIVE HIGHER EDUCATION INSTITUTION TRAINING TOOLBOX TO EFFECTIVELY
ADDRESS THE EUROPEAN INDUSTRY 4.0 SKILLS GAP AND MISMATCHES

Project Nr: 2019-1-MT01-KA203-051265

www.icarusproject.edu.mt
icarus@um.edu.mt
2
Obiectivele modulului

Scopul acestui modul este de a introduce cititorul în conceptele inovatoare

ale bioimprimarii 3D.

Competențe: • Competența 1. Înțelegerea elementelor de bază ale

bioimprimarii 3D și ale ingineriei țesuturilor.
• Competența 2. Descrierea procesului de bioprintare și a
proprietăților bio-cernelii.
• Competența 3. Furnizarea de exemple de bio-plottere și
diferențele lor față de imprimantele 3D normale.
• Competența 4. Oferirea unei perspective asupra
bioimprimarii 3D, inclusiv aplicațiile actuale și provocările
viitoare care trebuie abordate în domeniu.
Structura modulului

− Prezentarea conceptului de bioprintare 3D

− Bioprintare – Ingineria țesuturilor
− Bioprintare – Procesul
− Bioplottere
− Perspectiva bioprintării
− Concluzii și lecturi suplimentare

4
 Prezentarea conceptului de
bioprintare 3D

CARUS - An Innovative Higher Education Institution Training Toolbox to Effectively Address the European Industry 4.0 Skills Gap and Mismatches
This project has been funded with support from the European Commission. The content reflects the views only of the authors, and the Commission or the National Agency cannot be held responsible for any use which may
Bioprintare 3D
Introducere

“Bioprintarea este una dintre cele zece tehnologii inovatoare care se

preconizează că vor schimba lumea.”

— IUPAC, International Union of Pure and Applied Chemistry —

“Acesta va permite pacienților să primească țesuturi de înlocuire fără

intervenții chirurgicale suplimentare. În prezent, tehnologia este concepută
pentru a crea ligamente, tendoane și discuri spinale, dar poate fi folosită
literalmente pentru orice tip de aplicație de inginerie tisulară.”

— Robby Bowles, Professor of The University of Utah —

6
Bioprintare 3D
Motivația

Motivația pentru bioprintarea 3D și ingineria țesuturilor este cererea tot mai mare de țesuturi și
organe de înlocuire.
În general, se disting trei tipuri de transplant de țesut:

Transplant de țesut

Autogrefarea Alogrefarea Xenogrefarea

− De la donator
− De la o parte la alta − De la animal
− Disponibilitate limitată,
a corpului − Risc ridicat de
deficit de organe
− Nicio problemă de transmitere a bolii
− Medicament anti-
respingerede − Nu este posibil din
respingere de exemplu.
exemplu. piele motive etice
inimă, ficat, măduvă
osoasă,...
Source: W. Y. Yeong & C. K. Chua (2014)

7
 Bioprintare – Ingineria țesuturilor

CARUS - An Innovative Higher Education Institution Training Toolbox to Effectively Address the European Industry 4.0 Skills Gap and Mismatches
This project has been funded with support from the European Commission. The content reflects the views only of the authors, and the Commission or the National Agency cannot be held responsible for any use which may
Bioprintare 3D
Ingineria țesuturilor

Ingineria țesuturilor este un domeniu interdisciplinar care aplică principiile ingineriei și

științelor vieții pentru dezvoltarea substituenților biologici.

