MEDII DE CULTURA

suporturi materiale si nutritive care servesc la

cultivarea bacteriilor

amestecuri de substante care asigura

cultivarea microorganismelor
 Scopuri
Izolarea in cultura pura
Identificare
Diagnostic, tratament
Producerea industriala a unor substante
(prepararea vaccinurilor)
Controlul sterilitatii sau incarcarcaturii
microbiene a unor elemente de mediu (apa,
alimente)
 Conditii
1. Surse de C, N, apa, substante minerale, energie,
substante nutritive, factori de crestere

2. pH optim, temperatura optima

3. Aero/anaerobioza

4. Sterile
 Ingrediente

Peptona
Extracte sau infuzii de carne
Agenti de solidificare: agar
Indicatori de pH: turnesol, rosu fenol
Agenti selectivi
Zaharuri
 Prepararea mediilor de cultura

Amestecul ingredientilor: proportie, ordinea

indicata
Determinarea si ajustarea pH-ului
Repartizarea in recipiente adecvate
Sterilizarea
Controlul sterilizarii si al calitatii mediului
Clasificarea mediilor de cultura
Dupa consistenta: lichide
solide
semisolide

Dupa provenienta: naturale

sintetice

Dupa compozitie si scop: simple

complexe
speciale
 Clasificarea mediilor de cultura
Medii complexe
de utilitate generala: - uzuale
- cu proteine native
Medii speciale
selective
de imbogatire
anaerobi
teste biochimice
Medii simple: Apa peptonata
Bulion simplu
Geloza simpla

Medii complexe: bulion sange

geloza sange
geloza chocolatie
 Medii lichide- bulion simplu

Categoria: Mediu de
baz
Componente: macerat
de carne + pepton +
NaCl 0,5%
Utilizare: pentru
germeni nepretenioi
 Geloza simpla
Categoria: Mediu de baz
Componente: bulion simplu + agar-agar
 Geloza simpla
Categoria: Mediu de baz
Componente: bulion simplu + agar-agar
 Geloza lactozata

Categoria: Mediu
diferenial
Componente:
geloz simpl +
lactoz + albastru
bromtimol
Utilizare:
studierea
fermentrii
lactozei
 Geloza sange

Categoria:
Mediu compus
Componente:
geloz simpl
rcit la 45C +
snge
defibrinat 10-
20%
 Geloza socolatie

Categoria: Mediu
special
Componente: geloz
simpl rcit la 60-
80C + snge
Utilizare: cultivarea
neisseriilor,
hemofililor
 Mediul Chapman

Categoria: Mediu
selectiv i diferenial
(evidentiaza o proprietate
biochimica a tulpinii)
Componente: geloz
simpl + NaCl 7,5% +
manitol + rou fenol
Utilizare: selectiv
pentru stafilococ
 Medii folosite pentru enterobacterii
(agar, lactoza, indicatori de pH)
Drigalski
Istrate
McConkey
Levine

Bacteriile care degradeaza lactoza din mediu =

lactozo pozitive
Bacteriile care nu degradeaza lactoza din mediu =
lactozo negative
 Mediul Levine

Categoria: Mediu selectiv

i diferenial
Componente: geloz
simpl + eozin + lactoz
+ albastru de metilen
Utilizare: cultivarea
enterobacteriilor (E.coli)
 ADCL (Leifson)

Categoria: Mediu
selectiv i diferenial
Componente: geloz
simpl + sruri biliare +
lactoz + rou neutru
Utilizare: cultivarea
shigelelor i salmonelelor
 Mediul BSA: vibrionul holeric

Mediul Chapman : stafilococi

Mediul Lowenstein-Jensen: bacilul TBC

Mediul OCST: bacilul difteric

Mediul Sabouraud: fungi

 Mediul Muller - Hinton
Categoria: Mediu special
Utilizare: Efectuarea antibiogramelor
 Mediul OCST

Categoria: Mediu
de mbogire
(favorizeaza X
bacteriilor, mai ales
cand acestea sunt in
concantratie mica)
Componente: ou +
cistein + ser +
telurit de potasiu
Utilizare: cultivarea
bacililor difterici
 Mediul Sabouraud

Categoria: Mediu
special

Componente: geloz
simpl +
maltoz/glucoz +
antibiotice

Utilizare: cultivarea
fungilor
Mediul Lowenstein-Jensen
 Metode de insamantare

Insamantare = punerea in contact a unei

culturi bacteriene sau a unui produs patologic
cu mediile de cultura.
Izolare = repicarea unei singure colonii pe
alte medii de cultura cu scopul de a obtine
cultura pura
Cultura bacteriana = totalitatea bacteriilor
crescute in/pe suprafata unui mediu de
cultura
 Tehnici de insamantare
Tehnica insamantarii prin epuizare:
Scop: obtinerea coloniilor izolate
Insamantarea prin intepare (pe medii solide
aflate in tuburi)
Insamantarea in panza
 Caracterele culturii microbiene pe medii solide
Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie
pura de bacterii provenite dintr-un singur parental.

Pe mediu solid se descrie:

- forma coloniei - producerea de pigment
- marimea coloniei - consistenta coloniei
- suprafata coloniei - emulsificabilitatea
- marginile coloniei - mirosul culturii
Pigment
 Caracterele culturii microbiene pe medii solide
Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie
pura de bacterii provenite dintr-un singur parental.

Colonii S (smooth)
Colonii R (rough): B.anthracis, C.diphteriae,
M.tuberculosis
MYCOBACTERIUM
TUBERCULOSIS PE
MEDIUL LOWENSTEIN
 HEMOLIZA
STAFILOCOC
- COMPLETA
- CALD-RECE
(se clarifica la 4C)

STREPTOCOC
- INCOMPLETA

VERZUIE
- COMPLETA
 Clasificare hemoliza pe geloza sange

hemoliza :
= streptococi -
hemolitici
hemoliza -
incompleta, verzuie
streptococi -
nehemolitici,