− Folosit pentru prima dată la mijlocul anilor 1890

pentru a descrie tehnicile care au fost folosite în
manipularea țesuturilor și organelor
− Termen general pentru producția artificială de țesut
biologic
− Cultivarea celulară dirijată este utilizată pentru a
înlocui sau regenera țesutul bolnav la pacienți.
− O componentă importantă a ingineriei tesuturilor
este schela
− Schelele servesc ca un cadru structural și permit
cultivarea celulelor tridimensionale
Supapa cardiacă realizată prin inginerie tisulară
Source: W. Y. Yeong & C. K. Chua (2014)

9
Bioprintare 3D
Abordarea de bază a ingineriei țesuturilor

Implant Biopsie

Dezvoltarea țesuturilor
cu factori de creștere și
stimuli electromecanici Izolarea
Scaffold celulelor

Cultivarea
celulelor

Schela

Propagarea celulelor

10
Bioprintare 3D
Fabricare aditivă a schelelor

Schelele sunt o componentă fundamentală a ingineriei țesuturilor.

− Pe lângă material, arhitectura internă a schelelor

este crucială pentru propagarea celulelor
− În mod ideal, structura este foarte poroasă cu
pereți, bare și canale
− Acest lucru permite țesutului să se lege bine și, în
același timp, să fie alimentat cu oxigen în timpul
fazei de creștere.

Fabricația aditivă este cunoscută pentru construirea

de structuri complexe cu o multitudine de straturi Schela printata 3D
paralele.

Source: W. Y. Yeong & C. K. Chua (2014)

11
 Procesul de bioprintare

CARUS - An Innovative Higher Education Institution Training Toolbox to Effectively Address the European Industry 4.0 Skills Gap and Mismatches
This project has been funded with support from the European Commission. The content reflects the views only of the authors, and the Commission or the National Agency cannot be held responsible for any use which may
Bioprintare 3D
Proesul de bioprintare| Imagistica 3D

În ciuda mai multor metode de bioprintare, un proces tipic de bioprintare are o serie standard de etape:

1) Imagistica 3D

− Scopul este de a obține dimensiunile exacte ale

țesutului care urmează să fie imprimat
− Țesutul ar trebui să ofere o potrivire perfectă, cu o
ajustare redusă sau deloc necesară
− Se utilizează tomografia computerizată standard (CT)
sau imagistica prin rezonanță magnetică (RMN).

Scanarea CT a unei inimi umane

Source: F. Mashambanhaka (2018)

13
Bioprintare 3D
Proesul de bioprintare| Modelare 3D

În ciuda mai multor metode de bioprintare, un proces tipic de bioprintare are o serie standard de etape:

2) Modelare 3D

− Din imaginile 2D ale CT sau MRT trebuie obținut un

model 3D
− Acest lucru se realizează prin utilizarea unui software
CAD
− Modelul solid include o instrucțiune strat cu strat în
detaliu
− Mai departe în etapa de modelare pot fi făcute ajustări
pentru a evita transferul defectelor
Model CAD 3D al unei inimi umane
Source: F. Mashambanhaka (2018)

14
Bioprintare 3D
Procesul de bioprintare | Prepararea biocernelii

În ciuda mai multor metode de bioprintare, un proces tipic de bioprintare are o serie standard de etape :

3) Prepararea biocernelii

− În continuare trebuie să se obțină o biopsie a țesutului

de imprimat
− Biopsia este utilizată pentru a izola celulele vii și pentru
a le multiplica
− Celulele vii sunt amestecate cu o bază compatibilă, cum
ar fi colagenul, gelatina sau nanoceluloza
− Substanța completă este in functie de pacient și este
specifică funcției
− Substanța se numește Biocerneala
Exemplu de două Bioinks diferite ale companiei
biogelx

Source: F. Mashambanhaka (2018)

15
Bioprintare 3D
Procesul de bioprintare | Printare

În ciuda mai multor metode de bioprintare, un proces tipic de bioprintare are o serie standard de etape :
:
4) Printare

− După pregătirea Biocernelii, procesul de imprimare

începe prin depunerea Biocernelii strat cu strat
− Biocerneala este depusa pe o schelă biocompatibilă
generând o structură tridimensională asemănătoare
țesutului
− Fiecare strat are o grosime mai mică de 0,5 mm
− Grosimea straturilor depinde de vâscozitatea fluidului

Bioprintare pe schelă

Source: F. Mashambanhaka (2018)

16
Bioprintare 3D
Procesul de bioprintare | Solidificare

În ciuda mai multor metode de bioprintare, un proces tipic de bioprintare are o serie standard de etape :

5) Solidificare

− Pe măsură ce au loc depuneri de Biocerneala, stratul

începe să se solidifice și să-și mențină forma
− Acest proces este adesea ajutat de lumina UV,
substanțe chimice specifice sau căldură
− Procesul de amestecare și solidificare este cunoscut sub
numele de reticulare
− Odată cu solidificarea procesului de bioprintare se
termină și țesutul poate fi implementat pacientului

Ventricul cardiac bioprintat solidificat

Source: F. Mashambanhaka (2018)

17
Bioprintare 3D
Proprietatile biocernelii
Congelare
− Oferă fixarea formei
− Momentul de congelare este
crucial
Viscozitate − Citocompatibilitate Proprietățile rețelei
fizică/chimică
− Determinați rigiditatea și
− Întârzie prăbușirea structurii întăriți
− Determină tensiunea de − Dimensiunea ochiurilor
Fidelitatea
forfecare influențează difuzia
printarii Celulele
− Complexitate − Viabilitate − Poate restricționa formarea
− Rezoluţie − Proliferare țesuturilor
− Dimensiunea − Diferenţiere
Calibrul de duză constructiei − Formarea Timp de fabricație
− Stabilitatea țesuturilor
formei

− Influențează rezoluția și viteza − Determină durata expunerii în

de fabricație condiții neoptime
Tensiunea de forfecare

− Provoacă posibile leziuni

celulare
Source: J. Malda et all (2013)

18
 Bioplotere

CARUS - An Innovative Higher Education Institution Training Toolbox to Effectively Address the European Industry 4.0 Skills Gap and Mismatches
This project has been funded with support from the European Commission. The content reflects the views only of the authors, and the Commission or the National Agency cannot be held responsible for any use which may
Bioprintare 3D
Exemple de bioprintare – Bio X
Capete de imprimare interschimbabile:
– Cap de imprimare pneumatic încălzit, 3cc (65° Celsius)
– Cap de imprimare pneumatic încălzit, 10cc (65°)
– Cap de imprimare cu picături electromagnetice (EMD)
(65°)
– Cap de imprimare pneumatic controlat cu temperatură
(4-65°)
– Cap de imprimare cu pompă de seringă (65°)
– Cap de imprimare termoplastic (250°)
– Cap de instrument pentru fotopolimerizare (pentru UV și
lumină vizibilă în orice lungime de undă: 365, 405, 450,
480, 520 nm)
– Cap de instrumente pentru cameră HD

Source: https://www.cellink.com/global/product/cellink-bio-x/
20
Bioprintare 3D
Exemple de bioplottere

Bioplotter 3D - Envisiontec Bioplotter MMX - Organovo

Source: https://www.invetechgroup.com/case-
Source: https://www.envisiontec.com
studies/organovo-novogen-mmx-bioprinter/

21
Bioprintare 3D
Exemplu de bioplotter ieftin – Allevi 3
Caracteristici principale:
– 3 extrudere Allevi CORE
– LED – 365 și 405 nm​ pentru fotopolimerizare
– Precizie X, Y - 1 μm
– Precizie Z - 1 μm
– Volumul construcției: 9 × 6 × 13 cm (702 cm³)
– Temperatura maxima - 160˚C
– Temperatura minima - 4˚C
– Seringi compatibile - 5 ml plastic, 5 ml metal

Pret: $ 10,000 — $ 50,000

Producator: Allevi (former BioBots) USA

Source: https://www.allevi3d.com/allevi-3/
22
 Perspectiva bioprintarii

CARUS - An Innovative Higher Education Institution Training Toolbox to Effectively Address the European Industry 4.0 Skills Gap and Mismatches
This project has been funded with support from the European Commission. The content reflects the views only of the authors, and the Commission or the National Agency cannot be held responsible for any use which may
Bioprintare 3D
Aplicații

Organe artificiale Testare farmaceutică

− Principalul motor pentru bioprintarea 3D datorită creșterii
mari a organelor vitale
− Disponibilitate mai mare a organelor imprimate 3D
− Este de așteptat o biocompatibilitate mai mare a
țesutului/organelor imprimate 3D
− Bioimprimarea 3D este o opțiune mai rentabilă și mai etică
pentru testarea farmaceutică
− Permite identificarea efectelor secundare ale medicamentelor
− Permite administrarea oamenilor cu doze sigure validate pe
baza ADN-ului lor

Chirurgie Plastică Altele

− Pentru chirurgie plastica si grefa de piele − Producția de alimente precum carne și legume
− Comercializarea țesutului cutanat bioprintat − Regenerarea țesutului osos
− Proteze

Source: F. Mashambanhaka (2018)

24
Bioprintare 3D
Domenii de aplicare

Aplicatie pentru:

- Ingineria țesuturilor
- Medicina regenerativă
- Imprimarea alimentelor
- Descoperirea/testarea
medicamentelor

Source: https://www.cellink.com/global/bioprinting/bio-x/
25
Bioprintare 3D
Provocări viitoare

Tehnologia Bioprintarii 3D este încă la începutul dezvoltării sale și trebuie

încă să stăpânească unele provocări.
Imprimați sistemul vaselor de sânge
- Pentru structurile celulare extrem de complexe, cum ar fi organele, circulația completă a sângelui este
crucială
- În corpul uman, fiecare celulă se află la maximum 200 de micrometri distanță de cel mai apropiat vas de
sânge
- Această structură este foarte complex de reprodus.

Scalabilitatea bioprintarii
- În prezent, țesutul poate fi reprodus de la un centimetru cub, ceea ce poate fi considerat pe o perioadă mai
lungă de timp.
- Cultivarea celulelor după procesul de imprimare este crucială pentru scalabilitatea bioprintarii

− Mai trebuie dezvoltate bioreactoare adecvate în acest scop.

Source: M. Rimann (2019)
26
Bioprintare 3D
Perspectiva bioprintarii furnizorilor de tehnologie

Global Startup Heat Map a

startus-ului evidențiază 8
exemple interesante din
1.089 de soluții relevante.

Source: https://www.startus-insights.com/innovators-guide/8-top-3d-bioprinting-startups-impacting-the-biotech-industry/
27
Bioprintare 3D
Brevete de bioprintare

− Două companii principale brevetează cel mai mult în domeniul țesuturilor/organelor artificiale
3D: Organovo (12 brevete), Sichuan Revotek (4 brevete)
− Patentele sunt înregistrate în principal pentru țesuturi/celule/organe 3D, alte brevete sunt
pentru aplicații în testarea medicamentelor, toxicitatea, testarea sau cercetarea modelelor de
Source: F. Mota (2020)
boală

− China, SUA și Coreea sunt țările cele mai prolifice în ceea ce privește numărul de brevete de
bioprintare 3D
− Brevetele în bioprintare 3D sunt acordate și unor universități precum: Tshinghua Univ, Xi’an
Jiaotong Univ, Drexel Univ, Shanghai Univ sau MIT.
Source: M. Rodriguez (2015)

28
 Concluzii și lecturi suplimentare

CARUS - An Innovative Higher Education Institution Training Toolbox to Effectively Address the European Industry 4.0 Skills Gap and Mismatches
This project has been funded with support from the European Commission. The content reflects the views only of the authors, and the Commission or the National Agency cannot be held responsible for any use which may
Bioprintare 3D
Provocari viitoare

Tehnologia Bioprintarii 3D este încă la începutul dezvoltării sale și

trebuie încă să stăpânească unele provocări.
Dezvoltare ulterioară a biocernelurilor
− Există deja o gamă largă de biocerneluri disponibile care îndeplinesc cerințele de imprimare și compatibilitate
celulară.
− Nici una dintre biocerneluri nu reprezintă până acum soluția optimă.
− Biocernelurile sunt substanțe polimerice extrem de complexe, care necesită experiență din diverse discipline
Source: M. Rimann (2019)
(știința materialelor, chimie, biologie)

Pret
Costurile bioimprimantelor comerciale sunt mari, în jur de 100–200.000 USD, dar sunt dezvoltate sisteme low-
cost.
Proces rapid de maturare a țesuturilor
- Construcțiile de organe imprimate trebuie să se îndrepte rapid spre un solid pentru a asigura rigiditatea
mecanică necesară în transplatare Source: I.T. Ozbolat (2015)

30
Bioprintare 3D
Piața de bioprintare în creștere rapidă

Piața de bioprintare 3D, pe componentă

Bioimprimante 3D
• Bioprintare prin microextruziune
• Bioprintare 3D cu jet de cerneală
• Bioprintare asistată cu laser
• Bioprintare magnetică 3D
• Alte tehnologii
Biocerneli
• Biocerneli naturale
• Biocerneli hibride
• Biocerneli sintetice

Source: https://www.startus-insights.com/innovators-guide/8-top-3d-bioprinting-startups-impacting-the-biotech-industry/
31
Lectură recomandată
Sosirea bioimprimantelor comerciale - Spre revoluția
bioprintarii 3D!
http://dx.doi.org/10.18063/ijb.v4i2.139

32
Bibliografie

Chua, C. K., & Yeong, W. Y. (2014). Bioprinting: Principles and Applications (1st ed.). World
Scientific Publishing Company.
Mashambanhaka, F. (2018). What Is 3D Bioprinting? – Simply Explained. All3DP.
https://all3dp.com/2/what-is-3d-bioprinting-simply-explained
Malda, J., Visser, J., Melchels, F. P., Jüngst, T., Hennink, W. E., Dhert, W. J. A., Groll, J., &
Hutmacher, D. W. (2013). Engineering Hydrogels for Biofabrication. Advanced Materials, 25(36),
5011–5028. https://doi.org/10.1002/adma.201302042
Rimann, M. (2019). Bioprinting: Wenn der 3-D-Drucker lebende Haut ausspuckt. Netzwoche.
https://www.netzwoche.ch/news/2019-05-20/bioprinting-wenn-der-3-d-drucker-lebende-haut-
ausspuckt
Ozbolat, I.T., Yu, Y., (2013) Bioprinting Toward Organ Fabrication: Challenges and Future Trends,
IEEE TRANSACTIONS ON BIOMEDICAL ENGINEERING, vol.60, no.3

33
Bibliografie

F. Mota, L. Braga, L. Rocha, et al. (2020) 3D and 4D bioprinted human model patenting and the
future of drug development. Nat Biotechnol 38, 689–694, DOI: 10.1038/s41587-020-0540-1
M.Rodriguez, R.M. Rio-Belver, G. Garechana (2017), Scientometric and patentometric analyses to
determine the knowledge landscape in innovative technologies: The case of 3D bioprinting, PLoS
ONE 12(6), DOI: 10.1371/journal.pone.0180375

34
Bioprintare 3D
Video

− How to 3D print human tissue - Taneka Jones

− https://www.youtube.com/watch?v=uHbn7wLN_3k
− 3D-printed scaffold enables controlled release of biomolecules into body
− https://www.youtube.com/watch?v=gXaagHdaVhE
− Aspect Biosystems: The Bioprinting Process
− https://www.youtube.com/watch?v=BDdMxjq_M4g
− 3D bioprinting of organs
− https://www.youtube.com/watch?v=i8uCs09BoNU

35
Project:
ICARUS - AN INNOVATIVE HIGHER EDUCATION INSTITUTION TRAINING TOOLBOX TO EFFECTIVELY
ADDRESS THE EUROPEAN INDUSTRY 4.0 SKILLS GAP AND MISMATCHES

Project Nr: 2019-1-MT01-KA203-051265

www.icarusproject.edu.mt
icarus@um.edu.mt

36